药理学实验课

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实验药物:乙酰胆碱溶液(1/10万)、
0.1% 硫酸阿托品溶液、1% 氯化钡溶液
实验试剂:台氏液
主要仪器:离体平滑肌槽(浴槽)
3
实验主要步骤

安装离体实验装置
在浴槽(大试管)中,加入台氏液70ml (标 线处),加热,维持水37℃±0.5 ℃ 。
3
实验主要步骤

安装离体实验装置

换能器插入第一通道
问题与思考

吗啡药理学 作用、机制 ? 两种镇痛模 型的区别?
药理学实验
八、药物对家兔动脉血压的影响
1
实验目的及原理
1.1 实验目的:
学习麻醉动物急性血压实验的方法 。 观察传出神经药物对动物血压的影响 。
1.2 实验原理:
盐酸肾上腺素溶液 、酚妥拉明溶液等药物能与 心肌或者血管平滑肌上的相应受体结合,从而 影响家兔的血压。
3
b 主要实验过程(扭体法)
给药组:腹腔注射0.1%吗啡 0.1ml/10g体重 对照组:腹腔注射生理盐水 0.1ml/10g体重 30min后
四只小鼠随机分二组
各组小鼠均腹腔注射0.7%冰醋酸(0.1%酒石酸锑钾) 0.2ml/只
小 鼠 扭 体 反 应
记录各组小鼠潜伏期、15min内的扭体次数
(给药—出现扭体时间)
2
主要实验材料
实验动物:小鼠 实验器材:0.4%戊巴比妥钠、1ml注射器、 1ml灌胃器。
3
主要实验过程(二)
取6只小鼠,称重、分组、标记 给0.4﹪戊巴比妥钠(腹腔、皮下、灌胃) (0.1ml/10g)
计时
观察小鼠翻正反射消失及恢复的时间 分析、比较实验结果
4
实验注意事项
(1)注意给药途径的正确操作。
打开气量调节旋钮,让气泡缓慢通入,1-2个气泡/秒即可。
打开电脑,点击桌面中BL-420图标,进入主菜单,点击工 具栏上的“实验项目”,——消化道实验,——消化道平滑肌生 理特性(2)
双击
3
④ 加药
正常曲线
实验主要步骤
乙酰胆碱
阿托品
乙酰胆碱
1. 肠管 稳定10分 钟,记录 一段正常 活动曲 线。
• 鸡蛋清现配现用。
2、小鼠耳片法
实验目的及原理
2.1 实验目的:
学习利用化学药物刺激制急性炎症动物模型方 法。 观察糖皮质激素的抗炎作用。
ห้องสมุดไป่ตู้
2.2 实验原理:
化学刺激物,可致动物急性炎症,出现局部肿 胀,重量改变,比较給予药物前后动物局部肿 胀程度的变化从而观察到药物的抗炎作用。
2
主要实验材料 和
实验后 1.死亡动物放在 指定地点;存活 动物放入笼内。 2.将器材洗净擦 干,放回原处 3.每小组轮流负 责搞好实验室内 卫生 。
1.预习实验指导 ,明确实验目的 和要求,充分了 解实验方法 2.进入实验室, 必须穿白大衣. 3.检查实验器材
实验课程学习目的
A
巩固药理学基本理论 学习基本的实验方法
药理学实验课
药理教研室
药学专业实验课程安排
(1)实验基本技能 (2)不同给药途径对药物的影响 实验课程安排
共18学时
(3)药物抗炎实验{ 耳片法
足肿胀法
(4)药物对家兔离体肠平滑肌的 作用 (5)吗啡镇痛实验{ 扭体法
热板法
临床医学(本)实验课程
(1)实验基本技能 (2)不同给药途径对药物的 影响 (3)药物抗炎实验
涂抹45min后小鼠脱臼处死,分别用打孔器取相 同部位左右耳片,电子天平称重。计算:
右耳-左耳=肿胀度; 肿胀率=(右耳-左耳)/左耳×100%












4
实验注意事项
• 抗炎实验中动物性别的选择:雄性
• 小鼠耳廓滴加二甲苯时,正反面均匀涂抹。避免 滴入耳廓内。
• 小鼠左右耳打耳片位置统一(耳廓中间部位)。
斜角在上
3
实验主要步骤

离体肠肌的制备
取家兔一只,颈椎脱臼处死。
立即打开腹腔,找到幽门部,分离十二指肠,以2cm左右穿 线,分段结扎,剪取肠段(一只兔取三段)。
每组取一肠段,在上下结扎线内侧边缘各剪一小口。肠段贯通。
3
实验主要步骤

