生物材料中分离纯化淀粉酶教案设计

一、目的和要求

1.掌握盐析法初步分离纯化蛋白质的原理和方法；

2.掌握透析脱盐浓缩蛋白质的原理和方法。

3.掌握膜分离原理和方法

二、基本原理

1.蛋白质的盐析

蛋白质是亲水胶体，借水化膜和同性电荷（在PH值7.0的溶液中一般蛋白质带负电荷）维持胶体的稳定性。由于蛋白质分子内及分子间电荷的极性基团

有着静电引力，当向蛋白质溶液中加入少量碱金属或碱土金属的中性盐类[如(NH4)2SO4、Na2SO4、NaCl或MgSO4等]时，由于盐类离子与水分子对蛋白质分

子上

的极性基团的影响，使蛋白质在水中溶解度增大，因此蛋白质、酶等在低

盐浓度下的溶解质随着盐液浓度升高而增加，此时称为盐溶；当盐浓度不断上

升并达到一定浓度时，蛋白质表面的电荷大量被中和，水化膜被破坏，于是蛋

白质就相互聚集而沉淀析出，蛋白质和酶的溶解度又以不同程度下降并先后析出，称为蛋白质的盐析。

由盐析所得的蛋白质沉淀，经过透析或用水稀释以减低或除去盐后，能再

溶解并恢复其分子原有结构及生物活性，因此由盐析生成的沉淀是可逆性沉淀。盐析法就根据不同蛋白质和酶在一定浓度的盐溶液中溶解度降低程度的不同而

达到彼此分离的方法。盐析法对于许多非电解质的分离纯化都是适合的，也是

蛋白质和酶提纯工作应用最早，至今仍广泛使用的方法。

2.透析脱盐的原理

蛋白质的分子很大，其颗粒在胶体颗粒范围（直径1～100nm）内，不能透

过半透膜。选用孔径合宜的.半透膜，使小分子物质能够透过，而蛋白质颗粒不能透过，这样就可使蛋白质和小分子物质分开。把蛋白质溶液装入透析袋中，

袋的两端用线扎紧，然后用蒸馏水或缓冲液进行透析，这时盐离子通过透析袋

扩散到水或缓冲液中，蛋白质分子量大不能穿透析袋而保留在袋内，通过不断

更换蒸馏水或缓冲液，直至袋内盐分透析完毕。这种方法可除去和蛋白质混合

的中性盐及其他小分子物质，是常用来纯化蛋白质的方法。透析需要较长时间，常在低温下进行，并加入防腐剂避免蛋白质和酶的变性或微生物的污染。

三、试验材料

1.培养基

种子培养基：牛肉膏5g 蛋白胨10g NaCl 5g 可溶性淀粉 2g 葡萄糖1.5g /1000ml H2O 配100ml

发酵培养基：牛肉膏5g 蛋白胨10g NaCl 5g可溶性淀粉 2g /1000ml

2.酶活测定溶液

0.2mol/LpH6.8 PBS缓冲液葡萄糖标准液1mg/mL DNS试剂（3,5-二硝基

水杨酸试剂）

3.试剂

蛋白胨、牛肉膏、可溶性淀粉、(NH4)2SO4、NaOH、HCl、、Na2HPO412H2O、NaH2PO4H2O、EDTA

4.仪器或其它用具

微量移液器、移液器枪头、透析袋、恒温培养箱、摇床、紫外检测仪（分

光光度计）、离心机、分析天平、pH计、量筒、250ml瓶、分装架、记号笔、

纱布、酒精灯、灭菌锅、干燥箱、恒温水浴锅等；

四、试验路线

发酵培养→粗酶液制备→硫酸铵盐析→透析脱盐浓缩→浓缩酶液酶活测定

五、操作步骤

1.菌株发酵

将实验一中纯化的菌株接入种子培养基摇瓶培养24h，2% 的接种量接种到

发酵培养基，37℃，180r/min，培养36h；

2.粗酶液的制备

发酵液在8000r/min离心20min，收集上清液即为粗酶液，测定酶活方法

参见实验三DNS测淀粉酶活力。

3.硫酸铵盐析

3.1 盐析条件的确定

40%、60%和80%

盐析步骤

1）发酵液上清分装至3支烧杯中，每个20ml；

2）加硫酸铵至3支烧杯中，对照25℃硫酸铵饱和度配置表，使其饱和度分别为40%、60%和80%。在加硫酸铵时需缓慢的加入，同时不断的轻柔搅拌（否则局部浓度过高会使酶失活）使硫酸铵完全溶解；

