斛芪浸膏对60Co辐照后小鼠胸腺淋巴细胞氧化损伤的影响

浸 膏 是 否 通 过 抗 氧 化 、抗 自由 基 来 实 现 其 减 轻 辐 射 损 伤 的
作用 。
１ 实 验 材 料
１１ 实验 动 物 ．
４ ８周 昆 明 小 鼠 。 自上 海 斯 莱 克 实 验 动 物 购
组 、 照组 和辐 照加 低 、 、 剂 量 斛 芪 浸 膏 组 。对 照 组 和 辐 辐 中 高 照 组 加 等 量 无 血 清 Ｒ ＭＩ６ ０培 养 液 ，辐 照 加 斛 芪 浸 膏 低 、 Ｐ １４
中 、 剂 量 组 加 等量 的 ２ ｍ ／ 、 ０ ｇ 高 ５ ｇ ｍＬ ５ ｍ ／ ｍＬ和 １ ０ ｇｍ ０ ｍ ／ Ｌ浓 度
有 限 责 任 公 司 ， 雄 不 限 ， 于 第 二 军 医 大 学 海 医 系 动 物 房 雌 置
清 洁级 饲 养 ， 自由进 食 水 ， ｄ 开始 实 验 。 ３ 后 １ ． 斛 芪浸 膏 斛 芪 浸 膏 由黄 芪 、 斛 、 ２ 石 白术 、 冬 、 荷 组 麦 薄
氧化 物 水 平 有 不 同程 度 下 降 ． 异有 统计 学意 义 。 结 论 ： 芪 浸 膏 能在 一 定 程 度 上 降低 电 离辐 射 后 早 期 小鼠 胸 腺 淋 巴细 差 斛 胞 内活性 氧 水 平 ， 有 减 轻 电 离辐射 所致 的氧 化 损 伤 的作 用 。 具
关 键 词 辐 射 损 伤 斛 芪浸 膏 胸 腺 淋 巴 细胞 实验研 究
斛 芪 浸 膏对 ∞ ｏ辐 照 后小 鼠胸 腺淋 巴细胞 Ｃ 氧化损伤 的影响
张 军勇 － 王 凯丽 王傅 醅 。 李 柏
（． １解放 军第二 军 医大 学长海 医院， 海 ２ ０ ３ ；２解放 军第 １ ０中心 医院 ， 南洛 阳 ４ １ ３ ） 上 ０ ４ ３ ． ５ 河 ７ ０ １
外 ， 余 各组 均采 用 其 Ｃ ＾射 线 ５ ｙ单 次 辐 照 。 辐 照后 ３ ｍ ｎ 内分 别 用流 式 细 胞 仪 及 超 氧 化 物检 测 试 剂 盒检 测 各 组 细 ０ ｙ Ｇ ０ ｉ 胞 内 活性 氧 荧 光 强度 及 超 氧 化 物 含 量 。 结果 ： 辐 照 组 比较 ， 照加 低 、 高 剂 量 斛 芪浸 膏各 组 细 胞 内活 性 氧 强 度及 超 与 辐 中、
中 图分 类 号
Ｒ ８． ２ ９５
文献标识码
Ａ
文 章 编 号 １ ７ — ９ Ｘ（ ０ ２ ０ — ０ ０ ０ ６２ ３７ ２ １ ）３ ０ ７ — ２
目前 普 遍 认 为 电离 辐 射 诱 发 的 生 物 损 伤 主 要 源 于 自 由 基 与 诸 如 Ｄ Ａ、 白质 、 质 等 细胞 生 物 分 子 的 相 互 作 用 ［ Ｎ 蛋 脂 。 因此 ． 氧 化 损 伤成 为抗 辐 射 药 物 研 究 的一 个 主 要 方 向 。含 抗 硫 化 合 物 、 胞 因 子 、 白 酶 抑 制 剂 、 素 、 些 天 然 药 物 细 蛋 激 一 （ 括 中药 ） 提 取 物 等 均 已 被 证 明具 有 不 同 程 度 的抗 氧 化 包 的 作 用 ［ ］ 分 已进 入 到 了 临 床 试 验 和 应 用 阶段 ， 中 药 复 方 ２， －部 ３ 但 制 剂 的 抗 辐 射 研 究 还 相 对 较 少 。我 院 中 医科 长 期 应 用 四 生 汤辅 助 治 疗 恶 性 肿 瘤 放 疗 患 者 ，能 有 效 改 善 患 者 放 疗 后 疲 乏 、 热 、 喉干 痛等症状 ， 发 咽 明显 减 轻 放 疗 的毒 副作 用 。斛
