微生物注意事项

微生物实验注意事项

1. 应保证实验室环境不影响检测结果的准确性：应避免交叉污染；应对洁净

区每月两次进行监测。

2. 检验人员在检验过程中应保持个人卫生和整洁，防止人为污染样品。

3. 实验用的设备应进行清洁和消毒。

4. 检验用品的储存环境应保持干燥和清洁，已灭菌与未灭菌的用品应分开存

放。

5. 应避免使用自来水，因其中含有氯等抗菌物质，所以应采用蒸馏水或用蒸

馏水配成的生理盐水。

6. 无菌水中最好预置适当数量的无菌玻璃珠，使样品充分分散、均匀。

7. 每次实验应取1ml稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。

8. 培养基的倾注温度为46±1℃，可先放置于恒温水浴箱中保温，水液面应

略高于培养基液面。

9. 如果样品中有可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后

的琼脂表面覆盖一层薄的琼脂培养基（约4ml）。

10. 若空白对照有菌落生长，则此次检测结果无效。

11. 若所以平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延，再重新检测。

12. 若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘

以最低稀释倍数计算。

13. 培养时间应按要求进行培养，不可提前或延后。如果平板菌落太多，不

能计数时，不能以多不可计作报告，应在最高稀释度平板上任意选取2个1cm2的面积，计算菌落数，除2求出每cm2的平均菌落数，乘以63.6。

14. 在进行菌落计数时，检样中的霉菌和酵母菌也不应计数。

15. 做大肠菌群实验时，其样品匀液的PH值应在6.5—7.5之间，必要时要

进行调节。

16. 做大肠菌群时，从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。

17. 采用VRBA培养基时，典型菌落为紫红色，菌落周围有沉淀环，菌落直径

为0.5mm或更大，其他菌落也会在培养基上生长，要区分开。

18. 称量培养基时应带口罩，避免吸入培养基粉末。

19. 培养基如发现有焦化现象，该培养基即不能使用，应重新配制。

20. 应避免培养基多次加热与凝固，最多三次。

21. 已配好的培养基必须立即灭菌。

22. 湿热灭菌的温度和时间很重要，应严格控制，有些只能加热灭菌，应按

说明操作，大于培养基体积1000ml时，应调整灭菌时间。

23. 培养基分装的容器应在培养基的1倍。

24. 培养箱应定期以熏蒸消毒。

25. 培养基溶化后应尽快使用，一般不应超过4h。

26. 直径9cm的平皿一般要求15—20ml培养基或2mm以上厚度。若培养基太

薄，在培养过程中可能因水分蒸发而影响细菌的生长。

27. 琼脂平板在培养时不要堆积高于6个。

28. 如果有倒好的平皿，应用报纸或其他东西包好，放在密封的袋子，放于

冰箱中保存，但应尽快使用。

29 取样量应符合要求，如果有特殊产品，应尽量取样大一点，用500ml的无

菌水稀释。

30 细菌与真菌不能同时操作和同一个培养箱培养。