绿原酸生物活性_资源及其提取纯化

胆保肝的作用[7]。
3.1.2 水提石灰乳沉淀法[10]
1.6 对心血管作用
绿原酸与钙盐生成沉淀，在水提液中加入石灰乳，
异绿原酸 B 对大鼠具有较强促进前列腺环素 使绿原酸沉淀下来，然后用硫酸分解沉淀。该方法操
(PGI2)的释放和抗血小板聚集作用；对豚鼠肺碎片感 应的抗体诱导 SRS-A 释放抑制率达 62.3％。此外，对 血小板血栓素生物合成和氢过氧化物诱导的内皮素细 胞损伤有极强抑制作用[2]。
好。绿原酸作为一种重要的化学试剂，我国目前还没
3.2 绿原酸纯化 3.2.1 乙酸乙酯法[12]
依照绿原酸微溶于乙酸乙酯而杂质不溶于乙酸乙
有生产医用或化学纯的厂家，国内所需的绿原酸纯品 从国外进口，价格十分昂贵，因此，制取作为医用或 化学试剂用的绿原酸，即可替代进口产品，又可出口
酯的特性，在绿原酸水溶液中加入乙酸乙酯进行液液 创汇，无疑将会产生巨大的社会效益和经济效益。
病毒有较强的抑制和杀灭作用。对急性咽喉炎症及皮 可能对绿原酸产品造成一定的污染。
肤病有明显疗效，临床上用于治疗急性细菌性感染疾 3.1.4 超声波法[13]
病。绿原酸的水解产物咖啡酸也具有升白、止血、利
利用超声波能击碎细胞壁，使细胞内组分渗透到
胆及抑制单纯疱疹病毒之功效[1]。最近报道德国 Free 溶液中，从而达到分离的目的。该方法综合成本低，
萃取来达到物质的分离，该法操作简单，且原料来源 较丰富，经济方便。缺点是产量低。 3.2.2 聚酰胺柱层析法[2]
依照聚酰胺对氢键的特殊吸附性来达到物质分 离。特别适合分离酚类、醌类、黄酮类化合物，对鞣 质的吸附特强，近乎不可逆。该法能使绿原酸和黄酮 获得较好的提取和分离，吸附剂聚酰胺可反复使用， 反复层析可以纯化，纯化度高；但操作麻烦，产量低， 洗脱耗费时间长，主要用于分析研究中。 3.2.3 大孔树脂吸附法[2]
关键词：绿原酸；生物活性；资源；提取；纯化;检测
Bioactivity,Resources,Extraction and Purification of Chlorogenic Acid
Du Yan-bing, Qiu Ai-yong (School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214036, China)
绿原酸具有较强的抑制突变能力，它可抑制黄曲 霉素 B1 引发的突变和亚消化反应引发的突变，并能有 效地降低 γ-射线引起的骨髓红细胞突变；同时，绿原
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酸还可通过降低致癌物的利用率及其在肝脏中的运输 来达到防癌、抗癌的效果。并能抑制由苯并芘、4-NQO
1 绿原酸生物活性
1.1 对透明脂酸酶及葡萄糖-6-磷酸酶的抑制作用 透明脂酸酶（HAase）是裂解粘多糖的酶之一，
可催化透明脂酸（HA）的分解，关系到血管系统的通 透性和炎症反应。HA 是由糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖 组成的一种粘多糖，具有多种功能，如治愈创伤、使 皮肤润湿健康、润滑关节和防止炎症等。因此，从天 然产物中发现多种抑制 HAase 激活的活性成分，同时 又具有较强的抗变态反应活性，有望作为先导化合物， 进一步开发为新的抗变态反应药物。从狭叶紫锥花根 的 乙 酸 乙 酯 提 取 物 中 发 现 3,5- 二 咖 啡 酰 奎 尼 酸 （DCQA）和绿原酸(IC50 分别为 1.85 和 2.25mmol/L)
壁水解有利于胞内绿原酸的溶出。该方法绿原酸得率 企业利用金银花提取液制作的针剂、片剂、及口服液
比乙醇回流法提高约 25.97％，反应条件温和；但采用 酶法处理，大大增加生产成本，其经济可行性有待于
畅销国内外，在这些制剂中，已经将绿原酸作为质量 控制的主要指标之一，绿原酸含量越高，产品质量越
进一步研究。
大学 Eich 教授在研究有些植物次生代谢物作为抗逆 污染较小，工艺简易，适合于工业化生产。无水提法
转录病毒剂时，认为绿原酸是有希望的抗艾仔病毒 难以过滤的制约因素，无醇提法因溶剂使用而带来的
