RibonucleaseInhibitor重组核糖核酸酶抑制剂-ThermoFisher

Ribonuclease Inhibitor
重组核糖核酸酶抑制剂
货号：c10777000
浓度：40 U/µl (参见下面的储存注意事项)规格：5,000 Units 储存于 -20℃
产品描述
该重组核糖核酸酶 (RNase) 抑制剂是胰型核糖核酸酶 (如 RN ase A) 的强效非竞争性抑制剂，该产品为猪肝脏核糖核酸酶抑制剂基因在重组大肠杆菌中的表达产物，经亲和层析纯化后得到。

与其他胰型核糖核酸酶抑制剂类似，该产品为酸性蛋白质，分子量约为 52 kDa ，与 RNase A 等胰型核糖核酸酶具有极高的亲和结合力。

该产品是胰型核糖核酸的非竞争性抑制剂，通过与牛胰腺 RNase A 形成 1:1 的复合物来实现其抑制作用。

该产品能够抑制 RNase A 、RNase B 和 RNase C 的活性，但对 RNase 1、RNase T1、RNase T2、S1 核酸酶和 RNase H 的活性没有抑制作用。

储存缓冲液
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)、50 mM KCl 、0.5 mM EDTA 、8 mM DTT 及 50% (v/v) 甘油。

储存注意事项
避免将产品放置于温度剧烈变化的环境中，使用时建议将该产品放置于冰盒内或冰浴上，使用完毕后应立即放置于 -20℃ 冰箱内保存。

此核糖核酸酶抑制剂需要 1 mM DTT ，以维持活性。

该产品仅适用于实验室研究使用。

注意：不适用于诊断用途。

该产品在诊断或者其他临床应用上的安全性和有效性方面尚未经过验证。

质量控制单位定义：一个活性单位为抑制5 ng RNase A 50%活性所需的核糖核酸酶抑制剂的量。

此活性是通过检测该产品抑制RNase A 水解胞嘧啶 2’, 3’-环单磷酸的效率来测定的 (1)。

纯度：经12.5%SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，该核糖核酸酶抑制剂的纯度高于90%。

比活性 80,000 units/mg 。

核酸内切酶 (切口) 分析：分别将50、100 和200 单位的该核糖核酸酶抑制剂与1 µg φX174 RF DNA 混合，37℃ 孵育60 分钟，与对照组 (未加入任何核糖核酸酶抑制剂) 相比，未观察到 DNA 被切为开放环状 (II 型) 或线性 (III 型)。

RT-PCR ：与对照批号组相比，该核糖核酸酶抑制剂对PCR 产物确无抑制作用。

应用cDNA 合成：在加入到反应混合液体系 (40 units/20 µl 反应混合液) 中时，该核糖核酸酶抑制剂能够保护mRNA 不被降解，从而提高总cDNA 产量，包括全长cDNA 在总cDNA 中的百分比。

RT-PCR ：该核糖核酸酶抑制剂与RT-PCR 中所使用的所有酶能够兼容。

例如，该产品曾应用于基于Elongase ®酶反应混合物的长时间RT-PCR 反应中 (40 units/20 µl 反应混合液)。

体外转录：研究表明，在使用T3、T7 和SP6 RNA 聚合酶进行全RNA 体外转录实验中，该核糖核酸酶抑制剂可有助于获得更多完整的RNA 分子 (20-40 units/10 µl 反应混合液)。

Blackburn, P. (1979) J. Biol. Chem . 254, 12484-12487.
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