疑难血型分析鉴定及处理(课堂PPT)
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13
ABO正反定型不符合原因
• 试验因素
假阴性：未加试剂；红细胞与血清比例不当；试验温 度不当；离心速度不够；未判明结果为溶血；试验结果解 读不准确。
假阳性：试剂血清、红细胞或生理盐水污染；应用不 洁的器皿；离心过度；试验结果解读不准确。
• 患者本身
14
排除人为试验差错
• 漏加试剂 • 红细胞浓度过低或过高 • 试剂污染、失效 • 加样枪污染 • 离心机转速不达标 • 标本搞错 • 记录错误 • 结果判读错误
输血：A型红细胞、血小板
30
实例分析（三）
-A
室温
2+
-B
-D 自身c Ac Bc
2+
4+
0
0
0
患者是新生儿，抗体未出，反定无效 正定型未出现2管强凝集
血型可能是O型，脐带血中有Wharton胶。 洗涤被检细胞后正定型凝集消失：O型
输血：O型血
31
ABO正反定型不符需要关注的问题
患者的年龄？ 细胞是否三洗？ 患者是否血浆蛋白浓度低？ 患者的疾病类型？（白血病，胃肠道肿瘤） 血样是否是输血后采集？
性者用显微镜观察结果
22
进一步实验
• 增加试剂血清：抗A1 、 抗H、 抗AB • 增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞 • 唾液血型物质鉴定 • 吸收试验 • 放散试验 • 直接抗球蛋白试验 • 分子生物学实验
23
实例分析和处理方法
24
实例分析（一）
1、病史 ：患者，女，37岁，子宫肌瘤，既往妊娠史： G2P1，无输血史。
3、自身凝集素 (临床提示AIHA)直抗（+）
4、红细胞粘附大量蛋白 5、红细胞未洗涤,血清对
试剂反应 6、输异型血(输血史) 7、造血干细胞移植(病史)
（混合视野）
反定型、意外阴性
血清抗体“变少”
19
新生儿、老年
病理 情况
低蛋白血症 免疫抑制药物
血液病 先天性免疫缺乏
骨髓移植
处理：加大血清量， 降低温度
• 玻片法 • 试管法：经典 • 微量板法： • 微柱凝胶法 • PCR方法
注意：细胞浓度、血清与细胞比例
10
ABO 正反定型结果
-A
A型
4+
B型
0
O型
0
AB型
4+
-B
A细胞
0
0
4+
>1+
0
>1+
4+
0
B细胞 >1+
0 >1+
0
O细胞 0 0 0 0
自身对照 0 0 0 0
ABO正反定型相符：
1份Pc（生理盐水三洗后）+1份抗A
4℃吸收30-60min
4℃生理盐水洗6次
热放散后取上层放散液
放散液的检测：
A细胞 IS 4℃
Pc放散液 2+ 3+
Oc放散液 0 0
27 通过吸收放散试验在Pc上检测出A抗原
• 4、结论
综上所述：可判断为A亚型，但还不能确定亚型的具体分型 • 输血：A型红细胞、血小板
4
ABO血型系统的血清学特点
• ABO系统主要的抗原、抗体
血型 A B O AB
5
抗原
A B A，B
抗体
抗B 抗A 抗A，抗B -
ABO血型系统的血清学特点
• A、B抗原的免疫性强 • 规则抗体：血清中规律性的存在抗A和/或抗B抗体 • 分泌型人的分泌液（血浆、唾液、羊水等）存在着A、B、H
血型物质
-A -B -D 自身c Ac Bc
室温 ±
0
4+
0
0
4+
分析：A亚型？ A型（A抗原减弱）？其它可能
25
• 2、补充试验（人源抗A/B、抗H）
-A（人源） -B（人源） -AB（人源）
室温
±
0
±
4℃
1+
0
1+
Oc
Pc
A1c
抗H
4+
4+
±
26
H抗原强弱：Oc > 大部分亚型> Ac
• 3、吸收放散试验：
反定型、意外阳性
血清抗体“变多”
20
缗钱状形成 （多发性骨髓瘤）
不规 则抗
体
同种抗体 自身抗体
冷型自身抗体
常见问题处理方法
★了解患者一般情况。 ★在做进一步试验之前，先进行重复试验。 ★用试管法,洗涤细胞。 ★更换新的试剂。 ★灭活补体。
21
常见问题处理方法
• 初步检查：再取一份患者新鲜标本 • 红细胞洗涤后配成2～5%浓度 • 重复进行各项试验 • 直接抗人球蛋白试验 • 用O及自身细胞检测血清 • 判定结果之前，实验管至少在室温和4℃放置30分钟，阴
32
ABO正反定型不符思路整理
意 外
（—）
正 定 型
洗涤RBC，降 低温度，延长孵 育时间
用不同 来源的 抗体试 验，镜 检
