采前涂膜对_泰山红_石榴采后贮藏生理的影响_杨雪梅_尹燕雷_冯立娟_武冲
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
A420 320 / 1000 V V1 M
1
2014-08-19
果实病害具有良好的防治效果[1,2]，是一种新型的天然保鲜涂膜剂。研究表明采用适宜的涂膜处理，可 增强对果皮的保护作用从而提高果蔬耐贮性，同时还可以抑制果实呼吸，保持果肉硬度，控制微生物 生长和减少失水等[3-6]。张润光等在温度为 5.0±0.5℃条件下，采用 1%壳聚糖溶液涂膜，能有效保持贮 藏期石榴籽粒可溶性固形物含量和可滴定酸含量，减缓果皮相对电导率和褐变指数升高速率，贮藏 120d 果实外观色泽鲜艳，籽粒感官品质良好，保鲜效果理想[7]。目前，大部分研究多集中于采后涂膜 延长贮期和控制腐烂[8]，但采后涂膜存在涂膜后膜液风干困难和需大面积摊放晾干等不利于操作的问 题；而采前涂膜可在果实挂树时喷涂，该方法已在葡萄[9]和厚皮甜瓜[10]上取得了较理想的效果，但在 石榴上尚未见相关报道。本试验旨在探索采前涂膜处理对‘泰山红’石榴贮藏过程中生理变化和品质 保鲜的影响，以期为石榴贮藏提供新的便于操作的保鲜方法。 1 材料与方法： 1.1 试验材料 试验于 2013 年 9 月～2014 年 3 月 在山东省果树研究所环境与园艺植物研究室进行。以‘泰山 红’石榴为试材，涂膜前于山东省果树研究所苗圃内选取无裂果及病虫害的果实挂标签进行标记，每 处理选取 30 个果实。采前 20 d（2013 年 9 月 18 日）对选好的果实第一次喷施涂膜剂，于采摘前 2 d （2013 年 10 月 5 日）再喷施涂膜一次。采收后的果实分别用吸水纸包裹后装入保鲜袋置于冷库中贮 藏，库温 4±0.5℃，相对湿度 90%。 1.2 仪器设备与试剂 手持糖量计 WYT-4 泉州中友光学仪器有限公司；OLYMPUS DP71 体视显微镜 日本奥林巴斯株 式会社；Eppendorf 5810R 台式高速冷冻离心机 德国艾本德股份公司；HH-2 恒温数显水浴锅 江苏省 金坛市精达仪器制造厂；UV-2550 紫外可见分光光度计 日本岛津。 没食子酸（gallic acid, GA） sigma 公司生产；壳聚糖(脱乙酰基≥95%) 阿拉丁试剂(上海)有限公 司；福林酚试剂 北京索莱宝科技有限公司 ；其余试剂均为分析纯。 1.3 样品处理 1.3.1 石榴皮提取液的制备 称取经粉碎（过 40 目筛）的石榴果皮 2.5 g 于烧瓶中，加入 250 mL 蒸溜水在 60℃下浸提 2 h， 3 层纱布过滤，得到 1%的果皮提取溶液，在 4℃下保存备用。 1.3.2 处理及涂膜液的配制[11] 处理 1（T1）1.25%壳聚糖溶液：用 1%的冰乙酸水溶液为溶剂配制；处理 2（T2）1.25%壳聚 糖果皮提取物复合溶液：以石榴皮提取液为溶剂配制 1%冰乙酸溶液，再以其为溶剂配制 1.25%壳聚 糖溶液作为复合涂膜液；以喷施蒸馏水为空白对照（CK） 。 1.4 方法 1.4.1 石榴果皮解剖结构观察 常规石蜡切片法制片[12]。果实采收后，分别取果皮近萼筒处易裂部位切成 0.3×0.5cm 左右（厚度 不超过 3 ㎜） 的小块， 用卡诺氏固定液 （无水酒精 3 份:冰醋酸 1 份） 固定 12 小时→梯度脱水→45~50℃ 浸蜡 2 周→包埋（含 5%蜂蜡）→制作切片（50μm）→贴片→45~50℃烘片 3 周→番红染色→脱色→ 固绿染色→脱色→中性树胶封片。切片在 OLYMPUS DP71 光学显微镜下观察拍照。用比例尺对石榴 表皮 2～5 层薄壁细胞进行测定，比较其差异。 1.4.2 生理指标测定方法 贮藏期间每 30 d 随机取样 3 个果实测定一次下列生理指标，每个指标测定 3 次取平均值。 1.4.2.1 石榴果皮含水量变化 石榴果皮含水量变化采用称重法计算，果皮含水量（%）=
网络出版时间：2014-08-25 14:16 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.2206.TS.20140825.1416.045.html
2014-08-19
采前涂膜对‘泰山红’石榴采后贮藏生 理的影响
杨雪梅，尹燕雷**，冯立娟，武 冲
