灭菌性能鉴定验证方案

验证方案
灭菌性能鉴定验证方案
产品名称:
文件编号：版号：B
拟制：200 年月日审核：200 年月日批准：200 年月日受控状态：分发号：
灭菌性能鉴定验证方案1/13 1 总则
1.1目的
1.1.1当医疗器械必须以无菌的形式提供时，必须用一切可行的手段保证初始微生物污染降至最低。

既使在ISO9001质量体系标准规定的生产环境下生产，灭菌前仍有少量的微生物在污染产品。

因此，这种产品是带菌的，必须通过一个灭菌过程来杀灭污染的微生物，以保证满足一次性医疗器械无菌的要求。

1.1.2环氧乙烷气体或液体具有较强的杀灭微生物的能力，是一种非常活泼的灭菌剂，有很强的穿透力，适合于对包装物品的灭菌。

在采用环氧乙烷灭菌时，由于灭菌效果受到多种因素的影响，如真空和压力变化、温度升高与湿度变化、作用时间和环氧乙烷的浓度变化、以及包装材料等其它方面的因素，都有可能对灭菌效果造成一定的影响。

因此，产品的开发和所使用的材料应保证功能的可靠性和安全性不会受到预期灭菌条件的影响。

ISO11135/EN550标准规定环氧乙烷灭菌与确认的常规控制要求。

为确保环氧乙烷灭菌设备符合要求和保证灭菌效果合格，必须对灭菌设备和灭菌效果作特定验证确认。

1.1.3根据EN550：1994《医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌确认与常规控制》的要求，对环氧乙烷灭菌器和灭菌效果进行有效性确认（验证），以确认最佳灭菌工艺方法,建立全面有效的灭菌程序。

1.2 范围
a本验证方案仅适用于杭州电达消毒设备厂生产的HDX-10(CE)标准环氧乙烷灭菌器的验证。

（出厂编号01-10ΙCE）
b验证产品：
1.3使用设备及其概要
2/13 1.4工序概要
气体作用
产
产
品加温 EO导入 EO除去品
空气除去
推
推
入
出
蒸汽导入空气置换
1.5验证依据
EN1422：1997 《医用消毒器——环氧乙烷消毒器》
EN550：1994 《医疗器械的灭菌——环氧乙烷灭菌确认与常规控制》
1.6 验证
1.6.1验证方案：验证方案由企管部制定，并经生产副总确认后，方可实施。

1.6.2验证实施：由品质部、生产部、企管部的人员组成验证小组，生产部、企管部负责按照验证方案组织实施环氧乙烷灭菌器的验证，品质部负责取样和试验，必要时设备厂家提供技术协助。

1.6.3验证结论：应由品质部对验证的过程和所取得的数据进行确认，形成验证结论并会签。

1.6.4验证资料：所有有关验证的资料、所取得的数据、表单和验证报告由企管部妥善保管、存档。

1.7 再验证
1.7.1再验证的条件
当发生以下情况时，应进行再验证：
⑴当引入新产品或产品的结构、材料发生变化时
⑵当产品的包装型式、包装材料发生变化时
⑶当灭菌室内负载的装载方式发生变化时
⑷ 当灭菌工艺发生变化时
⑸ 灭菌器大修后或连续出现灭菌质量事故（灭菌不合格）时 ⑹ 正常情况下，应至少每年进行一次再验证
3/13 1.7.2再验证的组织实施 1.7.2.1再验证申请
当需要进行再验证时，应由相关职能部门提出申请，报生产副总批准。

1.7.2.2再验证方案的制定
生产副总批准再验证申请后，应指定相关职能部门制定验证方案，经生产副总确认后方可组织实施。

1.7.2.3再验证的组织实施
由生产部、品质部、等相关职能部门的人员组成验证小组，按照验证方案组织实施验证。

1.7.3再验证结论的确认
验证小组负责对验证的过程和取得的数据进行确认、形成验证结论并会签。

1.7.4再验证资料
所有有关再验证的资料、所取得的数据、表单和再验证报告应妥善保管、存档。

2 验证方案
2.1验证预定实施责任部门：
验证是由交付试验和性能确认两部分组成，其关系如下：
4/13 2.3设备合格性的确认
1、安装合格性确认
5/13 2.4 运转合格性确认
2.4.1 灭菌器的物理性能确认：
a 灭菌器的空载运行温度均匀性验证：(箱壁温度均匀性、空载运行温度均匀性) —温度探头的数量：16个（箱壁温度均匀性）、15个（空载运行温度均匀性) —温度探头放置的位置：（箱壁温度均匀性）
绘制温度探头分布图（图1），将灭菌器内体积划分为三个部分，每个部位按逆时针方向将温度探头进行编号（1-16号）测试。

