草莓组织培养与脱毒技术
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诱导花药产生愈伤组织，选取花粉发育为单核 期花蕾，5~7 ℃低温处理 1~2 d，经 75 %酒精浸数 秒钟，再经 0.1 %升汞消毒 10~15 min，用无菌水冲 洗 3~5 次，剥取花药进行接种培养。诱导愈伤组织 的培养基为 MS+NAA2mg/L，蔗糖 30g/L，琼脂 6~7.5 g/L，pH 5.8。花药接种后 20~60 d，出现愈伤组织， 开始多数在花丝断口处出现，有的从药壁产生，有 的整个花药愈伤组织化。经 1 个月左右，由变褐色 的花药裂口处长出花粉愈伤组织，质地有的致密， 有的疏松，色泽有的鲜明，有的暗褐。将直径 2 mm 左右组织致密，色泽鲜明呈颗粒状的愈伤组织转移 到附加 BA0.5 mg/lMS 培养基上，诱导愈伤组织分化
人工击卵等），啄木鸟等捕食性鸟类等啄食幼虫， 造成孔洞和生长不良，严重危害时可造成园林景观
树干注药、树干涂白，灯光或者性激素类似物诱杀 极差。对该类有害动物的生态治理，主要是植物合
成虫，饵木诱杀成虫、虫卵、幼虫等。
理配置，合理密植确保通风透光，合理灌溉不积水，
4.3 地下害虫的生态综合治理
饵料诱杀成虫、幼虫等。
草莓属于蔷薇科，草莓属，多年生草本植物。 在世界小浆果生产中，草莓荣举首位。草莓是结果 最快、成熟最早、株体最小、周期最短、管理方便、 病虫较少、加工容易，便于调控的一种果树。它一 般栽后数月即可成熟收获，早春 5 月上市供应，填 补水果的淡季市场。它还可以进行促成栽培或在一 年内多次生产，周年供应。草莓繁殖主要靠葡匐茎 分株提供种苗，效率较低，不利于优良品种推广， 而且在长期无性繁殖中，植株往往积累多种病毒， 导致种苗退化，产量和品质下降，已成为阻碍草莓 生产的主要问题。应用离体培养技术，不仅可以快 速繁殖大量优质草莓种苗，有利于品种提纯和更新， 而且可用于脱除病毒和无病毒种苗的繁殖，加快新 品种的推广。1999 年~2002 年，我们在灵宝草莓樱 桃专家大院进行草莓组织培养与脱毒试验研究，利 用培育出的脱毒草莓苗在灵宝市建立草莓园 200 hm2，生长结果良好。
况，来调整 BA 的用量，增殖数量少时，可适当提高
BA 浓度，增殖数量多而苗的生长差时，应适当减少
BA 的用量。培养基中的糖以 30 mg/L 为宜，琼脂 7~8
g/L，pH 5.8。
表 1 BA 的浓度对草莓增殖与生长的影响
BA/（mg/l）
试验 管数
芽增 殖数
平均 数
生长 状况
0.1
30 62 2.066 良好
74
河 南 林业科技
第 29 卷
芽茎，分化一般需 40~50 d。
2 培养基的选择
草莓的增殖培养为 MS 培养基，草莓培养的激
素用量一般比较低，以 BA0.5 mg/L、NAA0.02 mg/L
较好。BA 浓度过高，形成的芽丛生长会停滞，呈莲
座状，当 BA 浓度过低时，形成的芽少，但芽长势好。
在培养过程中，应根据腋芽增殖数量和苗的生长状
文章编号：1003-2630（2009）01-0073-03
Tissue Culture and Virus-free Technology of Strawberry
ZHANG Yu-jun1，PENG Xing-long1，ZHANG Zhe-min2，ZHAO Hui1 （1.Forestry Technology Extending Station of SanMenXia, Henan，SanMenXia, Henan 472000,China ;
用指示植物检测草莓病毒，关键是提高嫁接成 活率。选用壮苗和较粗的指示植物叶柄，成活率较 高；用待检株成熟的叶片叶柄楔形削面，长 1~1.5
第1期
张玉君等：草莓组织培养与脱毒技术
75
cm 较易成活；嫁接在低龄叶片比老龄叶片上的成 严重时，匍匐茎、叶柄上出现褐色坏死斑，花瓣上
