大鼠卵巢培养
当归芍药散及其不同提取部位对离体培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响
分 泌 ， 括 雌 二 醇 （ 和 孕 酮 （ ） 是 维 持 女 性 正 常 包 Ｅ） Ｐ ，
１ ｅ ， 地 内蒙 海 格 尔 ； 苓 为 Ｐ ｒ Ｏ Ｏ ， 于 浙 ｏ ｓ产 ｄ 茯 ｏｉ ＣＣＳ 产 ａ 江松 阳 ； 泽泻 为 Ｒ ｉ ｍ ｌ ｍａ 产 于 四川彭 ｋ 。 以 ｈｚ ａＡ ｉ ， ｏ ｓ ， Ｊ １ 上药物 经南京 中 医药 大学段 金廒 教授鉴 定 ． 符合《 中 华 人民共 和国药典 》 ２ ０ （０ ５年版 ） 项下标准 ， 品保 留 样 于南京 中医药 大学 标本 馆 （ Ｏ Ｎ Ｕ Ｃ ２０ ０ ｌ Ｎ ． Ｊ Ｔ Ｍ一 ０ ６ ８ １ ２ ０ ０ １ ） 当归 芍药散水 煎液 、 ０ ６８６ 。 水提 ８ ％醇沉沉 ０ 淀、 醇溶 液 部 分 、 溶 部 分 、 不 溶 部分 、 洗 脱部 水 水 水
１ 材 料
分 、０ １ ％～８ ％乙 醇洗 脱 部 分 、５ ０ ９ ％乙 醇洗 脱 部分 、 ９ ％乙醇提取 液 、 油醚 提取 部分 、 ０ 石 二氯 甲烷 萃取部 分 、乙酸 乙酯 萃取部 分 由江苏 省方剂研 究重点 实验 室 提供 。 １２ 动 物 非 孕 ３周 龄 雌 性 Ｓ ｒｇ ｅ Ｄ ｗｅ － ｐａｕ — ａ ｌ ｙ大 鼠 （０ ０ｇ ，购 于江苏 省实 验动 物 中心 ，合格 证号 ６ ￣７ ）
￣
生理功 能 ， 建立并 维持 妊振 以及性 腺发育所 必需 的 。 本研究 以体外培 养 的大 鼠卵巢颗 粒细胞作 为研 究对 象 ，直接 在细胞 水平 观察 当归芍 药散及 其不 同提取 部位对 卵巢颗粒 细胞增 殖 功能 的影 响 ，探 讨 当归 芍 药散通过 该途径 治疗痛经 的效应 及物质基 础 。
大鼠卵巢颗粒细胞体外培养及哈蟆油对其增殖功能的影响
大鼠卵巢颗粒细胞体外培养及哈蟆油对其增殖功能的影响零小妹;谭焱;季波;杨晶晶;吴新荣;梁磊【摘要】目的采用CCK-8法研究哈蟆油对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响,对比分析哈蟆油含药血清对颗粒细胞的最佳作用浓度和时间,为进一步体外试验奠定基础.方法选用25日龄未成年雌性SD大鼠,腹腔注射孕马血清,48 h后脱颈处死,收集卵巢颗粒细胞,在DMEM-F12培养液中培养,并通过HE染色和免疫荧光技术对颗粒细胞进行鉴定.25只SD大鼠分为正常对照组、阳性药对照组、哈蟆油低、中、高剂量组,灌胃给药7d后采血并分离血清.将体积分数为10％,20％,40％,80％各组不同浓度的含药血清加入体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞体系中,采用CCK-8法检测各组24、48 h和72 h细胞增殖情况.结果哈蟆油显著提高了颗粒细胞的增殖能力,有一定的量效和时效关系,随着哈蟆油浓度的增加,其促增殖能力逐渐增强,在作用48 h后,20％浓度体积分数的哈蟆油含药血清组最为显著(P＜0.05).结论体外建立大鼠卵巢颗粒细胞的培养方法,有助于深入研究哈蟆油等中药对卵巢的作用和机制.%Objective To optimize the effective methods ofisolation,purification,culture in vitro and identification of SD rat ovarian granulosa cells,to research the effects of Oviductus Ranae on the proliferation of rat ovarian granulosa cells by CCK-8,and to contrastively analyze the best optimal action concentration and time of serum contsining Oviductus Ranae on granulosa cells to lay the foundation for further in vitro experiment.Methods Nonage SD rats aged 25 d were selected and intraperitoneally injected by pregnant mare serum,then killed after 48 h.Ovarian granulosa cells were collected and cultured in the DMEM-F12 culture solution.The hematoxylin & eosin(HE) staining andimmunofluorescence technique were used to identify the ovarian granulosa cells.Twen ty-five SD rats were randomly divided into the normal control group,positive medicine control group,and low,middle and high do ses Oviductus Ranae groups.Blood was collected and serum was separated after 7 d