血球计数板计数法培训课件

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血球计数板的使用通用课件

血球计数板的使用通用课件

在数据解读过程中,某些异常值可能被忽 略或误判,这会影响最终结果的准确性。
05
血球计数板的发展趋势与展望
技术创新与改进
自动化技术
通过引入自动化技术,提高血球 计数板的计数效率和准确性,减
少人为误差。
高分辨率成像
采用高分辨率成像技术,使计数 板能够捕捉更细微的结构和细胞
特征。
智能化分析
利用人工智能和机器学习算法, 实现血球计数板的智能化分析,
提高分析效率和准确性。
应用领域的拓展
临床诊断
血球计数板在临床诊断中发挥着重要作用,随着技术的不断改进 ,其在临床上的应用将更加广泛。
生物研究
血球计数板在生物学、免疫学和病理学等领域的研究中也有广泛应 用,未来将有更多相关领域得到拓展。
药物研发
血球计数板在药物研发过程中可用于监测药物对血细胞的影响,为 新药研发提供有力支持。
操作经验不足
新手操作员可能由于经验不足而忽略 某些操作细节,导致计数结果不准确 。
缺乏培训
未接受过血球计数板使用培训的人员 可能不了解正确的操作步骤和注意事 项,导致操作不规范。
忽略操作细节
某些操作员可能过于自信,忽略了一 些看似微不足道的细节,如清洁计数 板或确保镜筒对准等,这些细节都可 能影响计数的准确性。
未来发展方向
1 2 3
标准化与规范化
未来血球计数板的发展需要进一步标准化和规范 化,以确保不同设备之间的可比性和互操作性。
个性化医疗
随着个性化医疗的发展,血球计数板将更加注重 个体差异和特殊需求,为患者提供更加精准的诊 断和治疗方案。
跨界融合
未来血球计数板的发展将与其他医疗设备和技术 进行跨界融合,形成更为完整的医疗解决方案, 提高医疗服务的整体水平。

血细胞计数板 ppt课件

血细胞计数板 ppt课件
计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度
为 0.1mm , 其 体 积 为 _0__.1___mm3 , 合 __1_×__1_0_-_4_mL。
深度
400 小格
中格数
• 血细胞计数板是一种专门用于计算较大单 细胞微生物的一种仪器。
• 计数时,常采用抽样检测。
计数器大方格规格:
2mm×2mm×0.1mm 或 1mm×1mm×0.1mm 浙科版默认第一种
血细胞计数板是
一块特制的厚型 载玻片,载玻片上 有四个槽构成三 个平台。中间的 平台较宽,其中间 又被一短横槽分 隔成两半,每个半 边上面各刻有一小 方格网, 计数用,称为计数区。
精品资料
• 你怎么称呼老师? • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你
是否会认为老师的教学方法需要改进? • 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我
1mL酵母菌培养液 能盛满多少大格?
2500
25×16
深度
400 小格
ห้องสมุดไป่ตู้
中格数
• 血细胞计数板是一种专门用于计算较大单 细胞微生物的一种仪器。
• 计数时,常采用抽样检测。
计数器大方格规格:
2mm×2mm×0.1mm 或 1mm×1mm×0.1mm 浙科版默认第一种
1mL酵母菌培养液 能盛满多少大格?
2500
25×16
若5个中格内共有酵母菌数53个,求每 毫升酵母菌培养液中的酵母菌数?
笨,没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
每个方格网共 分九个大方格, 中央的一大方 格作为计数用,
中格
25(中格)×16(小格)型的计数板

血球计数板PPT课件

血球计数板PPT课件

方格又分成25个小方格;另一种是一个计数
区分成25个中方格(中方格之间用双线分
开),而每个中方格又分成16个小方格。但
是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个
共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm,则计数区的面积为
1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2。盖
上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以
6.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬物洗 刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入 盒内保存。
7.对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵 母菌个数。
-
5
计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
血球计数板
-
1
基本构造
• 血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片 上有四个槽构成三个平台。中间的平台较宽, 其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上 面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大 方格,中央的一大方格作为计数用,称为计数 区。
-
2
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16
个中方格(大方格用三线隔开),而每个中
-
4
5.计数时若计数区是由16个中方格组成,按对角线方位,数左上、左下、 右上、右下的4个中方格(即100小格)的菌数。如果是25个中方格组成的计 数区,除数上述四个中方格外,还需数中央1个中方格的菌数(即80个小 格)。为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在 格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上,计数时 则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。即位于本格上线和左线 上的细胞计入本格。