(山东省果树研究所，山东 摘 泰安 271000) 要：以 ‘泰山红’ 石榴为试材， 研究了采前 1.25%壳聚糖溶液涂膜 （T1） 和石榴皮提取液复合涂膜 （T2） 对石榴果实采后贮藏品质及生理指标的影响。结果表明：采前两种涂膜剂涂膜后，均能增加‘泰山红’石 榴近外表皮的薄壁细胞，但作用不显著； ‘泰山红’石榴在(4.0±0.5)℃条件下贮藏，能有效保持其表皮新鲜 程度，维持其果皮内含水量；涂膜对提高贮藏前期石榴籽粒可溶性固形物含量和降低贮藏前期可滴定酸含 量有一定影响，但对贮藏后期影响不显著；涂膜能使石榴果皮中总酚含量和类黄酮总含量维持在较高水平， 减少贮藏前期因膜脂质过氧化产生的丙二醛含量；此外，T2 复合涂膜还能延迟多酚氧化酶活性高峰出现的 时间，同时提高多酚氧化酶活性的峰值；而 T1 涂膜影响不显著。采前涂膜石榴贮藏至 120 d 果实外观色新 鲜无皱缩，色泽鲜艳，腐烂率较对照低，保鲜效果较为理想。 关键词：石榴；壳聚糖；采前涂膜；贮藏
‘泰山红’石榴以其果皮颜色鲜红，籽粒深红，风味独特，成为目前国内优良的主栽品种之一。 该品种果皮较薄，果皮组织中细胞较大且排列疏松，室温下存放表皮易失水皱缩及部分果皮褐变，降 低其商品价值。此外，石榴花萼为筒状结构里面有干缩的花丝花药，易成为病原菌繁殖的场所，是造 成石榴贮藏过程中的腐烂及病变的根源。 壳聚糖是甲壳素部分脱乙酰化的产物，无毒、无味可用于食品添加剂行业做增稠剂、被膜剂，还 具有高效抑制病原微生物繁殖和生长的作用，提高果实自身的抗病性和延缓果实衰老的功能，对多种
Baidu Nhomakorabea
m1 m2 m1
×100
2
2014-08-19
式中：m1—每次取样后称取果皮鲜重，g；m2—鲜果皮置于烘箱中 65℃烘干至恒重，g。 1.4.2.2 石榴果实总可溶性固形物（Total soluble solids, TSS）含量变化 用手持糖量计测定，挤出石榴果汁测定每次取 3 个石榴计算平均值。 1.4.2.3 石榴果实可滴定酸含（titratable acidity, TA）量变化 可滴定酸含量采用酸碱滴定法测定[13]。 1.4.2.4 石榴果皮中多酚氧化酶（Polyphenol oxidase，PPO）活性 PPO 活性采用邻苯二酚法，取石榴果皮 0.5g，加入 pH7.0 的磷酸缓冲液（含 1%聚乙烯吡咯烷酮 和 10mmmol/L 的抗坏血酸）5mL，冰浴研磨成匀浆，4℃下 4000 r/min 离心 20 min，得上清液用于测 定 PPO 活性。测定时，取上述粗酶液 50μL 与 2.95mL 底物（邻苯二酚，浓度为 0.2mol/L）在 410nm 波长处使用紫外分光光度计进行酶动力学分析，测定 0～30s 吸光度的变化。并规定吸光度每分钟增 加 0.1 为 1 个酶活力单位(1U=0.1ΔA/min)[14,15]。 1.4.2.5 果皮总酚含量 取 1g 石榴果皮研磨成匀浆，加入 20 mL 60%的乙醇于 50mL 三角瓶中，超声波 60℃提取 40min， 后过滤至 25mL 容量瓶并定容。测定时取 1mL 0.5 mol/L 的福林酚试剂加入 50μL 提取液振荡混匀，再 后于 750nm 比色测定其吸光值 A750。 以没食子 加入 4mL 0.5mol/L 的 Na2CO3 溶液室温下反应 60 min， 酸（gallic acid, GA）为标准品制作标准曲线。 1.4.2.6 总类黄酮含量 参考周建华等[16]的方法稍作改动，取 1.4.2.5 中制得的提取液 1mL 加入 4mL 浓度为 1%的 AlCl3 溶液于 420nm 下测定吸光值 A420。类黄酮总含量以以黄酮苷计，根据吸光值等于 1 时，相当于 320μ g 黄酮苷计算含量。 类黄酮总含量（mg/g）=
Effects of Preharvest Coating to the Physiological of ‘Taishanhong’ Pomegranate during Storage
YANG Xue-mei, YIN-yanlei*, FENG Li-juan, WU-Chong (Shandong institute of pomology, Tai’an 271000, China) Abstact: In this study, both 1.25% chitosan (T1) and chitosan with extract of pomegranate rind composite(T2) were uniform sprayinged on ‘Taishanhong’ pomegranate fruit before harvest and then stored at 4.0±0.5℃ for 120 d. The weight loss, total soluble solid, titratable acidity, malondialdehyde content, total phenolics content, polyphenol oxidase activity, soluble solids content, and decay rate were investigated