微卫星 DNA 标记是解决亲子鉴定的有效手段

微卫星DNA与亲子鉴定

一. 微卫星DNA：

重复单位序列最短，只有2～6bp，串联成簇，长度50～100bp，又称为短串联重复序列（Short Tandem Repeat STR)。广泛分布于基因组中。其中富含A-T碱基对，是在研究DNA 多态性标记过程中发现的。1981年Miesfeld等首次发现微卫星DNA，其重复单位长度一般为1～6个核苷酸，双核苷酸重复单位常为(CA)n和(TG)n。

二．亲子鉴定：

根据鉴定目的的不同，DNA亲子鉴定可以分为司法鉴定和个人鉴定。司法鉴定，是指在诉讼活动中鉴定人运用科学技术或者专门知识对诉讼涉及的专门性问题进行鉴别和判

断并提供鉴定意见的活动，是我国主要的法律鉴定制度。三．微卫星DNA 标记是解决亲子鉴定的有效手段, 无论家畜, 还是野生动物或人工圈养小群体, 象马匹、奶牛、肉牛、东北虎、绵羊、鳄鱼等动物都有学者成功解决了亲子关系的确认。Ellegr en 等用5 个马科的微卫星座位( 要求有 6 个以上的多态性座位) 判定马的亲权关系可使排除率达98% 以上, 10个位点排除率达99. 99% 。Binns 等用 6 个微卫星位点解决了20 匹以前用血型无法判定的纯血马的亲权归属, Lee 和Choi 应用14 对马科微卫星引物对纯

种马进行鉴定, 结果支持微卫星标记在亲子鉴定中的潜力, 排除率为99. 98% 。Sherm an 等[使用微卫星座位评价肉牛公牛数量和公牛间亲缘关系对后代的影响, 并计算非父排除率和不明父亲的概率。贾名威等用 6 个微卫星座位判清了几头奶牛的嫌疑父亲, 还使用这 6 对引物为法院做过亲子鉴定, 破案后确与事实吻合。Mo mmens 等用微卫星引物作了大量的亲子鉴定研究, 同时也指出微卫星是作为遗传距离计算和分子系统发生树构建的理想标记。张于光等用 6 对家猫和 4 对苏门答腊虎共 10 对引物鉴定了7 个父子关系不清的东北虎后代。对于绵羊的嫌疑父亲确认也是一样的有效与准确Fitzsim mons 等( 2002) 用微卫星 DNA 标记结合mtDNA 对暹罗鳄、古巴鳄及湾鳄 103 只个体进行研究, 成功鉴定出 4 个个体为种间杂交后代, 其中 2 个最初的形态鉴定有误, 而有 1 个险些作为纯种暹罗鳄野外放养, 有效地避免了种间杂交个体对野外群体中暹罗鳄种质资源的影响。张志和等对成都动物园、成都大熊猫繁育研究基地的大熊猫幼子及其母亲和可疑父亲作了父亲鉴定, 通过基因型分析结果有效认出这些大熊猫之间的父子关系。我们开展的大额牛( Bo s frontalis) 与婆罗门牛( Bos indicus) 人工授精种间杂交试验取得较大进展, 并对第一例杂交后代进行了亲子鉴定, 得到的 RCP ( relative chance of paternity, 父权相对机会)

为 99. 9949%,表明大额牛与婆罗门牛种间杂交的可行性[ 20] , 目前先后获得了 16 头大婆 F1 后代( 3、 13 ) 。微卫星标记是目前用途十分广泛的一类DNA分子标记，是继RFLP标记之后发展起来的一种新型分子标记。与RFLP、RAPD 以及小卫星标记相比较，微卫星标记具有数量大、分布广且均匀、多态信息含量高、共显性遗传、分析方便、适合进行自动化和半自动化检测、服从孟德尔遗传规律等优点⋯，而且在多态性、平均杂合度等方面其位点值均高于蛋白标记位点。同时，微卫星受选择压力小，更能反映群体分化水平及亲缘关系远近，因此在亲缘关系分析、个体鉴定、亲子鉴定以及疾病控制、标记辅助选择等方面得到广泛应用。

四．用微卫星标记技术进行亲子鉴定的基本原理

在现代动物生产和育种中，通常利用畜群系谱来确定亲缘关系并以此来确定个体选留，但在混合授精、胚胎移植、寄养等条件下却不能准确判断某些个体的亲缘关系。利用微卫星多态性，即以多个微卫星在一个群体中等位基因频率为基础，通过计算排除概率，便可进行亲子鉴定与血缘控制五．微卫星DNA的优势：与其他亲子鉴定方法相比较，微卫星标记检测方法在样品采集和统一检测标准方面更为方便，血液、组织、毛发以及福尔马林保存样品等都是很好的原材料 J，同时检测不受年龄和环境等因素的影响，在亲子鉴定中比其他标记有更高的准确性。