牛奶蛋白质检测方法
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牛奶蛋白质检测方法试析
摘要:用浓硫酸将含氨有机物加热分解,使氮变成氨气,然后加入naoh使之变成碱性,将游离的氨气用水蒸气蒸馏,用硼酸溶液收集蒸馏液,将收集液用标准盐酸或硫酸溶液滴定,求得氨气量,根据食品中的氨与蛋白质的换算系数,可求得蛋白质的含量。
关键字:蛋白质浓硫酸检测方法
引言
牛奶的营养成份很高,牛奶中的矿物质种类也非常丰富,除了我们所熟知的钙以外,磷、铁、锌、铜、锰、钼的含量都很多。最难得的是,牛奶是人体钙的最佳来源,而且钙磷比例非常适当,利于钙的吸收。种类复杂,至少有100多种,主要成份由水、脂肪、磷脂、蛋白质、乳糖、无机盐等组成。而蛋白质含量的高低,在一定程序上决定了牛奶品质的优劣。
1、蛋白质含量检验对试验设备和试剂的要求
在不少牛奶中蛋白质含量检验项目中,用到各种试验设备和试剂。如:消化炉;水流减压器;水蒸汽发生器;定氮蒸馏装置;酸式滴定管;天平(感量0.0001g);浓硫酸; cuso2...5h2o;k2so4;混合指示剂: 称取0.01g甲基红和0.05g溴甲酚绿溶液于40g无水乙醇中,指示剂现配现用; 0.01n盐酸或硫酸标准溶液;硼酸溶液: 20g/l; 10n naoh。
2、检测操作步骤
2.1 取10ml样品放于消化管中.
2.2 称取0.2g(精密到0.01)cuso4和3gk2so4精确至0.01g),用纸槽加入到消化管中.然后加放25ml硫酸.
2.3 将消化管置于消化炉上,接好水流减压器,并用封口膜将连接处封好.
2.4 将消化炉温度设置在420 ℃,升温,使其消化至澄清透明为止,关闭电源,放冷.
2.5 将消化液冷却后,慢慢加放冷水30ml,放冷,然后将消化液定容至100ml.
2.6接好定氮蒸馏装置,将20ml 20g/l硼酸溶液放入吸收瓶中,加入1-2滴混合指示剂,将冷凝管下端浸在液面下,通过小漏斗将消化液10ml加入到蒸馏装置中,经小漏斗加入10ml 10n naoh溶液,通过轻轻拔起玻璃塞使碱液流下,为防止漏气,最后加水于封住玻璃塞,以防漏气。
2.7 从水蒸汽发生器通入水蒸汽蒸馏6-7分钟后,将冷凝管下端离开液面,再蒸馏一分钟左右,将下端用水冲洗,将洗液收集至接受瓶中.n
3.8 用0.01n的硫酸标准溶液或盐酸溶液滴定至接受瓶内硼酸溶液从纯蓝色为灰蓝色。
三、结果计算
x= c*(v1-v2)*6.38*0.014*100 n
式中:x——样品中的蛋白质含量,%
c——标准硫酸或盐酸溶液(mol/l)
v1——样品能消耗标准酸液的体积(ml)
v2——空白所消耗标准酸液的体积(ml)
0.014——1.00ml 1n 酸液相当氮的质量,g
6.38 ——氮换算为蛋白质系数.n
需要注意的是:
1、加碱的速度要快,并在接上有硼酸的锥形瓶后加入,以防氨的逸出。
2、消化时把附在壁上的食物用少量的硫酸冲下,使消化完全,蒸馏时要随时注意防止蒸馏器漏水漏气等情况。
3、水蒸汽发生器中的不可能含有氨气时,加入数滴硫酸至甲基红呈微红色,水蒸气蒸馏不要太慢也不能太过激,分别会引起氨气无法蒸馏出来和使蒸馏液中的naoh变为飞沫进入收集瓶中。
4、混合指示剂在碱性条件下呈纯蓝色,中性条件下呈灰色或蓝灰色,混合指示剂要现配现用。
四、说明
4.1本法是通过氮含量确定蛋白质的含量,因食品中还含有非蛋白质物质含氮,故用本法测得的蛋白质含量为粗蛋白含量。
4.2 水蒸汽发生器中的水可能含有氨气时加入数滴硫酸至甲基红呈微红色。水蒸汽蒸馏不要太慢也不要太过激,分别会引起无法将氨气蒸馏出来和使蒸馏液中的naoh变为飞沫进入收集瓶。
结束语:
保障食品安全离不开食品质量检验,食品质量检验就是通过感官、物理、化学、微生物学等方法对食品的感官特性、理化性能及卫生
状况进行分析测定,并将结果与
规定的要求进行比较,以确定每项特性合格情况的活动。在我国,关于食品卫生的国家标准是强制性标准,生产、销售、进口食品必须符合国家食品卫生标准的规定,食品质量检验也必须按国家卫生标准的规定来进行各项检验。
参考文献:
[1]benabdeslam h,garcia i,brllon g et al.biochemical assessment of the nutritional status of cystic fibrosis patients treated with pancreatic enzyme extracts[j].am j clin nutr,2008,67(5):912.
[2]陈伟国,郑慕韓《高二化学教学与测试》,苏州大学出版社,2011.7.