《血球计数板使用》课件

《血球计数板使用》课件

01
02
03
04
计数结果应及时记录并核对, 确保数据的准确性和完整性。
对于异常数据应进行复核或重 新取样,避免误差的积累。
在数据解读时应结合实际情况 进行分析,避免片面或主观的
判断。
对于误差的控制应采取有效的 措施,如采用合适的取样方法
、提高操作技能等。
04
血球计数板应用实例
临床应用实例
诊断疾病
《血球计数板使用》PPT课件
目录
• 血球计数板简介 • 血球计数板操作步骤 • 血球计数板使用注意事项 • 血球计数板应用实例 • 血球计数板的发展趋势与展望
01
血球计数板简介
血球计数板的结构
血球计数板由一块载玻片和两个 盖玻片组成,载玻片上刻有方格 ,每个方格分为9个中格,共计
162个小格。
04
稀释样本
将待测样本进行适当稀释,以 便于计数。
染色处理
根据实验要求,对稀释后的样 本进行染色处理。
滴加样本
使用吸管或移液器将染色后的 样本滴加到血球计数板的凹槽
中。
覆盖盖玻片
轻轻覆盖盖玻片,确保没有气 泡产生,然后进行显微镜检查

数据分析阶段
显微镜检查
使用显微镜观察血球计 数板,记录各种血细胞
提高医疗效率
降低医疗成本
血球计数板的智能化和自动化将大大 提高医疗效率,减轻医护人员的工作 负担。
血球计数板的优化和普及将降低医疗 成本,减轻患者经济负担,促进医疗 服务的普及和公平。
促进医疗技术创新
血球计数板的发展将推动医疗技术的 不断创新和发展,提高医疗质量和安 全性。
THANK YOU
感谢各位观看
药物研发

《血细胞计数板》课件

《血细胞计数板》课件
PPT,a click to unlimited possibilities
汇报人:PPT
01
03
05
02
04
血细胞计数板是一种用于计数血细胞的工具
由多个小方格组成,每个方格内可容纳一定数量的血细胞
通过观察血细胞在方格内的分布情况,可以计算出血细胞的数量和比例
血细胞计数板广泛应用于医学、生物学等领域,用于检测血液中的血细胞数量和比例, 了解血液健康状况。
将盖玻片放在血细胞计数板上,使血液 样本均匀分布
在显微镜下观察血细胞计数板,计数血 细胞数量
根据血细胞计数板的刻度,计算血细胞 数量
记录血细胞计数结果,用于诊断和治疗 疾病
血细胞计数板是一种用于计数红细 胞数量的工具
通过观察血细胞在血细胞计数板上 的分布情况,可以计算出红细胞的 数量
添加标题
添加标题
血细胞计数板是诊断血液系统 疾病的重要工具
通过观察血细胞形态和数量, 可以判断血液系统疾病的类型 和严重程度
血细胞计数板可以帮助医生制 定治疗方案
血细胞计数板在血液系统疾病 的诊断中具有较高的准确性和 可靠性
放化疗对血细胞的影响
血细胞计数板在监测放化疗 效果中的应用
血细胞计数板由多个小方格组成, 每个小方格代表一个红细胞
血细胞计数板在实验中具有重要的作 用,可以帮助研究人员更好地了解血 液中的红细胞数量,从而更好地了解 血液的健康状况。
血细胞计数板是一种用于计数血细胞数量的工具 在实验中,血细胞计数板可以帮助我们快速准确地计数白细胞数量 血细胞计数板的使用步骤包括:取样、稀释、涂片、染色、观察和计数 血细胞计数板的使用可以提高实验结果的准确性和可靠性
血细胞计数板在监测放化疗 效果中的注意事项

血球计数板使用及相关计算方案ppt课件

血球计数板使用及相关计算方案ppt课件

经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的,应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失,增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
血球计数板的使用方法步骤
1.镜检计数室。在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;
2.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用 的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边 缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生 气泡,多余培养液可用滤纸吸去;
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 ▲个/mL。 (参考答案:5n×105 )
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的,应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失,增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
3.计数。稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降到 计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下 找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的,应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 服 务的费 用
4.活酵母有芽殖现象,若芽体达到母细胞大小的一半时, 即可作为两个菌体计数,若芽体小于母细胞一半时为1个酵 母细胞。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的,应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失,增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
5.对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上 的菌体数,一般可采取“数上线不数下线,数左线不数右 线”的原则处理,另两边不计数。
1.每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计 数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。

