黑胸散白蚁Reticulitermes+chinensis+Snyder体内几种与菊酯类代谢有关的酶活性研究
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ＮａＫ Ａ Ｐ ｓ ； － Ｔ ａ ｅ － － Ｔ ａｅ ＭｇＡ Ｐ ｓ
收稿 日期 ： ０ ００－６ ２０－３２ 基金项 目： 成都市城市建设委员会资助课题
作者简介： 谭速进（９８ １５ 一）男， 重庆市人， 在职博上生 高级上程师， 从事城市害虫防治研究
万方数据
浙 仁 大 李 含 银（ 与 命 学 农业 牛 科 版｝
发现菊醋类杀虫剂的毒理机制与昆虫神经系统 中的 Ｎ － － Ｔ ａ ａ Ａ Ｐｓ Ｋ ｅ有着密切关系［． － ＇ Ｎ Ｋ １ ａ Ａ Ｐｓ 在昆虫的神经活动中起着离子泵的作 Ｔａ ｅ 用， 以维持神经膜内外两侧的电位差， 形成膜电 位， 使得神经细胞能够传导冲动［． ］ ’ 我们没有在 黑胸散白蚁体内检测到Ｎ － － Ｔ ａ 活性， ａ Ａ Ｐｓ Ｋ 。 但 却发现突轴小体中Ｃ － Ｔ ａ ａＡ Ｐｓ ｅ的活性特别高， 估计在黑胸散白蚁神经系统中该酶主要起着离 子泵的作用． 目 对白蚁体内代谢酶的研究较少， 前， 国内 几为空白．国外仅见Ｄ ｖ 等１ ａｉ ｓ ｓ ］ 对欧美散白蚁 （ｅｃ ｉｒ ｅ ｆ ｖ ｅ） Ｒｔｕｔｍ ｓ ｉ ｓ 工蚁 的＃ Ｍ， ｕ ｉｌ ｅ ｌｐ ａ ａ Ｉ ｋｒ ｔ ａ ａ 等［对象白蚁（ｏｔ ｅ ｅ ｆ ｍ ａｕ） ６ 」 Ｃｐ ｔｍ ｓ ｓ ｓ的丙酮 ｏｒ ｏ ｎ ｒ
ｕ ｔ ｎｓ ｎｎｉＳ ｙｅ ｗ ｓ ｗ ｅ ｔｏｅ ｔｅ ｃｐｉｅ ａ ｓ Ｍｕｃ ｄｒ ｓｃ Ｌ ａｄ ｌｔｉ ｌｅ ｅ ｃｉ ｕ ｎｄｒ ｂｔｅｎ ｓ ｏ ｈ ｓｓ ｔ ｌｓ ｉ ｏ ｉｎ ｈ ｅ ｓ ａ ｅ ｈ ｆ ｕ ｅ ｂ ｔ ｎ ｆ ｓ ｏ ｅ ｉ ． Ｈｅｏ ． ｒ ａ ｎ ｔａ ｎ ｉｈｓ ａｍｇｒ Ｈ ｂｅ． ｔ ａｔ ｉ ｌ ｅ ｏ ｍｆ ｗ ｓ ｎ ｉ ｎｌ ｌ ｅ ｔａ ｔａ ｏ ｓｓｃｔ ｔ ｓ ａ ｓ ｒ ｉ ａ ｎｒ Ｂ ｔｅ ｉｔ ｅ ｌ ｏ ｓ ｉｃ ｔ ｏ ｒ ｎ ｔ ｕｃｐｉｅ ｉ ｏ ｅ ｕ ｕ ｈ ｃ ｖ ｙ ｖ ｆ ａ ｉ ｆａ ｙ ｇ ｗ ｈ ｈ ｆ ｂ ｔ ｎ ｆ ｒ
ＭｇＡ Ｐｓ； Ａ Ｐｓ － Ｔ ａ Ｃ －Ｔ ａ ｅ ａ ｅ
中 图分 类 号
０９ ９ ９ ＇ ： ６ ６ ． ５ ０９ ５ ， ９ 立献 标 识 码 ． Ａ