活率高；嫁接后要保湿，适宜的温度为 20~25℃（王 产生褐色条纹。
草莓在低温、短日照条件下即进入生理休眠， 在锻炼阶段必须保持长日照和较高的温度，移栽的 季节应安排在初夏，否则要加照明补充光照，延长 光照时间达 16 h，最低温保持 18℃以上。
6 病毒检测
1
30 216 7.2 很差
3 培养条件
在低温、短日照条件下，草莓可能进入休眠， 所以接种后需要保持适宜的培养条件即 22~25 ℃ 的温度，18 h 光照和 3 000 Lx 的照度。
从被检草莓植株上，采集长成不久的叶，除去 两边的小叶，中央小叶带 1~1.5 cm 长的叶柄，把它 削成楔形作接穗。再除去指示植物复叶中间的小 叶，在叶柄中央部切开 1~1.5 cm，插入接穗，包扎 后，罩塑料薄膜袋，或放在高湿度的室内。若被检 植株带有病毒，嫁接后 1~2 月，在新展开的叶片、 匍匐茎或老叶上，会出现病毒症状。
第 29 卷第 1 期 2009年3月
河南林业科技 Journal of Henan Forestry Science and Technology
草莓组织培养与脱毒技术
Vol. 29 No. 1 Mar. 2 0 0 9
张玉君 1，Leabharlann Baidu兴龙 1，张哲民 2，赵 珲 1 （1.河南三门峡市林业技术推广站，河南三门峡 472000；2.灵宝草莓樱桃专家大院）
的斑驳。在 EMC 上，则产生黄白斑点和明脉。
结论（王国平，1991）。
6.2.2 草莓轻型黄边病毒（SMYEV） 在指示植物 UC4 上，致叶片枯死。在 EMC、UC5、AIP 和 UC10 上，表现叶片边缘失绿，植株矮化。 6.2.3 草莓镶脉病毒（SVBV） 在指示植物 UC5 上， 表现叶片向背面反卷，在 UC6 上，叶片沿叶脉出现 带状褪绿斑，后期变为坏死条纹或条斑。
参考文献： [1]郝宝春.草莓高产栽培技术问答[M]. 北京：中国盲文出版 社，2000 年. [2]陈振光.园艺植物离体培养学[M]. 北京:中国农业出版社， 1995 年. [3]李慎英.花果蔬菜快速繁殖新技术[M]. 北京:中国人事出版 社，1996 年.
6.2.4 草莓皱缩病毒（SCrV） 在指示植物 UC4、
0.5
30 123 4.1 良好
后，将苗从瓶中取出，洗去基部的培养基，移栽到 盛有园土掺砂土或蛭石的塑料钵内，置于塑料大棚 或温室中，再加塑料薄膜拱棚保湿，保持 85 %的相 对湿度和 22~25℃，7~10 d 后，试管苗长出新叶、 发出新根，可逐步放风，降低拱棚内的湿度，最后 除去塑料薄膜，经过 20~30 d 的过渡移栽，可移至 田间。过渡移栽的管理，主要是控制小环境的温度、 湿度和光照，过强的光照会使棚内温度过高，需进 行遮荫。其次是防病，湿度过高易引起苗期病害， 除及时放风外，要喷洒杀菌剂。此外，叶面喷肥可 使小苗生长健壮，有利移栽成活。
城市园林植物上的地下害虫种类常见的主要 有：蛴螬类，地老虎类，金针虫类、蝼蛄类等。对
0
30
162
5.4
0.05
30
39
1.3
0.1
30
0
0
许多草莓品种，因病毒发生严重，生长衰弱， 产量下降与品质变劣，病毒的发生和危害已成为我 国草莓生产上急需解决的问题。目前我国鉴定明确 的草莓病毒及其类似病害有 7 种，其中草莓斑驳病 毒（sMoV）、草莓皱缩病毒（SCrV）、草莓镶脉 病毒（SVBV）和草莓轻型黄边病毒（SMYEV）4 种已使大部分草莓受到侵染，约减产 20 %~50 %。 解决草莓病毒病害的主要途径是培养脱毒与原种、 并建立脱毒苗繁殖与推广体系，定期更新田间种 苗。脱毒苗原种是应用脱毒技术对优良草莓品种脱 除病毒，并进行病毒检测鉴定、确认为无病毒时， 方可作为原种保存和繁殖。为了防止蚜虫传播病 毒，脱毒苗的原种母株应保存在网室或试管内，并 应用离体繁殖技术，扩大繁殖，利用组培苗在田间 产生的匍匐茎进一步扩繁，培育生产草莓果实用的 种苗。草莓的病毒检测，通常用小叶嫁接法，利用 指示植物症状表现，来判断带毒情况。