3）室温静置2h，出现白色沉淀

4）离心，分别取沉淀用少量0.2mol/LpH6.8 PBS缓冲液回溶。

4.透析脱盐浓缩

4.1 透析膜前处理

透析袋的预处理方法：

1）将透析袋剪成合适的长度；

2）在一只250 mL的玻璃烧杯中，加入200 mL的透析袋处理液，微波炉中预热；

3）将透析袋装入其中，电炉上煮沸10 min；

4）用蒸馏水彻底洗涤；

5）蒸馏水中煮10 min；

6）冷却后4℃存放，存放过程中透析袋应完全放入0.02mol/L磷酸酸缓冲液（pH7.0）中

7 用细线扎紧透析袋一端，注入清水检验不漏后加入不超过透析袋体积

1/2的须透析溶液。

4.2 操作

1 沉淀用少量0.2mol/LpH6.8 PBS缓冲液回溶，移入透析袋中，经透析膜袋在20倍量0.02mol/L磷酸缓冲液（pH7.0）中在室温，36h透析脱盐（每过6h换一次透析液).

2 取各梯度脱盐沉淀5ml 8000r/min离心20min，取上清测酶活。（沉淀为变性蛋白质酶活很低。）

5.酶活力的测定

参照实验三中的酶活测定。

实验数据

粗酶液 540nm 0.291 0.314

盐析40%60% 80%

1.221

2.708 1.456

七、实验报告

1.实验结果

（1）测定粗酶液酶活；

粗酶液 540nm 0.291 0.314 （取平均值)

酶活力9.705

（2）测定透析后酶液的酶活力

40%60% 80%

540nm吸光度 1.221 2.708 1.456

酶活力36.63 81.24 43.68

2.实验结果分析

通过比较可知在硫酸铵饱和度为 60%时分离纯化淀粉酶酶活力最高。经盐析，透析除盐后酶活力大大提高纯化后的酶活力约为粗酶活力的4~9倍。

八、注意事项

（1）硫酸铵饱和度计算及加入方式：在分段盐析时，加盐浓度一般以饱和度表示，所需达到饱和度较高而溶液的体积又不再过分增大时，可直接加固体硫酸铵，其加入量见附表。注意看清是25℃硫酸铵饱和度表

（2）清洗透析袋内外时，操作过程中应使用镊子或戴手套；

（3）蛋白质溶液用透析法去盐时，正负离子透过半透膜的速度不同。以硫酸铵为例，NH4＋的透出较快.在透析过程中膜内SO42-剩余而生成H2SO4，而使膜内蛋白

质溶液呈酸性，足以达到使蛋白质变性的酸度，因此在用盐析法纯化蛋白质做透析去盐时，开始应用0.1M的NH4OH透析，或者用缓冲液配制蛋白溶液。

酵母蔗糖酶的提取工艺

酵母蔗糖酶的提取工艺摘要蔗糖酶是一种水解酶, 广泛存在于动物、植物、微生物等各种生物体内。它可以不可逆的催化蔗糖水解为D-葡萄糖和D-果糖，为微生物的生长提供碳源和能源。采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶[1]，冻融法和SDS 抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法。其中冻融法的效率最高（纯化倍数比活力与总活力），加之其操作简便，更适合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取。比较了乙醇分级沉淀、硫酸铵分级沉淀对于冻融法得到的粗提物的沉淀效果，结果表明：50%(w/w)乙醇分级沉淀效果较好（比活力与总活力），乙醇分级沉淀所得蔗糖酶经DEAE-Sepharose 离子交换层析纯化后，制得高纯度的酵母蔗糖酶（比活力与总活力）。纯化倍数为16.14倍，比活性为947.805U/mg，回收率为51.6%。蔗糖酶的酶促动力学性质表明，蔗糖酶的最适PH值为4.5，最适温度为50℃，酶的特征米氏常数Km值为13.8mmol/L，最大反应速度Vmax为5.98ug/min。关键词：酵母；蔗糖酶；提取；纯化 Study on Purification of Invertase from Yeast Abstract Sucrase is widespread in prokaryotes and eukaryotes .Sucrase catalyzes the irreversible hydrolysis of sucrose into glucose and fructose.the mainfroms of carbon and energy supplies in microorganism growth and development. This paper used three methods to extract invertase from yeast,which included in this manuscript, three different extraction method breaking cells by adding methylbenzene,frost grinding,and adding SDS for extracting invertase from yeast were investigated.Then the purified invertase was obtained by precipitatation with 50% ethyl alcohol、sequential ammonium sulpate precipitation and DEAE-Sepharose lon-exchange chromatography.The purified sucrase was characterized by SDS-PAGE.The results showed all three methods had both advantages and disadvantages.The invertase extracted by adding SDS and frost grinding had much more total activity than that of extracted by adding methylbenzene.A highest total invertase activity was found in the forst grinding,and it was a convent and economical method for commercial production of invertase from yeast. The results of our study were followed: 1、Purification of invertase from yeast The specific activity was 947.805U/mg,purification fold was 32.28.The activity recovery of sucrase was 51.6%. 2、Properties of sucrase The kinetic characters of the enzyme have been studied.The optimum PH and optimum temperature for the enzyme are PH4.5 and 50℃.Km is 21mmol/Land Vmax is 6.57ug/min. Key words : yeast;invertase;extraction;purification 第一部分文献综述