Ｔ Ｎ －ｎ， Ｊｎ ｕ＇ Ｔ Ｎ ａ－ｏｇ， Ｌ － ｎ＇ Ｔ Ｎ Ｚｅ－ｕ＇ Ｄ ｐ． Ｐａｔ Ａ Ｓ ｊ ＇ Ｈ ｕ－ ｓ， Ｘ ｏｈｎ＇ Ｄ ｉ ｆ ｇ， Ｇ ｎｈａ（． ｔ ｏ ｌ ｕｉ Ｅ ｈ Ａ ｉ Ｕ ｎ ａ Ａ ｈ １ ｅ ｆ ｎ Ｐｏｃｏ， ｊｎ Ｕ ｉ ， ｎｚｏ ３０２． ｎ； Ｌ ｅ ｄｍ ｏ Ｓ ｈａ Ｕ ｉ ．ｈｎｄ ｒｅｉ Ｚｅａｇ ｖ Ｈａｇｈｕ ０９ Ｃ ｉ ２ ｉ Ａａｅ ｙ ｉ ｕｎ ｖ Ｃ ｅ ｕ ｔｔｎ ｈ ｉ ｎ ． １ ｈ ａ ． ｃ ｆ ｆ ｃ ｎ ． ｇ ６０６． 、； ． ｎｈｉ ｉｔｏ Ｅｔｍ ｌ ｙ ＡａｅｉＳｕａＳａｇａ ２０２， ｎ） １０４ Ｃ ｈ ３ ＳａｇａＩｓ ｕ ｆ ｏｏ ｇ ｏ ｃ ｍａ ｃ，ｈｎｈｉ ０５ Ｃｉ ｈ ｎ ｔｅ ｎ ｏ ｆ ｄ ｔ ｂ ０ ｈａ
曾报道澳大利亚棉铃虫种群对菊酷类的抗性机 制主要表现为多功能氧化酶代谢 ， 神经敏感性 降低和表皮穿透性降低 ， 而与酷酶代谢关系不
酶源制备参照谭维嘉等［的方法， ５ 头 ， ７ 取 ０ 黑胸散白蚁工蚁置于玻璃匀浆器中， ３ 加人 ｎ ｉ ｌ
０ １ ｌ ． ｏ Ｌ的冰凉磷酸缓冲液 （ １ Ｔ ｉｎ ｍ ／ 含 ０ ｒｏ ｏ ｔ
ｓ ｌ ｒｌ ｏ Ｎ － ＡＴ ａｅ ｏ ｔｅ ｅ ｃ ｉ ｏｈｒ ｅｔ ｉ ａ ｏ ｆ Ｋ－ Ｐ ｓ ａ ｎ ｓｍ ｐａｅ ｔｅ ｉｓｃ ｍｉｒ ｅ ａ ｓ ｈ ａ ｌ ｎ ｎ ｓ
Ｋｙ ｒｓ Ｒｔｕｔｍ ｓ ｅｓ Ｓｙｅ； ｖｙ ｅｚｍ ， Ｅ ； ； Ａ Ｐｓ， ｅ ｗ ｄ； ｉｌｅ ｅｃｉｎｓ ｄｒ ａｔｉ ｏ ｎｙ ｅ Ｃｒｓ ｍ ｏ Ｃ－Ｔ ａ ｏ ｅｃ ｉｒ ｈ ｉ ｎ ｎ ｃ ｔ ｆ ｉ ａ ｆ ａ ｅ
巾国科学院 上侮 昆血研究所 ． 上海 ２０２） ０ ０５
摘
要 ： 究了黑胸散 白蚁（ ｅｃｌｅｎｓ ｅｓ Ｓ 叫ｅ） 内与 菊醋类杀虫剂代谢有关的搜酸酷酶 研 Ｒｔｕ ｔ ＞ ｄｍ ｎｉ ｏ ｒ 体 ｉ ｉｒ ｅ ｒ ｓ 全虫组织提取得到的 突触小体 中检 浏不到 Ｎ － ａＫ
（ａ ｓ， 功能氧化酶（ ｆ ， ｕ － Ｔ ａ 和 Ｃ － Ｔ ａ 等几种代谢酶的活Ｎ 结果表明， Ｃｒ ）多 Ｅ ｍｏ Ｎ － Ａ Ｐｓ ） Ｋ ｅ ａＡ Ｐｓ ｅ ｆ 黑胸嵌 白
￣ ６｝ 〔 ６
Ａ ｓ ａｔ Ｔ ｅ ｔ ｉ ｏ ｓｍ ｉ ｏｔ ｔ ｚｍ ｓ Ｒ ｔｕｔ ｍ ｓ ｅ ｉ Ｓ ｙ ｅ ｃｎｅｎｄ ｔ ｂｔ ｃ： ａ ｉｔ ｆ ｅ ｒ ｎ ｅ ｙ ｅ ｏ ｅｃｌｅ ｅ ｃｍ ｖ ｓ ｄｒ ｃｒｅ ｗ ｈ ｒ ｈ ｃ ｖ ｙ ｏ ｍｐ ａ ｎ ｆ ｉ ｉｒ ｈ ｓ ｎ ｏ ｉ
醚， ２ Ｃ 于 ８ 反应 ３ ｍｉ， 。 ５ １ ｌ ０ ｎ 用 ． ｍ Ｌ ｏ Ｌ的 ｍ ／ Ｈｌ Ｃ 终止反应． ｍ ５ Ｉ氯仿萃取， ３３ 取 ． ｌ氯仿 ｍ 层， 加人 ３ ， ｍ ｌ Ｎ Ｏ 取 Ｎ Ｏ 层 ｍｌ ０ ５ ／ ａ Ｈ， ａ Ｈ ． ｏ Ｌ 于 ４０ 处比色． ０ ｍｎ ｉ １５ Ｔ ａｅ活力的测定 ． Ａ Ｐ ｓ
