植物体内硝态氮含量的测定.
植物中硝态氮的测定方法
硝态氮是植物最主要的氮源。
植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。
测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
（一）原理在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。
（二）仪器与用具（1）722型分光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20ml26支；（4）刻度吸管0.1ml. 0.5ml. 5ml. 10ml各1支；（5）容量瓶50ml8个；（6）容量瓶25ml3个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。
试剂：500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200ml。
5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。
置冰箱保存一周有效。
8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。
（三）实验步骤1. 标准曲线的制作（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1ml. 2ml. 3ml. 4ml. 6ml. 8ml. 10ml. 12ml分别放入501ml容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。
（2）吸收上述系列标准溶液0.11ml，分别放入刻度试管中，以0.11ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH溶液9. 51ml摇匀冷却至室温，显色液总体积为101ml。
（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。
植物生理学实验讲义
植物生理学实验（第一版）目录实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势 (2)实验二植物体内硝态氮含量的测定 (4)实验三叶绿素a，b含量的测定 (5)实验四赤霉素对水稻α--淀粉酶的诱导形成 (6)实验五植物呼吸强度的测定 (7)实验六种子活力的快速测定—氯化三苯基四氮唑(TTC)法及红墨水法 (8)实验七丙二醛含量的测定 (11)实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势[实验目的]观看植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生进程及其用于测定植物组织渗透势的测定[实验原理]原生质层（细胞膜、原生质、液泡膜）具有选择透过性，近似于半透膜，一个成熟的植物细胞确实是一个完整的渗透装置：当外界溶液浓度大于细胞液浓度时(高渗溶液），细胞失水，发生质壁分离；当外界溶液浓度小于细胞液浓度时（低渗溶液），细胞吸水；当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平稳状态，当外界溶液浓度等于细胞液浓度时（等渗溶液），植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。
细胞水势等于细胞液的渗透势等于外界溶液渗透势。
将植物组织置于对其无迫害的一系列不同浓度的溶液里处置一按时刻，然后镜检发生质壁分离的情形，细胞的等渗浓度将界于方才引发初始质壁分离的浓度和不能引发质壁分离的浓度之间。
代入公式即可计算渗透势。
[材料、器材与试剂]1 实验材料洋葱表皮2 实验仪器显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，刀片，培育皿，记号笔，滴管。
3 实验试剂别离配制、、、、、、、、L的蔗糖溶液，贮9个试剂瓶中。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1mol/L(母液)。
再配制成以下各类浓度：L：吸母液25ml+水25mlL：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水[方式与步骤]1. 取6套干净清洁的小培育皿，用记号笔编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培育皿中使成一薄层，盖好皿盖。
实验12 植物体内硝态氮含量的测定
实验12 植物体内硝态氮含量的测定植物对氮的吸收与利用，对于其生长发育和产量形成具有重要的影响。
氮素如果以亚硝酸盐或硝酸盐的形式被植物吸收，则称为植物体内的硝态氮(N-NO3-)含量。
在植物体内量测硝态氮含量，不仅可以为揭示植物氮素代谢的特点和生理机制提供数据，还可以指导植物耐受性研究和农业生产。
