龙胆草地上部分的化学成分

天然产物研究与开发Ⅳ口ｔＰｎ耐ＲｅｓＤｅ￡，２００９，２１：５５６．５５８，５８５

文章编号：１００１－６８８０（２００９）０４ＪＤ５５６讲

龙胆草地上部分的化学成分

张敬莹，王世盛＋，赵伟杰，宋其玲，孟庆伟

大连理工大学精细化工国家重点实验室，大连１１６０１２

摘要：为研究龙胆草（＆ｎ￡ｉ口∞ｓｃ曲ｍＢｕｎｇｅ）地上部分的化学成分，利用硅胶柱色谱对其乙醇提取物进行分离纯化，根据理化性质和波谱方法鉴定了化合物的结构。分离得到ＪＢ．香树脂醇（１）、卢－谷甾醇（２）、ＪＢ一香树脂醇乙酸酯（３）、乌苏醇（４）、齐墩果酸（５）、６．去甲氧基．７．甲基茵陈色原酮（６）。其中化合物６为首次从龙胆科植物中分离得到的具有２一苯氧基色原酮骨架的天然酚类成分，本文对其１Ｄ和２ＤＮＭＲ谱的特征及ＥＩ质谱主要碎片的可能裂解方式进行了讨论，利用单晶ｘ一射线衍射方法对其晶体结构进行了分析，为该类天然产物的结构表征提供了依据。

关键词：龙胆；波谱表征；晶体结构；６－去甲氧基－７一甲基茵陈色原酮

中图分类号：Ｒ９１４；Ｑ９４６．９１文献标识码：Ａ

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龙胆（Ｇｅｍｉ口ｎ口ｓｃ口６ｍＢｕｎｇｅ）又称糙龙胆，为龙胆科（Ｇｅｎｔｉａｎａｃｅａｅ）龙胆属植物，主要分布于东北、内蒙古、陕西、湖北、四川等地。其根茎人药历史悠久，有泻肝胆实火，除下焦湿热的功效…。临床上主要用于治疗急慢性肝炎、乙型脑炎、甲状腺机能亢进、胆囊炎、胃病等旧Ｊ。近年来的研究表明作为废弃部分被丢弃的龙胆地上部分也具有抗炎、抗菌、降血糖等药用价值∞＇４Ｊ，而迄今为止其中的化学成分还不清楚。为充分发掘龙胆资源的药用价值，我们对龙胆地上部分的乙醇提取物进行了研究，首次从中分离鉴定出６个化合物，分别为口一香树脂醇（１）、ｐ一谷甾醇（２）够一香树脂醇乙酸酯（３）、乌苏醇（４）、齐墩果酸（５）和６－去甲氧基＿７一甲基一茵陈色原酮

收稿日期：２００８＿０２之７接受日期：２００８旬３－３１

基金项目：辽宁省博士启动基金项目（２００６１０６８）

｝通讯作者Ｔｅ】：８６４ｌｌ－８８９９３６５７９；Ｅ—ｍｄ：ｗａｎｇｓｓｇ＠ｓｊ盯ａ，ｃｏｍ（６），且除化合物５外，其余化合物还未见从龙胆根中提取分离的报道。其中化合物６具有２一苯氧基色原酮骨架，属于结构罕见的一类天然酚类成分，该类成分具有抗氧化、利胆、抗肿瘤等许多独特的生理活性［５Ｊ。本研究首次从龙胆科植物中发现该类天然产物，体外活性筛选发现对醛糖还原酶具有显著的抑制活性。

本文着重介绍化合物６的分离和结构表征，详细讨论其１Ｄ和２ＤＮＭＲ谱的特征，对其ＥＩ质谱中主要碎片的可能裂解方式进行了推测，并利用单晶ｘ．射线衍射方法对其晶体结构进行了分析，旨在为该类天然产物的结构表征提供重要依据。

１材料与方法

１．１仪器与试剂

龙胆地上部分于２００５年１０月采自辽宁清源辽东中药材种植基地，经大连工业大学朱靖博教授鉴

张敬莹等：龙胆草地上部分的化学成分５５７

定为糙龙胆＆ｍｉ吼口ｓｃ０６ｍ。植物标本（２００５１００８）保存于化工学院制药工程教研室。

ＶａｒｉａｎＩＮＯＶＡ（４００ＭＨｚ）、ＢｍｋｅｒＡＶＡＮＣＥ（５００ＭＨｚ）型核磁共振仪；ｗＲｘ一１Ｓ型显微热分析熔点仪；Ｇｃ－Ｔ０ｆＭｓ气相色谱一飞行时间高分辨质谱仪；ＨＰ１１００Ｌｃ／ＭｓＤ型液相色谱．质谱联用分析仪；Ｂ１１ｌｋｅｒＳｍａｎＡＰＥＸＩＩＣｃＤ型ｘ射线单晶衍射仪。

