江苏大学细胞生物学考研真题与答案
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2018大纲
四简答题60 分(共 6 题,每题10 分)
1 细胞生物学研究的主要内容是什么?
生物膜与细胞器的研究,细胞核、染色体以及基因表达的研究,细胞骨架体系的研究,细胞增殖及其调控,细胞分化及其调控,细胞的衰老与程序性死亡,细胞的起源与进化,细胞工程(答出其中 5 个就给满分)
2 单克隆抗体的制备过程。
动物受到外界抗原的刺激后可发生免疫反应,产生相应的抗体,这一职能由 B 淋巴细胞承担;瘤细胞在体外培养条件下可以无限传代,是“永久的”细胞。
把小鼠骨髓瘤细胞同经免疫过的小鼠脾细胞(B 淋巴细胞)在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生融合。
融合后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,一方面可分泌抗体,另一方面像瘤细胞一样,可在体外培养条件下或移植到体内无限增殖,从而分泌大量抗体。
3 生物膜的基本结构特征及生理功能。
生物膜是由膜脂与膜蛋白构成的。
膜蛋白又分为内在膜蛋白与外在膜蛋白。
脂双分子层构成了膜的基本结构。
各种不同的膜蛋白及其与膜脂分子的协同作用不仅为细胞的生命活动提供了稳定的内环境,而且还行使着物质转运、信号传递、细胞识别等多种复杂的功能。
流动性和不对称性是生物膜的基本特征,也是完成其生理功能的必要保证。
4 什么是真核生物mRNA 前体的拼接(splicing)?
真核生物中不连续基因中的居间序列称为内含子,被内含子隔开的基因序列称为外显子。
一个基因中的外显子和内含子都转录在一条原初转录产物中,然后把内含子切除而把外显子连接起来,才能产生成熟的 mRNA 分子,这个过程称 RNA 拼接。
在内含子上游方向的一个拼接点为 GT,内含子下游的一个拼接点为 AT。
5 蛋白质翻译后加工有哪些方式?
分泌蛋白的 N 端信号肽的切除; GPI锚的连接;除去肽链合成的起始氨基酸或随后几个氨基酸残基;形成多肽分子内的二硫键;末端或内部氨基酸的共价修饰;蛋白质泛素化;蛋白质的糖基化等
6 细胞周期包含哪四个时期,各时期的主要特征是什么?
①G1期,与DNA合成启动相关,开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂质等,同时染色质去凝集。
②S期,合成DNA和染色体蛋白(组蛋白和非组蛋白)。
③G2期,合成其他结构物质和相关的亚细胞结构,如微管蛋白、染色体凝集因子等。
④M期,即细胞分裂期,包括胞核分裂和胞质分裂,细胞将其遗传物质载体平均分配到两个子代细胞中。
五问答题45 分(共 3 题,每题15 分)
1 细胞研究的重要历史阶段划分成哪几个阶段?阐述细胞学说的内容及意义。
Ⅰ五个阶段:(1)细胞的发现;(2)细胞学说的建立;(3)细胞学说的经典时期;(4)实验细胞学时期;(5)细胞生物学学科的形成与发展。
Ⅱ内容:(1)细胞是有机体,一切动植物都是由细胞发育而来,即生物是由细胞和细胞的产物所组成;(2)所有细胞在结构和组成上基本相似;(3)生物体是通过其细胞的活动反映其功能;(4)新细胞是由已存在的细胞分裂而来;(5)生物的疾病是因为其细胞机能失常。
Ⅲ意义:细胞学说的提出对生物科学的发展具有重大的意义。
它是生物学的三大基石之一,对于生物基本细胞结构的了解是其他一切生物科学和医学分支进一步发展所不可缺少的
2 阐述真核生物细胞的主要细胞器及功能。
线粒体、内质网、中心体、叶绿体、高尔基体、核糖体、溶酶体和液泡等.它们组成了细胞的基本结构,使细胞能正常的工作,运转.
线粒体:是细胞进行有氧呼吸的主要场所,又称"动力车间".细胞生命活动所需的能量,大约95%来自线粒体.