离体肠肌连接及记录
将肠段,一端连结通气钩,置测定管(麦氏浴槽)中。另一 端连结张力换能器弹簧片上。上下调节双凹夹,控制张力的大小。
5、按压温度调节旋钮 6、调温为37℃
1
实验目的及原理
1.1 实验目的:
学习离体平滑肌器官的实验方法。 观察拟胆碱药和抗胆碱药对离体家兔肠平滑肌 的作用。
1.2 实验原理:
乙酰胆碱通过激动M受体兴奋胃肠平滑肌;阿 托平可阻断M受体;氯化钡直接兴奋胃肠平滑 肌。
2
主要实验材料 和
实验动物:家兔
吗啡对小鼠的镇痛作用(扭体法)
组别 鼠号
1 吗啡组 2 1
体重
15min内 药物与剂 疼痛潜伏 潜伏期均 15min内 扭体次数 量 期(s) 值(s) 扭体次数 均值
对照组
2
注:疼痛潜伏期超过15mim,以15mim(900s)计。
4
实验注意事项
• 热板仪温度设定:55℃±0.5 ℃ • 室温 :以15 ~20º C为宜 • 热板法中动物性别的选择:雌性 • 痛阈值判定指标:添后足
实验目的及原理
1.1 实验目的:
学习利用鸡蛋清制急性炎症动物模型方法。 观察糖皮质激素的抗炎作用。
1.2 实验原理:
鸡蛋清为异性蛋白,可致动物急性炎症,出现 局部肿胀,容积增加。比较給药组与对照组动 物局部容积的变化,从而观察到药物的抗炎作 用。
主要实验材料 和 实验动物:大鼠(雄性)
实验药物:0.5%氢化可的松、10%鸡蛋清、
生理盐水
主要仪器:(PV-200足趾肿胀测定仪)
实验主要步骤(大鼠足肿胀)
大鼠两只:称重、标记
动物
甲(给药组):腹腔注射0.5%氢化可的松溶液 计 0.3ml/100g 体重 时 乙(对照组):腹腔注射生理盐水0.3ml/100g 体重
甲、乙二鼠右踝关节的突起点处用笔划线作为测 量标志,测定大鼠正常足容积(见后图) 给药30min, 从右后足掌心向掌跖关节方向进 针,皮下注射10%新鲜蛋清0.1ml。 (见后图)
问题与思考

阿托品是否 对于乙酰胆 碱和氯化钡 均有拮抗作 用?为什么 ? 实验中能影 响离体肠肌 收缩活性的 必要条件有 哪些?
药理学实验
三、吗啡镇痛实验
1
实验目的及原理
实验目的: ①掌握镇痛药的实验方法
(热板法、扭体法)
②观察药物的镇痛作用
实验原理:热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生不同的疼痛反应,观察给 药前后小鼠疼痛反应的变化。
注射蛋清后15min、30 min、45min、,测量右后足的体积,记录 数据。 计算肿胀率=(药后-药前体积)/ 药前体积×100%
皮下注射新鲜蛋清
实验注意事项
• 抗炎实验中动物性别的选择:雄性
• 测定大鼠足体积时,选定统一测量位置(大鼠足 外踝关节突起)
• 注意测量时别把鼠足插得过深,避免测量杯中水 溢出,影响准确性。 • 大鼠捉拿时别捉得过紧,避免其窒息死亡。
分离气管
气管插管
(痛阈值、扭体次数)
2
主要实验材料
实验动物:小鼠(热板法中小鼠为雌性)
实验药物: 0.1%吗啡 生理盐水
实验试剂:0.1酒石酸锑钾(或0.7%冰醋酸)、 主要仪器:热板测痛仪(RB-200智能热板仪)
3
主要实验过程(热板法)
打开实验仪器、设定温度(55℃)
动物初筛(选出四只),称重,合格动物分二组
实验课程安排
共27学时
(4)吗啡镇痛实验 (5)药物对家兔离体肠平滑肌的作用
(6)药物对家兔动脉血压的影响 (7)药物对肠推进实验的影响 (8)药物对家兔心电图的影响
实验课程学习要求
实验中
实验前 1.根据实验内容 进行小组内分工 2.严格、准确地 按照指导中的实 验方法进行实验 操作。 3.仔细、真实的 记录实验结果。
实验动物:小鼠(雄性)
实验药物:0.1%地塞米松、二甲苯、
生理盐水
主要仪器: 分析天平、打孔器、手术剪等
3
主要实验步骤(小鼠耳肿胀)
♂小鼠4只,称重、标记
四只分二组
给药组:腹腔注射0.1﹪地塞米松 0.1ml/10g 体重 计 对照组:腹腔注射生理盐水0.1ml/10g 时 体重
30min后用二甲苯0.05ml均匀涂抹每只鼠 的右耳
测定药前痛阈值。 二组
给药组:腹腔注射0.1%吗啡 0.1ml/10g体重 对照组:腹腔注射生理盐水 0.1ml/10g体重
给药后15min、30min、45min再次测定各组 小鼠痛阈值1次。 实验数据记录、整理、分析
注释: 痛阈值——即小鼠出现疼痛反应的时间。 (以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。) 筛选指标——以痛阈值大于5秒,小于30秒, 做为筛选合格动物。 药前痛阈值——测定2次痛阈值, 2次间隔时间5min,取平均值, 为给药前正常痛阈值。
返回
吗啡热板法镇痛结果
用药后平均痛阈值--用药前平均痛阈值 痛阈值提高百分率= ×100% 用药前平均痛阈值
• •
组别 生理盐水组 0.1%吗啡组
剂量(mg/kg) 0.1ml/10g 0.1ml/10g
动物数 2 2
药前痛阈值(s)
药后痛阈值(s) 15min 30min 45min
药后痛阈值提高百分率(%) 15min 30min 45min
2. 加入1:10 万乙酰胆碱 溶液0.2ml, 记录其收缩 幅度,待收 缩明显后。
3. 立即加入 0.05% 硫酸阿 托品0.2ml。 观察结果。
4. 平滑肌收缩 曲线稳定后, 再次加入1:10 万乙酰胆碱溶 液0.2ml ,结 果与(1)相 比较,观察结 果有何不同。
3
实验主要步骤