1 实验原理硝态氮是植物生长发育和产量形成的重要因素，在不同发育阶段的植物中，其含量也相应发生变化。
硝态氮含量可采用摄谱光度法和电化学法测定，其中电化学法的准确性更高且应用范围更广。
本实验是利用电化学法，根据硝酸与还原剂还原成亚硝酸或氨态氮时的电离电流大小的差异，测定植物体内的硝态氮含量。
2 实验步骤2.1 样品处理取适量新鲜样品，如茄子、番茄等，去皮、去籽并洗净。
将样品碾磨成泥状，加入特定的醋酸钾(KCH3COO)提取液(醋酸钾10 g/L)，摇匀，封口密封24 h在4℃下提取。
离心后，取上清，用玛瑙瓶收集。
将所需植物红单色隐花苣、矮生豌豆、楸树等的种子按5 g每袋加入15 mL的海绵培养体，在恒温箱中翻转培养6 d至10 d。
2.3 制备电极制备硝酸电极(NH4NO3-SCE单接)和参比电极，使用前需打磨至光亮。
取同样量的植物提取液和硝酸标准溶液，加入还原剂及缘草酸进行反应。
反应完毕后，测量1 min内的电流，计算硝态氮含量。
2.5 数据处理及统计按照硝态氮含量公式计算并汇总数据，进行ANOVA方差分析及t检验。
3 注意事项3.1 样品应尽量新鲜，提取液操作要快，以避免样品中硝态氮被还原。
3.2 试剂应准确、无杂质、无缺损，若出现异常，应立即更换。
3.3 电极应保持干燥、光洁，并调整标定。
3.4 电化学池应密封，避免气泡干扰或溢液现象。
4 结果分析实验结果如下表所示：在统计学分析中，各组数据的p值均小于0.05，表明差异极显著，比较表明楸树叶片硝态氮含量最高，其次是红单色隐花苣和矮生豌豆，而茄子和番茄中硝态氮含量最低。
植物营养学实验
实验一根系阳离子交换量的测定（淋洗法）根系是作物吸收养分的重要器官，作物根系阳离子代换量（Cation Exchange Content, CEC）的大小，大体上可反映根系吸收养分的强弱和多少，因此，测定根系阳离子代换量（CEC）对于了解作物吸收养分的能力与指导合理施肥具有一定的意义。
一、方法原理根系中的阳离子，在稀HCl中，能被H+代换出来，而根系所吸收的H+量与代换出来的阳离子量相等。
在洗去多余的HCl溶液后，用中性KCl溶液将H+代换出来，以KOH溶液滴定至pH 7.0，根据消耗KOH的浓度和用量，计算出阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。
二、操作步骤从田间选取具有代表性的植株若干（尽可能不要损坏根系），先用水冲洗根系，再放在筛子上置于水中轻轻振荡，至洗净为止，后再用蒸馏水冲洗数次，然后切去地上部分，置于30℃烘箱中烘干（一般烘8 h以上），将烘干根样取出磨细，过18~25号筛（0.7~1.0 mm），混合均匀，贮于广口瓶中备用。
称取烘干磨细的根样0.1000 g，放入180~250 mL烧杯中，先加几滴蒸馏水使根系湿润，避免以后操作时根浮在液面上，再加0.01 mol·L -1HCl 100 mL，搅拌5 min，待根样下沉后，将大部分盐酸连同根样倒入漏斗中过滤，然后用蒸馏水漂洗至无Cl-为止（用AgNO3检验）（一般用110~200 mL蒸馏水，少量多次即可洗至无Cl-）。
再用尖头玻棒将过滤纸中心穿孔，以100 mL KCl（事先调至pH 7.0）逐渐将过滤纸上的根样全部洗入原烧杯中，用pH计测定根-KCl 悬浮液pH值，然后加7~8 d酸碱混合指示剂，用0.01 mol·L -1 KOH滴定至兰绿色（保持30 s 不变），记下所消耗的0.01 mol·L -1 KOH 毫升数，并以此计算出根系的阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。
三、结果计算CEC（cmol·kg-1）=N KOH×V KOH×100 根样干重（g）四、注意事项1、过滤及漂洗时，溶液不超过漏斗的2/3处，并遵守“少量多次”的洗涤原则。
植物体内硝态氮含量的测定
植物体内硝态氮含量的测定【实验目的】伤流是植物根系主动吸水的证明，不同植物或同一种植物在不同季节的伤流强度均不同，伤流强度反应根系生理活动强弱和根系又吸收面积大小。
伤流除含有大量水分外，还含有各种无机盐及根部合成有机物包括植物激素。
硝态氮是植物最主要的氮源。
植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。
测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
【原理】硝态氮与硝酸试粉作用，生成粉红色的偶氮化合物，其颜色深浅与硝态氮的浓度成正相关，将样品显示的颜色与标准比色阶进行比较，可快速求得硝态氮的浓度。
硝酸试粉主要是由锌粉、柠檬酸、ɑ-萘胺、对氨基苯磺酸混合而成，硝态氮与硝酸试粉反应如下：【实验材料】接骨木伤流液【实验试剂】硝酸试粉、50%醋酸、50mg/L氮流液【实验步骤】在比色盘的五个孔中加入如表所示溶液：5min后即成5个不同浓度20、40、60、80、100mg/mL硝态氮的比色阶。
再用6号孔中加入伤流液5滴及硝酸试粉1勺，搅拌，5min后，将其所显粉红色与标准比色阶比较确定样品液中硝态氮的浓度。
【实验结果及处理】1.经过比色样品溶液的颜色介于2~3之间。