内质网:是细胞内蛋白质和脂质的合成和加工场所.可分为光面内质网和粗面内质网,粗面内质网加工蛋白,光面内质网合成脂质.
中心体:是细胞分裂时内部活动的中心,动物细胞和低等植物细胞中都有中心体.
叶绿体:是绿色植物能进行光合作用的细胞含有的细胞器,产生氧气和有机物,是植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”.
高尔基体:将内质网合成的蛋白质进行加工、分类与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外.动植物细胞中都含有高尔基体,动物细胞用于分解物的形成,植物细胞参与细胞壁的形成.
核糖体:分为附着核糖体和游离核糖体,是蛋白质合成的场所,通过mRNA与携带氨基酸的tRNA的相互作用合成蛋白质。
溶酶体:内含多种水解酶,专司分解各种外源和内源的大分子物质.能分解衰老,损伤的细胞器,吞噬并杀死入侵的病毒或细菌,动植物细胞中都含有溶酶体.
液泡:是贮存水、离子和营养物质(如葡萄糖,氨基酸等)的细胞器.只存在于植物细胞和低等动物细胞.
3 癌细胞的主要特征是什么?致癌因素根据性质大体上分为3 大类,是哪3 大类并举例说明。
特征:无限增殖,接触抑制现象丧失,癌细胞间黏着性减弱,易于被凝集素凝集,细胞骨架结构紊乱,产生新的抗原,对生长因子需要量降低。
致癌因素:物理致癌因子,主要为辐射致癌;化学致癌因子,主要是化学物质,如无机物中的砷,石棉等,有机物中的苯,亚硝胺等;病毒致癌因子,肿瘤病毒等。
六英文译成中文15 分
Self-reproduction is perhaps the most fundamental characteristic of cells—as may be said for all living organisms. All cells reproduce by dividing in two, with each parental cell giving rise to two daughter cells on completion of each cycle of cell division. These newly formed daughter cells can themselves grow and divide, giving rise to a new cell population formed by the growth and division of a single parental cell and its progeny. In the simplest case, such cycles of growth and division allow a single bacterium to form a colony consisting of millions of progeny cells during overnight incubation on a plate of nutrient agar medium. In a more complex case, repeated cycles of cell growth and division result in the development of a single fertilized egg into the more than 1013cells that make up the human body.
自我更新是细胞也可以说是所有的生物体的最基本特性。
所有细胞的自我更新是通过一个完整的细胞分裂实现的,即一个亲代母细胞分成2个姐妹细胞,这些新形成的子细胞自身生长和分裂,由一个亲代母细胞和它的后代生长分裂成一个新的细胞群。
最简单的事例,在含营养的培养基上,一昼夜一个单个细菌可以形成一个由成千上万的子代细胞构成的集落。
一个比较复杂的事例,单个受精卵可以通过反复的生长和分裂循环形成一个具1013个细胞以上的人体。
2018样卷
四.简答题:60分(共6题,每题10分)
1、经由细胞表面受体介导的信号途径有哪些步骤?
4个步骤组成:①细胞通过特异性受体识别胞外信号分子;②信号跨膜转导;③通过胞内级联反应实现信号放大作用,并终至细胞活性改变;④由于信号分子失活,细胞反应终止或下调。
2、细胞核的结构特点及功能是什么?
(1)细胞核大多呈球形或卵圆形,约占细胞总体积的10%,主要由核被膜、染色质、核仁及核骨架组成。
(2)细胞核是细胞内最重要的细胞器,遗传与代谢的调控中心。
细胞核是遗传信息的储存场所,在细胞核进行基因复制转录和转录初产物的加工过程,从而控制细胞的遗传与代谢活动。
3、什么是癌基因和抑癌基因?各有什么特点?