ｈｕ ｆ ． ｐｒ ｈｏ ｓ ｌ ｂ ｒ ｓ ａｌａｐｅ ｔ ｃ ｔ ｌ ｇ Ｒｔｕｔ ｍ ｓ ｅ ｉＳｙｅ Ａ ｏｓ ｌ Ｓ ｙｅ ｒｄ ｃｕ ｅ ｏ ｂ ｐｌｄ ｏ ｒ ｌ ｏ ｅｃｌｅ ｅｃｉ ｎｓ ｄｒ ｃ ｅｙ ｏ ｔ ｉ ｏ ｄ ｅ ｎ ｙ ｉ ｏ ｏｉ ｆ ｉ ｉｒ ｈ ｓ ｎ ． ａ ｎ ｎ ｎ
浙详大李母报〔 业 生 科 版 ２６（６） ６０１－ ６０６， ０００ 农 与 命 学 ） ： ２
ｉ ｅ ｅ Ｊ ｕ ｎ ｌ Ｚ ｅｉｎ Ｕｎｖｒｉ （ ｒ ．氏 Ｌｆ Ｓ ｔ） ｏ ｒ ａ ｏ ｈ ｊ ｇ ｉｅｓ ｙ ｉ ｆ ａ ｔ Ａｇ ｃ
文章 编号 ：０ ８９ ０ （０ ０ ０－６ １０ １ ０－２ ９２ ０ ）６０ ０－６
Ｓｕ ｙ ｔｅ ｔ ｉ ｏ ｓｍｅ ｚｍｅ ｃｎｅｎｄ ｔ ｐ ｒｔｒｉｓ ｔｂ ｌ ｍ ｓｂｅｒｎａ ｔ ｍｉ ｔｄ ｏ ｈ ａ ｉ ｔ ｆ ｅ ｙ ｓ ｃｒ ｅ ｗ ｈ ｅｈｏ ｍｅａ ｏｉ ｉ ｕ ｔｒａ ｅｎ ｒ ｔ ｎ ｃ ｖ ｙ ｏ ｎ ｏ ｉ ｙ ｄ ｓ ｎ ｅ ｅ
（ｅｃｌｅ ｅ ｃｉ ｎ ｓ ｄｒ ． ｒａｏＺ ｅａｇ ｉ ｒｔ （ ｇｉ 乙Ｌ ｅ ． ， ００２（）６１ Ｒｔｕｔ ｍ ｓ ｎ ｓ Ｓｙｅ） ｕｎｌ ｈｊｎ Ｕ ｖ ｓｙ ｒ ｉ ｉｒ ｈｅｉ ｎ Ｊ ｏ ｆ ｉ ｎ ｅｉ Ａ ｃ ｉ Ｓｉ ２０ ． ６ ： ｆ ｃ） ６ ０
Ｘ １０， －０）匀浆． 匀浆液在 １ ００ ｇ４ ０ ０ Ｘ ， ｀以下离 Ｃ
心 ２ ｍｉ 取上清液作为酶原． ７２ ０ ｎ ， 在 ５Ｃ紫外光
分光光度计中分析酶活力． 。乙酸蔡醋酶活力测定参照 Ａｐｒ＂ 一 ｓ ｅ 的方 ｅＥ
大， 但张友军１等的研究却表明， ： ７ 我国棉铃虫种
群对菊酚类的抗性涉及多功能氧化酶代谢、 醋 酶代谢及神经敏感性降低等多种因素．近年来
ｐｒ ｈｏ ｍ ｔ ｏｓ ｗ ｓ ｉ ｉｖｒ． ｅ ｌ ｓｏ ｅ ｔａ ｔ ａ ｉｔｏ Ｃｒｓ ｉ ｏ ｅｃ ｙｅ ｒ ｄ ａ ｌ ａ ｓ ｄ ｄ ｉｏ Ｔ ｒ ｕｓ ｗ ｄ ｔ ｃｖ ｙ ａ ａｄ ｉＲｔ－ ｔ ｉ ｅｂｉ ｍ ｔ ｅ ｎ ｕ ｔ ｈ ｅ ｔｈ ｓ ｈ ｈ ｔ ｉ ｆ Ｅ ｎ ｎ ｎ ｉ ｅ ｆ
蚁体 内致酸醋醉 活性较高 ， 多功能氧化醉活性较低 Ａ Ｐｓ Ｔａ ｅ活性 ， ａＡ Ｐｓ 而Ｃ － Ｔ ａ ｅ活性却很 高． 据此认为， 在黑胸散 白蚁体 内可能存在与 Ｎ ａ泵具有相似作用 的 Ｃ 泵， ａ 在其神经活动 中起 着重要作用．
关 键 词
黑胸散白蚁； 酪活性； 致酸醋酶（ａ ｓ； Ｃ ｒ ） 多功能氧化畴（ ｆ） Ｎ － － Ｔ ａｅ Ｅ ｍ ｏ ； Ｋ Ａ Ｐｓ ａ
法・反应液中含有 １ ｐ ０ Ｌ的酶液， ｍ Ｘ１＇ ３ 工１ ０ － ｍｌ ｏ Ｌ的磷酸缓冲液（ ７０ ， ｐ ４ １－ ／ ｐ ．）５ ． Ｘ ０ Ｈ ０ Ｌ