可能的亚 型;因为年 龄、诊断 或用药造 成的抗原
“正反定型中有且只有2个强凝集反应管”
11பைடு நூலகம்
ABO正反不符
ABO亚型/抗 原抗体减弱
未达到两管强 凝集
不规则抗体？
除两管强凝集 之外还有其他 凝集
12
提示疑难血型
疑难血型的定义
• 疑难血型：是指一种血型难以判定的“现象”
实质不是一种独立的血型 • 在临床输血中,常规只要求查ABO和Rh（D）,不要求查其它 血型,因此,疑难血型只涉及ABO和RhD • ABO疑难血型一般是因为正、反定型不合而发现的
28
ABO亚型的检测
ABO亚型
人源抗 A/B
抗-H
吸收放散
检测项目
抗-AB 抗A1
29
实例分析（二）
-A
-B
室温
4+
2+
-D 自身c Ac Bc
4+
2+
2+ 4+
分析：患者的血型可能是A型。 巨球蛋白血症或部分多发性骨髓瘤患者，血液中异
常球蛋白升高，导致缗钱状凝集
对策：核对患者诊断和用药情况；盐水替代 ：A型
疑难血型鉴定分析及处理
昆明医科大学第一附属医院输血科 董伟群
1
输血前检查
输血申请
血样、信息
ABO、Rh定型
抗体筛选与鉴定
交叉配血
血液发放
2
红细胞血型系统简介
• 最重要的血型系统：ABO、Rh • 临床意义：输血安全、器官移植、新生儿溶血病
3
ABO血型临床意义 • 溶血性输血反应 • 新生儿溶血病 • 器官移植
• 红细胞上的抗原与血清中的抗体存在相反的互补关系
----正反定型的理论基础
6
ABO血型系统的血清学特点
抗A、抗B抗体的特性 • 主要为IgM、IgG
！
• IgM抗体可被2-Me（2-巯基乙醇）破坏 • IgG抗体分子量小，可通过胎盘屏障，造成新生儿溶血
7
新生儿溶血病
8
9
ABO正反定型试验方法
15
正反定型不合的三种情况
正定型被干扰 : 抗原“变多” 抗原“变少”
反定型被干扰: 抗体“变多” 抗体“变少”
正,反定型同时被干扰
16
正定型，抗原减弱或缺少
红细胞抗原“变少”
17
ABO亚型
年龄＜6月、老年
白血病 输异型血
移植 输血反应 血型物质↑
正定型，意外抗原反应
红细胞抗原“变多”
18
1、获得性B抗原(类B) (临床提示感染) 2、多凝集红细胞
ABO正反定型不符合原因
• 试验因素
假阴性：未加试剂；红细胞与血清比例不当；试验温 度不当；离心速度不够；未判明结果为溶血；试验结果解 读不准确。
假阳性：试剂血清、红细胞或生理盐水污染；应用不 洁的器皿；离心过度；试验结果解读不准确。
• 患者本身
14
排除人为试验差错
• 漏加试剂 • 红细胞浓度过低或过高 • 试剂污染、失效 • 加样枪污染 • 离心机转速不达标 • 标本搞错 • 记录错误 • 结果判读错误
输血：A型红细胞、血小板
30
实例分析（三）
-A
室温
2+
-B
-D 自身c Ac Bc
2+
4+
0
0
0
患者是新生儿，抗体未出，反定无效 正定型未出现2管强凝集
血型可能是O型，脐带血中有Wharton胶。 洗涤被检细胞后正定型凝集消失：O型
输血：O型血
31
ABO正反定型不符需要关注的问题
患者的年龄？ 细胞是否三洗？ 患者是否血浆蛋白浓度低？ 患者的疾病类型？（白血病，胃肠道肿瘤） 血样是否是输血后采集？
性者用显微镜观察结果
22
进一步实验
• 增加试剂血清：抗A1 、 抗H、 抗AB • 增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞 • 唾液血型物质鉴定 • 吸收试验 • 放散试验 • 直接抗球蛋白试验 • 分子生物学实验
23
实例分析和处理方法
24
实例分析（一）
1、病史 ：患者，女，37岁，子宫肌瘤，既往妊娠史： G2P1，无输血史。
3、自身凝集素 (临床提示AIHA)直抗（+）
4、红细胞粘附大量蛋白 5、红细胞未洗涤,血清对
试剂反应 6、输异型血(输血史) 7、造血干细胞移植(病史)
（混合视野）
反定型、意外阴性
血清抗体“变少”
19
新生儿、老年
病理 情况
低蛋白血症 免疫抑制药物
血液病 先天性免疫缺乏
骨髓移植
处理：加大血清量， 降低温度
• 玻片法 • 试管法：经典 • 微量板法： • 微柱凝胶法 • PCR方法
注意：细胞浓度、血清与细胞比例
10
ABO 正反定型结果
-A
A型
4+
B型
0
O型
0
AB型
4+
-B
A细胞
0
0
4+
>1+
0
>1+