癌基因是指控制细胞生长和分裂的一类正常基因,其突变能引起正常细胞发生癌变。
癌基因的一对等位基因中有一个发生突变便可引起癌变。
抑癌基因又称抗癌基因,是指编码正常细胞增殖过程中的负调控因子的基因,其表达产物具有在细胞周期的检验点上阻止周期进程,或促进细胞凋亡,或既抑制细胞周期调节,又促进细胞凋亡的作用。
抑癌基因突变,则丧失其细胞增殖的负调控作用,导致细胞周期失控而过度增殖。
抑癌基因的一对等位基因都缺失或失去活性才出现癌变,常见的有p53、Rb 和ras 等基因
4、植物细胞与动物细胞的区别是什么?
植物细胞特有的细胞器:细胞壁(主要成分是纤维素)、液泡、叶绿体等;而动物细胞的中心粒在植物细胞中不常见到。
动物细胞的胞质分裂方式是缢缩,而植物细胞是形成细胞板。
5、植物叶肉细胞中既然存在大量的叶绿体的产能细胞,为什么还需要线粒体供能?
线粒体和叶绿体是细胞内的两种产能细胞器。
叶绿体通过光合作用把光能转化为化学能,并储存于糖类、脂肪和蛋白质等大分子有机物中。
线粒体是一种高效地将有机物转化为细胞生命活动的直接能源ATP 的细胞器,是糖类、脂肪和氨基酸最终氧化释能的场所。
因此,植物细胞中虽然有叶绿体合成ATP,但那是伴随生物大分子的合成产生的,不是叶绿体的主要功能。
细胞的能量主要是靠线粒体来提供,所以是必
不可少的。
6、动物克隆技术在那些方面具有重要的应用价值?
①动物克隆技术在畜牧业生产上的应用:利用优良动物品种的体细胞作核供体克隆动物,可大大缩短育种年限,加速动物育种进程。
②动物克隆技术用于拯救濒危动物。
③克隆技术与转基因技术结合表达外源基因
④克隆技术与干细胞技术结合,通过克隆动物的胚胎干细胞作异源移植,可以解决人类移植器官供求矛盾。
利用克隆技术对人类细胞和组织行治疗,解决所用胚胎和卵母细胞来源困难和伦理问题
五.问答题:45分(共3题,每题15分)
1、什么是细胞培养技术?它对细胞生物学研究有什么重要意义?
细胞培养是指在体外模拟体内的生理环境,培养从机体中取出的细胞,并使之生存和生长的技术。
细胞培养是细胞生物学研究的最基本的实验技术之一,细胞生物学是一门研究和揭示细胞基本生命活动规律的学科,研究细胞结构与功能,细胞增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡,以及细胞信号转导,细胞基因表达与调控,细胞起源与进化等重大生命过程,而细胞作为生命活动的基本单位,这些研究离不开细胞。
(2)广义上,细胞培养包括原核生物细胞、真核单细胞、植物细胞与动物细胞的培养以及与此密切相关的病毒的培养,通过细胞培养可以获得大量的细胞。
而生物学其他领域的研究,如基因工程、酶工程、蛋白质工程、细胞工程、发酵工程等均需在细胞上进行操作,因此都离不开细胞培养技术。
因此说细胞培养是许多后期实验的基础,是细胞生物学研究的前提,也是最基本的实验技术之一。
2、蛋白质在细胞内的哪个部位被合成?合成后被转运到什么地方?