during storage. It indicated that parenchyma cells inside the epidermic cells increased after coating by both T1 and T2 when freshly harvest. Both the control and the treatments maintained the moisture content of rind effectively; preharvest coating also increased the TSS content and TA content decreased during the early stage of storage; maintained the total phenols content and total flavonoids content in pomegranate rind at a higher level; reduced the malondialdehyde content in the early storage. In addition, T2 treatment both delayed and increased the peak value of the polyphenol oxidase activity significantly. Furthermore, preharvest coating increased the shelf life and maintained the sensory quality of the ‘Taishanhong’ pomegranate fruit. Key words: pomegranate; chitosan; preharvestcoating; storage 中图分类号：S665.4 文献标识码：A 文章编号：
收稿日期： （15064177321） 基金项目：山东省国际科技合作项目（2013GHZ31003） ；科技基础性工作专项子课题（2012 FY110100-4） 作者简介：杨雪梅（1982—） ，女，研究实习员，硕士，研究方向为石榴栽培及采后贮藏保鲜研究。E-mail： qdyxm1216@163.com 通讯作者：尹燕雷(1976—)，男，副研究员，硕士，研究方向为果树种质资源评价与遗传育种研究。E-mail： yylei66@sina.com。
1
2014-08-19
果实病害具有良好的防治效果[1,2]，是一种新型的天然保鲜涂膜剂。研究表明采用适宜的涂膜处理，可 增强对果皮的保护作用从而提高果蔬耐贮性，同时还可以抑制果实呼吸，保持果肉硬度，控制微生物 生长和减少失水等[3-6]。张润光等在温度为 5.0±0.5℃条件下，采用 1%壳聚糖溶液涂膜，能有效保持贮 藏期石榴籽粒可溶性固形物含量和可滴定酸含量，减缓果皮相对电导率和褐变指数升高速率，贮藏 120d 果实外观色泽鲜艳，籽粒感官品质良好，保鲜效果理想[7]。目前，大部分研究多集中于采后涂膜 延长贮期和控制腐烂[8]，但采后涂膜存在涂膜后膜液风干困难和需大面积摊放晾干等不利于操作的问 题；而采前涂膜可在果实挂树时喷涂，该方法已在葡萄[9]和厚皮甜瓜[10]上取得了较理想的效果，但在 石榴上尚未见相关报道。本试验旨在探索采前涂膜处理对‘泰山红’石榴贮藏过程中生理变化和品质 保鲜的影响，以期为石榴贮藏提供新的便于操作的保鲜方法。 1 材料与方法： 1.1 试验材料 试验于 2013 年 9 月～2014 年 3 月 在山东省果树研究所环境与园艺植物研究室进行。以‘泰山 红’石榴为试材，涂膜前于山东省果树研究所苗圃内选取无裂果及病虫害的果实挂标签进行标记，每 处理选取 30 个果实。采前 20 d（2013 年 9 月 18 日）对选好的果实第一次喷施涂膜剂，于采摘前 2 d （2013 年 10 月 5 日）再喷施涂膜一次。采收后的果实分别用吸水纸包裹后装入保鲜袋置于冷库中贮 藏，库温 4±0.5℃，相对湿度 90%。 1.2 仪器设备与试剂 手持糖量计 WYT-4 泉州中友光学仪器有限公司；OLYMPUS DP71 体视显微镜 日本奥林巴斯株 式会社；Eppendorf 5810R 台式高速冷冻离心机 德国艾本德股份公司；HH-2 恒温数显水浴锅 江苏省 金坛市精达仪器制造厂；UV-2550 紫外可见分光光度计 日本岛津。 没食子酸（gallic acid, GA） sigma 公司生产；壳聚糖(脱乙酰基≥95%) 阿拉丁试剂(上海)有限公 司；福林酚试剂 北京索莱宝科技有限公司 ；其余试剂均为分析纯。 