4+
0
B细胞 >1+
0 >1+
0
O细胞 0 0 0 0
自身对照 0 0 0 0
ABO正反定型相符：
1份Pc（生理盐水三洗后）+1份抗A
4℃吸收30-60min
4℃生理盐水洗6次
热放散后取上层放散液
放散液的检测：
A细胞 IS 4℃
Pc放散液 2+ 3+
Oc放散液 0 0
27 通过吸收放散试验在Pc上检测出A抗原
• 4、结论
综上所述：可判断为A亚型，但还不能确定亚型的具体分型 • 输血：A型红细胞、血小板
4
ABO血型系统的血清学特点
• ABO系统主要的抗原、抗体
血型 A B O AB
5
抗原
A B A，B
抗体
抗B 抗A 抗A，抗B -
ABO血型系统的血清学特点
• A、B抗原的免疫性强 • 规则抗体：血清中规律性的存在抗A和/或抗B抗体 • 分泌型人的分泌液（血浆、唾液、羊水等）存在着A、B、H
血型物质
-A -B -D 自身c Ac Bc
室温 ±
0
4+
0
0
4+
分析：A亚型？ A型（A抗原减弱）？其它可能
25
• 2、补充试验（人源抗A/B、抗H）
-A（人源） -B（人源） -AB（人源）
室温
±
0
±
4℃
1+
0
1+
Oc
Pc
A1c
抗H
4+
4+
±
26
H抗原强弱：Oc > 大部分亚型> Ac
• 3、吸收放散试验：
反定型、意外阳性
血清抗体“变多”
20
缗钱状形成 （多发性骨髓瘤）
不规 则抗
体
同种抗体 自身抗体
冷型自身抗体
常见问题处理方法
★了解患者一般情况。 ★在做进一步试验之前，先进行重复试验。 ★用试管法,洗涤细胞。 ★更换新的试剂。 ★灭活补体。
21
常见问题处理方法
• 初步检查：再取一份患者新鲜标本 • 红细胞洗涤后配成2～5%浓度 • 重复进行各项试验 • 直接抗人球蛋白试验 • 用O及自身细胞检测血清 • 判定结果之前，实验管至少在室温和4℃放置30分钟，阴
32
ABO正反定型不符思路整理
意 外
（—）
正 定 型
洗涤RBC，降 低温度，延长孵 育时间
用不同 来源的 抗体试 验，镜 检
可能的亚 型;因为年 龄、诊断 或用药造 成的抗原
“正反定型中有且只有2个强凝集反应管”
11பைடு நூலகம்
ABO正反不符
ABO亚型/抗 原抗体减弱
未达到两管强 凝集
不规则抗体？
除两管强凝集 之外还有其他 凝集
12
提示疑难血型
疑难血型的定义
• 疑难血型：是指一种血型难以判定的“现象”
实质不是一种独立的血型 • 在临床输血中,常规只要求查ABO和Rh（D）,不要求查其它 血型,因此,疑难血型只涉及ABO和RhD • ABO疑难血型一般是因为正、反定型不合而发现的
28
ABO亚型的检测
ABO亚型
人源抗 A/B
抗-H
吸收放散
检测项目
抗-AB 抗A1
29
实例分析（二）
-A
-B
室温
4+
2+
-D 自身c Ac Bc
4+
2+
2+ 4+
分析：患者的血型可能是A型。 巨球蛋白血症或部分多发性骨髓瘤患者，血液中异
常球蛋白升高，导致缗钱状凝集
对策：核对患者诊断和用药情况；盐水替代 ：A型
疑难血型鉴定分析及处理
昆明医科大学第一附属医院输血科 董伟群
1
输血前检查
输血申请
血样、信息
ABO、Rh定型
抗体筛选与鉴定
交叉配血
血液发放
2
红细胞血型系统简介
• 最重要的血型系统：ABO、Rh • 临床意义：输血安全、器官移植、新生儿溶血病
3
ABO血型临床意义 • 溶血性输血反应 • 新生儿溶血病 • 器官移植
• 红细胞上的抗原与血清中的抗体存在相反的互补关系
----正反定型的理论基础
6
ABO血型系统的血清学特点
抗A、抗B抗体的特性 • 主要为IgM、IgG
！
• IgM抗体可被2-Me（2-巯基乙醇）破坏 • IgG抗体分子量小，可通过胎盘屏障，造成新生儿溶血
7
新生儿溶血病
8
9
ABO正反定型试验方法
15
正反定型不合的三种情况
正定型被干扰 : 抗原“变多” 抗原“变少”
反定型被干扰: 抗体“变多” 抗体“变少”
正,反定型同时被干扰
16
正定型，抗原减弱或缺少
红细胞抗原“变少”
17
ABO亚型
年龄＜6月、老年
白血病 输异型血
移植 输血反应 血型物质↑
正定型，意外抗原反应
红细胞抗原“变多”
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1、获得性B抗原(类B) (临床提示感染) 2、多凝集红细胞