ｍｌ ｏ Ｌ的 ａ乙酸蔡醋液（ ５ ０ ＇ ／ 含 Ｘ － Ｍ Ｗ 的 １ Ｏ 毒扁豆碱）在 ３ Ｃ ， ７ 水浴中保温 ３ ｍ ｎ 加人 ０ ， ｉ ０ ５ ． Ｌ显色剂，５ ｍ １ ｍｎ后在 ６０ ｉ ０ｎ ｍ处比色， 用 ａ禁酚作标准曲线， 一 １４ 多功能氧化酶（ ｆ） ． ｍ ｏ活力测定 酶源制备同Ｃｒ ， ａ ｓ但白蚁增加到 １。 Ｅ ５ 头， 离心时间为 １ ｍｎ ０ ．多功能氧化酶活力测定参 ｉ
酸源自文库氢酶系做过研究．
照Ｓａｇ ｈ ｈｎ〕 ｈｎ Ｃ ｉｃｅｃ ｈ－ ＇ 等的方法， 取酶液 １ ， ｍ Ｌ 加人 ２５ Ｎ Ｄ Ｈ， ｍ ， ４ ｌ ． ｇ Ｐ １ ００ ｍ ／ ｍ Ａ ｌ ． ｏ Ｌ磷酸 缓冲液（Ｈ ．）１ ｔ， ｍ ｌ ｐ ７０，０ ０１ ／ ｄ ． ｏ Ｌ对硝基苯甲
利用该类药剂对白蚁进行控制， 有必要对其作 用机理进行深人研究． 其中， 体内有关代谢酶的
研究是最基础的工作
散白 Ｒｔｕｔｍ ｓ ｅ ｉ ｎｄｒＩ蚁． 蚁（ｅｃ ｉｒ ｅｃｉｎｓ ｅ） ｉｌ ｅ ｈ ｓ Ｓｙ ｎ
１３ 梭酸醋酶（ａＥ ） ． Ｃ ｒｓ活性的测定
目 前对菊醋类杀虫剂有关的代谢酶研究较 多的是家 蝇 （ ． ｄｍ ｓｃ Ｌ ） Ｍｕ ａ ｅｉ ． 和棉 铃虫 ｓ ａ ｔａ ｃ （ ｅｏ ｉ ｒ ｉｒ Ｈ ｂｅ） Ｈ ｌｔｓ ｇ ａ ｎ 等．Ｇ ｎｉ 等［ ｉ ａ ｅ ｕ ｒ ｈ ｍ ｕｎ ｇ Ｉ ｎ ］
ｍｎ． ｅ ｕ ｉｐｅｔａＣ － Ｔ ａ ｏ ｔｅ ａｔ ｏ ｅ ｅｃｌｅ ｅｃｉｎ ｓ ｄｒ ｐ ｙ ｉ） Ｔ ｒ ｌ ｍ ｌｓ ｔ Ａ Ｐｓ ｎ ｓ ｐｏ ｍ ｏ Ｒｔｕｔ ｍ ｓ ｅ ｉＳ ｙｅｍ ｙ ａ ｈ ｅ ｔ ｉ ｈ ａ ｓ ｅ ｈ ｙ ｎ ｓ ｆ ｉ ｉｒ ｈ ｓ ｎ ｎ ａ ｌ ａ
ｔｉ ｏ Ｎ － －Ｔ ａ ｃｕ ｎｔ ｄｔｔ ｏ ｔ ｓｎｐ ｓ ｅ Ｒｔｕｔｍｓ ｅｓ Ｓｙｅ， ｉｔ ｆ Ｋ Ａ Ｐｓ ｏｌ ｏ ｂ ｅ ｃ ｄ ｈ ｙａｔ ｏ ｏ ｅｃｌ ｒ ｅｃｉｎｓ ｄｒ ｂｔ ｖｙ ａ ｅ ｄ ｅ ｅ ｅ ｎ ｅ ｏ ｍ ｆ ｉ ｉ ｅ ｈ ｉｎ ｎ ｕ ｍ ｃ ｈ ｈｒ ｖｙ ａ Ｔ － ａ ｄｔ ｍｎｄ ｔ ｓ ｅ ｍ ｒ ｅ ． １｀ ｍ ｌ ｍ ・ ｕｈ ｅａｔｉ ｏＣ－ Ｐ ｗｓ ｒ ｉ ｏ ｈ ａ ｍ ｂ ｎ ａ ２１Ｘ （ ｏ ｆ・ ｇ ｉ ｇ ｃ ｔ ｆ Ａ ｉ ｅ ｅ ｅ ｎ ｍ ｅ ａ ｔ ６ ０ ｐ ／ ｅ
第 ２６ 卷
黑胸散白蚁Ｒｔ ｌ ｒｅｃ ｎ ． ｎｄ ｅ ｕｔｍｓ ｅｓ Ｓｙｅ ｉｉ ｃ ｅ ｈ ｎｓ ｒ ｉ ｉ
是我国一种重要的城市害虫．近年来采用菊酚 类杀虫剂对其进行防治效果很好．为了更好地
分析纯， ａ乙酸蔡醋为国产化学纯．
１Ｚ 供试白蚁 ．
成都市白蚁防治研究所养虫室饲养的黑胸