细胞中的蛋白质都是在核糖体上合成的,并都是起始于细胞质基质中。
基本途径:一条途径是在细胞质基质中完成多肽链的合成,然后转运至膜围绕的细胞器,如线粒体、叶绿体、过氧化物酶体、细胞核及细胞质基质的特定部位,有些还可转运至内质网中;另一条途径是蛋白质合成起始后转移至粗面内质网,新生肽边合成边转入粗面内质网腔中,随后经高尔基体转运至溶酶体、细胞膜或分泌到细胞外,内质网与高尔基体本身的蛋白质成分的分选也是通过这一途径完成的。
3、什么是细胞凋亡?试述其生理学及医学意义。
2.细胞凋亡(apoptosis):是细胞接受某些特定信号刺激后,主动的由基因决定的细胞死亡方式。
该过程具有典型的形态学和生化特征,凋亡细胞最后以凋亡小体形式被吞噬消化。
①动物发育过程中,细胞凋亡是塑造个体及器官形态的机制之一。
②细胞凋亡能够清除体内多余、受损或危险的细胞而不对周围的细胞或组织产生损害。
③人体细胞凋亡的失调,包括不恰当的凋亡激活或抑制,会引发多种疾病。
a.细胞凋亡不足会引发肿瘤和自身免疫病;
b.细胞的过度凋亡或凋亡的失调将会导致免疫功能的丧失、引发炎症和疾病。
④细胞凋亡与细胞分裂是控制细胞族群大小的两大原动力
六.英文译成中文:15分
DNA replication is constantly challenged by DNA lesions, noncanonical DNA structures and difficult-to-replicate DNA sequences. Two major strategies to rescue a stalled replication fork and to ensure continuous DNA synthesis are:(1) template switching and recombination-dependent DNA synthesis; and (2) translesion synthesis (TLS) using specialized DNA polymerases to perform nucleotide incorporation opposite DNA lesions. The former pathway is mainly error-free, and the latter is error-prone and major source of mutagenesis.
An accepted model of translesion synthesis involves DNA polymerase switching steps between a replicative DNA polymerase and one or more TLS DNA polymerases.
The mechanisms that govern the selection and exchange of specialized DNA polymerases for given DNA lesion are not well understood. In this review, recent studies concerning the mechanisms of selection and switching of DNA polymerases in eukaryotic systems are summarized.
DNA复制不断受到DNA损伤,非经典DNA结构和难以复制的DNA序列的挑战。
拯救停滞的复制叉并确保连续DNA合成的两个主要策略是:(1)模板转换和重组依赖性DNA合成;(2)使用专门的DNA聚合酶进行跨损伤修复(TLS)以进行与DNA损伤相反的核苷酸掺入。
前一种途径主要是无错误的,后者容易出错,是突变的主要来源。
可接受的跨损伤合成模型涉及复制DNA聚合酶和一种或多种TLS DNA聚合酶之间的DNA聚合酶转换步骤。
管理给定DNA损伤的专门DNA聚合酶的选择和交换的机制尚不清楚。
在该综述中,总结了关于真核系统中DNA聚合酶的选择和转换机制的最新研究。
2017样卷(真题)
四、简答题,60分(共6题,每题10分):
1、为什么说线粒体和叶绿体是半自主性细胞器?
半自主性是指自身含有遗传表达系统,但编码的遗传信息十分有限,其RNA 转录、蛋白质翻译、自身构建和功能发挥等必须依赖核基因组编码的遗传信息。
线粒体和叶绿体是半自主性细胞器的原因如下:
(1)线粒体和叶绿体的自主性体现在:①线粒体和叶绿体都含有DNA,线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(cpDNA)都呈双链环状,分子结构与细菌DNA相似,均以半保留方式进行复制,都具有编码功能。
②线粒体和叶绿体中含有RNA、核糖体、氨基酸活化酶等,说明这两种细胞器均具有自我繁殖所必须的基本组分,具有独立进行转录和翻译的功能。
(2)线粒体和叶绿体的非自主性体现在:已知线粒体基因组仅能编码约20种线粒体膜和基质蛋白质并在线粒体核糖体上合成;叶绿体仅有60多种特有的蛋白质是在叶绿体内合成的。
但参与组成线粒体和叶绿体的蛋白质各有上千种之多。
所以,线粒体和叶绿体的绝大多数蛋白质是由核基因编码,在细胞质核糖体上合成,然后转移到线粒体或叶绿体内,与线粒体或叶绿体DNA 编码的蛋白质协同作用。
因此,线粒体和叶绿体的生长和增殖是受核基因组及其自身的基因组两套遗传系统的控制,被称为半自主性细胞器
2、核仁的结构和功能有那些?