（责任编辑：王团荣）
UC5 和 UC6 上，导致叶片皱缩，扭曲变形，发病
（上接第 64 页）
潜叶蛾类等。
4.5 其它有害动物的生态综合治理
对该类食叶害虫的生态治理，主要是植物合理
城市园林植物上的有害动物种类主要有：蜗牛、
配置，人工有效销除虫源（包括修剪清除虫害枝、 蛞蝓、马陆、鼠妇等，往往危害植物的根部和嫩叶，
2.Courtyard of the Experts on Strawberry and Cherry in Lingbao,China） Abstract: Through years of experiments and research, we have researched and developed the tissue culture and virus-free technology of strawberry. Using stem tip and anther as explants, choosing MS as the multiplication substrate, taking 1/2MS as the basic culture medium for rootage culture, preserving and propagating the innoxious young plants by using virus measurement technology, 200 hm2 orchard has been established with the tissue cultured young strawberry plants and has had a well-grown achievement. Key Words: Strawberry; Tissue Culture; Virus-free Technology
4 生根培养
草莓生根比较容易，在继代培养中，有些苗也
会发根，但为了使生根整齐，可把健壮的植株转入
生根培养基中，其余植株转入新鲜的继代培养基中
扩大繁殖。生根培养以 1/2MS 为基本培养基，除去
BA，不添加任何激素的生根最好，根多而且长。
表 2 NAA 浓度对生根的影响
NAA/（mg/l） 试验管数 生根条数 平均数
1 外植体接种
1.1 茎尖培养 草莓茎尖培养常用匍匐茎的顶端作为外植体，
它的数量能保证，操作也方便。6~7 月份是匍匐茎发
收稿日期：2009-02-10
生最多的季节，当生长到 15~20 cm 长的时候从健壮 的植株上，剪去长 5 cm 左右，带有顶端的匍匐茎， 用水冲洗，除去尘土，随后在 75 %的次氯酸钠溶液 中，进行 5~7 min 的表面消毒。由于匍匐茎表面茸 毛多，易附着气泡会降低灭菌效果，因此需用消毒 的镊子在其周围搅动数次，再用无菌水多次冲洗， 在超净工作台上，应在解剖镜下剥去茎尖外面的幼 叶，切取茎尖，茎尖切取的长度为 0.2 mm 左右，接 种到培养基上。 1.2 花药培养
摘 要：经过多年试验研究，已摸索出草莓组织培养和脱毒技术，利用茎尖和花药做为外植体，选择 MS 为
增殖培养基，以 1/2MS 为生根培养基本培养基，通过病毒检测技术保存繁殖无毒苗，已用组培出的草莓苗建
园 200 hm2，生长结果表现良好。
关键词：草莓；组织培养；脱毒技术
中图分类号：S668.4
文献标识码：B
国平，1991）。
用作草莓病毒检测的指示植物多种，其中 UC5
6.2 草莓病毒在指示植物上的表现
对上述 4 种主要草莓病毒均有较高的敏感性，因此，
6.2.1 草莓斑驳病毒（SMoV） 在指示植物 UC5 的 对草莓病毒的检测，仅用 UC5 一种指示植物就可以
叶片上，出现褪绿斑驳，有时产生黄色形状不整齐 完成，既可减少工作量，又能较快得出有无病毒的
6.1 小叶嫁接法
5 炼苗和移栽