（HIV）先导化合物。这与杜仲树皮或叶的碱性提取 物治疗和预防 HIV 感染很有效果的结论相一致[1]。
2 绿原酸来源
收稿日期：2005-12-06
有较强的抑制 HAase 激活的作用[1]。 葡萄糖-6-磷酸酶体系(Gl-6-Pase)在体内平衡血糖
调控中发挥重要作用。它承担着由糖原异生和糖原分 解产生内源性葡萄糖的形成。最近，绿原酸被确认为 是 大 鼠 肝 微 粒 体 中 葡 萄 糖 -6- 磷 酸 位 移 酶 (Gl-6-Ptranslocase)第一个新型特异性抑制剂。通过测定正常 大鼠肝微粒体中 Gl-6-P 水解程度，来测定绿原酸及其 合成类似物对位移酶活性的抑制强度[1]。 1.2 抗氧化作用
冬老叶中绿原酸含量是金银花的 1.41 倍、忍冬藤的 9.08 倍[2]。
（氧化硝基喹啉）引发的癌症，绿原酸对大肠癌、肝 癌和喉癌具有显著的抑制作用，它被认为是癌症的有
3 绿原酸提取纯化及其检测
效化学防腐剂[4]。 1.5 保肝利胆
3.1 绿原酸提取 3.1.1 水提醇沉法[1]
娄红祥等从金银花水溶性部分经乙酰化后得绿原
作简单、经济，其缺点是石灰乳沉淀不完全，硫酸钙 对绿原酸有吸附作用，从而降低产率。 3.1.3 醇提铅盐沉淀法[11]
采用乙醇溶剂，在醇提液中加入乙酸铅溶液，使
1.7 抗菌、抗病毒等
绿原酸以铅盐的形式沉淀下来。优点是可得到较纯绿
有文献报道，绿原酸和异绿原酸对多种致病菌和 原酸，缺点是工艺复杂，产量低，并使用有毒金属铅，
Abstract: The Chlorogenic acid is a important bioactivity material, and one of the main available constituents in many plants and Chinese herb materials. In this paper, the bioactivity, resources, extraction, purification and determination of Chlorogenic acid are summarized.
发育阶段绿原酸含量从花蕾到开放过程有逐渐下降之 预处理要求高，产量易受超滤条件的影响，而且膜清
趋势,其含量 6.07%～4.29%。环境对金银花中绿原酸 动态积累有重要影响，生长在阳坡的叶、花蕾、茎和
洗麻烦。 3.1.7 酶法[15]
叶花混品的绿原酸含量均高于阴坡的同类样品。随着
采用纤维素和果胶酶分别或联合处理药材（金银
国内外的研究表明，绿原酸是一种有效的酚型抗 氧化剂，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、阿 魏酸和丁香酸，以及常见的抗氧化剂，如丁基羟基茴 香醚（BHA）和生育酚，但和丁基羟基甲苯（BHT） 的抗氧化能力相当[4]。 1.3 清除体内自由基
绿原酸及其衍生物具有比抗坏血酸，咖啡酸和生 育酚更强的自由基清除效果[5]，可有效清除 DPPH 自 由基（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）、羟基自由基和 超氧阴离子自由基；它还可抑制低密度脂蛋白的氧化。 绿原酸对体内自由基的有效清除，对于维持机体细胞 正常的结构和功能，防止和延缓肿瘤、突变和衰老等 现象的发生具有中药作用。 1.4 抑制突变和抗肿瘤
存放时间的延长,其绿原酸含量呈下降趋势。金银花越 花），然后再醇提。金银花用纤维素酶处理后，结构致
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密的细胞壁中纤维素水解成水溶性糖类物质，而细胞
绿原酸具有广泛生理活性和药理活性。我国许多
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文章篇号:1007-2764(2006)02-0250-087
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绿原酸生物活性、资源及其提取纯化
