饲料中粗纤维的测定

二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
（三）结果计算 粗纤维（％）=（m1－m2）/m
式中： m1─130℃பைடு நூலகம்干后坩埚及试样残渣重，g； m2─550℃（或500℃）灼烧后坩埚及试样残渣 重，g； m─试样（未脱脂）质量，g。
每个试样取两平行样进行测定，以算术平均值为结果。 粗纤维含量在10％以下，绝对值相差0.4。粗纤维含量在10％以上，相对 偏差为4％。
➢ 纤维素是由葡萄糖分子通过β－D－葡萄糖以β－1,4－糖苷键 连接而成的多糖或天然高分子化合物。（淀粉：α－葡萄糖以 α－1,4－糖苷键）。两者分子通式均为(C6H10O5)n 。
特性：
纤维素不溶于水和乙醇、乙醚等有机溶剂，也不溶于稀酸和 稀碱。但与硫酸或盐酸共热时可水解为α-葡萄糖。
一、概述
半纤维素（hemicellulose）
• 含脂肪大于10％必须脱脂， 含脂肪不大于10％，可不脱脂 。
• 碳酸盐含量超过5％，需要预先出去碳酸盐。 • 滴加正辛醇——防泡剂 。
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样品消煮
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残渣＋150ml 0.23 mol/L KOH＋1滴正辛 醇
微沸30min（保持KOH浓度不变）
碱处过滤理，沸目蒸的馏水：洗涤至中性（红色石蕊
去除蛋白质、部分半纤维素和部分木质素，并使试脂纸肪皂不化变而去色除）。
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有机溶剂处理目的：
去除单宁、色素、残余脂肪、蜡、部分蛋白质和戊糖。 Back
95％乙醇、乙醚或丙酮洗涤数 次（余下纤维素和矿物质）
感谢下 载
剩下的为木质素和硅酸 盐。
木质素被灰化，灰化的 部分酸性洗涤木质素（A
三、范氏（Van Soest）中性洗涤纤维（ NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定
（二）方法评价 酸性洗涤纤维测定法已获得公认，中性洗涤纤维测定法尚在继续改
进中。
中性洗涤剂提取蛋白质的效率不高，对于高蛋白饲料，部分蛋白混
杂在中性洗涤纤维（NDF）中。淀粉也有相似的干扰作用。 ● 将中性洗涤剂溶液的pH值由6.9~7.0调至3.5左右；
方法标准：GB/T 6364-2006
与GB/T 6364-1994相比主要技术差异： KOH替代NaOH； 海沙或硅藻土代替酸洗石棉； 消煮液体积由200ml改为150ml； 洗液由乙醇改为丙酮； 增加了试样预先脱脂和除去碳酸盐步骤 灰化温度由550±25℃改为500±25℃； 称样量由1～2g改为1g； 规定了测量范围。
二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
（一）原理
用固定量的浓度准确的热酸和热碱，在特定条件 （强制条件）下消煮样品，再用醚、丙酮除去可溶物 ，经高温灼烧扣除矿物质的量，余量为粗纤维。
不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定 的条件下测出的概略养分。以纤维素为主，还含少量 半纤维素和木质素。
二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
残渣过＋滤1，5沸0m蒸蕊l馏0试正水.2纸辛洗3不醇m涤变o至色l/中L）性KO（H蓝＋色1石滴
微沸30min（保持KOH浓度不变）图
过滤滤对，，（沸酸2）蒸洗处馏和试理水沸纸后洗蒸不的涤馏变样至水色品中洗）进性至行（中抽红性色，石蕊 而后95％乙醇、乙醚或丙酮洗
烘干涤（数1次30，℃抽）干，称转重移至（坩坩埚埚+纤维 素+灰分，m1） 灰化（500℃）
4.5 粗纤维的测定 江西农业大学
引导题
✓ 用本方法测定的结果为什么称为“粗纤维”？ ✓ 在测定为中为什么必须严格控制实验条件。 ✓ 在本测定中哪些因素是影响测定结果的主要因素？
一、概述
纤维素（cellulose）
➢ 植物细胞壁的主要成分，对植物体有支持和保护作用。天然纤 维素常同木质素、半纤维素、树脂等伴生在一起。
➢ 在稀碱溶液中加热易水解。
一、概述
木质素（lignose）
木质素是由苯丙烷单元通过醚键和碳碳键连接而成 的聚酚类三维网状高分子化合物。无定形。
特性：
➢ 黄褐色无定形粉末，不溶于水，可溶于强碱和亚硫酸盐。
➢ 非碳水化合物；动物不能消化，除作填充剂外，对动物没有营养 价值。
二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
三、范氏（Van Soest）中性洗涤纤维（ NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定
（一）原理
十二烷基硫酸钠（ SDS，离子型 去垢剂）——去除中性洗涤剂溶 解物（NDS，包括蛋白质、脂肪、 淀粉、糖），余下的即为中性洗 涤纤维酸（性ND洗F）涤剂。（十六烷甲基
溴化铵）：去除酸性洗涤 溶解物（ADS），包括NDS和 半纤维素。剩下的则为酸 性纤洗维涤素纤被维7（2％AD硫F）酸。水解，
● 对于高蛋白质饲料，先用蛋白酶处理样品； ● 对于高淀粉饲料可以考虑添加耐高温的α－淀粉酶。
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kind cooperati on!