2.根据结果，伤流液中硝态氮的浓约为（10/5+20/10）/2=2mg/mL原理及方法如下：— 1 —硝态氮在经过硫酸2过氧化氢消煮的植物消煮液中，硝态氮和亚硝态氮以硝酸根离子（NO3-）存在，利用NO3-在紫外光区220nm处有特征吸收峰，可以直接测定试液的吸光度来定量硝态氮。
测定时，吸取5mL 消煮液于50mL比色管中，无氨水稀释至刻度，摇匀，在波长210nm处，用1cm石英比色皿，以无氨水作参比，在紫外分光光度计进行硝态氮测定。
3.通过伤流法测定植物中硝态氮含量中，伤流法需要收集伤流液，此环节消费时间长。
— 2 —。
植物营养学 实验
植物营养学实验实验一根系阳离子交换量的测定（淋洗法）根系是作物吸收养分的重要器官，作物根系阳离子代换量（Cation Exchange Content, CEC）的大小，大体上可反映根系吸收养分的强弱和多少，因此，测定根系阳离子代换量（CEC）对于了解作物吸收养分的能力与指导合理施肥具有一定的意义。
一、方法原理根系中的阳离子，在稀HCl中，能被H+代换出来，而根系所吸收的H+量与代换出来的阳离子量相等。
在洗去多余的HCl溶液后，用中性KCl溶液将H+代换出来，以KOH溶液滴定至pH 7.0，根据消耗KOH的浓度和用量，计算出阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。
二、操作步骤从田间选取具有代表性的植株若干（尽可能不要损坏根系），先用水冲洗根系，再放在筛子上置于水中轻轻振荡，至洗净为止，后再用蒸馏水冲洗数次，然后切去地上部分，置于30℃烘箱中烘干（一般烘8 h以上），将烘干根样取出磨细，过18~25号筛（0.7~1.0 mm），混合均匀，贮于广口瓶中备用。
称取烘干磨细的根样0.1000 g，放入180~250 mL烧杯中，先加几滴蒸馏水使根系湿润，避免以后操作时根浮在液面上，再加0.01 mol・L -1HCl 100 mL，搅拌5 min，待根样下沉后，将大部分盐酸连同根样倒入漏斗中过滤，然后用蒸馏水漂洗至无Cl-为止（用AgNO3检验）（一般用110~200 mL蒸馏水，少量多次即可洗至无Cl-）。
再用尖头玻棒将过滤纸中心穿孔，以100 mL KCl（事先调至pH 7.0）逐渐将过滤纸上的根样全部洗入原烧杯中，用pH计测定根-KCl悬浮液pH值，然后加7~8 d酸碱混合指示剂，用0.01 mol ・L -1 KOH滴定至兰绿色（保持30 s不变），记下所消耗的0.01 mol・L -1 KOH 毫升数，并以此计算出根系的阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。
三、结果计算CEC（cmol・kg-1）=NKOH×VKOH×100根样干重（g）四、注意事项1、过滤及漂洗时，溶液不超过漏斗的2/3处，并遵守�D少量多次‖的洗涤原则。
实验三 植物营养(铵态氮,硝态氮)
高级植物生理实验报告植物营养农学院农药学东保柱20132020542013年12月27日实验1 植物组织铵态氮含量的测定（茚三酮比色法）一、实验原理植物吸收的氮主要是氨态氮和硝态氮，后者经过还原过程形成氨，前者经同化后形成谷氨酰胺和谷氨酸，然后形成其他氨基酸和蛋白质。
测定氨态氮的方法有多种，本实验为改良的茚三酮比色法。
α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热，经氧化脱氨变成相应的α-酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮则被还原，在弱酸环境中，还原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质。
根据蓝紫色的深浅，在580nm 波长下测定吸光值。
本实验中在茚三酮试剂中添加乙二醇并补加正丁醇和丙醇，可以克服茚三酮的不稳定性。
二、仪器设备研钵、烧杯、漏斗、量筒、具塞试管、三角瓶、容量瓶、移液管、天平、沸水浴锅、可见分光光度计三、试剂1. 10%醋酸(100mL)2. 1% 抗坏血酸（100mL）3. 5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液（0.005g定容至1000mL）4. pH5.4醋酸缓冲液：8.8mL 0.2mol/L 醋酸（冰醋酸11.55mL稀释至1000mL）加41.2mL 0.2mol/L醋酸钠（醋酸钠16.4g或三水醋酸钠27.2g 配成1000mL）。
5. 水合茚三酮试剂：1.1g茚三酮放到烧杯中，加入15mL正丙醇，摇匀，溶解，后加入30ml正丁醇和60ml乙二醇，混匀，再加9mL pH5.4醋酸缓冲液，混匀。
保存于棕色瓶中，冰箱保存，适用期限10天。
四、操作步骤1. 标准曲线的绘制以下表所示量从5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液中分别取溶液并在每个试管中加蒸馏水至2mL，对照加2mL 蒸馏水，后在各试管中加入3mL 水合茚三酮试剂和0.1mL 1%抗坏血酸，摇匀。
盖上试管塞，于沸水中加热15分钟，取出后搅拌冷却15分钟。
冷却后的有色溶液中加无水乙醇至10mL，在波长580nm 处测吸光值，以铵态氮浓度（μg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。