黑胸散白蚁（ｅｃｌ ｒｅｃｉ ｎ ｓ ｄｒ Ｒｔｕｔｍ ｓ ｅｓ Ｓｙｅ） ｉｉ ｅ ｈ ｉｎ ｎ
体 内几种与菊醋类代谢有关的酶活性研究
谭速进’ 何俊华’ 谭 晓宏“ 杜林方２ ， ， ， ，唐振华３
ｔ ｌ
３
浙江大学 植物保护系， 浙江 杭州 ３０２ ； １０９ 四川大学 生命科学学院， 四川 成都 ６０６ １０４
收稿 日期 ： ０ ００－６ ２０－３２ 基金项 目： 成都市城市建设委员会资助课题
作者简介： 谭速进（９８ １５ 一）男， 重庆市人， 在职博上生 高级上程师， 从事城市害虫防治研究
万方数据
浙 仁 大 李 含 银（ 与 命 学 农业 牛 科 版｝
发现菊醋类杀虫剂的毒理机制与昆虫神经系统 中的 Ｎ － － Ｔ ａ ａ Ａ Ｐｓ Ｋ ｅ有着密切关系［． － ＇ Ｎ Ｋ １ ａ Ａ Ｐｓ 在昆虫的神经活动中起着离子泵的作 Ｔａ ｅ 用， 以维持神经膜内外两侧的电位差， 形成膜电 位， 使得神经细胞能够传导冲动［． ］ ’ 我们没有在 黑胸散白蚁体内检测到Ｎ － － Ｔ ａ 活性， ａ Ａ Ｐｓ Ｋ 。 但 却发现突轴小体中Ｃ － Ｔ ａ ａＡ Ｐｓ ｅ的活性特别高， 估计在黑胸散白蚁神经系统中该酶主要起着离 子泵的作用． 目 对白蚁体内代谢酶的研究较少， 前， 国内 几为空白．国外仅见Ｄ ｖ 等１ ａｉ ｓ ｓ ］ 对欧美散白蚁 （ｅｃ ｉｒ ｅ ｆ ｖ ｅ） Ｒｔｕｔｍ ｓ ｉ ｓ 工蚁 的＃ Ｍ， ｕ ｉｌ ｅ ｌｐ ａ ａ Ｉ ｋｒ ｔ ａ ａ 等［对象白蚁（ｏｔ ｅ ｅ ｆ ｍ ａｕ） ６ 」 Ｃｐ ｔｍ ｓ ｓ ｓ的丙酮 ｏｒ ｏ ｎ ｒ
ｕ ｔ ｎｓ ｎｎｉＳ ｙｅ ｗ ｓ ｗ ｅ ｔｏｅ ｔｅ ｃｐｉｅ ａ ｓ Ｍｕｃ ｄｒ ｓｃ Ｌ ａｄ ｌｔｉ ｌｅ ｅ ｃｉ ｕ ｎｄｒ ｂｔｅｎ ｓ ｏ ｈ ｓｓ ｔ ｌｓ ｉ ｏ ｉｎ ｈ ｅ ｓ ａ ｅ ｈ ｆ ｕ ｅ ｂ ｔ ｎ ｆ ｓ ｏ ｅ ｉ ． Ｈｅｏ ． ｒ ａ ｎ ｔａ ｎ ｉｈｓ ａｍｇｒ Ｈ ｂｅ． ｔ ａｔ ｉ ｌ ｅ ｏ ｍｆ ｗ ｓ ｎ ｉ ｎｌ ｌ ｅ ｔａ ｔａ ｏ ｓｓｃｔ ｔ ｓ ａ ｓ ｒ ｉ ａ ｎｒ Ｂ ｔｅ ｉｔ ｅ ｌ ｏ ｓ ｉｃ ｔ ｏ ｒ ｎ ｔ ｕｃｐｉｅ ｉ ｏ ｅ ｕ ｕ ｈ ｃ ｖ ｙ ｖ ｆ ａ ｉ ｆａ ｙ ｇ ｗ ｈ ｈ ｆ ｂ ｔ ｎ ｆ ｒ
ＭｇＡ Ｐｓ； Ａ Ｐｓ － Ｔ ａ Ｃ －Ｔ ａ ｅ ａ ｅ
中 图分 类 号
０９ ９ ９ ＇ ： ６ ６ ． ５ ０９ ５ ， ９ 立献 标 识 码 ． Ａ