纤维中心(FC),是rRNA基因的储存位点;
致密纤维组分(DFC),转录主要发生在FC与DFC的交界处,并加工初始转录本;
颗粒组分(GC),负责装配核糖体亚单位,是核糖体亚单位成熟和储存的位点;负责将rRNA与核糖核蛋白装配成核糖体亚基。
功能:是核糖体的生物发生场所,是一个有序的向量过程,即从核仁纤维组分开始,再向颗粒组分延续,逐步完成rRNA的合成、加工和核糖体亚单位的装配;
3、简要说明核定位信号与前导肽的区别。
核定位信号可以反复利用,即永久性,前导肽一般只能使用一次就被切除;
核定位信号通过核孔复合体,而前导肽则通过跨膜运输
4、亲核蛋白进入细胞核的机制是什么?
亲核蛋白质是指在细胞内合成,然后输入到核内发挥作用的一类蛋白。
亲核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列,正是这些信号序列起到一个“定向”、“定位”的作用,保证整个蛋白质通过核孔复合体的输入,因此将此特殊的氨基酸序列命名为核定位信号(NLS)。
亲核蛋白的入核转运可分为五个步骤。
1.亲核蛋白的NLS识别结合importinα;与importin α/importinβ异二聚体结合,形成转运复合物
2.在importinβ的介导下,转运复合物与核孔复合体的胞质纤维结合;
3.转运复合物通过改变构象的核孔复合体从胞质面转移到核质面;
4.转运复合物在核质面Ran-GTP结合,导致复合物解离,亲核蛋白释放;
5.受体的亚基与结合的Ran返回胞质,在胞质内Ran-GTP水解形成Ran-GDP并与importin解离,Ran-GDP 返回核内再转化成Ran-GTP状态。
5、简述酶联受体和G蛋白耦联受体的主要不同点。
G蛋白偶联受体都是7次跨膜的蛋白质,在信号转导中全部与G蛋白偶联。
配体与受体结合后激活相邻的G蛋白,被激活的G蛋白又可激活或抑制一种产生特异第二信使的酶或离子通道。
酶联受体都属于单次跨膜受体,既是受体又是酶,一旦被配体激活即具有酶活性并将信号放大。
6、克隆基因组DNA与克隆CDNA的目的是什么?简要说明两者的区别。
五、问答题,45分(共3题,每题15分):
1、有丝分裂和减数分裂有什么异同?
减数分裂与有丝分裂的共同点都是通过纺锤体同染色体的相互作用进行细胞的分裂,分裂过程中都形成有丝分裂器,都有明显的细胞核特别是染色质的变化。
物质有核膜包被,还具有明显的核仁结构。
(2)原核细胞的遗传物质DNA分子一般仅一条,而且不与蛋白质结合,呈裸露状态;而真核细胞的DNA分子常有多条,且要与蛋白质结合成染色质或染色体等构造。
(3)原核细胞无内膜系统,缺乏膜性细胞器;而真核细胞有内膜系统。
(4)原核细胞中不存在细胞骨架系统;而真核细胞中具有由微管、微丝和中间纤维等构成的细胞骨架系统。
(5)原核细胞基因表达的两个基本过程,即转录和翻译同时进行;而真核细胞遗传信息的转录和翻译过程具有明显的阶段性和区域性。
(6)原核细胞的增殖无明显的周期性,以无丝分裂的方式进行;而真核细胞的增殖以有丝分裂方式进行,周期性很强。
(7)原核细胞的体积较小;而真核细胞的体积较大。
3、你对动物体细胞克隆有什么看法?
六、英文译成中文,15分:
Among three major replicative DNA polymerases of the B-family, Polα, Polδand Polε, Polδplays an essential role in chromosomal DNA replication and is also involved in various DNA repair processes in eukaryotes. Human Polδis commonly viewed as a heterotetrameric complex, consisting of the catalytic subunit p125 and second subunit p50, together with two additional accessory subunits, p68 and p12. A growing body of research has shown that the latter subunits play a critical role in the regulation of Polδfunctions. The formation of a new form of Polδ, heterotrimer Polδ3, is found by virtue of the depletion of p12 through the ubiquitin-proteasome pathway in response to DNA damages that are trigged by UV irradiation, alkylating agents, oxidative and replication stresses. Polδ3 exhibits significant differences in properties to its progenitor with a major impact on cellular processes in genomic surveillance, DNA replication and DNA repair. Our recent studies indicate that there exists an alternative pathway for Polδ3 formation by calpain-mediated proteolysis of p12 in a calcium-triggered apoptosis in living cells. Here, we review and discuss the recent advances from our group and others in the studies of human Pol with an emphasis on the generation of its multiple forms by reconstitution and subsequent alternations in enzymatic properties, the multiple pathways of the Polδ3 formation in living cells, and the phylogenetic analysis of the evolutionary history on POLD4 gene that is for the p12 subunit.