在瓶内生根培养的试管苗，直接移栽到田间， 不易成活，需经过温室或大棚过渡移栽进行锻炼， 使其逐步适应田间环境条件，最后移栽到田间，以 提高成活率。
生根培养至试管苗根长 2~3 cm 时，将瓶塞除 去，在温室里放置 3~4 d 进行锻炼。用大口罐头瓶 做培养瓶时，除盖后，会因温度降低过快，试管苗 出现失水萎焉现象，需将瓶盖再盖上，或有塑料薄 膜覆盖，待试管苗恢复正常时，再逐渐去盖。锻炼
人工击卵等），啄木鸟等捕食性鸟类等啄食幼虫， 造成孔洞和生长不良，严重危害时可造成园林景观
树干注药、树干涂白，灯光或者性激素类似物诱杀 极差。对该类有害动物的生态治理，主要是植物合
成虫，饵木诱杀成虫、虫卵、幼虫等。
理配置，合理密植确保通风透光，合理灌溉不积水，
4.3 地下害虫的生态综合治理
饵料诱杀成虫、幼虫等。
草莓属于蔷薇科，草莓属，多年生草本植物。 在世界小浆果生产中，草莓荣举首位。草莓是结果 最快、成熟最早、株体最小、周期最短、管理方便、 病虫较少、加工容易，便于调控的一种果树。它一 般栽后数月即可成熟收获，早春 5 月上市供应，填 补水果的淡季市场。它还可以进行促成栽培或在一 年内多次生产，周年供应。草莓繁殖主要靠葡匐茎 分株提供种苗，效率较低，不利于优良品种推广， 而且在长期无性繁殖中，植株往往积累多种病毒， 导致种苗退化，产量和品质下降，已成为阻碍草莓 生产的主要问题。应用离体培养技术，不仅可以快 速繁殖大量优质草莓种苗，有利于品种提纯和更新， 而且可用于脱除病毒和无病毒种苗的繁殖，加快新 品种的推广。1999 年~2002 年，我们在灵宝草莓樱 桃专家大院进行草莓组织培养与脱毒试验研究，利 用培育出的脱毒草莓苗在灵宝市建立草莓园 200 hm2，生长结果良好。
况，来调整 BA 的用量，增殖数量少时，可适当提高
BA 浓度，增殖数量多而苗的生长差时，应适当减少
BA 的用量。培养基中的糖以 30 mg/L 为宜，琼脂 7~8
g/L，pH 5.8。
表 1 BA 的浓度对草莓增殖与生长的影响
BA/（mg/l）
试验 管数
芽增 殖数
平均 数
生长 状况
0.1
30 62 2.066 良好
74
河 南 林业科技
第 29 卷
芽茎，分化一般需 40~50 d。
2 培养基的选择
草莓的增殖培养为 MS 培养基，草莓培养的激
素用量一般比较低，以 BA0.5 mg/L、NAA0.02 mg/L
较好。BA 浓度过高，形成的芽丛生长会停滞，呈莲
座状，当 BA 浓度过低时，形成的芽少，但芽长势好。
在培养过程中，应根据腋芽增殖数量和苗的生长状
文章编号：1003-2630（2009）01-0073-03
Tissue Culture and Virus-free Technology of Strawberry
ZHANG Yu-jun1，PENG Xing-long1，ZHANG Zhe-min2，ZHAO Hui1 （1.Forestry Technology Extending Station of SanMenXia, Henan，SanMenXia, Henan 472000,China ;
用指示植物检测草莓病毒，关键是提高嫁接成 活率。选用壮苗和较粗的指示植物叶柄，成活率较 高；用待检株成熟的叶片叶柄楔形削面，长 1~1.5
第1期
张玉君等：草莓组织培养与脱毒技术
75
cm 较易成活；嫁接在低龄叶片比老龄叶片上的成 严重时，匍匐茎、叶柄上出现褐色坏死斑，花瓣上
活率高；嫁接后要保湿，适宜的温度为 20~25℃（王 产生褐色条纹。
草莓在低温、短日照条件下即进入生理休眠， 在锻炼阶段必须保持长日照和较高的温度，移栽的 季节应安排在初夏，否则要加照明补充光照，延长 光照时间达 16 h，最低温保持 18℃以上。
6 病毒检测
1
30 216 7.2 很差
3 培养条件
在低温、短日照条件下，草莓可能进入休眠， 所以接种后需要保持适宜的培养条件即 22~25 ℃ 的温度，18 h 光照和 3 000 Lx 的照度。