《血细胞计数板》课件

《血细胞计数板》课件
血细胞计数板在其他医学领域的应用 ,进一步拓展了其在医学诊断和治疗 中的价值。
04
血细胞计数板的维护与保养
血细胞计数板的清洁与保养
清洁
使用柔软的湿布定期擦拭计数板 ,以清除灰尘和污垢。避免使用 含有酒精或化学溶剂的清洁剂, 以免损坏计数板表面。
保养
定期检查计数板的边缘和角落, 确保没有损坏或裂纹。如有需要 ,可以使用薄薄的一层防锈油来 保护金属部分。
血细胞计数板的常见故障及排除方法
读数不准确
可能是由于计数板表面有污垢或 磨损造成的。清洁和检查计数板 表面,确保其清晰、干净且无磨
损。
气泡产生
在计数过程中出现气泡可能是由于 温度变化或液体表面张力问题。确 保在恒温环境下操作,并确保计数 板表面干燥。
计数板松动或移位
检查计数板的安装是否稳固,如有 需要,可以重新安装或更换固定装 置。
科学研究
血细胞计数板可用于科研领域,为疾病发病机制、药物研发和生物 医学研究提供有力支持。
公共卫生
在流行病和公共卫生事件中,血细胞计数板可用于快速大规模筛查 和监测,保障公共卫生安全。
血细胞计数板的研究方向与挑战
新型计数板材料的研发
01
探索新型材料,提高计数板的耐用性和稳定性,降低成本。
计数板标准化的研究
血细胞计数板在临床上的应用,有助于医生快速、准确地获取患者的血液指标,为 制定治疗方案提供依据。
血细胞计数板在血常规检测中的应用
血常规检测是临床常见的检查项目,通过血细胞计数板可以快速准确地测定红细胞、白细胞 和血小板数量。
红细胞计数有助于判断贫血、红细胞增多等病症;白细胞计数有助于判断感染、炎症等病症 ;血小板计数有助于判断出血性疾病。
02

血球计数板的使用-图文

血球计数板的使用-图文

对每个样品计数三次,再取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
N1=(n1-1+n1-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n1-1
n1-2
N1=(n1-1+n1-2)/2
x个 = N/(5×16) ×16×25个
1cm3
(1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm)
=50000 N
②用血球计数板对藻细胞进行计数 的方法与步骤:
ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净
如果规格为25格×16格的计数板统计计数池中央 大方格内四角及中央中格内(即80个小方格)的单 胞藻数,并记录。
计数时,小心移动载物台,从上到下,由左及右 又由右及左依次计数各小格内的细胞数。一般可 采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则 处理。凡压方格的上线和左线的细胞,统一算此 方格内的细胞,而压方格的下线和右线的细胞, 统一不算此方格内的细胞。
。若有污物,则需用清水清洗,吹干,用擦镜纸 擦拭干净。
盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中,使用时用 眼科镊取出,放在滤纸上吸水,用擦镜纸擦拭干 净。
将盖有盖玻片的计数板放在显微镜的载物台上, 调焦,用低倍镜找到计数区检查是否干净。
从试管中吸出培养液进行计数之前,要将 试管轻轻震荡几下,这样使单胞藻分布均 匀,防止单胞藻凝聚沉淀,提高计数的代 表性和准确性,求得的培养液中的单胞藻 数量误差小。

血球计数板计数法培训课件

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计数室的刻处度,一请般联系有网两站或种本规人格删除,。一种是一个 大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25 个小方格,共400小格;另一种是一个大方格分 成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格, 总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数 板,每一个大方格中的小方格数都是相同的。 每一个大方格边长为1㎜,则每一大方格的面积 为1㎜2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的 高度为0.1㎜,所以计数室的容积为0.1㎜3。
a×105×b
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例4、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若 计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成, 如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先 ▲ 后 再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5 个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 ▲ 个。
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血球计数板处,,请通联常系是网站一或块本人特删制除的。 载玻片,其上 由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽 隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每 个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数 室,微生物的计数就在计数室中进行。
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推导:1mm×1m处m,方请联格系的网计站或数本人删除。