薄层层析用硅胶为ＧＦ２，。型（青岛海洋化工厂，Ｍｅｒｃｋ公司）；柱层析硅胶（青岛海洋化工厂）；水为去离子水，常规试剂均为分析纯。

１．２提取与分离

龙胆地上部分（５ｋｇ）粉碎，９５％乙醇（５０Ｌ）回流提取三次，７０％乙醇（１５Ｌ）回流提取一次，合并提取液，减压浓缩，得沉淀２９０ｇ，滤液浓缩得浸膏６６０ｇ。沉淀部分依次用石油醚和氯仿超声溶解，分别得到石油醚部分和氯仿部分。石油醚部分通过硅胶柱层析，以石油醚一乙酸乙酯（２０：１～５：１）梯度洗脱，分别得到化合物１（２４０ｍｇ）、２（１４０ｍｇ）。氯仿部分以石油醚一丙酮（２０：１～１：９）梯度洗脱，得到化合物３（２０ｍｇ）、４（４０ｍｇ）。浸膏部分以乙酸乙酯超声加热提取，得乙酸乙酯浸膏１８０ｇ，进行硅胶真空柱层析，以氯仿．丙酮（４：１～丙酮）梯度洗脱，分别得到５个部位Ｆｒｌ一５。Ｆｒｌ浸膏以丙酮溶解，得丙酮不溶部分和丙酮溶解部分。丙酮不溶部分经硅胶柱层析，石油醚一丙酮（６：１—４：１）梯度洗脱得化合物５（２．１ｇ）。丙酮溶解部分经硅胶柱层析，石油醚一丙酮４：ｌ洗脱，得化合物６（５０ｎｌｇ）。化合物１—６分别鉴定为肛香树脂醇、ｐ谷甾醇锣一香树脂醇乙酸酯、乌苏醇、齐墩果酸和６一去甲氧基－７一甲基一茵陈色原酮。１．３化合物６单晶培养

取化合物６细针状结晶５ｍｇ于洁净玻璃小瓶中，缓慢加入丙酮使其溶解。放人烧杯中，并在烧杯中加入氯仿，将烧杯盖好，静置３ｄ，析出无色柱状单晶。

１．４化合物６的晶体结构测定

取大小为０．３０×０．２０×Ｏ．２０ｍｍ的晶体，使用ｃＡＤ４型ｘ一射线衍射仪（波长ｏ．７１０７３Ａ）进行晶胞单元测定和数据收集，收集数据的条件为２７３（２）Ｋ。采用缈／２ｐ扫描技术，收集范围２．１。＜秽＜２５。，危：一１５—１５，蠡：一７—６，Ｚ：一３４—３３。共收集７８１７个衍射点，对其中２０９９个独立点（Ｒ－ｎＩ＝Ｏ．０３０５）进行分析。全部强度数据均经ＬＰ因子及经验吸收校正，晶体结构由直接法解出，采用全矩阵最小二乘法进行精修。结构计算的数据与参数比２０９９／２０３，最终的偏离因子尺＝Ｏ．０３２９，锨＝Ｏ．０８２０。最终差值电子云密度的最高峰为０．１３９ｅ・Ａ～，最低峰为旬．１３５ｅ・Ａ。３。全部计算均用Ｓｈｅｌｘｔｌ程序完成。

２结果与讨论

２．１化合物６的核磁共振波谱表征铺。Ｈ

圈１化合物６的化学结构

Ｆｉ昏１Ｓｔｍｃｔｕｒｅｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄ６

化合物６为无色针状结晶，易溶于丙酮，可溶于甲醇，ｍｐ．２４６～２４７℃。其分子结构如图Ｉ所示。ＨＲＥＩ—ＭＳ显示分子离子峰为３００．０６１４，确定其分子式为ｃ１６Ｈ，：０６（计算值３００．０６３４）。ＥＩ—ＭＳ矾／ｚ（％）：３００＋（１００），２７１＋（３１），１６７（１８），１３４（８）；ＩＲｌＪ：窦ｃｍ‘１：３２００，１６７０，１６ｌｏ，１４９０；１Ｈ和１３ｃＮＭＲ（ＤＭＳＯ—ｄ。）数据见表ｌ。通过ＨＳＱＣ和ＨＭＢＣ谱进一步确定了取代基的位置和Ｃ、Ｈ信号的准确归属，其主要ＨＭＢＣ相关见图２。

表１化合物６的ＮＭＲ数据（”ｃ：１００ＭＨｚ；１Ｈ：４００ＭＨｚ；

ＤＭＳＯ－咴）

Ｔａｂｌｅ１ＮＭＲｓｐｅｃｔｒａｌｄａｔａｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄ６ｉｎＤＭｓ０．吨（１３ｃ：１００ＭＨｚ；１Ｈ：４００ＭＨｚ）