酸1g处样品理＋目15的0ml：正0.辛13醇mol/L硫酸＋1滴
去除淀粉，果微胶沸质3、0m部in（分保蛋持白硫质酸和浓部度分不半变纤）维 素和少部分纤维素。过滤，沸蒸蕊馏试水纸洗不涤变至色中）性（蓝色石 前处理：
（二）仪器和设备
粉碎设备 分析天平 滤锅 陶瓷筛板 灰化皿 干燥器 马福炉 消煮器
二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
（三）测定步骤
（1）酸处理：目的
（2）碱处理：目的
（3）抽滤和有机 溶剂处理:目的
（4）烘干、灰化
1g样品＋150ml 0.13 mol/L硫酸＋ 1滴正辛醇
微沸30min（保持硫酸浓度不变）图
二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
（四）操作中应注意的事项
样品粒度的大小将影响分析结果，通常将样品研磨成粒度为1mm左
右为宜；
在酸煮后和碱煮后冲洗至中性过程中，最好用热蒸馏水，易于过滤
；
含脂肪小于1%的样本可不脱脂；含脂肪1%～10%的样本不是必须的,
但建议脱脂；含脂肪在10%以上的则必须脱脂, 或用测脂后的试样 残渣；
• 半乳聚糖 该类半纤维素的主要代表是阿拉伯半乳聚糖。落叶松中存在着 丰富的阿拉伯半乳聚糖。
• 木葡聚糖 该类半纤维素分子包括象纤维素那样的β-1,4链的葡聚糖骨架 ，在糖苷键6位上接了很多木糖侧链。
一、概述
半纤维素（hemicellulose）
特性：
➢ 不溶于水，但吸水后溶胀形成粘性物质。溶于碱液和某 些有机溶剂如乙醚、石油醚、乙醇、苯、二氯乙烷等。
测定过程复杂，处理过程中利用热的强酸强碱，必须注意安全！
问题讨论：（大家思考）
（1）在本测定中哪些因素是影响测定结果的主要因素？在 测定为中为什么必须严格控制实验条件？
答：从酸碱处理所去除的成分考虑，酸碱浓度、酸碱处理时 间、乙醇洗涤次数等。纤维素与高浓度硫酸或盐酸共热时 可水解为α-葡萄糖。
（2）用本方法测定的结果为什么称为“粗纤维”？
半纤维素一般为非葡萄糖聚合而成的多糖，没有化学通式。 半纤维索的种类很多，结构十分复杂，而且随植物种类的不同而有较大 差异.根据其化学组成中主要单糖的成分，可以分为以下主要几个大类：
• 甘露聚糖 该类半纤维素的主链由甘露糖以β-1,4糖苷键连接而成。甘露 聚糖是针叶树半纤维素的主要成分。
• 木聚糖 是由β-1,4糖苷键连成的木糖链状分子，大约每10个木糖残基有 7个乙酰化。蕨类、裸子、被子植物均含有这类半纤维素。
二、饲料中粗纤维的测定（酸碱法）
（五）方法评价
➢ 测定结果以纤维素为主，还包括少量半纤维素以及木质素；
➢ 测定结果低于实际含量（为什么呢？）；
➢ 计算得出的无氮浸出物含量高于实际含量； ➢ 粗纤维不是一种纯化合物。
鉴于上述原因，Van Soest提出了中性洗涤纤维(Neu tral detergent fibre, NDF)和酸性洗涤纤维(acid detergent f ibre, ADF)的测定方法。