Ｔ Ｎ －ｎ， Ｊｎ ｕ＇ Ｔ Ｎ ａ－ｏｇ， Ｌ － ｎ＇ Ｔ Ｎ Ｚｅ－ｕ＇ Ｄ ｐ． Ｐａｔ Ａ Ｓ ｊ ＇ Ｈ ｕ－ ｓ， Ｘ ｏｈｎ＇ Ｄ ｉ ｆ ｇ， Ｇ ｎｈａ（． ｔ ｏ ｌ ｕｉ Ｅ ｈ Ａ ｉ Ｕ ｎ ａ Ａ ｈ １ ｅ ｆ ｎ Ｐｏｃｏ， ｊｎ Ｕ ｉ ， ｎｚｏ ３０２． ｎ； Ｌ ｅ ｄｍ ｏ Ｓ ｈａ Ｕ ｉ ．ｈｎｄ ｒｅｉ Ｚｅａｇ ｖ Ｈａｇｈｕ ０９ Ｃ ｉ ２ ｉ Ａａｅ ｙ ｉ ｕｎ ｖ Ｃ ｅ ｕ ｔｔｎ ｈ ｉ ｎ ． １ ｈ ａ ． ｃ ｆ ｆ ｃ ｎ ． ｇ ６０６． 、； ． ｎｈｉ ｉｔｏ Ｅｔｍ ｌ ｙ ＡａｅｉＳｕａＳａｇａ ２０２， ｎ） １０４ Ｃ ｈ ３ ＳａｇａＩｓ ｕ ｆ ｏｏ ｇ ｏ ｃ ｍａ ｃ，ｈｎｈｉ ０５ Ｃｉ ｈ ｎ ｔｅ ｎ ｏ ｆ ｄ ｔ ｂ ０ ｈａ
曾报道澳大利亚棉铃虫种群对菊酷类的抗性机 制主要表现为多功能氧化酶代谢 ， 神经敏感性 降低和表皮穿透性降低 ， 而与酷酶代谢关系不
酶源制备参照谭维嘉等［的方法， ５ 头 ， ７ 取 ０ 黑胸散白蚁工蚁置于玻璃匀浆器中， ３ 加人 ｎ ｉ ｌ
０ １ ｌ ． ｏ Ｌ的冰凉磷酸缓冲液 （ １ Ｔ ｉｎ ｍ ／ 含 ０ ｒｏ ｏ ｔ
ｓ ｌ ｒｌ ｏ Ｎ － ＡＴ ａｅ ｏ ｔｅ ｅ ｃ ｉ ｏｈｒ ｅｔ ｉ ａ ｏ ｆ Ｋ－ Ｐ ｓ ａ ｎ ｓｍ ｐａｅ ｔｅ ｉｓｃ ｍｉｒ ｅ ａ ｓ ｈ ａ ｌ ｎ ｎ ｓ
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巾国科学院 上侮 昆血研究所 ． 上海 ２０２） ０ ０５
摘
要 ： 究了黑胸散 白蚁（ ｅｃｌｅｎｓ ｅｓ Ｓ 叫ｅ） 内与 菊醋类杀虫剂代谢有关的搜酸酷酶 研 Ｒｔｕ ｔ ＞ ｄｍ ｎｉ ｏ ｒ 体 ｉ ｉｒ ｅ ｒ ｓ 全虫组织提取得到的 突触小体 中检 浏不到 Ｎ － ａＫ
（ａ ｓ， 功能氧化酶（ ｆ ， ｕ － Ｔ ａ 和 Ｃ － Ｔ ａ 等几种代谢酶的活Ｎ 结果表明， Ｃｒ ）多 Ｅ ｍｏ Ｎ － Ａ Ｐｓ ） Ｋ ｅ ａＡ Ｐｓ ｅ ｆ 黑胸嵌 白
￣ ６｝ 〔 ６
Ａ ｓ ａｔ Ｔ ｅ ｔ ｉ ｏ ｓｍ ｉ ｏｔ ｔ ｚｍ ｓ Ｒ ｔｕｔ ｍ ｓ ｅ ｉ Ｓ ｙ ｅ ｃｎｅｎｄ ｔ ｂｔ ｃ： ａ ｉｔ ｆ ｅ ｒ ｎ ｅ ｙ ｅ ｏ ｅｃｌｅ ｅ ｃｍ ｖ ｓ ｄｒ ｃｒｅ ｗ ｈ ｒ ｈ ｃ ｖ ｙ ｏ ｍｐ ａ ｎ ｆ ｉ ｉｒ ｈ ｓ ｎ ｏ ｉ
醚， ２ Ｃ 于 ８ 反应 ３ ｍｉ， 。 ５ １ ｌ ０ ｎ 用 ． ｍ Ｌ ｏ Ｌ的 ｍ ／ Ｈｌ Ｃ 终止反应． ｍ ５ Ｉ氯仿萃取， ３３ 取 ． ｌ氯仿 ｍ 层， 加人 ３ ， ｍ ｌ Ｎ Ｏ 取 Ｎ Ｏ 层 ｍｌ ０ ５ ／ ａ Ｈ， ａ Ｈ ． ｏ Ｌ 于 ４０ 处比色． ０ ｍｎ ｉ １５ Ｔ ａｅ活力的测定 ． Ａ Ｐ ｓ
ｈｕ ｆ ． ｐｒ ｈｏ ｓ ｌ ｂ ｒ ｓ ａｌａｐｅ ｔ ｃ ｔ ｌ ｇ Ｒｔｕｔ ｍ ｓ ｅ ｉＳｙｅ Ａ ｏｓ ｌ Ｓ ｙｅ ｒｄ ｃｕ ｅ ｏ ｂ ｐｌｄ ｏ ｒ ｌ ｏ ｅｃｌｅ ｅｃｉ ｎｓ ｄｒ ｃ ｅｙ ｏ ｔ ｉ ｏ ｄ ｅ ｎ ｙ ｉ ｏ ｏｉ ｆ ｉ ｉｒ ｈ ｓ ｎ ． ａ ｎ ｎ ｎ