在B族的三个主要复制DNA聚合酶Polα,Polδ和Polε中,Polδ在染色体DNA复制中起着至关重要的作用,并且还参与了真核生物的各种DNA修复过程。
人Polδ通常被视为异源四聚体复合物,由催化亚基p125和第二亚基p50,以及两个其他辅助亚基p68和p12组成。
越来越多的研究表明,后者的亚基在调节Polδ功能中起着至关重要的作用。
由于通过泛素-蛋白酶体途径消耗P12,以响应紫外线辐射,烷基化剂,氧化和复制压力引发的DNA损伤而发现了Polδ新形式的结构,异三聚体Polδ3。
Polδ3在性质上和其祖细胞表现出显着差异,这对基因组监测,DNA复制和DNA修复中的细胞过程产生重大影响。
我们最近的研究表明,钙蛋白酶介导的活细胞凋亡中,由钙蛋白酶介导的p12的蛋白水解,存在另外的Polδ3形成途径。
在这里,我们回顾并讨论了我们小组和其他人在人类Pol研究中的最新进展,重点是通过重组以及随后的酶学特性改变,活细胞中Polδ3形成的多种途径,产生了多种形式,以及针对p12亚基的POLD4基因进化史的系统发育分析。
2016样卷
四、简答题,60分(共6题,每题10分):
1.简要说明简单扩散(自由扩散)与协助扩散的区别。
简单扩散是指小分子物质以热自由运动的方式顺着电化学梯度或浓度梯度,不需要细胞提供能量,也无需膜转运蛋白的协助,在简单扩散中,脂双层对溶质的通透性大小主要取决于分子大小和分子的极性。
疏水性小分子如O2、N2以及小的不带电荷的极性分子很容易通过简单扩散进出细胞。
协助扩散,无需细胞提供能量,但需要膜转运蛋白协助,多种极性小分子和无机离子,包括水分子、糖、氨基酸、核苷酸以及细胞代谢物等顺着电化学梯度或浓度梯度完成跨膜转运,扩散速度取决于浓度梯度和载体数量。
2.简要说明核仁的结构和功能。
2
3.简要说明分泌蛋白的运输过程。
分泌蛋白在细胞质基质游离核糖体上的合成及转运,可分为两种途径:共翻译转运途径和后翻译转运途径,在内质网进行修饰、加工及转运,包括蛋白质糖基化、二硫键的形成、蛋白质折叠和多亚基蛋白的装配、特异性的蛋白质水解切割及酰基化等。
其中蛋白质糖基化分为两种形式:N-连接的糖基化和O-连接的糖基化(主要发生在高尔基体中)。
蛋白质经修饰、加工后形成了正确的构象,便由内质网出芽形成的膜泡包裹着转运到高尔基体。
与其顺面膜囊融合,高尔基体对内质网转运来的蛋白质进行加工与包装,形成分泌泡。
分泌泡与质膜融合,将分泌蛋白释放出胞外。
4.列举几种你知道的指导蛋白质转运的蛋白质信号序列。
内质网驻留蛋白C端回收信号序列KDEL,内质网膜蛋白C端KKXX序列,分泌蛋白N端信号肽,进入线粒
体的蛋白质中的导肽,进入叶绿体的蛋白质中的转运肽,细胞核蛋白中的核定位序列或核输出序列,过氧化物酶体蛋白质的PTS序列(C端PTS1,N端PTS2)
5.为什么真核细胞的总RNA在电泳时呈现3条RNA条带?