mediaction gavage.The volume percent of 10 ％,20％,40％,80％serum in each group was added into the in vitro medium system of ovarian granulosa cells culture.Then the cell proliferation situation at24,48,72 h in each group was measured by CCK-8.Results Oviductus Ranae significantly increased the proliferation ability of granulosa cells in a certain dose-dependent relation.With the increase of Oviductus Ranae concentration con centration,its.proliferation ability was gradually increased,after 48 h action,which in the Oviducthus Ranae-Comtaining serum group with the volume fraction of 20％ was most significant (P＜0.05).Conclusion Establishing in vitro cultural method of rat o varian granulosa cells is conductive to further research the action and mechanism of Oviductus Ranae on ovary.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2017(046)013【总页数】5页(P1792-1796)【关键词】哈蟆油;卵巢颗粒细胞;增殖;含药血清;CCK-8【作者】零小妹;谭焱;季波;杨晶晶;吴新荣;梁磊【作者单位】广东药科大学中药学院,广州510006;广州军区广州总医院药剂科,广州510010;广州军区广州总医院干部病房一科,广州510010;广州军区广州总医院药剂科,广州510010;广东药科大学中药学院,广州510006;广州军区广州总医院药剂科,广州510010;广州军区广州总医院药剂科,广州510010;广东药科大学中药学院,广州510006;广州军区广州总医院药剂科,广州510010【正文语种】中文【中图分类】R711女性进入围绝经期卵巢功能衰退可能导致多种疾病发生[1]。
大鼠卵泡提取原理
大鼠卵泡提取的原理主要是通过手术取出大鼠的卵泡，利用特殊的试剂和条件模拟体内环境进行培养，以研究卵泡生长发育和排卵等过程。
这个过程涉及到生理学、解剖学、组织学、细胞生物学等多学科知识，以及精密的手术技术和实验仪器。
具体来说，大鼠卵泡提取的原理主要包括以下几个方面：
1. 手术取出大鼠卵巢卵泡：首先需要对大鼠进行全身麻醉，然后打开腹腔，暴露卵巢，用特殊工具分离卵泡，并将其取出。
这个过程需要精确控制手术刀的深度和力度，以避免对大鼠造成伤害。
2. 模拟体内环境培养：卵泡在培养过程中需要模拟体内的环境，包括温度、湿度、pH值、渗透压、营养物质等。
同时，还需要添加一些特殊的试剂，如激素、生长因子等，以促进卵泡的生长发育。
3. 研究卵泡生长发育和排卵：通过观察卵泡在培养过程中的形态学和生理学变化，可以研究卵泡的生长发育过程和排卵机制。
此外，还可以利用基因芯片等技术分析培养液中哪些细胞因子和生长因子表达发生变化，以进一步揭示卵泡发育和排卵的分子机制。
总之，大鼠卵泡提取是一个复杂的过程，需要多学科知识和技术的综合运用。
这个过程为研究卵泡生长发育和排卵提供了重要的实验手段，有助于深入了解人类生殖系统的功能和疾病的发生机制，为不孕不育等生殖系统疾病的预防和治疗提供新的思路和方法。
卵巢实验报告
一、实验目的1. 了解卵巢的结构和功能。
2. 掌握卵巢的生理学特点。
3. 学习卵巢的实验操作技术。
二、实验材料1. 实验动物：雌性大白鼠。
2. 实验仪器：解剖显微镜、手术器械、注射器、生理盐水、显微镜等。
3. 实验试剂：戊巴比妥钠、肝素钠、生理盐水、生理盐水溶液等。
三、实验方法1. 实验动物处理：选用健康雌性大白鼠，随机分为实验组和对照组。
实验组动物进行卵巢摘除手术，对照组动物进行假手术。
2. 卵巢摘除手术：（1）麻醉：将实验组动物用戊巴比妥钠进行麻醉，剂量为50mg/kg体重。
（2）手术操作：打开腹腔，暴露卵巢，用镊子夹住卵巢，将其从输卵管和子宫的连接处切断，取出卵巢。
（3）缝合：将卵巢摘除后，用生理盐水清洗创面，用生理盐水溶液缝合腹腔。
3. 组织切片制备：（1）取实验组和对照组动物的卵巢组织，置于10%甲醛溶液中固定。
（2）将固定后的卵巢组织进行石蜡包埋，切片。
（3）切片进行苏木精-伊红染色。
4. 显微镜观察：（1）显微镜下观察卵巢组织的结构，包括卵泡、黄体、卵泡膜等。
（2）观察实验组和对照组卵巢组织的差异。
四、实验结果1. 卵巢结构：（1）卵巢表面为白膜，内部含有卵泡、黄体、卵泡膜等结构。
（2）卵泡：包括初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡等。
（3）黄体：由卵泡破裂后形成的结构，分泌孕酮。
2. 卵巢功能：（1）分泌雌激素和孕酮，调节月经周期和生殖功能。