浙详大李母报〔 业 生 科 版 ２６（６） ６０１－ ６０６， ０００ 农 与 命 学 ） ： ２
ｉ ｅ ｅ Ｊ ｕ ｎ ｌ Ｚ ｅｉｎ Ｕｎｖｒｉ （ ｒ ．氏 Ｌｆ Ｓ ｔ） ｏ ｒ ａ ｏ ｈ ｊ ｇ ｉｅｓ ｙ ｉ ｆ ａ ｔ Ａｇ ｃ
文章 编号 ：０ ８９ ０ （０ ０ ０－６ １０ １ ０－２ ９２ ０ ）６０ ０－６
Ｓｕ ｙ ｔｅ ｔ ｉ ｏ ｓｍｅ ｚｍｅ ｃｎｅｎｄ ｔ ｐ ｒｔｒｉｓ ｔｂ ｌ ｍ ｓｂｅｒｎａ ｔ ｍｉ ｔｄ ｏ ｈ ａ ｉ ｔ ｆ ｅ ｙ ｓ ｃｒ ｅ ｗ ｈ ｅｈｏ ｍｅａ ｏｉ ｉ ｕ ｔｒａ ｅｎ ｒ ｔ ｎ ｃ ｖ ｙ ｏ ｎ ｏ ｉ ｙ ｄ ｓ ｎ ｅ ｅ
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Ｘ １０， －０）匀浆． 匀浆液在 １ ００ ｇ４ ０ ０ Ｘ ， ｀以下离 Ｃ
心 ２ ｍｉ 取上清液作为酶原． ７２ ０ ｎ ， 在 ５Ｃ紫外光
分光光度计中分析酶活力． 。乙酸蔡醋酶活力测定参照 Ａｐｒ＂ 一 ｓ ｅ 的方 ｅＥ
大， 但张友军１等的研究却表明， ： ７ 我国棉铃虫种
群对菊酚类的抗性涉及多功能氧化酶代谢、 醋 酶代谢及神经敏感性降低等多种因素．近年来
ｐｒ ｈｏ ｍ ｔ ｏｓ ｗ ｓ ｉ ｉｖｒ． ｅ ｌ ｓｏ ｅ ｔａ ｔ ａ ｉｔｏ Ｃｒｓ ｉ ｏ ｅｃ ｙｅ ｒ ｄ ａ ｌ ａ ｓ ｄ ｄ ｉｏ Ｔ ｒ ｕｓ ｗ ｄ ｔ ｃｖ ｙ ａ ａｄ ｉＲｔ－ ｔ ｉ ｅｂｉ ｍ ｔ ｅ ｎ ｕ ｔ ｈ ｅ ｔｈ ｓ ｈ ｈ ｔ ｉ ｆ Ｅ ｎ ｎ ｎ ｉ ｅ ｆ
蚁体 内致酸醋醉 活性较高 ， 多功能氧化醉活性较低 Ａ Ｐｓ Ｔａ ｅ活性 ， ａＡ Ｐｓ 而Ｃ － Ｔ ａ ｅ活性却很 高． 据此认为， 在黑胸散 白蚁体 内可能存在与 Ｎ ａ泵具有相似作用 的 Ｃ 泵， ａ 在其神经活动 中起 着重要作用．
关 键 词
黑胸散白蚁； 酪活性； 致酸醋酶（ａ ｓ； Ｃ ｒ ） 多功能氧化畴（ ｆ） Ｎ － － Ｔ ａｅ Ｅ ｍ ｏ ； Ｋ Ａ Ｐｓ ａ
法・反应液中含有 １ ｐ ０ Ｌ的酶液， ｍ Ｘ１＇ ３ 工１ ０ － ｍｌ ｏ Ｌ的磷酸缓冲液（ ７０ ， ｐ ４ １－ ／ ｐ ．）５ ． Ｘ ０ Ｈ ０ Ｌ
ｍｌ ｏ Ｌ的 ａ乙酸蔡醋液（ ５ ０ ＇ ／ 含 Ｘ － Ｍ Ｗ 的 １ Ｏ 毒扁豆碱）在 ３ Ｃ ， ７ 水浴中保温 ３ ｍ ｎ 加人 ０ ， ｉ ０ ５ ． Ｌ显色剂，５ ｍ １ ｍｎ后在 ６０ ｉ ０ｎ ｍ处比色， 用 ａ禁酚作标准曲线， 一 １４ 多功能氧化酶（ ｆ） ． ｍ ｏ活力测定 酶源制备同Ｃｒ ， ａ ｓ但白蚁增加到 １。 Ｅ ５ 头， 离心时间为 １ ｍｎ ０ ．多功能氧化酶活力测定参 ｉ
