临床微生物室标本处理及操作流程
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很多中性粒细胞混合有形态多 样的细菌（革兰氏阴性杆菌， 纺锤形，革兰氏阳性球菌） 许多或中等量的中性粒细胞，
以一种形态的细菌为主
许多不着色的有折射的杆状细 菌
很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现 中性粒细胞减少
酵母菌样，酵母菌是一种 很少引起肺炎的细菌，常 由口腔污染
中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养
2
Infection Control Team
The Role of the Clinical Bacteriology Lab
3
分 门诊 析 病房 前 诊所
实验室 分 析 中
临床微生物检验流程示意
不合格
临床标本
留取
SOP +
环节一
运送
环节二
合格
标本合格？ 环节三
SOP
IQ
标本合格 判定
直接检测 EQA标本
接种 培养
环节四
培养基、冰箱 温箱、气体
检测
环节五
仪器设备、试剂
分
报告
环节六
析
后
对每个环节进行控制，构成质量保证体系4
内容
标本处理 微生物鉴定
药敏试验
5
标本处理
• 血培养 • 脑脊液培养 • 呼吸道标本 (痰标本、咽部标本） • 尿培养 • 生殖道标本培养 • 抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养） • 粪便培养
证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织
的标本）
34
呼吸道标本的涂片评估模
式 肺炎-可接受的
不合格标本
评述
很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野
许多鳞状上皮 >10个/低倍视野
可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采 集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。
很多的中性粒细胞
临床微生物室标本处理及检验流程
1
概述 General overview
点击输入本栏的具体文字，简明扼要的说明分项内容，请根据您 的具体内容酌情修改。
Click to enter the specific text in this column to explain the sub item content briefly. Please modify it according to your specific content.
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只 会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。
成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他
肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌
可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
40
尿液运输方法
如不能及时送检，需冷藏。 4小时延迟送检，须废弃标本。
41
42
是
> 105 CFU/ml
自然排尿 过夜培养
< 105 CFU/ml
否
继续培养； 随后观察；发送初步的培养阴性报告
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌
➢1 organism
（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释） ➢一种以上细菌生长
35
36
尿培养标本 Urine Culture
37
尿道感染
每年850万例尿路感染, 90%为女 性 1/2.5个妇女在一生中会得UTI 下行性感染：血流肾脏膀胱 （金黄色葡萄球菌，酵母菌，结 核分枝杆菌） 上行性感染：尿道膀胱肾盂 血流
38
用于尿液培养的标本
•肾活检或肾抽吸物（外科） •耻骨上膀胱抽吸物
（孕妇，婴儿，全膀胱）
•微导管尿（内部导管和外部导管）-老年人 •中段尿，清洁留取——急诊成年人 •留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）
39
尿液标本
•采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外
生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗
•长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 • 做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
14
呼吸道标本 Respiratory Cultures
15
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
16
17
下呼吸道标本 Lower Respiratory Tract Specimens
18
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
6
血培养 Blood Culture
7
8
脑脊液 CEREBROSPINAL FLUID
9
10
严格无菌操作
soap
11
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样 最少1 mL，最好>5 mL 打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
• 急性支气管炎 • 社区获得性肺炎 • 院内获得性肺炎 • 免疫妥协患者肺炎
19
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物 肺部组织
支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液
20
标本质量
脓痰
唾液or诱导痰 (?)
