实验室常用培养基配方及制备方法

一、孟加拉红培养基（虎红培养基）

配方：

蛋白胨5g

葡萄糖10g

磷酸二氢钾1g

硫酸镁（MgSO4•7H2O）0.5g 琼脂20g

1/3000孟加拉红溶液100ml 蒸馏水1000ml

氯霉素0.1g

制法：

上述各成分加入蒸馏水中溶解后，再加孟加拉红溶液。

另用少量乙醇溶解氯霉素，加入培养基中，分装后，121℃灭菌20min。

用途：

分离霉菌及酵母

加入红色素对培养基进行染色的原因主要是便于根据红色的浓度和色调的变化，以观察培养基的理化性质是否有所改变。

二、PDA培养基Potato Dextrose Agar （Medium）

配方：

马铃薯200g 葡萄糖20g 琼脂15~20g 自来水1000ml

制法：

马铃薯去皮，切成小块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000ml。121℃灭菌30min。

用途：

一种常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。

2.PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸

或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止

局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.1g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰

性

三、牛肉膏蛋白胨培养基

配方：

牛肉膏3g 蛋白胨10g NaCl 5g 琼脂15~20g 水1000ml pH 7.0~7.2

制法：

121℃灭菌20min。

用途：

培养细菌

牛肉膏中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。广泛应用于生物制药发酵。

四、LB培养基（Luria-Bertani 培养基）

配方：

蛋白胨10g 酵母膏5g NaCl 10g 蒸馏水1000ml pH 7.0

制法：

121℃灭菌20min。

用途：

是应用最广泛和最普通的半天然培养基，用于培养细菌，有时又称为普通培养基。生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种，使菌种成倍扩增，达到使用要求。

培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境中单独存活和扩增的工程菌。通过培养工程菌，我们可以表达大量的外源蛋白，也可以拿到带有外源基因的质粒，工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。

LB的营养浓度不如牛肉膏蛋白胨培养基，但LB中的酵母膏可以为微生物提供丰富的维生素、微量元素和生长因子。

五、高氏一号培养基

配方：

可溶性淀粉20g NaCl 0.5g

KNO3 1g

K2HPO4•3H2O 0.5g MgSO4•7H2O 0.5g FeSO4•7H2O 0.01g 琼脂15~25g

水1000ml

pH 7.4~7.6

制法：

按配方先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化。然后再称取其他各成分依次溶化。

对微量成分FeSO4•7H2O可先配成高浓度的贮备液，按比例换算后再加入，方法是先在100ml水中加入1g的FeSO4•7H2O，配成0.01g/ml，再在1000ml的培养基中加入1ml的0.01g/ml的贮备液即可。待所有药品完全溶解后，补充水分到所需体积。

如要配制固体培养基，其溶化过程同牛肉膏蛋白胨培养基的配制。

用途：

是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加入适量的抗菌药物，则可用来分离各种放线菌。

此合成培养基的特点使含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。因此，混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将两种或多种成分分别灭菌，使用时按此比例混合。