液相色谱-质谱联用仪课后复习指导书

液相色谱-质谱联用仪

1 范围

本作业指导书适用于新安装、使用中和修理后的离子阱和四极杆（包括三重四级）

两种类型LC-MS的校准，四极杆—飞行时间串联等其它类型台式LC-MS的校准可参照

此作业指导书进行。

2 引用文献

下列文献所包含的条文，通过在本指导书中的引用而构成本指导书的条文。本指导

书发布时，所示版本均为有效。所有标准、规范或规程都会被修订，使用本指导书的各

方应探讨使用下列文献最新版本的可能性。

JJF1001-1998《通用计量术语及定义》

JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》

JJF1164-2006《台式气相色谱-质谱联用仪校准规范》

3 概述

液相色谱－质谱联用仪是以液相色谱为进样分离系统并通过一定的接口与质谱仪耦合到仪器的分析仪器。样品经过色谱分离后经离子源离子化产生带有一定电荷、质量数的离子，采用不同的质量分析器把电离子按质荷比（m/z）分开,得到依质量顺序排列的质谱图。通过对质谱图的分析处理，进行定性、定量分析。液相色谱－质谱联用仪主要由液相色谱、离子源、质量分析器、检测器、真空系统和计算机等几部分组成。

4 计量特性

LC-MS各项技术指标见表1

表1 LC-MS主要技术指标

5 校准/测试条件

5.1 实验室环境要求

5.1.1 仪器室内不得有强烈的机械振动和电磁干扰，不得存放与实验无关的易燃、易爆和强腐蚀性气体或试剂。

5.1.2 实验室温度：20℃～30℃。

5.1.3 相对湿度：≤70％。

5.2 标准物质与试剂

5.2.1 利血平-50%乙腈水溶液：100.0 pg/μL；

5.2.2 利血平-50%乙腈水溶液：10.0 pg/μL；

5.2.3 氯霉素-50%乙腈水溶液：200.0 pg/μL；

5.2.4 氯霉素-50%乙腈水溶液：20.0 pg/μL；

5.2.5 碘化铯钠-异丙醇水溶液：2 μg/μL碘化钠，50 ng/μL碘化铯溶于50%异丙醇水溶液；

5.3 标准设备

5.3.1 微量注射器：10 μL

6 校准/测试项目与校准/测试方法

6.1外观检查

6.1.1仪器应具有下列标识：名称、型号、制造厂名(或公司名)、出厂编号，并附使用说明书。

6.1.2仪器主机、色谱仪、计算机、真空部件和检测器等完好(符合出厂说明书要求)，各部件连接正确，各插件紧密配合，接触良好，仪器启动后无异常噪声。

6.1.3仪器的按键开关、各调节旋纽均能正常工作，无松动现象，指示灯显示正常。 6.1.4仪器运行中使用的高电压、大电流和高温等应在仪器的显著部位贴有警示标志，提醒操作者注意这些潜在危险。 6.1.5仪器应标明使用电压和频率等。 6.2 分辨力

仪器稳定后，选择ESI 正离子模式，采用手动调谐，将碘化铯钠溶液 直接注入质谱中，参照附录D 均匀选择5个扫描质量，优化仪器至最佳状态，记录各目标离子峰得到半峰宽W 1/2。 6.3 质量范围

参照6.2条件将碘化铯钠溶液通过进样泵直接注入质谱中，选择Scan 模式，设定扫描范围为（20~2000）m/z ，观察是否出现质量数1000以上的质谱峰。 6.4 质量准确度

参照6.2条件，将碘化铯钠溶液通过进样泵直接注入质谱中，记录133，323,473,623,922,1072等碘化铯钠主要离子的质量数，理论值见附录D ，根据公式（1）计算质量准确度

理论测量i i M M M -=∆ (1)

式中测量i M ——第i 个离子三次测量平均值，u ；

理论i M ——第i 个离子理论值，u 。

6.5 信噪比 6.5.1 正ESI 源

仪器稳定后，将100pg/ul 的利血平溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子609

至最佳响应后记录参数并保存调谐文件。

调谐完毕后根据调谐文件设定参数，以50：50乙腈水溶液为流动相，使用C 18或等效色谱柱分离，注入10pg 利血平溶液，选择SIM 模式，提取609/=z m 特征离子，根据公式（2）计算信噪比。

噪声H z Hm N S //= (2)

式中：z Hm /——提取离子的峰高；

噪声H

——基线噪声。

6.5.2 负ESI 源

仪器稳定后，将200pg/ul 的氯霉素溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子321至最佳响应后记录参数并保存调谐文件。

调谐完毕后根据调谐文件设定参数，以50：50乙腈水溶液为流动相，使用C 18或等效色谱柱分离，注入20pg 氯霉素溶液，选择SIM 模式，提取321/=z m 特征离子，根据公式（2）计算信噪比。 6.5.3 正APCI 源

仪器稳定后，将100pg/ul 的利血平溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子609至最佳响应后记录参数并保存调谐文件。

调谐完毕后根据调谐文件设定参数，以50：50乙腈水溶液为流动相，使用C 18或等效色谱柱分离，注入20pg 利血平溶液，选择SIM 模式，提取609/=z m 特征离子，根据公式（2）计算信噪比。 6.6 测量重复性

参照6.5.1条件，注入200pg/ul 的；利血平溶液10ul ，选择SIM 模式，提取609/=z m 特征离子，连续测量6次，记录相应峰面积，根据公式（3）计算重复性

式中：RSD ——相对标准偏差，%； i x ——第i 次测量峰面积； x ——峰面积的算术平均值。

7 校准/测试结果处理与复校周期

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