棉花精氨酸脱羧酶基因GhADC1克隆与表达分析

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ｈｉｒｓｕｔｕｍ
ＬＩＹａ — ｄｏｎｇ，ＭＯＨｕｉ－ｊｕａｎ，ＷＡＮＧＸｉｎｇ — ｆｅｎ，ＳＵＮＹａｎ — ｘｉａｎｇ，，ＭＡＺｈｉ－ｙｉｎｇ
（１．ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｅｂｅｉ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＧｅｒｍｐｌａｓｍＲｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆＨｅｂｅｉ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｔｉ — ｔｕｔｅｏｆＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｇ，Ｌａｎｇ＆ｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｙ，ｔＬａｎｇｆａｎｇ０６５０００，Ｃｈ／ｎａ）
ａｎａｒｇｉｎｉｎｅｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｇｅｎｅｗａｓｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍｕｐｌａｎｄｃｏＲｏｎｕｓｉｎｇｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎｄＲＴ－ＰＣＲｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ．Ｔｈｅｆｕｌｌ — ｌｅｎｇｔｈ
异，推测在抗病品种中ＧｂＡＤＣ１可能参与根部对黄萎病菌胁迫的早期应答。关键词：棉花；精氨酸脱羧酶基因；多胺；黄萎病菌；基因表达
中图分类号：￥５６２．０３５．３文献标志码：Ａ
文章编号：１００２．７８０７（２０１３）０４ — ０２９１ — ０９
ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆａｎＡｒｇｉｎｉｎｅＤｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅＧｅｎｅｆｒＯｍＧｏｓｓｙｐｉｕｍ
摘要：以抑制性消减杂交（ＳＳＨ）文库序列为基础，采用生物信息学和ＲＴ．ＰＣＲ方法从陆地棉中克隆出精氨酸脱羧酶基因，命名为ＧｈＡＤＣ１，ＧｅｎＢａｎｋ登录号为ＫＣ８５１８５６。该基因全长２９５４ｂｐ，其中５ ’ 非翻译区４７７ｂｐ，
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂａｓｅｄｏｎａｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎａｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎｌｉｂｒａｒｙ，ＧｈＡＤＣ１，ＧｅｎＢａｎｋａｃｃｅｓｓｉｏｎｎｏ．ＫＣ８５１８５６，
棉花学报ＣｏＲｏｎＳｃｉｅｎｃｅ２０１３，２５（４）：２９１－２９９
棉花精氨酸脱羧酶基因ＧｈＡＤＣ１克隆与表达分析
李亚栋，默辉娟，王省芬，孙艳香，马峙英
（１．河北农业大学／河北省作物种质资源重点实验室，河北保定０７１００１；２．廊坊师范学院遗传与育种研究所，河北廊坊０６５０００）
wk.baidu.com
ｅＤＮＡｏｆＧｈＡＤＣ１ｗａｓ２９５４一ｂｐｌｏｎｇ．Ｔｈｅ５ ’ ＵＴＲｗａｓ４７７一ｂｐａｎｄｃｏｎｔａｉｎｅｄｓｅｖｅｒａｌｃ妇－ａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｓｔｒｅｓｓｒｅ — ｓｐｏｎｓｅｓａｎｄａｕＯＲＦｅｎｃｏｄｉｎｇａｎ８－ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅ．ＴｈｅｍａｉｎＯＲＦｗａｓ２１８１－ｂｐｌｏｎｇ，ａｎｄｅｎｃｏｄｅｄ７２６ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｗｉｔｈａｐｕｔａｔｉｖｅＮ— ｔｅｒｍｉｎａｌｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ — ｔａｒｇｅｔｉｎｇｓｉｇｎａｌｐｅｐｔｉｄｅ．ＣｏｎｓｅｒｖｅｄｄｏｍａｉｎａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＧｈＡＤＣ１ｃｏｎｆｉｎｅｄａＰＬＰｂｉｎｄｉｎｇｓｉｔｅａｎｄａｎＯｒｎ／Ｄａｐ／Ａｒｇｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｓｉｇｎａｌｓｉｔｅ．ＴｈｅｓｅｃｈａｒａｃｔｅｉｒｓｔｉｃｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｉｔｂｅｌｏｎｇｓｔｏｔｈｅｔｙｐｅＩＩＩＰＬＰ — ｄｅ－
具有多个参与胁迫响应的顺式作用元件和一个编码８个氧基酸的微型编码序列（ｕＯＲＦ）；主编码区（ｍＯＲＦ）
２１８１ｂＤ，共编码７２６个氨基酸，其中Ｎ端具有叶绿体定位信号肽。推测的ＧｈＡＤＣ１蛋白具有ＰＬＰ结合位点及Ｏｍ／Ｄａｐ／Ａｒｇ脱羧酶的信号位点，属于典型的ＩＩＩ型ＰＬＰ依赖型精氨酸脱羧酶家族成员。荧光定量ＲＴ．ＰＣＲ结果表明，正常条件下，ＧｈＡＤＣ１在叶片中表达量高于茎和根部组织，且在抗黄萎病品种冀棉２０中的表达水平高于耐病品种中５２１；黄萎病菌胁迫能够快速诱导抗病品种根部ＧｈＡＤＣ１表达，而在耐病品种中未见明显差