酸源自文库氢酶系做过研究．
照Ｓａｇ ｈ ｈｎ〕 ｈｎ Ｃ ｉｃｅｃ ｈ－ ＇ 等的方法， 取酶液 １ ， ｍ Ｌ 加人 ２５ Ｎ Ｄ Ｈ， ｍ ， ４ ｌ ． ｇ Ｐ １ ００ ｍ ／ ｍ Ａ ｌ ． ｏ Ｌ磷酸 缓冲液（Ｈ ．）１ ｔ， ｍ ｌ ｐ ７０，０ ０１ ／ ｄ ． ｏ Ｌ对硝基苯甲
利用该类药剂对白蚁进行控制， 有必要对其作 用机理进行深人研究． 其中， 体内有关代谢酶的
研究是最基础的工作
散白 Ｒｔｕｔｍ ｓ ｅ ｉ ｎｄｒＩ蚁． 蚁（ｅｃ ｉｒ ｅｃｉｎｓ ｅ） ｉｌ ｅ ｈ ｓ Ｓｙ ｎ
１３ 梭酸醋酶（ａＥ ） ． Ｃ ｒｓ活性的测定
目 前对菊醋类杀虫剂有关的代谢酶研究较 多的是家 蝇 （ ． ｄｍ ｓｃ Ｌ ） Ｍｕ ａ ｅｉ ． 和棉 铃虫 ｓ ａ ｔａ ｃ （ ｅｏ ｉ ｒ ｉｒ Ｈ ｂｅ） Ｈ ｌｔｓ ｇ ａ ｎ 等．Ｇ ｎｉ 等［ ｉ ａ ｅ ｕ ｒ ｈ ｍ ｕｎ ｇ Ｉ ｎ ］
ｍｎ． ｅ ｕ ｉｐｅｔａＣ － Ｔ ａ ｏ ｔｅ ａｔ ｏ ｅ ｅｃｌｅ ｅｃｉｎ ｓ ｄｒ ｐ ｙ ｉ） Ｔ ｒ ｌ ｍ ｌｓ ｔ Ａ Ｐｓ ｎ ｓ ｐｏ ｍ ｏ Ｒｔｕｔ ｍ ｓ ｅ ｉＳ ｙｅｍ ｙ ａ ｈ ｅ ｔ ｉ ｈ ａ ｓ ｅ ｈ ｙ ｎ ｓ ｆ ｉ ｉｒ ｈ ｓ ｎ ｎ ａ ｌ ａ
ｔｉ ｏ Ｎ － －Ｔ ａ ｃｕ ｎｔ ｄｔｔ ｏ ｔ ｓｎｐ ｓ ｅ Ｒｔｕｔｍｓ ｅｓ Ｓｙｅ， ｉｔ ｆ Ｋ Ａ Ｐｓ ｏｌ ｏ ｂ ｅ ｃ ｄ ｈ ｙａｔ ｏ ｏ ｅｃｌ ｒ ｅｃｉｎｓ ｄｒ ｂｔ ｖｙ ａ ｅ ｄ ｅ ｅ ｅ ｎ ｅ ｏ ｍ ｆ ｉ ｉ ｅ ｈ ｉｎ ｎ ｕ ｍ ｃ ｈ ｈｒ ｖｙ ａ Ｔ － ａ ｄｔ ｍｎｄ ｔ ｓ ｅ ｍ ｒ ｅ ． １｀ ｍ ｌ ｍ ・ ｕｈ ｅａｔｉ ｏＣ－ Ｐ ｗｓ ｒ ｉ ｏ ｈ ａ ｍ ｂ ｎ ａ ２１Ｘ （ ｏ ｆ・ ｇ ｉ ｇ ｃ ｔ ｆ Ａ ｉ ｅ ｅ ｅ ｎ ｍ ｅ ａ ｔ ６ ０ ｐ ／ ｅ
第 ２６ 卷
黑胸散白蚁Ｒｔ ｌ ｒｅｃ ｎ ． ｎｄ ｅ ｕｔｍｓ ｅｓ Ｓｙｅ ｉｉ ｃ ｅ ｈ ｎｓ ｒ ｉ ｉ
是我国一种重要的城市害虫．近年来采用菊酚 类杀虫剂对其进行防治效果很好．为了更好地
分析纯， ａ乙酸蔡醋为国产化学纯．
１Ｚ 供试白蚁 ．
成都市白蚁防治研究所养虫室饲养的黑胸
黑胸散白蚁（ｅｃｌ ｒｅｃｉ ｎ ｓ ｄｒ Ｒｔｕｔｍ ｓ ｅｓ Ｓｙｅ） ｉｉ ｅ ｈ ｉｎ ｎ
体 内几种与菊醋类代谢有关的酶活性研究
谭速进’ 何俊华’ 谭 晓宏“ 杜林方２ ， ， ， ，唐振华３
ｔ ｌ
３
浙江大学 植物保护系， 浙江 杭州 ３０２ ； １０９ 四川大学 生命科学学院， 四川 成都 ６０６ １０４