亚铁嗪直接比色法测铁

亚铁嗪直接比色法测铁

原理：

血清铁与运铁蛋白结合成复合物，在酸性介质中铁从复合物中解离出来，再被还原剂还

原成二价铁，并与亚铁嗪生成紫红色化合物，在562nm 处有吸收峰，可比色测定。

试剂：

R1试剂：甘氨酸/盐酸缓冲液（PH2.8）：0.4mol/L 甘氨酸溶液58mL 、0.4mol/L 盐酸溶

液42ml 和Triton X-100 3ml 混合后加入无水亚硫酸钠800mg ，使溶解。

R2试剂亚铁嗪显色液：称取亚铁嗪0.6g 溶于100ml 去离子水中。

铁标准贮存液（1.79mmol/L ）：精确称取经室温干燥恒重的硫酸高铁铵

[O H SO FeNH 224412)(•,AR]0.8635g ，置于烧杯中，加去离子水50ml ，逐滴加入浓硫酸5ml ，溶解后移入1L 容量瓶中并用去离子水稀释至刻度。置棕色瓶中可长期保持。

铁标准应用液（35.8μmol/L ）：在100ml 容量瓶中加入铁标准贮存液2ml ，加适量去离

子水后，再加浓硫酸0.5ml ，最后以去离子水稀释至刻度。

操作：

如表：

混匀，用波长562nm ，光径0.5cm ，空白调零，读取测定管吸光度，然后再加

充分混匀，置室温15分钟或37℃ 10分钟后用同样的条件和方法读取各管吸光度。

计算结果：

）铁标准应用液浓度（标准管吸光度

血清空白管吸光度测定管吸光度）血清铁（μm ol/L *0.97*-μm ol/L =

测定意义：

铁是人体必需的微量元素，是合成红细胞中血红蛋白的主要原料，存在于正常人体内的

铁平均为3~4.5g 。全身所有的约70%存在血红蛋白中，少量存在于肌红蛋白中。而各种酶和

血浆中运输状态中的铁，仅占全身铁的极小部分。

血清铁增高：①红细胞破坏增多是，如溶血性贫血；②红细胞的再生或成熟屏障，如再

生障碍性贫血、巨幼红细胞性贫血；③铝中毒时铁利用率过低；④维生素6B 缺乏引起造血

功能减退时。

血清铁降低：①机体摄入不足，如营养不足、胃肠道病变、消化性溃疡、慢性腹泻等；

②机体失铁增加，如失血，包括大量和隐性失血，特别是肾炎、肾结核、阴道出血、溃疡病

等，泌尿生殖道和胃肠道的出血；③体内铁的需要增加又未及时补充，如妊娠、婴儿生长期试剂(ml) 测定管 标准管 空白管 血清 0.45 铁标准应用液 （35.8μmol/L ） 0.45 去离子水 0.45 甘氨酸/盐酸缓冲液 1.20 1.20 1.20 亚铁嗪显色液 0.05 0.05 0.05

等；④体内贮存体释放减少，如急性和慢性感染、尿毒症等均可引起铁释放减少；⑤某些药物治疗，如促肾上腺皮质激素或肾上腺皮质激素、大剂量的阿司匹林、考来烯胺等；⑥生理性降低：妇女在月经期、妊娠期，婴儿在生长期，因体内铁的需要量增加，可使血清铁降低，属于生理现象

物品清单

甘氨酸0.4mol/L 100ml 盐酸0.4mol/L 100ml Triton X-100 3ml

无水亚硫酸钠 2g

亚铁嗪 2g

硫酸高铁铵 2g

去离子水 2L

浓硫酸 50ml

50ml移液管3支

5ml移液管2支

电子天平

滤纸3张

药匙3个

200ml烧杯2个

100ml烧杯1个

1L容量瓶1个

棕色瓶1个

100ml容量瓶1个

玻璃棒1根

紫外可见分光光度计1台

比色皿3个