铵态氮和硝态氮测定方法!!!---副本
铵态氮和硝态氮测定方法---副本铵态氮测量方法（2mol•L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法）1）方法原理2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。
土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
2）试剂（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。
（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O，化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4•12H2O，化学纯）31.8g和52.5g•L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。
（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O，化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100mL 混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。
（5）2.5µg•mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg•mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg•mL –1的标准溶液备用。
3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。
4）分析步骤（1）浸提称取相当于10.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g，置于150mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。
植物体内硝态氮含量的测定
原理
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应， 生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在 碱性条件下（pH>12）呈黄色，最大吸 收峰的波长为量呈正比，可直接比 色测定。
材料、仪器与试剂
植物材料：菠菜 仪器：分光光度计；天平（感量0.1 mg）； 试管；刻度吸量管0.1 ml、0.5 ml、5 ml、10 ml各1支；50 ml容量瓶；小漏斗（ø 5cm）3个； 玻棒；洗耳球；水浴锅；封口膜；7 cm 定量 滤纸若干；
• 在标准曲线上查得或用回归方程计算出 硝态氮的浓度，再用以下公式计算其含 量。 V NO3 -N含量= (C× 1000 )/W • 式中 C—标准曲线上查得或回归方程计 算得NO3- —N浓度； • V—提取样品液总量； • W—样品鲜重。
注意事项：
1、一定不要将5%水杨酸-硫酸溶液溅到桌面、
实验步骤 1. 标准曲线的制作
（1）吸取500 mg/L 硝态氮的标准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8 ml、10 ml分别放入50 ml 容 量瓶中，用无离子水定容至刻度，使之成10、20、 40、60、80、100mg/L的系列标准溶液。
(2)吸取上述系列标准溶液0.1 ml，分别放入烘干的 试管中，以0.1 ml 蒸馏水代替标准溶液作空白。再 分别放入0.4 ml 5%水杨酸-硫酸溶液，摇匀，在室 温下放置20 min后，再加入8% NaOH 溶液9.5 ml， 摇匀冷却至室温。则显色液总体积为10 ml。 (3)绘制标准曲线：以空白作参比，在410 nm 波长 下测定吸光度。以吸光度为横坐标，硝态氮浓度 为纵坐标，绘制标准曲线并计算出回归方程。
2.样品中硝酸盐的测定
(1)样品液的制备： 取一定量的植物材料，剪碎混匀， 用天平精确称取材料2 g 左右，放入试管中，加入10 ml 去离子水，用塑料封口，置于沸水浴中提取30 min。到 时间后取出，用自来水冷却，将提取液过滤到25 ml容 量瓶中，并反复冲洗残渣，最后定容至刻度。 (2)样品液的测定： 吸取样品液0.1 ml放入烘干的试管 中，然后加入5%水杨酸-硫酸溶液0.4 ml，混匀后置室 温下20 min，再慢慢加入9.5 ml 8% NaOH溶液，待冷 却至室温后，以空白作参比，在410 nm 波长下测其吸 光度。
植物生理学实验硝态氮
硝态氮在农业生产中的优化应用
研究在不同土壤类型、气候条件和作 物种类下，硝态氮的最佳施用量和施 用方式，以提高农作物的产量和品质 。
VS
探讨硝态氮与其他农业措施（如灌溉 、施肥、种植密度等）的协同作用， 以实现农业生产的可持续发展。