粘液样痰
带血痰
21
Hale Waihona Puke Baidu
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
22
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒 收
23
有PMN的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别 少=接受，进行培养
粘液丝
24
胞内细菌 ——提示感染
细胞内细菌
25
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
26
滑石颗粒
27
见于迁延长时间的呼吸道疾病
淀粉样小体
28
弹性纤维
29
库什曼螺旋体
30
呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
31
几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
你看见多少种形态？ 32
呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌
33
呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？
肺中的结节吸出物，不规则“球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都
12
13
如何看待CSF的培养结果？
（1）如果同期送检的血培养大于3天报警，通常不是很紧急 （2）假如仍不确定，电话联系微生物室值日主管，了解革兰氏
染色涂片的相关情况。
（3）必须综合生化和血液学结果 （4）如果CSF常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他
指标正常，对报告的致病菌应保持怀疑，可能送检污染。
以一种形态的细菌为主
许多不着色的有折射的杆状细 菌
很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现 中性粒细胞减少
酵母菌样，酵母菌是一种 很少引起肺炎的细菌，常 由口腔污染
中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养
2
Infection Control Team
The Role of the Clinical Bacteriology Lab
3
分 门诊 析 病房 前 诊所
实验室 分 析 中
临床微生物检验流程示意
不合格
临床标本
留取
SOP +
环节一
运送
环节二
合格
标本合格？ 环节三
SOP
IQ
标本合格 判定
直接检测 EQA标本
接种 培养
环节四
培养基、冰箱 温箱、气体
检测
环节五
仪器设备、试剂
分
报告
环节六
析
后
对每个环节进行控制，构成质量保证体系4
内容
标本处理 微生物鉴定
药敏试验
5
标本处理
• 血培养 • 脑脊液培养 • 呼吸道标本 (痰标本、咽部标本） • 尿培养 • 生殖道标本培养 • 抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养） • 粪便培养
证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织
的标本）
34
呼吸道标本的涂片评估模
式 肺炎-可接受的
不合格标本
评述
很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野
许多鳞状上皮 >10个/低倍视野
可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采 集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。
很多的中性粒细胞
临床微生物室标本处理及检验流程
1
概述 General overview
点击输入本栏的具体文字，简明扼要的说明分项内容，请根据您 的具体内容酌情修改。
Click to enter the specific text in this column to explain the sub item content briefly. Please modify it according to your specific content.
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只 会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。
成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他
肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌
可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
40
尿液运输方法
如不能及时送检，需冷藏。 4小时延迟送检，须废弃标本。
41
42
是
> 105 CFU/ml
自然排尿 过夜培养
< 105 CFU/ml
否
继续培养； 随后观察；发送初步的培养阴性报告
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌
➢1 organism
（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释） ➢一种以上细菌生长
35
36
尿培养标本 Urine Culture
37
尿道感染
每年850万例尿路感染, 90%为女 性 1/2.5个妇女在一生中会得UTI 下行性感染：血流肾脏膀胱 （金黄色葡萄球菌，酵母菌，结 核分枝杆菌） 上行性感染：尿道膀胱肾盂 血流
38
用于尿液培养的标本
•肾活检或肾抽吸物（外科） •耻骨上膀胱抽吸物
（孕妇，婴儿，全膀胱）
•微导管尿（内部导管和外部导管）-老年人 •中段尿，清洁留取——急诊成年人 •留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）
39
尿液标本
•采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外
生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗
•长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 • 做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
14
呼吸道标本 Respiratory Cultures
15
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
16
17
下呼吸道标本 Lower Respiratory Tract Specimens
18
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
6
血培养 Blood Culture
7
8
脑脊液 CEREBROSPINAL FLUID
9
10
严格无菌操作
soap
11
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样 最少1 mL，最好>5 mL 打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
• 急性支气管炎 • 社区获得性肺炎 • 院内获得性肺炎 • 免疫妥协患者肺炎
19
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物 肺部组织
支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液
20
标本质量
脓痰
唾液or诱导痰 (?)
粘液样痰
带血痰
21
Hale Waihona Puke Baidu
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
22
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒 收
23
有PMN的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别 少=接受，进行培养
粘液丝
24
胞内细菌 ——提示感染
细胞内细菌
25
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
26
滑石颗粒
27
见于迁延长时间的呼吸道疾病
淀粉样小体
28
弹性纤维
29
库什曼螺旋体
30
呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
31
几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
你看见多少种形态？ 32
呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌
33
呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？
肺中的结节吸出物，不规则“球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都
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如何看待CSF的培养结果？
（1）如果同期送检的血培养大于3天报警，通常不是很紧急 （2）假如仍不确定，电话联系微生物室值日主管，了解革兰氏
染色涂片的相关情况。
（3）必须综合生化和血液学结果 （4）如果CSF常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他
指标正常，对报告的致病菌应保持怀疑，可能送检污染。