中药栀子中环烯醚萜苷类有效成分的综合色谱分析.pptx

有效部位
198911.375 198174.203
198542.789
63.256
4.973 4.973
栀子药材中栀子苷含量为39.086mg/g，
栀子有效部位中栀子苷含量为591.733mg/g。
栀子苷得率为80.396%。
1.色谱条件：
项目 色谱柱
载气 进样量
柱温
检测器
条件
SPB-1(30m×0.25mm×0.25μm) 毛细管柱
条件 ODS(150mm×4.6mm，5μm) 乙腈-1%醋酸水溶液(15:58，V/V)
1mL/min 238nm 室温 20μL
2.实验步骤
配制 溶液
进样及 记录
线性 关系 考察
(1)溶液配制：
供试品：
要求：以流动相为溶剂，配制为相当于原药材2mg/mL的浓度。 方法：(1)量取粗提液0.24mL(100g药材浓缩为120mL溶液)于 10mL容量瓶定容，取1mL于10mL容量瓶定容。
高纯氮(柱前压7Pa，分流比30：1)
0.5μL
进样口温度：230 ℃； 程序升温(初始为50℃，恒温3min，变为
40 ℃升温至230 ℃后，恒温5min) FID检测
氢焰离子化检测器 选择性检测器 质量型检测器
2.实验步骤
配制 溶液
进样及 记录
样品 鉴定
(1)溶液配制：
对照品
内标法：
由于进样量很 小(0.5μL)，
供试品
要求：以DMF为溶剂，正丁 醇为内标物，配制含有效部 位0.1g/mL和正丁醇 0.5mg/mL的浓度。
方法：量取0.618mL正丁 醇于10mL容量瓶定容，再 以10mL容量瓶，以1：10 的比例稀释1次，取1mL于 10mL容量瓶，称取 0.9846g有效部位粉末加 入同一容量瓶，加入适量 溶剂(不超过刻度线)，振荡 使固体溶解后，定容。
∴以10mL容量瓶配制，即理论上需量取 0.024mL粗提液。 思路：量取0.24mL(1mL的移液吸管)，以 1：10的比例稀释一次
∴以10mL容量瓶配制，即理论上需量取 1.062mg有效部位粉末。 思路：称取0.1062g，以1：100的比例稀 释一次
1. 提取 及纯化
2.薄层色 谱鉴别栀 子苷
3.HPLC 对栀子苷 含量测定
4.GC检测 残留溶剂
熔点：163℃～164℃
溶解性：易溶于水，溶于乙醇， 不溶于石油醚。
性状：环烯醚萜苷类化合物，对 α-萘酚、羟肟酸、三氯化铁呈正 反应。白色结晶。
药理作用：栀子苷具有缓泻、镇 痛、利胆、抗炎、治疗软组织损 伤以及抑制胃液分泌和降低胰淀 粉酶等作用。
合格
通道 2 156.700 706.800 975.300 938.800 0.2217 1.039
合格
哪些因素有可能影响到栀子苷的得率？
栀子的前 处理
提取的方 法
栀子的采 集时间
流动相的 选择
提取液的 选择
∴以10mL容量瓶配制，即理论上需量取 2.4mL粗提液。
∴以10mL容量瓶配制，即理论上需称取 0.1062g有效部位粉末。
栀子苷浓度
(μg/mL)
10 20 40 60 80
峰面积
28396.699 30138.900 63945.852 63118.398 122630.797 121273.369 184917.078 187950.188 254531.688 252989.047
平均峰面积 29267.800 63532.125 121952.083 186433.633 253760.368
大孔树脂吸附法具有吸附范围广，吸附容量大，洗 脱容易，反复使用等特点，对栀子苷吸附能力较高， 其纯化产物栀子苷含量高。方法简单、可靠。
1.薄层板的铺制：硅胶-CMC 板的铺制
2.溶液的配制： 以羧甲基纤维素Na为黏合剂
供试品：
要求：以50%甲醇为溶剂，配制为相当于原药材0.2g/mL的浓度。 方法：(1)量取粗提液2.4mL(100g药材浓缩为120mL溶液)于10mL 容量瓶定容。
色泽：白色、类白色或浅黄色。
口感与气味：无味
1.提取：以50%乙醇为溶剂，回流提取有效成分
栀子药材(100g)⇒粗提物(120mL)
2.分离提纯：柱色谱法
固定相：D101型大孔吸附树脂 流动相：水（自来水） 原理：以吸附为主
3.结果
粗提物(120mL)⇒有效部位(5.3104g)
实验结果表明——
(2)称取有效部位粉末0.1056g(有效部位5.3014g) 于10mL 容量瓶定容。
对照品：
要求：以乙醇为溶剂，配制成约4mg/mL的浓度。
3.薄层色谱法鉴别：
粗提液 对照品 有效部位 平均值
Rf 0.698 0.690 0.690 0.693
1.色谱条件：
项目 色谱柱 流动相 流动相流速 检测波长 柱温 进样量
(2)样品鉴定：
按照上述色谱条件进行检测，得到供试品溶液和对照品溶液的气相色谱图。
3.结果计算
A 供试品乙醇
A 供试品正丁醇
A 对照品乙醇
A 对照品正丁醇
A / A 供试品乙醇
供试品正丁醇
A / A 对照品乙醇
对照品正丁醇
结果
通道 1 1285.200 7433.500 3817.100 5137.750 0.1729 0.7430
导致相对误差 会很大。所以 以内标物为基 准以比值的方 式进行数据处 理，可以提高 准确度。
要求：以DMF为溶剂，正丁 醇为内标物，配制含乙醇和 正丁醇均为0.5mg/mL的浓 度。
方法：量取无水乙醇 0.633mL、正丁醇 0.618mL，以10mL容 量瓶按照1：10的比例 稀释2次，再以10mL 容量瓶定容。
保留时间 (min) 4.977 4.982 4.973 4.973 4.973 4.973 4.973 4.973 4.965 4.965
3.结果
溶质
峰面积
平均峰面积
ห้องสมุดไป่ตู้
栀子苷浓度
(μg/mL)
保留时间 (min)
粗提液
238687.406 253219.643
245953.525
78.172
4.973 4.973
(2)称取有效部位粉0.1069g(有效部位5.3014g) 于100mL容 量瓶定容，取1mL于10mL容量瓶定容。
对照品：
要求：以流动相为溶剂，精密配制成约10μg/mL、20μg/mL 、 40μg/mL 、60μg/mL 、80μg/mL的浓度。
(2)线性关系考察
编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10