杜延兵，裘爱泳 （江南大学食品学院，江苏无锡 214036）
摘要：绿原酸是一种重要的生物活性物质，是许多植物及中草药的主要有效成分之一。该文对绿原酸的生物活性、资源、提 取、纯化及检测进行系统概述。
名称 金银花
向日 葵籽
咖啡 豆
杜仲 (皮,叶)
继花
沙棘 果
元宝 枫叶
含量 0.2~11.2 1.5~3 2~8 1~5 2.05 0.5~1 1~4
依照超滤膜物理化学性能，采用超滤可除去水提 或醇提液中多糖、蛋白质等大分子，而绿原酸等小分 子则可透过膜的一种提取方法。优点是能有效保留有
绿原酸是金银花主要有效成分之一，金银花不同 效成分，无污染，绿原酸得率较高；但该法对提取液
利用绿原酸易溶于水的特性，采用水作溶剂，加
酸四乙酰化物，经药理实验表明，对四氯化碳引起的 热煮沸提取，然后用高浓度醇沉淀蛋白质、多糖等杂
小鼠肝损伤有明显的保护作用，这为阐明金银花具有 质。该方法工艺简单、经济，但是水提液中杂质较多，
保肝利胆之功效提供了理论依据[6]。莱蓟素也具有利 醇沉过程中伴随吸附夹带，使部分绿原酸消失。
Keywords: Chlorogenic acid; Bioactivity; Resources; Extraction; Purification; Determination
绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸组成缩酚酸，异名咖 啡鞣酸，又名 3-咖啡酰奎尼酸，化学名 3-O-咖啡酰奎 尼酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生 的一种苯丙素类化合物[1]。 绿原酸具有较强的药理活 性。研究表明它对消化系统、血液系统和生殖系统均 有药理作用，具有广泛的抗菌消炎、利胆、止血及增 高白血球数量的作用[2]。现在，在有的药品制剂中已 经将其作为质量控制的指标之一。绿原酸不仅在医药 工业，而且在食品、日用化工也有广泛的应用，是国 际公认的“植物黄金”。本文对绿原酸的生物活性、资 源、提取、纯化及检测作一简单概述，旨在开发和利 用绿原酸资源。
大孔树脂吸附特别适合水溶性化合物纯化分离。 该法具有吸附容量大，选择性好，易于解吸，机械强 度高，再生处理简单，吸附速度快，操作简单，得率 恒定，产品质量稳定，生产成本低等特点，且吸附法 仅用少量溶酶洗脱树脂就能达到浓缩目的，但耗用时 间长，吸附树脂清洗困难。 3.3 绿原酸检测
检测方法有紫外分光光度法（UV），薄层层析法 （TLC），高效液相色谱法（HPLC）和高效毛细管法 （HPCE）。UV 法由于样品中伴随绿原酸存在的异绿 原酸、咖啡酸等衍生物在相同波长下均有较强的吸收， 因此测定值一般偏高。而 TLC 法存在难分离、易受其 他杂质干扰的缺点。反相 HPLC 法是目前文献中涉及 最多的分析方法，它具有分离效果显著、灵敏度高和 重现性好等特点，流动相多采用乙腈、水和乙酸或甲 醇、水和磷酸等。由于绿原酸容易发生水解，从而导 致谱图的拖尾，影响测定结果的准确性，在实际操作 中，在流动相里可加入一定比例的乙酸或磷酸等，可 有效抑制酚羟基解离，克服谱图的拖尾现象；HPLC 法测定绿原酸时也有不足之处，一是色谱柱容易污染， 二是分离效率低。HPCE 法是一种发展很快的分离新 技术，具有高分离效率、进样量少、分析时间短、检 测极限低和重现性好的特点[4]。
绿原酸在植物中分布广泛，从高等双子叶植物到
成本高、溶剂回收难之弊，而且绿原酸的得率和纯度 都有所提高，但目前仅限于实验室规模。 3.1.5 超临界 CO2 法[13]
用超临界 CO2 提取绿原酸。该方法具有操作范围 广，便于调节的特点，可以通过控制压力或温度，有
蕨类植物均有报道，但含量较高的植物不多，主要存 针对性的将绿原酸萃取出来。同时萃取和蒸馏合为一
在于忍冬科忍冬属、菊科蒿属植物中[8]，包括杜仲、 体，不需要回收溶剂，可以大大提高生产效率、节约
金银花、向日葵、继花、咖啡和可可树。几种含绿原 能耗，制取的产品纯度高。但生产成本较高，还没有
酸较多的常见植物见表 1。
表 1 常见植物花、果或叶中绿原酸含量 单位%
大规模应用于工业生产。 3.1.6 超滤法[14]