1.3 样品处理 1.3.1 石榴皮提取液的制备 称取经粉碎（过 40 目筛）的石榴果皮 2.5 g 于烧瓶中，加入 250 mL 蒸溜水在 60℃下浸提 2 h， 3 层纱布过滤，得到 1%的果皮提取溶液，在 4℃下保存备用。 1.3.2 处理及涂膜液的配制[11] 处理 1（T1）1.25%壳聚糖溶液：用 1%的冰乙酸水溶液为溶剂配制；处理 2（T2）1.25%壳聚 糖果皮提取物复合溶液：以石榴皮提取液为溶剂配制 1%冰乙酸溶液，再以其为溶剂配制 1.25%壳聚 糖溶液作为复合涂膜液；以喷施蒸馏水为空白对照（CK） 。 1.4 方法 1.4.1 石榴果皮解剖结构观察 常规石蜡切片法制片[12]。果实采收后，分别取果皮近萼筒处易裂部位切成 0.3×0.5cm 左右（厚度 不超过 3 ㎜） 的小块， 用卡诺氏固定液 （无水酒精 3 份:冰醋酸 1 份） 固定 12 小时→梯度脱水→45~50℃ 浸蜡 2 周→包埋（含 5%蜂蜡）→制作切片（50μm）→贴片→45~50℃烘片 3 周→番红染色→脱色→ 固绿染色→脱色→中性树胶封片。切片在 OLYMPUS DP71 光学显微镜下观察拍照。用比例尺对石榴 表皮 2～5 层薄壁细胞进行测定，比较其差异。 1.4.2 生理指标测定方法 贮藏期间每 30 d 随机取样 3 个果实测定一次下列生理指标，每个指标测定 3 次取平均值。 1.4.2.1 石榴果皮含水量变化 石榴果皮含水量变化采用称重法计算，果皮含水量（%）=
网络出版时间：2014-08-25 14:16 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.2206.TS.20140825.1416.045.html
2014-08-19
采前涂膜对‘泰山红’石榴采后贮藏生 理的影响
杨雪梅，尹燕雷**，冯立娟，武 冲
(山东省果树研究所，山东 摘 泰安 271000) 要：以 ‘泰山红’ 石榴为试材， 研究了采前 1.25%壳聚糖溶液涂膜 （T1） 和石榴皮提取液复合涂膜 （T2） 对石榴果实采后贮藏品质及生理指标的影响。结果表明：采前两种涂膜剂涂膜后，均能增加‘泰山红’石 榴近外表皮的薄壁细胞，但作用不显著； ‘泰山红’石榴在(4.0±0.5)℃条件下贮藏，能有效保持其表皮新鲜 程度，维持其果皮内含水量；涂膜对提高贮藏前期石榴籽粒可溶性固形物含量和降低贮藏前期可滴定酸含 量有一定影响，但对贮藏后期影响不显著；涂膜能使石榴果皮中总酚含量和类黄酮总含量维持在较高水平， 减少贮藏前期因膜脂质过氧化产生的丙二醛含量；此外，T2 复合涂膜还能延迟多酚氧化酶活性高峰出现的 时间，同时提高多酚氧化酶活性的峰值；而 T1 涂膜影响不显著。采前涂膜石榴贮藏至 120 d 果实外观色新 鲜无皱缩，色泽鲜艳，腐烂率较对照低，保鲜效果较为理想。 关键词：石榴；壳聚糖；采前涂膜；贮藏
‘泰山红’石榴以其果皮颜色鲜红，籽粒深红，风味独特，成为目前国内优良的主栽品种之一。 该品种果皮较薄，果皮组织中细胞较大且排列疏松，室温下存放表皮易失水皱缩及部分果皮褐变，降 低其商品价值。此外，石榴花萼为筒状结构里面有干缩的花丝花药，易成为病原菌繁殖的场所，是造 成石榴贮藏过程中的腐烂及病变的根源。 壳聚糖是甲壳素部分脱乙酰化的产物，无毒、无味可用于食品添加剂行业做增稠剂、被膜剂，还 具有高效抑制病原微生物繁殖和生长的作用，提高果实自身的抗病性和延缓果实衰老的功能，对多种
Baidu Nhomakorabea
m1 m2 m1
×100
2
2014-08-19
式中：m1—每次取样后称取果皮鲜重，g；m2—鲜果皮置于烘箱中 65℃烘干至恒重，g。 1.4.2.2 石榴果实总可溶性固形物（Total soluble solids, TSS）含量变化 用手持糖量计测定，挤出石榴果汁测定每次取 3 个石榴计算平均值。 1.4.2.3 石榴果实可滴定酸含（titratable acidity, TA）量变化 可滴定酸含量采用酸碱滴定法测定[13]。 1.4.2.4 石榴果皮中多酚氧化酶（Polyphenol oxidase，PPO）活性 PPO 活性采用邻苯二酚法，取石榴果皮 0.5g，加入 pH7.0 的磷酸缓冲液（含 1%聚乙烯吡咯烷酮 和 10mmmol/L 的抗坏血酸）5mL，冰浴研磨成匀浆，4℃下 4000 r/min 离心 20 min，得上清液用于测 定 PPO 活性。测定时，取上述粗酶液 50μL 与 2.95mL 底物（邻苯二酚，浓度为 0.2mol/L）在 410nm 波长处使用紫外分光光度计进行酶动力学分析，测定 0～30s 吸光度的变化。并规定吸光度每分钟增 加 0.1 为 1 个酶活力单位(1U=0.1ΔA/min)[14,15]。 