《血球计数板使用》课件

《血球计数板使用》课件

血球计数板使用心得:如何提高计数准确性和效率
血球计数板使用心得:如何避免常见错误和问题
感谢观看
汇报人:PPT
计数室:有网格线,便于计数细胞
网格线:横竖交叉,形成小方格,便于定位细胞
计数室底部:有凹槽,便于液体流动和细胞分布均匀
计数室侧面:有刻度,便于测量细胞大小和数量
血球计数板的原理
血球计数板是一种用于计数血液中红细胞、白细胞和血小板的工具。
血球计数板的原理是利用光学显微镜观察血液样本,通过计数板上的网格线来计算血液中的细胞数量。
血球计数板使用前需要清洁,避免污染
血球计数板使用过程中,避免用力过猛,以免损坏
血球计数板使用后,需要及时清洗,避免细菌滋生
血球计数板使用过程中,如果出现计数不准确,需要重新调整计数板位置或更换计数板
血球计数板使用实例
05
实验方案设计
实验注意事项: a. 确保血样和染色剂的浓度合适 b. 避免血样和染色剂的污染 c. 确保显微镜的焦距和照明条件合适 d. 计数时要准确、细致,避免遗漏或重复计数
细胞染色
准备血球计数板和染色液
将染色液倒入血球计数板中
将血液样本滴入染色液中
轻轻搅拌,使血液样本与染色液充分混合
静置一段时间,使细胞染色
观察染色后的细胞,进行计数和分类
计数操作
准备血球计数板和血液样本
将血液样本滴入血球计数板
轻轻晃动血球计数板,使血液均匀分布
观察血球计数板,记录红细胞、白细胞和血小板的数量
血球计数板的网格线分为主网格线和次网格线,主网格线用于计数红细胞和白细镜和血液样本,通过观察和计数来获取血液中的细胞数量。
血球计数板的种类
手动血球计数板:需要人工操作,适合初学者使用

高三血球计数板.pptx

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• (Ⅱ)(12分)
• (1)实验组 手术切除小鼠的内分
泌腺P
不做处理 代谢正常
• 手术创伤对小鼠带来的不良生理变化
• (2)内分泌腺P 注射(饲喂) 适量的物质Q,一段时间后观察小鼠 的代谢状况
知识拓展:
•根据以上实验可以判断物质Q最可能是 _________________,本实验的无关变量是 _________________,
的能量与这一值相比如何?
(大于或小于)。
(2)分析上图可以看出,生态系统的能量流动的特点是
•。
• (1)464.7 13.5 大于 • (2)单向流动、逐级递减 • 62.8÷464.7×100%≈13.5%
❖(464.7-1.5-293.1-96.3)
• 6. 硅藻的生长需要硅酸盐。下图是对两种淡水硅 藻——针杆藻和星杆藻的研究结果,虚线表示海水中 硅酸盐的浓度。图中a表示单独培养针杆藻.b表示单 独培养星杆藻的情况,c表示两种硅藻在一起的培养情 况。下列有关叙述正确的是
1.(11分)人类认识病毒的时间不是很长,但在于病毒的战斗 却是成绩斐然。阅读资料,回答问题:
资料(一):2006年11月以来,日本、新加坡、 意大利等地相继发生了诺瓦克病毒集体感染事件, 近日广州也出现诺瓦克病毒感染者,广州市疾病 预防控制中心有关人士说,今年广州诺瓦病毒性 胃肠炎疫情以散发病例为主,不必恐慌。
应的生理作用,某研究小组选取健康、月龄及生长发 育状况相同的小鼠,平均分为甲、乙、丙三组,实验 过程及结果如下 。
• (1)请完善上表的实验过程及结果。 • (2)有人认为以上实验只能说明实验中观察到的现象
与_________有关,不能验证实验结论,若要完成实 验,还需要对甲组进行怎样的后续步 • 骤?______________________。