（2）产生卵子，参与受精和胚胎发育。
3. 实验组与对照组卵巢组织的差异：（1）实验组卵巢组织结构较对照组更为疏松，卵泡数量减少。
（2）实验组卵巢组织中黄体数量减少，孕酮分泌减少。
五、实验讨论1. 卵巢是女性生殖系统的重要组成部分，具有产生卵子和分泌激素的功能。
2. 卵巢摘除手术可以模拟女性绝经期的生理状态，研究卵巢功能的变化。
3. 实验结果表明，卵巢摘除后，卵巢组织结构发生变化，卵泡和黄体数量减少，孕酮分泌减少，与绝经期女性的生理状态相似。
六、实验结论1. 本实验成功制备了卵巢摘除动物模型，为研究卵巢功能提供了实验基础。
大鼠卵巢颗粒细胞体外培养及哈蟆油对其增殖功能的影响
［ 摘要 ］ 目的 采用Ｃ Ｃ Ｋ － ８法研 究哈 蟆油对体外培养 大鼠卵巢颗粒细胞增 殖的影响， 对 比分析 哈蟆油含 药血 清对 颗 粒细胞 选用 ２ ５日龄 未成年雌性 ｓ Ｄ大鼠 ， 腹腔 注射 孕马血清 ， ４ ８ ｈ后 脱颈
的最佳作 用浓度 和时间 ， 为进一 步体 外试验 奠定基 础。方法
［ 中 图分 类 号 ］ Ｒ ７ １ １ ［ 文 献标 识码 ］ Ａ ［ 文章编号］ １ ６ ７ １ — ８ ３ ４ ８ （ ２ ０ １ ７ ） １ ３ — １ ７ ９ ２ — ０ ５
Ｃｕ ｌ ｔ ｕｒ ｅ ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ｏ ｆ ｒ ａ ｔ ｏ ｖ ａ ｒ ｉ ａ ｎ ｇ ｒ ａ ｎｕ ｌ ｏ ｓ ａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａｎ ｄ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｒａ ｎａ ｅ Ｏｖ ｉ ｄｕ ｃ ｔ ｕ ｓ ｏ ｎ ｉ ｔ ｓ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
零 小妹 “ 。 ， 谭 焱。 ， 季 波。 ， 杨 晶晶 。 ， 吴新 荣。 ， 梁 磊 （ １ ． 广 东药科 大 学 中药 学院 ， 广州 ５ １ ０ ０ ０ ６ ； ２ ． 广 州军 区广 州总 医院药 剂科 ， 广州 ５ １ ０ ０ １ ０ ；
３ ． 广 州 军 区广 州 总 医院干部病 房 一科 ， 广州 ５ １ ０ ０ １ ０ ）
卵巢结构实验报告
一、实验目的1. 了解卵巢的位置、形态和结构；2. 观察卵巢的内部结构，包括卵巢小叶、卵泡、黄体等；3. 学习卵巢的生理功能及其在女性生殖系统中的作用。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：雌性小白鼠卵巢组织；2. 实验仪器：显微镜、解剖显微镜、手术刀、镊子、剪刀、培养皿、生理盐水、70%酒精、蒸馏水等。
三、实验步骤1. 实验动物处死：取雌性小白鼠一只，用颈椎脱位法处死，打开腹腔，取出卵巢；2. 漂洗卵巢：将卵巢放入70%酒精中浸泡10分钟，然后用生理盐水清洗；3. 观察卵巢外观：用解剖显微镜观察卵巢的形态、大小和颜色；4. 横切卵巢：用手术刀将卵巢横切成薄片；5. 制片：将卵巢切片放入培养皿中，用生理盐水漂洗，然后用70%酒精固定；6. 观察卵巢结构：用显微镜观察卵巢切片，观察卵巢小叶、卵泡、黄体等结构；7. 记录实验结果：记录卵巢的结构特点和数量。
四、实验结果1. 卵巢外观：卵巢呈灰白色，表面光滑，呈椭圆形；2. 卵巢结构：（1）卵巢小叶：卵巢小叶是卵巢的基本结构单位，由卵泡、黄体和间质组成；（2）卵泡：卵泡是卵巢中的主要结构，分为初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡；（3）黄体：黄体是卵泡破裂后形成的结构，具有分泌激素的作用；（4）间质：间质由结缔组织、血管和神经组成，为卵巢提供支持和营养。
五、实验讨论1. 卵巢是女性生殖系统中重要的器官，其主要功能是产生卵子和分泌激素；2. 卵巢小叶是卵巢的基本结构单位，由卵泡、黄体和间质组成；3. 卵泡是卵巢中的主要结构，分为初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡，其中成熟卵泡是卵子释放的地方；4. 黄体是卵泡破裂后形成的结构，具有分泌激素的作用，如孕酮和雌激素，维持妊娠；5. 间质为卵巢提供支持和营养，同时参与激素的分泌。
六、实验结论通过本次实验，我们了解了卵巢的位置、形态和结构，掌握了卵巢小叶、卵泡、黄体等结构的观察方法，明确了卵巢在女性生殖系统中的作用。
这对于进一步研究女性生殖生理和疾病诊断具有重要意义。
《卵巢Ⅱ号对多囊卵巢大鼠垂体、肾上腺及卵巢作用的实验研究》
《卵巢Ⅱ号对多囊卵巢大鼠垂体、肾上腺及卵巢作用的实验研究》摘要本研究以多囊卵巢大鼠为研究对象，采用卵巢Ⅱ号作为治疗手段，观察其对垂体、肾上腺及卵巢的作用，通过一系列的实验分析，以评估其效果与作用机制。
研究结果提示卵巢Ⅱ号能够改善多囊卵巢大鼠的生理功能，且作用明显。
本文将对实验过程及结果进行详细阐述。
一、引言多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的内分泌紊乱性疾病，主要表现为月经失调、不孕、高雄激素血症等特征。
目前，对于PCOS的治疗多以激素替代疗法为主，但副作用及长期疗效不尽如人意。
因此，寻求安全有效的治疗方法具有重要意义。
近年来，中医理论中对于多囊卵巢综合征的调治颇具特色，本实验采用中药制剂卵巢Ⅱ号，对多囊卵巢大鼠的垂体、肾上腺及卵巢的作用进行深入研究。