从被检草莓植株上，采集长成不久的叶，除去 两边的小叶，中央小叶带 1~1.5 cm 长的叶柄，把它 削成楔形作接穗。再除去指示植物复叶中间的小 叶，在叶柄中央部切开 1~1.5 cm，插入接穗，包扎 后，罩塑料薄膜袋，或放在高湿度的室内。若被检 植株带有病毒，嫁接后 1~2 月，在新展开的叶片、 匍匐茎或老叶上，会出现病毒症状。
第 29 卷第 1 期 2009年3月
河南林业科技 Journal of Henan Forestry Science and Technology
草莓组织培养与脱毒技术
Vol. 29 No. 1 Mar. 2 0 0 9
张玉君 1，Leabharlann Baidu兴龙 1，张哲民 2，赵 珲 1 （1.河南三门峡市林业技术推广站，河南三门峡 472000；2.灵宝草莓樱桃专家大院）
的斑驳。在 EMC 上，则产生黄白斑点和明脉。
结论（王国平，1991）。
6.2.2 草莓轻型黄边病毒（SMYEV） 在指示植物 UC4 上，致叶片枯死。在 EMC、UC5、AIP 和 UC10 上，表现叶片边缘失绿，植株矮化。 6.2.3 草莓镶脉病毒（SVBV） 在指示植物 UC5 上， 表现叶片向背面反卷，在 UC6 上，叶片沿叶脉出现 带状褪绿斑，后期变为坏死条纹或条斑。
参考文献： [1]郝宝春.草莓高产栽培技术问答[M]. 北京：中国盲文出版 社，2000 年. [2]陈振光.园艺植物离体培养学[M]. 北京:中国农业出版社， 1995 年. [3]李慎英.花果蔬菜快速繁殖新技术[M]. 北京:中国人事出版 社，1996 年.
6.2.4 草莓皱缩病毒（SCrV） 在指示植物 UC4、
0.5
30 123 4.1 良好
后，将苗从瓶中取出，洗去基部的培养基，移栽到 盛有园土掺砂土或蛭石的塑料钵内，置于塑料大棚 或温室中，再加塑料薄膜拱棚保湿，保持 85 %的相 对湿度和 22~25℃，7~10 d 后，试管苗长出新叶、 发出新根，可逐步放风，降低拱棚内的湿度，最后 除去塑料薄膜，经过 20~30 d 的过渡移栽，可移至 田间。过渡移栽的管理，主要是控制小环境的温度、 湿度和光照，过强的光照会使棚内温度过高，需进 行遮荫。其次是防病，湿度过高易引起苗期病害， 除及时放风外，要喷洒杀菌剂。此外，叶面喷肥可 使小苗生长健壮，有利移栽成活。
城市园林植物上的地下害虫种类常见的主要 有：蛴螬类，地老虎类，金针虫类、蝼蛄类等。对
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许多草莓品种，因病毒发生严重，生长衰弱， 产量下降与品质变劣，病毒的发生和危害已成为我 国草莓生产上急需解决的问题。目前我国鉴定明确 的草莓病毒及其类似病害有 7 种，其中草莓斑驳病 毒（sMoV）、草莓皱缩病毒（SCrV）、草莓镶脉 病毒（SVBV）和草莓轻型黄边病毒（SMYEV）4 种已使大部分草莓受到侵染，约减产 20 %~50 %。 解决草莓病毒病害的主要途径是培养脱毒与原种、 并建立脱毒苗繁殖与推广体系，定期更新田间种 苗。脱毒苗原种是应用脱毒技术对优良草莓品种脱 除病毒，并进行病毒检测鉴定、确认为无病毒时， 方可作为原种保存和繁殖。为了防止蚜虫传播病 毒，脱毒苗的原种母株应保存在网室或试管内，并 应用离体繁殖技术，扩大繁殖，利用组培苗在田间 产生的匍匐茎进一步扩繁，培育生产草莓果实用的 种苗。草莓的病毒检测，通常用小叶嫁接法，利用 指示植物症状表现，来判断带毒情况。
（责任编辑：王团荣）
UC5 和 UC6 上，导致叶片皱缩，扭曲变形，发病
（上接第 64 页）
潜叶蛾类等。
4.5 其它有害动物的生态综合治理
对该类食叶害虫的生态治理，主要是植物合理
城市园林植物上的有害动物种类主要有：蜗牛、
配置，人工有效销除虫源（包括修剪清除虫害枝、 蛞蝓、马陆、鼠妇等，往往危害植物的根部和嫩叶，