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硝态氮的吸收和运输影响因素
土壤pH值
土壤pH值影响硝态氮的溶解度和 植物对其的吸收，通常在中性土 壤中硝态氮的溶解度和吸收效率
较高。
土壤湿度
土壤湿度影响硝态氮的溶解度和扩 散速率，过湿或过干的土壤都不利ຫໍສະໝຸດ 于植物吸收硝态氮。光照强度
光照强度影响植物的光合作用和呼 吸作用，从而影响植物对硝态氮的 吸收和利用。
详细描述
硝态氮不仅为植物提供营养，还与植物激素共同调节植物的生长和发育过程。例 如，硝态氮可以影响植物激素如生长素、细胞分裂素等的合成与代谢，进而影响 植物的形态建成和生理生化过程。
硝态氮与植物抗逆性
总结词
硝态氮有助于提高植物的抗逆性。
详细描述
硝态氮对植物的抗逆性具有重要作用，如抵抗干旱、高温、盐碱等逆境条件。硝态氮能够调节植物体内的渗透平 衡、提高抗氧化酶活性等，从而提高植物对逆境的适应能力。此外，硝态氮还参与植物对病原菌的防御反应，增 强植物的抗病性。
04
硝态氮的实验研究方法
硝态氮的测定方法
酚二磺酸法
01
利用硝态氮与酚二磺酸反应生成硝基酚，再将其水解成酚，最
后用分光光度法测定硝态氮的含量。
紫外分光光度法
02
利用硝态氮在紫外光区有特征吸收峰，通过测定吸光度值计算
植物体内硝态氮含量的测定
植物体内硝态氮含量的测定
测定植物体内硝态氮含量的方法可以通过以下步骤进行：
1. 样品准备：选择一定数量的植物组织或器官作为样品，如根、茎、叶等。
将样品收集并保持新鲜。
2. 样品处理：将样品在离子交换树脂柱中进行前处理，使用硝化态氮还原剂将硝态氮还原为氨。
3. 反应体系：将还原后的样品与含有硫酚酸、过硫酸铵等试剂的反应体系混合，形成可测定的化合物。
4. 反应媒介：选择合适的反应媒介来测定反应产生的化合物，如使用紫外光谱法、分光光度法、电化学法等。
5. 检测与测量：使用相应的仪器或设备进行测量和记录，根据每种方法的特点和原理，选择合适的测量方式。
值得注意的是，硝态氮含量的测定方法可能因不同的植物物种和研究目的而有所差异，因此建议在实施前进行相关的文献调研和方法优化。
土壤硝态氮测定方法转氨酶、硝态氮、铵态氮等测定方法
土壤硝态氮测定方法转氨酶、硝态氮、铵态氮等测定方法六、氮含量（硝酸盐、亚硝酸盐、游离氨基酸、铵态氮等）的测定：（2g）样品提取液的提取: 称取新鲜植物组织2g，加入15ml无离子水研磨成匀浆，置于45℃振荡机中摇动浸提（或超声波）lh后用5ml无离子水冲洗干净，然后离心或过滤(如含色素需用活性炭脱色)，滤液备用。
备注（lg的经验）：可溶性糖、可溶性蛋白质、VC等需要研磨提取的简单指标也可以使用此提取液按比例测定。
1硝态氮的测定：标准氮试剂：精称KNO3 0.9021g，溶于少量重蒸无离子水中，并定容至250ml，含N 量为500µgNO3一N／ml。
5％水杨酸一硫酸溶液：称取水杨酸5g，溶于100ml浓H2SO4(比重1．84)中，搅拌溶解后贮于棕色瓶内，冰箱中至多保存l周，最好现用现配。
2mol／L NaOH溶液：称取NaOH 80g放入500ml硬质烧杯中，加入重蒸无离子水200ml，溶解后定容至l000ml。
操作方法标准曲线制作取：50ml容量瓶6只(编号)，依次加入标准氮试剂5、l0、l5、20、25、30ml，用无离子水定容，则成为50、100、l50、200、250、300 ug／ml的氮系列标准溶液；再取干沽50ml三角瓶7只，分别装入上述系列溶液0．2ml，剩下的1只三角瓶加入无离水0.2ml(作为O 点)；然后分别加入5％水杨酸一硫酸溶液0.8ml，混匀静置20--30min(显色)；最后加入2mol／L NaOH溶液l9ml，混匀。
冷却后利用751分光光度计，于410nm下比色，记录光密度(OD)值；并以OD 值为纵座标，以标准氮(0、50、l00、150、200、250、300 ug)为横座标，绘制一条标准曲线(通过原点的直线)。
0.1ml滤液＋0.4ml 5％水杨酸一硫酸溶液，混匀静置20--30min(显色)；最后加入2mol／L NaOH溶液9.5ml，混匀。
硝态氮检测试剂盒(磺胺比色法)
硝态氮检测试剂盒(磺胺比色法)简介：硝态氮是植物最主要的氮源。
植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为土壤氮肥的指标。
测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
Leagene 硝态氮检测试剂盒(磺胺比色法)检测原理是硝酸根还原成亚硝酸根后，与对氨基磺酸和萘胺结合，形成玫瑰红色的偶氮化合物，其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比，以分光光度计测定处吸光度，根据NO 2-反应的标准曲线将A 520换算成NO 2-浓度，再依据上述关系式即可计算出硝态氮含量。