二、材料与方法1. 实验材料本实验所用药品为卵巢Ⅱ号，实验动物为多囊卵巢大鼠模型。
2. 实验方法将多囊卵巢大鼠随机分为实验组和对照组，实验组给予卵巢Ⅱ号治疗，对照组给予等量安慰剂。
通过定期给药，观察并记录大鼠的生理变化及各项指标。
采用组织学、免疫组化、生化分析等方法，对垂体、肾上腺及卵巢进行检测分析。
三、实验结果1. 垂体功能变化实验结果显示，经过卵巢Ⅱ号治疗的多囊卵巢大鼠，其垂体功能得到明显改善。
促性腺激素（FSH）和促黄体生成素（LH）水平趋于正常，表明卵巢Ⅱ号能够调节垂体激素的分泌，有助于恢复正常的内分泌环境。
2. 肾上腺功能变化在肾上腺方面，实验结果显示卵巢Ⅱ号可有效降低多囊卵巢大鼠肾上腺皮质的体积和重量，减少肾上腺皮质激素的分泌，从而改善因PCOS引起的肾上腺功能紊乱。
3. 卵巢作用及形态学改变对于卵巢而言，通过显微镜下观察和生化分析发现，卵巢Ⅱ号能促进卵泡发育和排卵功能恢复。
形态学上，大鼠的卵泡数量增多，体积增大，排卵过程趋于正常化。
同时，对多囊性囊肿也有明显改善作用。
四、讨论本实验结果显示，卵巢Ⅱ号在治疗多囊卵巢大鼠方面具有明显优势。
Wistar大鼠卵巢颗粒细胞的分离、培养与鉴定
Wistar大鼠卵巢颗粒细胞的分离、培养与鉴定肖娟;邬静;屠迪;袁慧;文利新;李荣芳【期刊名称】《中国老年保健医学》【年(卷),期】2012(010)001【摘要】目的探讨Wistar大鼠卵巢颗粒细胞的分离、培养与鉴定的方法.方法选用21～29天龄wistar大鼠,皮下注射PMSG,取出卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗粒细胞,于CO2培养箱中培养.用HE染色和免疫细胞化学法观察FSHR蛋白表达的方法来对卵巢颗粒细胞进行鉴定,并用MTT法测定细胞生长曲线,同时检测E2、P的分泌情况.结果分离培养出的Wistar大鼠卵巢颗粒细胞存活率＞90％,细胞纯度达到90％以上；体外培养的颗粒细胞对数生长期为48～ 96小时；HE染色在镜下可见贴壁细胞形态完整,细胞浆和细胞核染色均匀,核染深蓝色,位于细胞中央,胞浆淡红色并含有许多颗粒；激素的分泌趋势与细胞的生长情况基本一致,于在96～120小时左右达到峰值,随后逐渐下降.结论采用机械分离法分离培养的卵巢颗粒细胞纯度高、活性好,用FSHR表达染色鉴定颗粒细胞是一种简便快速的方法.【总页数】4页(P8-11)【作者】肖娟;邬静;屠迪;袁慧;文利新;李荣芳【作者单位】湖南农业大学动物医学院 410128;湖南农业大学动物医学院 410128;湖南农业大学动物保健工程技术研究中心 410128;湖南农业大学动物医学院410128;湖南农业大学动物保健工程技术研究中心 410128;湖南农业大学动物医学院 410128;湖南农业大学动物保健工程技术研究中心 410128;湖南农业大学动物医学院 410128;长沙绿叶生物科技(集团)有限公司 410128;湖南农业大学动物医学院 410128;湖南农业大学动物保健工程技术研究中心 410128【正文语种】中文【相关文献】1.Wistar大鼠脑和脊髓微血管周细胞的分离、培养、鉴定及其功能差异的比较 [J], 武清斌;荆瀛黎;苑晓晨;李宏伟;修瑞娟2.Wistar大鼠胚胎脑源性神经干细胞分离、培养及其鉴定 [J], 葛岩;王医术;张丽红;高婷;廖祥宇;李亚娟;王心蕊;李玉林3.Wistar大鼠骨髓源性神经干细胞分离与培养及其鉴定 [J], 刘永良;孙培;李泽福;隋德华;刘鹏飞;邵伟4.新生Wistar大鼠心肌细胞的分离培养与鉴定 [J], 陈克研;蔡书成;陈振文;王洋;张贺;王承利5.新生Wistar大鼠心肌细胞的分离培养与鉴定 [J], 陈克研;王洋;王承利;张贺;梁娟;孙倩;苏朋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验动物(大鼠、小鼠、兔)原代卵巢颗粒细胞
实验动物（大鼠、小鼠、兔）原代卵巢颗粒细胞产品编号：RAT/MIC/RAB-iCELL-f004产品规格：>5×105细胞数产品价格：4050/4050/4500包装规格：1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶细胞详述：卵巢是雌性动物的生殖器官。
卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。
它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。
卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。
皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。
卵巢是分泌雌激素的主要器官。
卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。
卵巢中颗粒细胞是合成雌激素的场所。
其产生过程是使雄烯二酮转变成雌激素：内膜细胞在LH的作用下，使胆固醇转变为雄烯二酮；颗粒细胞在FSH的作用，发育过程中产生芳香化酶，它使雄烯二酮转变成雌激素。
形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。
细胞特性:1)组织来源于实验动物的正常卵巢组织。
2)细胞鉴定：卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：不规则细胞，贴壁培养。