真核细胞中rRNA含量最为丰富,而其他RNA含量要少得多,而且大小不均一,所以电泳时一般呈现3条RNA条带(5SrRNA相对分子质量较小,不易观察到),分别是28 S rRNA、18 S rRNA、和5.8 S rRNA,并且28 SrRNA的带宽大约是18S rRNA的带宽的2倍。
6.鉴定细胞凋亡的常用方法有哪些?
(1)形态学观测;台酚蓝染色死细胞,活细胞排斥;DAP染色观察细胞核的变化; Giemsa染色观察染色质固缩、趋边、凋亡小体的形成;电镜观察凋亡细胞超微结构的变化,如染色质固缩、凋亡小体及细胞发泡等。
(2)DNA电泳;DNA片段呈现出梯状条带。
(3)DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)。
(4)彗星电泳法:凋亡细胞中DNA降解成片段,使细胞核呈现出彗星式的图案,而正常细胞无DNA断裂,泳动中细胞核保持圆球形。
(5)流式细胞分析凋亡细胞DNA断裂和丢失,呈亚二倍体。
(6)检测细胞膜成分变化,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸翻转至细胞膜外侧,用针对磷脂酰丝氨酸的荧光标记探针进行检测。
此外,还可借助其他生理生化方法检测细胞凋亡,如检测caspases的活性、Cytc的释放、线粒体膜电位的变化等。
五、问答题,45分(共3题,每题15分):
1.什么叫单克隆抗体技术?其主要特点是什么?
单克隆抗体术是一种将已被特定抗原免疫的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得既能分泌抗体又能无限增殖的杂交细胞,经选择性培养后可制备大量单克隆抗体的技术。
特点是:特异性强,灵敏度高,可大量制备。
2.真核生物核基因组和细胞质基因组的主要特征是什么?并概述它们在细胞功能上是如何协调统一的。
3.什么是细胞周期?细胞周期分几个时期?
细胞周期指一次细胞分裂结束到下一次分裂完成之间的有序过程。
细胞周期分为间期(G1期、S期、G2期)和分裂期(M期),各个时相发生的主要事件如下所述:
①G1期,与DNA合成启动相关,开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂质等,同时染色质去凝集。
②S期,合成DNA和染色体蛋白(组蛋白和非组蛋白),新合成的DNA立即与组蛋白结合,组成核小体串珠结构。
③G2期,合成其他结构物质和相关的亚细胞结构,如微管蛋白、染色体凝集因子等。
④M期,即细胞分裂期,包括胞核分裂和胞质分裂,细胞将其遗传物质载体平均分配到两个子代细胞中。
六、英文译成中文,15分:
The genome of the nucleopolyhedrovirus (NPV,核型多角体病毒) pathogenic for Bombyx mori(Bm,家蚕) was sequenced and analyzed. The BmNPV genome was 128413 nucleotides long with a GC content of 40% and contained 136 open reading frames (ORFs) encoding predicted proteins of over 60 amino acids. Although phenotypically different, the genome organizations of BmNPV and Autographa californica multinucleocapsid NPV (AcMNPV,蓿银纹夜蛾多角体病毒) were closely related. The BmNPV genome was over 90% identical to about three-quarters of the genome of AcMNPV. The relatedness of predicted amino acid sequences of corresponding ORFs between BmNPV and AcMNPV was about 90%. However, the BmNPV genome lacked homologues of the following AcMNPV ORFs: Ac3,Ac7, Ac48, Ac49, Ac70,Ac86 and Ac134. In addition. BmNPV contained five ORFs related to Ac2. A high frequency of multiple 3 bp insertions was also found within BmNPV and AcMNPV coding sequences.
对家蚕致病性核多角体病毒(NPV,核型多角体病毒)的基因组进行了测序和分析。
BmNPV基因组长128413个核苷酸,GC含量为40%,包含136个开放阅读框(ORF),编码超过60个氨基酸的预测蛋白。
尽管在表型上有所不同,但是BmNPV和Autographa californica多核衣壳NPV。