狂犬病的防治_疫苗和抗血清的安全性探讨_董关木

2　动物致病性

证实SS2的动物致病性比较困难,用SS2分离株接种普通仔猪或小鼠等实验动物难以获得重复性好的结果,因此选用纯系斑马鱼〔4〕及SPF巴马微型猪(贵州系)作为动物模型,以检测和比较SS2分离株的致病性。

斑马鱼试验毒力试验:分6组,每组至少90尾斑马鱼(AB系),取4株四川分离株、1998年分离自江苏的HA9801株以及参考菌株ATCC43765,分别从10-1稀释至10-6,腹腔接种斑马鱼,并以每缸15尾的密度饲养于含8L水、30℃的鱼缸中。结果显示,4株四川分离株(ZY05719、ZY05721、ZY05722和ZG05464)、HA9801及ATCC43765的LD50分别为8.69×103、6.92×103、2.98×104、5.36×103、1.85×104和3.14×104cfu。而无毒株T15的LD50为5.45×107cfu,远高于国内分离株。

斑马鱼免疫试验:AB系斑马鱼50尾/组,27℃恒温饲养。取灭活江苏分离株HA9801、灭活四川分离株ZY05719、MRP重组蛋白、pET空载体融合蛋白、猪抗HA9801高免血清、猪阴性血清及生理盐水分别腹腔注射各组斑马鱼。14d 后进行二免。29d后以50LD50剂量HA9801,腹腔接种攻击。两灭活菌苗、MRP重组蛋白、猪高免血清、猪阴性血清组的RSP(%)分别为78、72、61、72、8;另取灭活HA9801、灭活ZY05719同法免疫斑马鱼各1组,攻击50LD50剂量ZY05719,两免疫组的RSP均为86%。显示HA9801、ZY05719有较好的交叉免疫保护效果,MRP重组蛋白及SS2高免血清对斑马鱼也有一定保护作用。

微型猪致病性试验:将109cfu的ZY05719培养物肌肉注射3头体重为5kg的2月龄微型猪。24h后,3头猪均出现发热、食欲减退、脑膜炎和关节炎等症状。其中一头在3d后康复,另两头在6d后死亡。从其心脏及脑中分离出细菌,PCR 检测证实为SS2。同时设两头微型猪作为对照,接种109cfu无毒株T15,观察21d仍保持健康。

微型猪免疫保护试验:微型猪11头SS2抗体ELISA法检测均为阴性,其中2头作为空白对照,另9头均用灭活的HA9801疫苗两次免疫。第2次免疫两周后分两组,一组4头用ZY05719攻击,另一组5头用HA9801攻击,攻击量均为109cfu/头。攻击H A9801组的4头中2头第2天发病,一头于第4天死亡,另一头康复。其余8头免疫猪及对照猪观察21 d均健活。除1头外,8头免疫猪均检出较高滴度的抗体。

3　公共卫生意义

SS2是猪的致病菌。虽然有人认为SS2往往因继发感染致病,但江苏及四川等地猪群急性发病并死亡的情况表明,继发感染显然不能解释这两次疫情。两地的病原学检查未发现有原发病原,包括被怀疑最有可能的PRRSV,四川疫区猪血清样本抗体无一阳性。

国内检测的结果表明,SS2在健康猪群的携带率并不如国外文献报道的那样高〔5〕。本实验室在四川采集的猪肉及淋巴结样本101份,增菌并作PCR检测无一阳性。扁桃体检出率稍高,但也低于10%。因此从总体来说,在国外SS2不被列为肉品检疫对象是有依据的。

SS2对人类而言是机会致病菌,伤口感染是已确定的感染途径。尽管如此,为确保食品安全及从事养猪业的人员的健康,控制SS2的感染甚为必要。作者认为,应从源头抓起,做好猪群的SS2的免疫接种,强化卫生消毒措施,以保障人类和动物的健康。

至谢:感谢荷兰国家兽医研究所Dr.HE Smith博士提供SS2无毒菌株,中国水产科学院珠江水产研究所提供纯系斑马鱼

参　考　文　献

〔1〕　姚火春,陈国强,陆承平.猪链球菌1998分离株病原特性鉴定.南京农业大学学报,1999,22(2):67-70.

〔2〕　曾巧英,陆承平.猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白的黏附作用.

南京农业大学学报,2002,25(4):67-71.

〔3〕　方绍庆,陆承平.猪链球菌2型溶血素的化学修饰.微生物学报,2003,43:395-399.

〔4〕　Van der Sar A M,Appel melk BJ,Vandenbroucke-Grauls CM,et al.A star with stripes:zebrafish as an infection model.Trends M icrobiol,

2004,12:451-457.

〔5〕　Staats JJ,Feder,I,Okwumabua,O,et al.Streptoc occus suis pas t: and present.Vet R es Commun,1997,21:831-407.

(收稿:2006-05-18)

狂犬病的防治、疫苗和抗血清的安全性探讨

董关木

狂犬病又称恐水症,是由狂犬病毒所致的急性传染病,人被病兽咬伤而感染,多见于狗、猫、狼等肉食动物。狂犬病主要临床表现为兴奋、恐水、咽肌痉挛、进行性瘫痪等。狂犬病是一种十分凶险的疾病,即使在科学比较发达的今天,提起狂犬病,也会让人毛骨悚然,它在某种程度上说比癌症更可怕,当今病死率最高的疾病就是狂犬病。狂犬病一旦发作,在症状出现后病死率几乎是100%。虽然狂犬病的死亡率是100%,但狂犬病又是百分之百可以预防的。

作者单位:中国药品生物制品检定所,北京　100050

预防狂犬病发生的有效措施是正确处理伤口,注射狂犬病疫苗和抗狂犬病血清,三者缺一不可。

1　伤口处理的重要性

化学和物理方法是清除伤口处狂犬病毒的最好方法, WHO和我国对狂犬病预防和处理原则均对伤口的及时和正确处理立于首位〔1〕。我国古代医书对狂犬病伤口的处理描述的很清楚,如晋代葛洪所著《肘后备急方》(公元四世纪)“疗犬咬人方,先嗍去恶血,灸疮中十壮”。说治疗被疯狗咬伤,应先吸去恶血,并用艾柱灸狂犬咬伤的部位,共灸十个艾柱。宋代《太平圣惠方》57卷:“凡春末夏初,犬多狂恶伤人,即