1.4.2.5 果皮总酚含量 取 1g 石榴果皮研磨成匀浆，加入 20 mL 60%的乙醇于 50mL 三角瓶中，超声波 60℃提取 40min， 后过滤至 25mL 容量瓶并定容。测定时取 1mL 0.5 mol/L 的福林酚试剂加入 50μL 提取液振荡混匀，再 后于 750nm 比色测定其吸光值 A750。 以没食子 加入 4mL 0.5mol/L 的 Na2CO3 溶液室温下反应 60 min， 酸（gallic acid, GA）为标准品制作标准曲线。 1.4.2.6 总类黄酮含量 参考周建华等[16]的方法稍作改动，取 1.4.2.5 中制得的提取液 1mL 加入 4mL 浓度为 1%的 AlCl3 溶液于 420nm 下测定吸光值 A420。类黄酮总含量以以黄酮苷计，根据吸光值等于 1 时，相当于 320μ g 黄酮苷计算含量。 类黄酮总含量（mg/g）=
Effects of Preharvest Coating to the Physiological of ‘Taishanhong’ Pomegranate during Storage
YANG Xue-mei, YIN-yanlei*, FENG Li-juan, WU-Chong (Shandong institute of pomology, Tai’an 271000, China) Abstact: In this study, both 1.25% chitosan (T1) and chitosan with extract of pomegranate rind composite(T2) were uniform sprayinged on ‘Taishanhong’ pomegranate fruit before harvest and then stored at 4.0±0.5℃ for 120 d. The weight loss, total soluble solid, titratable acidity, malondialdehyde content, total phenolics content, polyphenol oxidase activity, soluble solids content, and decay rate were investigated during storage. It indicated that parenchyma cells inside the epidermic cells increased after coating by both T1 and T2 when freshly harvest. Both the control and the treatments maintained the moisture content of rind effectively; preharvest coating also increased the TSS content and TA content decreased during the early stage of storage; maintained the total phenols content and total flavonoids content in pomegranate rind at a higher level; reduced the malondialdehyde content in the early storage. In addition, T2 treatment both delayed and increased the peak value of the polyphenol oxidase activity significantly. Furthermore, preharvest coating increased the shelf life and maintained the sensory quality of the ‘Taishanhong’ pomegranate fruit. Key words: pomegranate; chitosan; preharvestcoating; storage 中图分类号：S665.4 文献标识码：A 文章编号：
收稿日期： （15064177321） 基金项目：山东省国际科技合作项目（2013GHZ31003） ；科技基础性工作专项子课题（2012 FY110100-4） 作者简介：杨雪梅（1982—） ，女，研究实习员，硕士，研究方向为石榴栽培及采后贮藏保鲜研究。E-mail： qdyxm1216@163.com 通讯作者：尹燕雷(1976—)，男，副研究员，硕士，研究方向为果树种质资源评价与遗传育种研究。E-mail： yylei66@sina.com。