加药
5.加入1% 氯化钡溶液0.2ml,观察实验结果。
3
实验主要步骤

麻醉与手术
家兔称重,找到耳缘静脉,用输液针,耳缘静脉注射 1.5%戊巴比妥钠2ml/kg,麻醉。(固定输液针,建立静 脉输液通道)注入适量肝素生理盐水液(冲洗管道并防凝 血)。
将动物背位固定于手术台上,剪去颈部的毛,颈正中 切口,分离气管,(作一倒“T”形切口,插入气管插管, 结扎固定。据情况可免)。
• 初筛:(5s <痛阈值时间< 30s)。 超过60s动物未添足,将动物取 出,痛阈值以60s计算
• 实验中保持小鼠足底及热板内干净、干燥。
• 热板仪测量中注意:及时盖鼠盒盖,避免温度散失。
• 扭体法实验中观察:潜伏期:以注射刺激物到出现疼痛反应(开始腹 部凹陷或扭体)计时。扭体次数:只数扭体反应的次数。 • 酒石酸锑钾、冰醋酸现用现配
(2)注意小鼠翻正反射消失时间判定
(>1min)。
问题与思考

仔细观察记录实验 结果,结合药理学 总论知识思考,何 种给药途径起效最 快。为什么?
影响药物起效的 因素有哪些? 请分析本次实验 中,那些因素可 影响实验结果。
药理学实验
二、抗炎实验
1、大鼠足肿胀法
2、小鼠耳片法
1、大鼠足肿胀法
1
6.待作用明显后,加入0.05% 硫酸阿托品溶液 0.2ml,再次观察结果。
反演窗口及剪辑
2点击
1拖
剪辑板(同时复制)
4
实验注意事项
• 冲洗和分离肠管时动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管。 • 加药时不要把药液直接加到标本上,以免影响结果。
• 如需换液,台氏液液面高度及温度应与以前保持一致。 • 浴温和肠肌的张力均可影响实验结果,应注意调节。
2
主要实验材料 和
实验动物:家兔
实验药物:
肝素生理盐水液(500ml 生理盐水加肝 素12ml)、1.5%戊巴比妥钠溶液、 0.01% 肾上腺素溶液、 0.1%酚妥拉明溶液。
2 主要仪器:
主要实验材料 和
压力换能器1台、BL-420生物机能实验系统 1套、手术刀1把、手术剪1把、止血钳2把、 眼科剪1把、三通2个、气管插管1个、动脉 插管(留置针)1根、动脉夹1个、输液针1 根、20ml注射器1个、5ml注射器1个、1ml 注射器3个、烧杯1个、纱布1块、丝线等。
• 使用打孔器注意:1、安全;2、别打硬物。
• 注意时间合理分配。
问题与思考

炎症的表现 以及炎症的 类型有哪些 ?
本实验中选 择雄性动物 的原因?
药理学实验
四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用
药物对家兔离体肠平滑肌的作用
浴槽实验前准备(预热):
1、领取器材 2、浴槽内加水 3、测定筒内加液 4、接通电源
B C
培养实事求是的学习作风
D
培养动手能力、科研能力
药理学实验
一、基本实验操作
看短片
实验报告
标题
实验目的: 实验原理: 实验器材: 实验方法: 结果: 讨论: 结论:

二、不同给药途径对 药物的影响
1
实验目的及原理 实验目的:掌握小鼠给药的基本方法。 比较不同给药途径药物起效的时 间快慢 实验原理:不同的给药途径药物吸收不同
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