产品的运输和保存：视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
推荐培养基：我们推荐使用iCell原代肾系膜细胞培养体系（产品编号：PriMed-iCELL-021）作为体外培养原代卵巢颗粒细胞的培养基。
养精种玉汤调控卵巢储备功能下降模型大鼠卵巢原始卵泡启动的作用机制研究
养精种玉汤调控卵巢储备功能下降模型大鼠卵巢原始卵泡启动的作用机制研究李宛静;邓蒂斯;汪景仪;许金榜【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2024(31)4【摘要】目的基于长链非编码RNA研究养精种玉汤调控卵巢储备功能下降(DOR)模型大鼠原始卵泡启动的作用机制。
方法3日龄雌性大鼠分离卵巢后进行体外培养,设置空白组、模型组、脱氢表雄酮组和中药高、中、低剂量组,采用雷公藤甲素诱导DOR模型,分别予相应含药血清培养。
HE染色观察生殖细胞并对卵泡计数,Western blot检测卵巢组织抗米勒管激素(AMH)、骨形态发生蛋白15(BMP15)、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、MST、转化生长因子(TGF)-β1、p-Smad1蛋白表达,RT-PCR检测卵巢组织AMH、BMP15、PTEN、MST、LTCONS-00011173、TGF-β1、Smad1 mRNA表达。
结果与空白组比较,模型组原始卵泡及生长卵泡数量均减少(P<0.05),卵巢组织AMH、BMP15、TGF-β1、p-Smad1蛋白表达降低(P<0.05),PTEN、MST蛋白表达升高(P<0.05),AMH、BMP15、TGF-β1、Smad1 mRNA表达降低(P<0.05),PTEN、MST、LTCONS-00011173 mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,DHEA组和中药高、中剂量组原始卵泡和生长卵泡数量增加(P<0.05),卵巢组织AMH、BMP15、TGF-β1、p-Smad1蛋白表达升高(P<0.05),PTEN、MST蛋白表达降低(P<0.05),AMH、BMP15、TGF-β1、Smad1 mRNA表达升高(P<0.05),PTEN、MST、LTCONS-00011173 mRNA表达降低(P<0.05)。
结论养精种玉汤可能通过LTCONS-00011173介导TGF-β1/Smad1信号通路调控DOR模型大鼠原始卵泡启动。
不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较
不同来源诱导剂建立的卵巢早衰动物模型的比较目的比较不同来源的诱导剂建立的卵巢早衰动物模型。
方法选取97只雌性SD大鼠分别给予120 mg/kg的环磷酰胺、白消安、35%半乳糖食物丸，制备卵巢早衰动物模型。
通过观察体重变化，激素血清浓度水平，卵巢病理切片等分析数据。
结果单次给药环磷酰胺后，大鼠体重增加非常缓慢，卵巢受损；随着血清LH浓度上升趋势，血清E2浓度下降趋势和受损的卵巢，35%半乳糖食物颗粒饲喂的大鼠体重增加缓慢，其中白蛋白和总蛋白以及受损的卵巢的血清浓度显著升高（P＜0.05）。
结论不同诱导物可产生不同特征POF模型，为进一步研究提供有效的实验依据。
标签：大鼠；卵巢早衰；动物模型卵巢早衰（POF）是指40岁以前卵巢早衰或卵巢功能衰退，主要发生在平均绝经年龄前两年的标准偏差人口，其原因可能与内源性基因，异常自身免疫，感染，医疗疗法等影响有关。
POF具有明显异质性及显着遗传性。
染色体异常被一直被认为是POF的常见原因。
基于POF基因组学致突变大鼠模型在探索，且不同模型之间存在较大差异，因此在探索POF治疗方法时很难选择合适的动物模型。
本文通过比较不同方法致大鼠卵巢早衰动物模型之间的差异，为POF治疗进一步研究提供实验依据。
1 材料和方法1.1 一般材料环磷酰胺由上海金穗生物有限公司提供。
35%半乳糖食品颗粒由南通营养饲料有限公司提供。
1.2 研究方法雌性大鼠在室温（22±2）℃和相对湿度（50±10）%的标准实验室条件下培养12 h光暗周期，水和食物随意提供。
每只大鼠的平均食物消耗为28g。
所有手术均在戊巴比妥钠麻醉下进行。
将体重约为（180～200）g的56只SD大鼠分成A、B、C组，A组大鼠用120 mg/kg的溶于0.9%盐水溶液中的单次腹膜内注射环磷酰胺处理，B组大鼠用单一的用0.9%盐水溶液以12 mg/kg的剂量自发注射白消安注射液，C组大鼠为对照组，用0.9%盐水溶液腹膜内处理。
大鼠胚胎卵巢冻存前后异体异位移植的实验研究汇总
・论著・大鼠胚胎卵巢冻存前后异体异位移植的实验研究任冉 , 孟英奇 , 李玉岩(大连市妇产科医院 , 大连 116033【摘要】目的 :研究胚胎卵巢冷 2解冻移植后的生存、生长及功能恢复情况。
方法 :将冻存大鼠胚胎卵巢植入去势成年雌鼠皮下 , 观察阴道脱落细胞变化。
以新鲜胚胎卵巢移植作为对照。
术后 3个月 , 取移植卵巢及自身子宫进行组织学研究 , 并测定血清雌二醇(E 2 水平。
结果 :移植卵巢内可见不同阶段的发育卵泡 , 并可见间质腺和黄体。
阴道上皮细胞及子宫内膜有雌激素效应。
血清学研究显示 , 移植卵巢具有与正常卵巢接近的内分泌功能。
结论 :冻融胚胎卵巢移植后能在异体异位存活、生长发育并具有内分泌功能。
