人教版 高中生物 选修一 专题五 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 学案

【情景创设】

多聚酶链式反应（PCR ）是一种体外迅速扩增DNA 片段的技术，它能以极少量的DNA 为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA 拷贝。这项技术有效地解决了因为样品中

DNA 含量太低而难以对样品进行分析研究的问题，被广泛地应用于基因克隆等各方面。本课题中，我们将了解PCR 技术的基本原理，并尝试用PCR 技术扩增DNA 片段。

【问题设计】

1. 试叙述细胞内DNA 复制的时期，需要的条件和复制的特点？

2. 什么是PCR 技术?说说PCR 技术解旋利用了什么原理？

3. PCR 技术需要的条件是什么？引物是什么？扩增的方向怎样？

4. 写出PCR 的过程，并说出每一步应如何操作？

5. DNA 含量测定的原理是什么？如何计算DNA 的含量？

【达标检测】

1.在（ ）的温度范围内，DNA 的双螺旋结构解开

A.10～20℃

B.80～100℃

C.20～30℃

D.40～60℃

2.关于DNA 的复制，下列叙述正确的是（ ）

A.DNA 聚合酶不能从头开始合成DNA ，只能从5’端延伸DNA 链

B.DNA 复制不需要引物

C.引物与DNA 母链通过碱基互补配对进行结合

D.DNA 的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸

3.下列有关PCR 描述，不正确的是（ ）

A.是一种酶促反应

B.引物决定了扩增的特异性

C.扩增产量按y ＝（1＋X ）n

D.扩增对象是氨基酸序列

E.扩增对象是DNA 序列

4.下列关于DNA 复制过程的正确顺序是（ ）

①互补碱基对之间氢键断裂②互补碱基对之间形成氢键③DNA 分子在解旋酶的作用下解旋④以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对⑤子链与母链盘旋

【使用时间】 第 9周 第 2 课时 【编辑】赵玉立 任丽伟【审核】刘萍萍 【编号】2262092 【主题】 专题五 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA 片段 2012.04.24

成双螺旋状结构

A①③④②⑤ B①④②⑤③ C①③⑤④② D③①④②⑤

5.下列各项过程中，遵循“碱基互补配对原则”的有（）

①DNA复制②RNA复制③转录④翻译⑤逆转录

A①②③④⑤ B①②③④ C①②③⑤ D①③④⑤

（选做）

资料显示，近十年来，PCR技术成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

1.加热使DNA双链打开，这一步是打开_______键，称为_______，在细胞中是在_______酶的作用下进行的。

2.当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2条DNA分子，此过程中的原料是

___________________________，遵循的原则是________________。

3.PCR技术的必需条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还要三个条件，即：液体环境、适宜的_____________和____________________。

4.下图为某一次循环的产物，请据图回答问题。

（1）PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分

为、、三个步骤。

（2）DNA的羟基(—OH)末端称为，图中所示的羟基端

为。(填字母)

（3）以引物为标记，可判断出此产物最早为第次循环的产物。

【学习反思】