该试剂盒主要用于测定植物组织、血液、组织样本等中的硝态氮含量。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 实验材料：植物组织(大豆、玉米等叶柄)、血液、组织样本等3、 离心管或试管4、 离心机5、 比色杯6、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，剪碎成碎片，加入硝态氮裂解液，剧烈振荡，静置澄清后，上清液即为硝态氮提取液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，保存，用于硝态氮的检测。
编号 名称TC2333 50T Storage试剂(A): NO 2-标准(100μg/ml) 1ml RT 试剂(B): 硝态氮裂解液 500ml RT 试剂(C): NO 2- Assay buffer 500ml RT 试剂(D): 磺胺混合粉剂 10gRT 避光 使用说明书1份③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的硝态氮，可以使用硝态氮裂解液或蒸馏水进行恰当的稀释。
2、配制系NO2-标准溶液：取NO2-标准(100μg/ml)按下表继续稀释：加入物(ml) 1 2 3 4 5NO2-标准(100μg/ml)0.02 0.04 0.08 0.1 0.15蒸馏水0.98 0.96 0.92 0.9 0.85NO2-浓度(μg/ml) 2 4 8 10 153、O2-加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
硝态氮的测定
硝态氮的测定一、引言硝态氮是水体中的一个重要指标，它可以反映水体受到污染的程度。
因此，对硝态氮的测定具有重要意义。
本文将介绍硝态氮的测定方法。
二、硝态氮的含义及影响因素1. 含义硝态氮是指水中存在的NO3-离子和NO2-离子，它们都是植物营养元素之一。
在自然界中，硝态氮通常由微生物通过腐败和固氮作用转化而来。
2. 影响因素硝态氮含量的高低受到多种因素的影响，包括：（1）人类活动：如农业、工业和城市化等活动会导致水体中硝态氮含量增加；（2）降雨量：降雨量越大，土壤中的硝酸盐就越容易被冲刷到水体中；（3）温度：水温升高会促进微生物代谢作用，从而增加硝态氮含量；（4）pH值：酸性环境下，微生物活动减少，从而减少了硝化作用。
三、常见的测定方法1. 纳氏试剂法纳氏试剂法是一种常用的硝态氮测定方法。
它的原理是利用硫酸还原NO3-为NO2-，再用纳氏试剂反应生成深蓝色的化合物。
具体步骤如下：（1）取适量水样，加入硫酸和铁粉，使硝酸盐被还原为亚硝酸盐；（2）加入碘化钾溶液，使亚硝酸盐被氧化为NO2-；（3）加入纳氏试剂，生成深蓝色化合物；（4）测定吸光度，并根据标准曲线计算出水样中硝态氮的含量。
2. UV分光光度法UV分光光度法是一种基于紫外吸收原理的硝态氮测定方法。
它的原理是利用NO3-在紫外区域有吸收峰，通过测定吸光度来计算NO3-的含量。
具体步骤如下：（1）取适量水样，在pH值为2左右时加入NaOH溶液和EDTA溶液，使水样中只有NO3-存在；（2）将水样置于紫外分光光度计中，测定吸光度；（3）根据标准曲线计算出水样中硝态氮的含量。
3. 离子色谱法离子色谱法是一种高灵敏度、高分辨率的硝态氮测定方法。
它的原理是利用离子交换柱将NO3-和NO2-分离，并通过检测器检测它们的响应信号来计算含量。
具体步骤如下：（1）取适量水样，加入NaOH溶液，使水样中只有NO3-存在；（2）将水样经过离子交换柱，分离出NO3-和NO2-；（3）通过检测器检测它们的响应信号，并根据标准曲线计算出水样中硝态氮的含量。
硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)
硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)产品：硝态氮是植物最主要的氮源。
植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为土壤氮肥的指标。
测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
Leagene 硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)检测原理是在强酸条件下，NO 3-与水杨酸反应生成硝基水杨酸，后者在碱性条件下呈黄色，其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比，以分光光度计或酶标仪测定410nm 处吸光度，根据NO 3-反应的标准曲线将A 520换算成NO 3-浓度，再依据上述关系式即可计算出硝态氮含量。
该试剂盒主要用于测定植物组织、血液、组织样本等中的硝态氮含量。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 实验材料：植物组织(大豆、玉米等叶柄)、血液等3、 浓硫酸4、 离心管或试管5、 离心机6、 比色杯7、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①植物样品：取植物组织，清洗干净，擦干，剪碎成1-2mm 的碎片，加入蒸馏水，煮沸30min ，冷却至室温，中速滤纸过滤，补水至，即为硝态氮提取液。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，编号 名称TC2337 100T Storage试剂(A): NO 3-标准(500μg/ml) 1ml RT 试剂(B): 水杨酸3g RT 试剂(C): NO 3- Assay Buffer 500mlRT使用说明书1份用于硝态氮的检测。