【关键词】卵巢功能试验 ; 冷冻 ; 移植 , 异体 ; 大鼠中图分类号 :Q954.592文献标识码 :A文章编号 :1004-7379(2002 06-0415-03The study of heterotopic allotransplantation of cryopreserved fetal ovary in rats. Ren Ran ,Meng Yingqi , Li Yuyan. Dalian City Obstetrical and Gynecological Hospital , Dalian 116033【 Abstract 】 Objective :T o study the survival ,growth and function restoration of allotransplantedcry opreserved fetal ovary. Methods :Cry opreserved rat fetal ovaries were grafted to castrated adult fe 2male rats. The vaginal epithelium was observed after transplantation 3m onths. The grafts and uteruswere rem oved and underwent histological examination and serum estradiol (E 2 level were deter 2mined. R esults :There were follicles in different developing stages ,corpus luteum and interstitialglands in the graft. The effects of estrogen on the vaginal epithelium and endometrium were ob 2served. Serum E 2showed that transplanted fetal ovary restored secreting function. Conclusions :Cry 2opreserved fetal ovary can be survival after heterotransplantation develop and restore the function ofsecreting steroid horm ore.【 K ey w ords 】 Ovarian functiontests ;Freezing ;Transplantation ,alotransplantation ;Rats性激素参与人体多种生理及生命活动 , 其水平下降可引起机体生理功能衰退。
当归芍药散及其不同提取部位对离体培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响
当归芍药散及其不同提取部位对离体培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响叶靖宇;黄玉芳;华永庆【期刊名称】《福建中医药》【年(卷),期】2009(040)001【摘要】目的探讨当归芍药散对痛经治疗的机理.方法运用体外培养技术进行小鼠卵巢颗粒细胞体外培养,将当归芍药散的不同提取方法所得提取物以2×10-4、2×10-5、2×10-6g/ml 3个终浓度加入单独培养的大鼠卵巢颗粒细胞,通过MTT法观察药物对卵巢颗粒细胞生长的影响.结果①当归芍药散挥发油部位、水提部位以及醇提部位均具有显著促进大鼠卵巢颗粒细胞增殖的作用,并且具有显著的量效关系.②当归芍药散水提物大孔树脂醇洗脱部位在200 μg提取物/ml剂量下30%、40%及80%醇洗脱部位显示较强的促进作用.③90%醇提取部住、石油醚部位、二氯甲烷部位以及乙酸乙酯部位作用较为突出.结论当归芍药散对离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞增殖具有明显的促进作用,其治疗原发性痛经可能与其促进卵巢颗粒细胞生长效应相关.【总页数】3页(P46-48)【作者】叶靖宇;黄玉芳;华永庆【作者单位】南京中医药大学国家规范化中药药理实验室,江苏,南京,210029;南京中医药大学病理教研窒,江苏,南京,210046;南京中医药大学病理教研窒,江苏,南京,210046;南京中医药大学国家规范化中药药理实验室,江苏,南京,210029;南京中医药大学江苏省方剂研究重点实验室,江苏,南京,210046【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.smad4和cyclinA蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及当归黄芪超滤膜提取物对其的增殖作用 [J], 赵粉琴;袁爱倩;李娜娜;谢知慧;胡雁云;刘凯2.不同浓度地黄低聚糖对离体培养成年大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响 [J], 尹明;王士雯;高磊;李泱;王新华;刘鹏3.香附四物汤对大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响及活性部位成分分析 [J], 禹良艳;华永庆;刘培;宿树兰;段金廒4.氯丙嗪对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响 [J], 邬静;袁慧;文利新;彭双清5.养精种玉汤加减提取液对离体培养的兔卵巢颗粒细胞雌二醇生成的影响 [J], 张玮;王京花;程龙庆;倪江;黄元信;张琦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠胚胎与卵巢的移植技术