注：每个温度传感器都贴触于灭菌器内壁上，在温度恒定后进行测量并绘制温度分布图。

—温度探头放置的位置：（空载运行温度均匀性）
绘制温度探头分布图（图2），将灭菌器内体积划分为三个部分，每个部位按顺时针方向将温度探头进行编号（1-15号）测试并绘制温度分布图。

（注：每个温度传感器都布于灭菌柜空间内至少离壁柜100mm的位置悬空放置）
—按设定的条件作空载试验，记录加热时间、最高温度和最低温度之差，温度波动范围为±3℃。

b 灭菌器的满载运行温度均匀性验证：
—温度探头的数量：15个
—温度探头放置的位置：
绘制温度探头分布图（图2），将灭菌器内体积划分为三个部分，每个部位按
顺时针方向将温度探头进行编号（1-15号）测试。

—按设定的条件(产品1)作满载分布，记录加热时间、最高温度和最低温度之差，温度波动范围为10℃以内。

—按设定的条件(产品2)作满载分布，记录加热时间、最高温度和最低温度之差，温度波动范围10℃以内。

—通过试验确定温度冷点和热点位置。

注：产品和柜壁之间至少留出30-50mm空隙。

c 灭菌器真空压力试验：
—真空速率试验：预真空至-15KPa的时间≤6min（温度恒定）
预真空至-70KPa的时间≤30min（温度恒定）
—真空泄漏试验：预真空至-70KPa维持60min应不超过0.1KPa/min（温度恒定）—正压泄漏试验：加压至50KPa维持60min应不超过0.1KPa/min（温度恒定）d 加湿试验：
—湿度传感器：0～100%RH
—湿度传感器范围：0～100%RH
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图一图二
2.5 运转性能合格性的确认及产品合格性的确认;
2.5.1灭菌工序的灭菌条件
灭菌温度——54±3℃
保温时间——60min
预真空——-30KPa
保压时间——10min
湿度——30～90%RH
加药量——2 Kg、4 Kg、6 Kg （10m3）
灭菌时间——120、180、240、300、360分钟
换气真空度——-20KPa
换气次数——至少3次
通风时间——30min
2.5.2准备
1所使用的生物指示剂
产地：公司
试验菌：bacillus subtilis derived from(ATCC9372) CIP 7718/片（含量，D值）
批号：
规格： EN：8661-1，-2（附质保证书）
2 过程监测器材
在输血器的滤盒内插入一张BI，用纸塑包装。

（图3）
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3 产品在灭菌罐内的装载方式
中包装装载方式
外包装装载方式
装载方法1参照附图4，适用于1型产品
装载方法2参照附图6，适用于2型产品
灭菌罐内可放1个底架。

4 计测仪器
在进行设备合格性确认时，应完成灭菌罐所有记测仪器的校正工作。

确认所需使用的记测仪器，要确认其在有效期内。

5 使用气体
X X X 公司
向供货单位索取气体质量保证书，并确认其在规格范围内。

附质检报告
2.5.3 验证方法：
⑴半时循环法：本方法是在除时间外所有其它过程参数不变情况下，确定无存活菌的EO最短作用时间应再重复两次实验来证实该最短灭菌时间，三次实验均应表明生物指示剂上无菌生长。

规定作用时间应至少为最短灭菌时间的2倍。

⑵按上述灭菌工艺进行验证，其中半时循环法温度参数取下限（51℃），当生物指示剂全为阴性，重复两次。

⑶亚致死周期试验：按前面得到的验证参数（其中温度51℃），其中灭菌时间缩短15分钟进行亚致死周期试验，当生物指示剂部分为阴性，试验完成。

⑷全周期试验（生物指示剂为5片）：按前面得到的验证参数（其中温度57℃）进行全周期试验。

其中最冷点2片，其它3片中心线均布。

2.5.4 生物指示剂布置方法：
—生物指示剂的数量：30（10m3灭菌器）
—生物指示剂应放于产品中最不容易灭菌的地方、灭菌柜中最难灭菌的地方。

生物指示剂应在预处理（若采用）前放置于灭菌物品中，并且在整个灭菌周期中保持在该位置(见图3)。

—负载位置见图4、图5，生物指示剂放置在A、B、C、D、E、F排的1、3、8、10、12箱产品的中间位置，每点放置一套带一枚生物指示剂的产品。

—负载位置见图6、图7，生物指示剂放置在A、C、D、F、G、I排的1、3、8、10、12箱产品的中间位置，每点放置一套带一枚生物指示剂的产品。

8/13 包装后的过程监测器材图3
产品装载方式1 图4
9/13 A B C D E F
图5 纵向图
横向图
10/13
产品装载方式2 图6
A B C D E F G H I
图7 纵向图
横向图
11/13 2.5.3生物指示剂的培养
按照《环氧乙烷灭菌效果生物性能试验规程》和供货单位的推荐，进行培养。