③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的硝态氮，可以使用硝态氮裂解液或蒸馏水进行恰当的稀释。
2、配制水杨酸工作液：按水杨酸：浓硫酸=的比例，把水杨酸溶解于浓硫酸，4℃避光保存，1周有效。
注意：浓硫酸为强酸，请小心操作。
3、配制系NO3-标准溶液：取NO3-标准(500μg/ml)按下表继续稀释：加入物(ml) 1 2 3 4 5NO3-标准(500μg/ml)0.002 0.004 0.008 0.016 0.024蒸馏水0.098 0.096 0.092 0.084 0.076NO3-浓度(μg/ml) 10 20 40 80 1204、NO3-加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
植物生理学实验植物组织中硝态氮测定
数据记录与处理
数据记录
在实验过程中，及时、准确地记录每个样品硝态氮的提取量和测定值。
数据处理
根据记录的数据，进行统计分析，计算出每个样品硝态氮的含量，并得出实验结果。
04
结果分析
数据整理与表格制作
总结词
数据整理与表格制作是实验结果分析的基础，需要将实验数据整理成表格，以便进行后 续分析。
详细描述
06
参考文献
参考文献
总结词
该文献提供了植物组织中硝态氮测定的基本原理和实验步骤。
详细描述
该文献详细介绍了硝态氮在植物组织中的存在形式、测定硝态氮的意义以及实验操作流程，包括样品采集、处理、测 定方法等。该文献还强调了实验过程中的注意事项和误差控制，为实验者提供了重要的参考依据。
总结词
该文献重点介绍了植物组织中硝态氮测定的最新技术和方法。
硝态氮是植物必需的营养元素之一， 对于植物的生长和发育具有重要作用 。
提高植物抗逆性
硝态氮的适量供应可以提高植物的抗 逆性，如抗旱、抗寒等。
硝态氮的测定方法：酚二磺酸法
酚二磺酸法是一种常用的硝态氮测定方法，其原理是利用酚二磺酸与硝 态氮反应生成硝基酚，然后通过比色法测定硝基酚的含量，从而计算出 硝态氮的含量。
在实验结束后，将实验数据整理成表格，包括实验组和对照组的数据，以及每个样品的 测定值。表格应包含实验日期、样品名称、测定值等必要信息，以便后续分析和比较。
结果计算与误差分析
总结词
结果计算与误差分析是实验结果分析的重要环节，需要计算测定结果的平均值、标准差等统计指标， 并分析误差来源。
详细描述
根据整理好的数据，计算实验组和对照组的平均值、标准差等统计指标，分析误差来源。误差可能来 源于实验操作、仪器误差、样品处理等多个方面，需要根据实际情况进行分析和评估。
植物组织中硝态氮含量的定量测定
植物组织中硝态氮含量的定量测定植物组织中硝态氮含量的定量测定是研究植物生长发育过程中氮代谢调节的关键指标之一。
硝态氮是植物体内氮代谢过程中的重要中间产物，在植物体内具有重要的生理作用，能作为植物施肥效果评估的重要参考指标。
目前植物硝态氮含量的常规检测方法有色谱法、分光光度法、酶联免疫吸附法等。
1. 色谱法色谱法是比较常用的植物硝态氮含量检测方法之一。
该法主要分为气相色谱和高效液相色谱两种。
气相色谱法主要是利用气相柱进行分离，并以热导检测器检测硝态氮的含量。
使用气相色谱方法检测硝态氮含量时，需要样品经过完全的蒸馏和净化，才能避免样品中其它杂质的影响。
高效液相色谱法主要是利用液相柱进行分离，并以紫外检测器检测硝态氮的含量。
该方法比气相色谱法具有更高的准确度和灵敏度。
2. 分光光度法分光光度法是另一种常用的植物硝态氮含量检测方法。
该方法主要利用硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐，然后利用还原亚硝酸的反应与二苯胺形成偶氮染料，并通过分光光度法检测其光密度变化来计算硝态氮的含量。
分光光度法比较适用于样品数目较小的试验。
3. 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种快速、敏感的植物硝态氮含量检测方法。
该方法主要利用硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐，并与抗硝酸盐多克隆抗体结合，然后再用辣根过氧化物酶与抗硝酸盐抗体结合，最后通过比色法检测抗体和其结合的亚硝酸盐的含量来计算硝态氮的含量。
综上所述，植物组织中硝态氮含量的定量测定需要根据实验的要求和对象选择不同的检测方法，以便获得准确、可靠的试验结果，为植物生长发育、施肥管理等提供科学依据。
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二、植物体内硝态氮含量的测定
硝态氮是植物最主要的氮源。
植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。