大鼠胚胎与卵巢的移植技术胚胎移植俗称人工授胎或借腹怀胎，是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。
本质上即生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。
利用胚胎移植技术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
胚胎移植具有以下几个生理学基础：①同种动物的供、受体的生殖器官的生理变化是相同的，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境；②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能；③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能；④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受任何影响。
卵巢移植即将某一雌性动物的卵巢整体切除并移植给另一去除卵巢的雌性动物卵巢部位。
卵巢移植对于治疗卵巢癌等恶性疾病具有重要意义。
一、胚胎移植假孕受体的制作胚胎移植需要同期发情处理的假孕受体，一般用结扎公鼠与雌鼠交配获得。
公鼠结扎一般采用输精管结扎法，即将输精管用机械法弄断。
（一）雄性大鼠的输精管结扎雄性大鼠麻醉后，腹部向上，腹部75%乙醇消毒，在睾丸附近腹中线处开一小口；用镊子夹住脂肪垫将睾丸拉出；用精细镊子在睾丸附近找出输精管，用另一把镊子撕掉周围的结缔组织；将一把镊子在输精管内侧自然张开裸露输精管，另一把镊子将输精管镊住固定，用烧红的镊子分别在两侧烧灼将输精管切断；烧灼以后输精管的两断口均形成密封口，切下的一段丢弃。
将睾丸、附睾和输精管等放回腹腔内；用镊子夹住脂肪垫拉出另一侧睾丸，进行同样的结扎手术；将睾丸、附睾和输精管等放回腹腔内；缝合肌肉、皮肤；将大鼠放在保温台上保温，等待苏醒。
（二）假孕受体的制作挑选8周龄的健康性成熟雌性大鼠，挑发情；将发情雌性大鼠与同品系输精管结扎雄性大鼠进行交配；次日见栓记为0.5dpc。
假孕见栓0.5dpc可用于大鼠发育各阶段胚胎的胚胎移植，假孕见栓3.5dpc仅用于大鼠囊胚移植。
仓鼠卵巢细胞培养工艺的探究
目前最 成 功 的生 物 制 品表 达 宿 主 细 胞 Ｊ。工 业 化 规 模 生产 生 物制 品需要 对 ＣＨＯ细胞进 行大 规模 培养 。
Ⅱ 皇
１．１ 材 料 中 国仓 鼠卵 巢 细胞 （上 海 信 则 生物 ）；ＣＤＣＨＯ培
养 基 （美 国英 杰 生命 技术 有 限公 司 ）；生化 分 析 仪 （浙 江黄岩 宁溪 医疗 器 械 有 限公 司 ）；细 胞 计 数 仪 （日本 岛津有 限公 司 ）；Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０高效 液相 色谱 仪 （美 国 安 捷伦 科技 有 限公 司 ）；
蔡 莉
（江 阴职 业技 术学 院 化纺 系 ，江 苏 江 阴 ２１４４０５）
摘 要 仓 鼠卵巢 细胞分 泌的蛋 白能专一高效地与 Ｂ淋 巴细胞结合 ，清 除坏死 的 Ｂ细胞 ，从 而让骨髓 重新产 生正常 的 Ｂ细胞 。可用于治疗多种免疫 系统疾病 ，如霍奇 金淋 巴瘤 ，类 风湿 性关节 炎等 。仓 鼠卵巢 细胞 的细胞生长 密度和 活率的高低直接影 响其分泌蛋 白含量 的高低 。为了提高 仓 鼠卵 巢细胞 活率 和细胞密 度 ，本文分别 考察 细胞溶 氧、细 胞生长末期降温 、培养 ｐＨ等 因素对仓 鼠卵巢细胞产量的影响 。当细胞溶氧为 ６０％ ，细胞 生长末期 降温为 ３３℃ ，细胞 培养 ｐＨ为 ６．９５时 ，细胞分泌蛋 白量最 大为 １．５８ ｇ／Ｌ，有 利于满足实际大规模生产 的需要 。 关键词 仓 鼠卵巢 细胞 细胞 活率 细胞分泌蛋 白
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈ ａｍ ｓｔｅｒ Ｏｖａｒｙ
Ｃａｉ Ｌｉ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｅｘｔｉｌｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｙｉｎ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｊｉａｎｇｙｉｎ ２１４４０５）
新生大鼠卵巢体外培养体系的研究