3 验证实施前的准备
3.1设备
3.1.1预处理（若采用）、灭菌和通风设备符合设备规范要求。

3.1.2 灭菌器安装应便于操作，安全措施应落实。

3.1.3各管道、阀门及密封件应安装可靠，无泄漏。

3.1.4电气装置应可靠接地。

3.1.4各记录装置应能够正常工作，必须校准所有控制、指示和记录灭菌过程的仪器开始。

3.2产品、包装及其他
3.2.1初始污染菌
应确定被灭菌产品从生产车间（净化车间）移出至进入灭菌器进行灭菌的最长滞留时间，并提供其初始污染菌化验报告。

3.2.2产品
应确定被灭菌产品经环氧乙烷灭菌后其物理、化学性能未发生变化，并提出
检验报告。

3.2.3包装
3.2.3.1包装的灭菌适应性
应能证明被灭菌产品的包装是适合于环氧乙烷灭菌的（主要指包装的材料、厚度等既能够保证环氧乙烷气体的穿透、使被灭菌产品达到有效灭菌，又能够保证其经环氧乙烷灭菌后其物理、化学性能未发生变化），并提供检验报告。

3.2.3.2包装的封口强度验证
应能证明包装经灭菌后其封口的密封性能不受到损害。

3.2.3.3包装的阻菌性验证
应能证明带包装经灭菌后的产品在标称的无菌有效期到期时仍是无菌的，并提供检验报告。

注：可进行老化实验或用留样的产品进行检验。

3.2.4环氧乙烷
应提供环氧乙烷气体成分的检验报告及供应商资料。

3.2.5环氧乙烷灭菌生物指示剂
应提供环氧乙烷灭菌生物指示剂的质检报告及供应商资料。

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3.2.6加湿用蒸汽
应提供加湿用水的质量报告，以保证使其不成为微生物污染源。

3.3验证实施
验证的实施由验证小组按确定的验证方案进行，并做记录，对验证所取得的数据进行分析、处理，形成验证报告、存档。

3.4确认出证
3.4.1 应以文件形式出具确认报告，该报告应由负责制定、评审和批准人员签名。

3.4.2确认报告应包括EO灭菌过程规范文件。

确认报告包括下列参数和公差：
①预处理（如采用）：
a 时间、温度、湿度
b 产品进行预处理所允许的最低温度
c 在预处理区内的产品的装载形式和隔离形式
d 灭菌负载的温度和湿度
e 从预处理区移出产品到灭菌循环开始的最长时间
②处理（如使用）：
a 最初真空度和达到它的时间（如使用）
b 真空保持时间
c 时间、温度、压力和湿度
d 灭菌负载的温度和湿度
e 灭菌：
1) 灭菌剂注射压力升高，灭菌剂注入时间和最终压力
2) 从压力升高中单独测的EO浓度，至少用下列方法之一：
•所用的灭菌剂质量
•所用的灭菌剂体积
•直接分析柜内气体
h 柜内温度
I 作用时间
J 灭菌负载温度
③通风：
a 时间和温度
b 柜内和/或房间内压力的改变
c 空气或其他换气速度
d 灭菌负载的温度
e 柜内和/或房间内的产品的装载形式和隔离形式
3.4.3 灭菌过程控制和监测
①应记录并保留每一灭菌循环数据以证明已达到灭菌过程规范。

这些数据应至少包括下列内容：
a 对预处理区（如使用）内最难达到规定条件的位置进行监测并记录下列温度和湿度
b 开始时间和从预处理区移出灭菌负载时间
c 每一灭菌负载开始灭菌循环的时间
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d 在灭菌循环中从柜内具代表性的位置测得的温度和压力；
e 证明气体灭菌剂已注入到灭菌柜内；
f 测定所用EO的量和柜内EO的浓度；
g 作用时间；
h 通风过程中时间、温度和压力的变化和
i EO灭菌指示剂的试验结果。

②应保留标准中规定的所有记录；
③用于监测灭菌过程的EO灭菌指示剂、复苏培养基和培养基条件应符合标准。

④在规定的时间间隔内应评价生物负载。

3.4.4 所有验证控制记录应至少保存到产品的有效期后一年。

4 重新灭菌
4.1当灭菌过程的物理变量与经验证有效的灭菌周期的物理参数相一致，且灭菌周期监测生物指示剂培养后无试验菌生长时，本灭菌周期的产品才能放行。

4.2当发现物理参数超出文件规定的公差，或生物指示剂经培养有菌生长时，该灭菌周期的产品应隔开放置，需重新灭菌。

4.3若产品需重新灭菌，则灭菌程序记录应是经过验证且有效的。

从再次灭菌记录中应可以追查出初次灭菌的记录。

5 验证方案审核会签表
6 灭菌性能鉴定验证参考文献
6.1 环氧乙烷灭菌用生物指示器件ISO11138-2。

6.2 医疗器械微生物学评价试验选择指南ISO10993-1/EN30993-1。

6.3 医疗器械微生物学评价环氧乙烷灭菌残留量ISO10993-7。