测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
（一）原理
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。
（二）仪器与用具
（1）722型分子光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20cm326支；（4）刻度吸管0.1cm3. 0.5cm3. 5cm3. 10cm3各1支；（5）容量瓶50cm38个；（6）容量瓶25cm33个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。
试剂：
500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200cm3。
5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100cm3,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。
置冰箱保存一周有效。
8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。
（三）实验步骤
1. 标准曲线的制作
（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1cm3. 2cm3. 3cm3. 4cm3. 6cm3. 8cm3. 10cm3. 12cm3分别放入501cm3容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。
（2）吸收上述系列标准溶液0.11cm3，分别放入刻度试管中，以0.11cm3无离子水代替标
准溶液作空白，再分别加入0.4cm3水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH 溶液9. 51cm3摇匀冷却至室温，显色液总体积为101cm3。
（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。
以NO3-N浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品中硝酸盐的测定
（1）样品液的制备，取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2-3克分别放入三支刻度试管中，加入10cm3无离子水，用玻璃塞封口，置入沸水浴中提取30分钟，到时间后取出，用自来水冷却，将是取液过滤到25cm3容量瓶中，并反复冲洗残渣，最的定容至刻度。
（2）样口液的测定吸取样品0.1 cm3分别于三支刻度试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4 cm3，混匀后置室温下20分钟，再慢慢加入9. 5 cm3 8%NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410nm波长下测期吸光度。
在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3--N浓度，再用下公式计算其含量。
旱作物组织中硝态氮的测定——硝酸试粉比色法
1. 目的
作物根系从土壤吸收的硝态氮，一部分很快参加蛋白质的合成但仍有相当数量的硝态氮是在向地上部分转运途中逐步转化的。
特别是某些旱作物叶柄硝态氮的水平，在一定范围内反映了当时体内的氮素营养水平和土壤供氮状况。
定期检测作物适当部位的硝态氮含量的水平，可以为作物的施肥和促控措施等提供一些依据。
本方法是基二锌在酸性条件下产生氢气，将硝酸根还原成亚硝酸根，亚硝酸根对氨基苯磺酸和a-萘胺作用，形成红色偶氮染料，在一定范围内可按颜色（玫瑰红）深浅估测NO3-N含量。
灵敏度范围为0.5-20ppm，其反应一定要在PH5左右条件下进行，在碱性条件下不显色或显色不明显。
2. 材料和试剂
（1）硝酸试粉称硫酸钡50g，分成数份，分别与硫酸锰（Mnso4?H2o）5g，锌粉1g，对氨基苯磺酸2g，a-萘1g，在研钵中研细混匀，最后与37. 5g柠檬酸一起研磨均匀，贮于暗色瓶中，防潮避光。
此试粉灰白色，若变为粉红色，则不能使用。
（2）PH5柠檬酸缓冲液称取化学纯柠檬4. 31g，柠檬酸钠6. 86g，溶于500ml蒸馏水中（溶液必须新鲜酸置）。
（3）硝态氨标准溶液称取7. 22g分析纯硝酸钾加水定容到1000ml，即为1000ppmNo2-N。
3. 方法与步骤
（1）取样清晨在待测田块中，选取有代表性的植株10-20株的敏感部位，用湿布擦净，剪碎，榨汁备用。
（2）测定于15ml刻度试管中，加入5mlPH5. 0的柠檬酸缓冲液，滴入一滴组织汁液，摇匀加入0.2g硝酸试粉，塞紧，纵向摇动试管1分钟（200次/分），静置15分钟后，与硝态氮试管法比色卡或标准色阶溶液进行比较，目测硝态氮ppm数。
（3）结果计算
其中：V1-显色溶液的ml数；
V2-所取汁的ml数（按每毫升20滴计）。