新生大鼠卵巢体外培养体系的研究黄健;郑月慧;徐良全;李芳【期刊名称】《生殖与避孕》【年(卷),期】2007(27)11【摘要】目的:探讨最适宜于大鼠原始卵泡体外生长发育的培养体系.方法:取出生2d的SD大鼠卵巢,分别在Waymouth和DMEM中培养8 d,石蜡制片,HE染色,统计分析各级正常卵泡数;于培养d4、d 8观察各级卵泡形态;并用免疫组化方法检测在这两种培养体系的卵巢中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达定位情况.结果:①在Waymouth中,由原始卵泡启动生长成为初级卵泡和次级卵泡的百分率分别是25.51%和6.93%,高于DMEM中的17.06%和3.56%(P＜0.01).②在Waymouth 中培养的卵泡形态都较正常,而在DMEM中培养的异常卵泡较多.③PCNA作为原始卵泡生长的指标,也说明卵巢在Waymouth中能良好生长.结论:Waymouth培养体系是研究原始卵泡生长的一个理想的培养体系.【总页数】5页(P699-703)【作者】黄健;郑月慧;徐良全;李芳【作者单位】南昌大学医学院生理生殖研究室,南昌,330006;南昌大学医学院生理生殖研究室,南昌,330006;南昌大学医学院生理生殖研究室,南昌,330006;南昌大学医学院生理生殖研究室,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R335.5【相关文献】1.可控性大鼠卵巢癌DC活疫苗的制备及其体外研究 [J], 康玉;徐丛剑;刘惜时;张新华;吴超群;钟翠平;顾健人2.正常和双侧卵巢切除大鼠体外骨髓培养破骨细胞凋亡变化的研究 [J], 李玉坤;李雨民;张宇光;邱明才3.新生大鼠卵巢体外培养中NT3与LIF对始基卵泡发育的影响 [J], 冯月枝;邱绮;杨冬梓;张清学4.微囊化新生大鼠卵巢组织体外及异体移植 [J], 严春晓;郑伟;傅红星;金一;卢晓声5.去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞体外成脂肪分化能力的研究 [J], 李冬菊;李良;吴江因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1．材料和方法
1.1实验动物
1）采用健康性成熟为交配过的雌性SPF级Wistar大鼠，鼠龄（60±5）d，每只体质量200～250g，试验期间提供足量自来水及普通饲料，动物是温度保持在22℃左右，自动通风，光照周期8:00～18:00,适应3d后用于实验。
《被动吸烟对大鼠卵巢雌激素受体α、孕激素受体表达的影响》解剖学杂志201 1年第34卷第l期
2）雌性SD大鼠90只，日龄50-60d，体质量145-165g，普通喂养，自由进食，给予12h的亮暗间隔。
《大鼠胚胎卵巢原位移植的生殖内分泌研究》南方医科大学报
3）成年雌性Wistar大鼠清洁级39只，体重（186.76±9.33）g。
上海实验动物中心提供。
成年雌性SD大鼠清洁级16只，体重（243.93±17.4）g。
福建医科大学实验动物中心提供。
《镉对大鼠卵巢性激素分泌功能的影响》毒理学杂志2005年12月第19卷第四期
4）未交配过成年雌性SD大鼠，经阴道细胞学检查，证实动情周期正常者作为受体，随机分成4组，每组20只。
供体分别为成年雌性sD大鼠和出生2～3天雌性SD大鼠，各20只。
《大鼠卵巢组织移植的实验研究》中华器官移植杂志1996年7月第17卷第三期
5）受体为SD成年雌性大鼠(购于浙江大学医学院实验动物中心)，体重220～250 g。
卵巢来源：出生24 h以内的SD新生大鼠(购于浙江大学医学院实验动物中心)卵巢。
《微囊化新生大鼠卵巢组织体外及异体移植》细胞生物学杂志
1.2实验试剂
1)兔抗大鼠ERa、PR多克隆抗体购自Santa-Cruz公司；SP免疫组织化学试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
《被动吸烟对大鼠卵巢雌激素受体α、孕激素受体表达的影响》解剖学杂志201 1年第34卷第l期
2)孕马血清促性腺激素（PMSG),杭州动物药品厂;人绒毛膜促性腺激素（HCG)，安徽新力药业股份有限公司。
孕酮（P)、雌二醇（E2）放免测定药盒，北京北方生物制品研究所，DME/F-12 1:1细胞孵育盒，Hyclone公司。
《镉对大鼠卵巢性激素分泌功能的影响》毒理学杂志2005年12月第19卷第四期
3)海藻酸钠f中国医药集团上海化学试剂公司)；聚左赖氨酸分子量为27400(Sigma公司，美国)；RPMI 1640培养基(上海吉诺生物医药技术有限公司)；胎牛血清(FBS，杭州四季青生物制品所)；Estradiol Test Units(美国Beckman Coulter公司)；PGN Test Units(美国Beckman Coulter公司)；其余试剂均为分析纯。
《微囊化新生大鼠卵巢组织体外及异体移植》细胞生物学杂志
2.大鼠器官体外培养
2.1 椎间盘体外培养
1）取健康清洁级SD大鼠60只，5-6周龄，150g左右，无菌条件下完整取出腰段椎间盘器官（包括髓核组织、纤维环、上下软骨终板及少量附着于终板的松质骨）共350个，随机分为5组；
2）无菌条件下高渗肝素盐水冲洗椎间盘3次，2.5倍放大镜下进一步修整后置入12孔培养皿内，37℃、5％CO2条件下培养，高渗DMEM/F12培养液通过每1000ml等渗培养液内加入3.72克NaCl获得，小牛血清浓度：20％，每天换液一次。
2.2 体外前庭器官培养
按照Lambert的方法，取新生2 d大鼠，20℃冰箱冷冻麻醉5min后全身浸入750mL／L乙醇5 min，无菌条件下断头，置于冰的Hank液中，在解剖显微镜下取出椭圆囊，打开囊壁，去除耳石，用吸管悬滴将椭圆囊移人鼠尾胶包被过的24孔培养板中央，放于37℃，50
mL／L CO2培养箱，待组织贴壁后加入适量DMEM高糖培养液，置于培养箱中培养．每日于倒置显微镜下观察移植物色泽及培养液情况，隔日将原液吸出，加入等量培养液．培养至1，3，5和7d取出固定，透射电镜观察。