计数板构造及血细胞计数 ppt课件

计数板构造及血细胞计数  ppt课件

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PPT课件
三、白细胞计数

7. 有核红细胞的影响:某些情况下,外周血可出现大量有核红细 胞,它不能被白细胞稀释液破坏,计数时与白细胞一同被计入, 导致白细胞计数结果偏高。因此,当血液中出现较多有核红细 胞时,必须将其校正扣除。校正公式:
校正后WBC数/L=X×100/100+Y
X:校正前WBC数 Y:在WBC分类时,计数100个WBC的同时计数到的NRBC
液(取氯化钠1.0g、结晶硫酸钠 5.0 g、氯化高汞 0.5 g,以 200.0ml
12
PPT课件
三、红细胞计数
【操作方法】
1. 用5ml吸管吸取血小板稀释液3.98 2. 用HGB吸管吸取被检血至20μl
3. 擦去管外粘附的血液,吹入小试管中,反复吸吹数次,以洗净 管内所粘附的血细胞,轻轻振荡混合,放置5~10min使红细胞
4. 用毛细吸管吸取被稀释的血液,充入已盖好盖玻片的计数室内, 静置2~3min
5. 将计数板装在显微镜上,在10倍镜下找到计数的中央大方格, 选择5个中方格(四角与中央的中方格或对角线的5个中方格,见 图2和图3),转至40倍镜下计数。
6. 计数规则为:与WBC、RBC计数相同。
13
PPT课件
三、红细胞计数
3. 用HGB吸管吸取混匀的血液稀释液,充入已盖有血盖片的计数板 的计数池内,10~15分钟后即可计数。
4. 将计数板装在显微镜上,在低倍镜下找到计数的中央大方格,选 择5个中方格(四角与中央的中方格或对角线的5个中方格,见 图),转至40倍镜下计数。
5. 计数规则:与WBC、RBC计数相同。
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PPT课件
【器材与试剂】
器材:同WBC计数。 试剂:草酸铵稀释液(10g/L)。
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血球计数板计数法
4
3/11/2021
血球计数板计数法
5
计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个 大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25 个小方格,共400小格;另一种是一个大方格分 成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格, 总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数 板,每一个大方格中的小方格数都是相同的。 每一个大方格边长为1㎜,则每一大方格的面积 为1㎜2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的 高度为0.1㎜,所以计数室的容积为0.1㎜3。
一、实验目的 1、明确显微镜计数的原理。 2.学习使用血球计数板进行微生物计数 的方法。
二、实验材料 酵母菌悬液,血球计数板,显微镜,盖
玻片,无菌毛细管、吸水纸等。
3/11/2021
血球计数板计数法
1
三、实验原理
利用血球计数板在显微镜下直接计数, 是一种常用的微生物计数方法。此法的优点 是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液 (或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖 玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。 由于计数室的容积是一定的(0.1㎜3),所以 可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来 换算成单位体积内的微生物总数目。由于此 法计得的是活菌体和死菌体的总和,故又称 为总菌计数法。
3/11/2021
血球计数板计数法
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血球计数板计数法
14
5.对每个样品计数三次,取其平均值, 计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
第一室 第二室
各中格中菌数
A
B
二室平均值
12345
A-五个中方格的总菌数 B-稀释倍数
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血球计数板计数法
菌数/ml 15
6.清洗血球计数板 血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切
勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹 干,或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有 机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格 内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净, 则必须重复清洗直到干净为止。
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血球计数板计数法
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7.注意事项
(1)实验过程中发现,如何稀释? 如果发现每小格中酵母菌的个数多于10个,可按以下处理:
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血球计数板计数法
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血球计数板,通常是一块特制的载玻片,其上 由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽 隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每 个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数 室,微生物的计数就在计数室中进行。
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血球计数板计数法
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×400×10000×稀释倍数
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血球计数板计数法
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假设:计数室内酵母菌为a个,稀释倍数 为b,则10mL培养液中酵母菌总数为:
a×105×b
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血球计数板计数法
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例4、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若 计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成, 如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先 ▲ 后 再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5 个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 ▲ 个。
(3)因菌液在血球计数板处于不同空间,要在不同焦距下才 能看全,所以,观察时必须不断调细螺旋(调焦距长短), 方可找全。 (4)每个样品重复2—3次,若两次差别太大应重测。
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推导:1mm×1mm方格的计数
1mm×1mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于计 数室厚度为0.1mm,所以计数室的总体积为0.1mm3。
1.16×25型的计数公式: 酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100
×4: 酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80
(参考答案: 2×107)
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四、操作过程
1.稀释 将酵母菌悬液进行适当稀释,菌液如不浓, 可不必稀释。 2.镜检计数室 在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物,则需清洗后才能进行计数。
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3.加样品 将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片, 再用无菌的细口滴管将稀释的酵母菌 液由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过 多),使菌液沿缝隙靠毛细渗透作用 自行进入计数室,一般计数室均能充 满菌液。注意不可有气泡产生。静置 5—10分钟即可计数。
取1ml酵母菌培养液加入到盛有9ml蒸馏水的试管中,摇匀, 再计数;如发现酵母菌的个数仍然过大,则同样再稀释一次, 直至每小格中酵母菌的个数介于5-10,并作记录。
(2)调节显微镜光线的强弱适当,对于用反光镜采光的显 微镜还要注意光线不要偏向一边,否则视野中不易看清楚计 数室方格线,或只见竖线或只见横线。
(参考答案:稀释;2×108)
5×400×10000×10=2×108 。
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例6、 在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释 50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下 的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16个,据此估 算10mL培养液中有酵母菌 ▲ 个。
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4.显微镜计数 将血球计数板置于显微镜载物台上,先用低倍镜找到计 数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。在计数前若 发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。一 般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。若 选用25×16规格的计数板则每个计数室选5个中方格, 可选4个角和中央的中格(即80个小格),若选用 16×25规格的计数板,则数四个角:左上、右上、左下、 右下的四个中方格,(即100小格)中的菌体进行计数。 位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。如遇酵 母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作两个菌体 计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算 样品的含菌量。
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