2.Courtyard of the Experts on Strawberry and Cherry in Lingbao,China） Abstract: Through years of experiments and research, we have researched and developed the tissue culture and virus-free technology of strawberry. Using stem tip and anther as explants, choosing MS as the multiplication substrate, taking 1/2MS as the basic culture medium for rootage culture, preserving and propagating the innoxious young plants by using virus measurement technology, 200 hm2 orchard has been established with the tissue cultured young strawberry plants and has had a well-grown achievement. Key Words: Strawberry; Tissue Culture; Virus-free Technology
4 生根培养
草莓生根比较容易，在继代培养中，有些苗也
会发根，但为了使生根整齐，可把健壮的植株转入
生根培养基中，其余植株转入新鲜的继代培养基中
扩大繁殖。生根培养以 1/2MS 为基本培养基，除去
BA，不添加任何激素的生根最好，根多而且长。
表 2 NAA 浓度对生根的影响
NAA/（mg/l） 试验管数 生根条数 平均数
1 外植体接种
1.1 茎尖培养 草莓茎尖培养常用匍匐茎的顶端作为外植体，
它的数量能保证，操作也方便。6~7 月份是匍匐茎发
收稿日期：2009-02-10
生最多的季节，当生长到 15~20 cm 长的时候从健壮 的植株上，剪去长 5 cm 左右，带有顶端的匍匐茎， 用水冲洗，除去尘土，随后在 75 %的次氯酸钠溶液 中，进行 5~7 min 的表面消毒。由于匍匐茎表面茸 毛多，易附着气泡会降低灭菌效果，因此需用消毒 的镊子在其周围搅动数次，再用无菌水多次冲洗， 在超净工作台上，应在解剖镜下剥去茎尖外面的幼 叶，切取茎尖，茎尖切取的长度为 0.2 mm 左右，接 种到培养基上。 1.2 花药培养
摘 要：经过多年试验研究，已摸索出草莓组织培养和脱毒技术，利用茎尖和花药做为外植体，选择 MS 为
增殖培养基，以 1/2MS 为生根培养基本培养基，通过病毒检测技术保存繁殖无毒苗，已用组培出的草莓苗建
园 200 hm2，生长结果表现良好。
关键词：草莓；组织培养；脱毒技术
中图分类号：S668.4
文献标识码：B
国平，1991）。
用作草莓病毒检测的指示植物多种，其中 UC5
6.2 草莓病毒在指示植物上的表现
对上述 4 种主要草莓病毒均有较高的敏感性，因此，
6.2.1 草莓斑驳病毒（SMoV） 在指示植物 UC5 的 对草莓病毒的检测，仅用 UC5 一种指示植物就可以
叶片上，出现褪绿斑驳，有时产生黄色形状不整齐 完成，既可减少工作量，又能较快得出有无病毒的
6.1 小叶嫁接法
5 炼苗和移栽
在瓶内生根培养的试管苗，直接移栽到田间， 不易成活，需经过温室或大棚过渡移栽进行锻炼， 使其逐步适应田间环境条件，最后移栽到田间，以 提高成活率。
生根培养至试管苗根长 2~3 cm 时，将瓶塞除 去，在温室里放置 3~4 d 进行锻炼。用大口罐头瓶 做培养瓶时，除盖后，会因温度降低过快，试管苗 出现失水萎焉现象，需将瓶盖再盖上，或有塑料薄 膜覆盖，待试管苗恢复正常时，再逐渐去盖。锻炼