斛 芪 浸 膏溶 液 。５ ０ 孵 箱 ３ ．℃孵 育 １ｈ ％Ｃ ７ ０ ０。 电离 辐 射 使 用 第 二 军 医 大学 辐 照 中心 。放 射 源 。辐 照
成 ， 伍 比 例 为 ５５５ ：， 克 浸 膏 含 生 药 ５８ ｇ 由上 海 中 医 配 ：：４１每 ： ． ， ８ 药 大 学源 创 科 技 有 限 公 司 提供 ， 号 ０ １ １ 。将 斛 芪 浸 膏 用 批 ９ １６ Ｒ ＭＩ６ ０培 养 基 配 制 成 ３种 不 同 浓 度 溶 液 ， 即 ２ ｍ ／ Ｌ Ｐ １４ ５ ｇｍ 、 ５ ｍｇ Ｌ、０ ｍ ／ Ｌ 相 当于 生 药 量 ）用 ｐ 计 调 整 药 物溶 液 ０ ／ １ ０ ｇｍ （ ｍ ， Ｈ ｐ Ｈ值 于 ７９ ． ． ８０ ０ ０之 间 ． ０２ １ 用 ． ｘ ２ ｍ无 菌 过 滤 器 过 滤 。 １ ． 试剂和仪器 ３ Ｒ ＭＩ６ ０培 养 液 ， 牛 血 清 （ ＩＣ ， Ｐ １４ 胎 Ｇ Ｂ Ｏ） 小
芪 浸 膏 是 四生 汤 的 改 进 剂 型 ．本 研 究 拟 通 过 实 验 观 察 斛 芪
标仪
（ ｉ ｅｋ Ｅ Ｘ ０ ） 流 式 细 胞 仪 器 Ｂｏ ｃ Ｌ ８ ８ ， Ｔ
（ 国 Ｂ 美 Ｄ
Ｆ Ｓ ａｉｕ ） ＡＣ Ｃ ｌ ｒ 。 ｂ
２ 实பைடு நூலகம்验 方 法
２ １ 昆 明 小 鼠 胸 腺 细 胞 原 代 培 养 昆 明 小 鼠 乙 醚 麻 醉 后 ， ．
颈椎 脱 臼处 死 。５ ７ ％乙醇 溶 液 浸 泡 １ｍ ｎ 在 超 净 台上 无 菌 剪 ５ ｉ。
开 小 鼠胸 腔 ． 出 胸 腺 ， 无 菌 Ｐ Ｓ漂 洗 干 净 ， 碎 过 ２ ０ 取 用 Ｂ 研 ０
目筛 网 。将 取 得 的胸 腺 细胞 悬 浮 于小 鼠淋 巴细 胞 分 离 液 中 ， ２ ０ ｒ ｉ． 心 ３ ｍｎ 吸 取 淋 巴细 胞 层 至 新 离 心 管 中 ， 无 ２ ０／ ｎ 离 ｍ ０ ｉ。 用 血 清 Ｒ Ｍ １４ Ｐ Ｉ６ ０培 养 液 清 洗 ． 细 胞 重 新 悬 浮 于 Ｒ ＭＩ６０ 将 Ｐ １４ ＋ １％Ｆ Ｓ培 养 液 中 ， 打 混 匀 ， 成 单 细胞 悬 液 。 用 ４ ０ Ｂ 吹 调 ％台 盼 蓝 溶 液染 色 ， 以显 微 镜 下 计 数 活 细 胞 率 ＞ ５ ９ ％判 为合 格 ， 细 将 胞 悬 液 置无 菌 培养 皿 中 ，％Ｃ ２ 箱 ３ ．℃孵 育 ４ 。 ５ ０孵 ７０ ｈ ２ 实验 分 组 和 辐 照 将 胸 腺 细 胞 悬 液 分 为 ５组 ， 即对 照 ． ２
摘 要 目的 ： 过 实验探 讨 斛 芪浸 膏是 否 具 有 减轻 电 离辐 射 所 致胸 腺 淋 巴细 胞 氧化 损 伤 的作 用 。 方 法 ： ４ ６周 通 取 ～
健 康 雄 性 昆明 小 鼠 。 离胸 腺 淋 巴 细胞 作 原 代 培 养 ， 分 为 对 照 组 、 照 组和 辐 照 加 低 、 、 剂量 斛 芪浸 膏组 ， 对 照 组 分 并 辐 中 高 除