碱性蛋白酶的分离纯化与性质初探

碱性蛋白酶的分离纯化与性质初探一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义: 1.国内外研究现状碱性蛋白酶(Alkaline protease)广泛存在于微生物中,最早发现在猪的胰脏中，1913年Rhom首先将胰蛋白酶作为洗涤浸泡剂使用。1945年瑞士的Dr.Jagg 等发现了微生物碱性蛋白酶,使其成为洗涤剂的主要添加剂之一。碱性蛋白酶在丝绸、制革工业、饲料工业、动物食品加工中也有广泛用途。由于市场的需求，高产、高效、耐高温、耐高碱的四高型碱性蛋白酶成为国内外当前研究的热点之一[1]。研究结果发现，海洋酶具有作用pH 范围宽，最适pH 和反应温度适中，随反应温度的降低酶活性下降缓慢等特点。海洋酶所具有的独特性质，引起学术界高度重视，日、美等国就此展开了深入的研究。迄今为止，由海洋微生物生产海洋酶的专利已达20 余项。海洋微生物酶的研究正逐渐成为发达国家开发新型酶制剂的重要途径[2,3]。相比之下，国内在海洋碱性蛋白酶研究方面差距较大。综合多篇文献分析，目前针对海洋细菌产生的碱性蛋白酶，分离提纯的方法大致多采用饱和硫酸铵分级盐析和层级技术。首先是从发酵液取上清制备粗酶液（此酶为一种外分泌蛋白，无需通过溶菌酶溶解或超声波破碎细胞来制备粗酶液），通过超速离心沉淀，饱和硫酸铵分级盐析，透析，凝胶层析或离子交换层析来分离提纯该菌所产生的碱性蛋白酶。其中一些已经对酶的性质、序列等进行了研究[4-7]。 2.选题依据及意义此毕业设计的课题为《碱性蛋白酶的分离纯化及性质初探》，主要是对海洋细菌进行培养及分离提纯方案的改进，并对其性质进行初步探究。大致是将各种相关参数和实验数据建立正交关系得到最佳培养条件，并对其产生的碱性蛋白酶进行分离提纯，同时得出最佳分离提纯方案。最后对碱性蛋白酶的性质进行初步研究。本设计针对目前研究较少的产碱性蛋白酶的海洋微生物新菌株，研发新型高效的碱性蛋白酶，这对满足人类生活、生产与技术开发的需求至关重要。这种积极采用微生物代替化学法的探究，有利于开发现代生物新产品的工业化生产技术研究，有利于加快现代生物领域产业的发展。二、研究的基本内容，拟解决的主要问题 1.海水中碱性蛋白酶高产菌株的筛选；

单细胞的生物体教案

第三节单细胞的生物体——学案１．单细胞生物概念：肉眼看不见、身体只有细胞的生物常见种类：酵母菌、、衣藻、眼虫、变形虫形态：倒置草鞋纤毛：是它的结构表膜：的摄入、的排出都通过表膜结口沟：是进入体内的通道构食物泡：食物形成的，逐渐被２．草履虫及胞肛：排出的通道功细胞质：促进物质代谢能细胞核：有、之分收集管伸缩泡、废物对刺激的反应：它能有害刺激３．单细胞生物与有利：可作鱼饵；还可水源等人类的关系有害：危害人类健康；造成等４．思考酵母菌有叶绿体吗？它是如何获得营养物质的？

第三节单细胞的生物体——教案姚学根一知识、技能与情感目标知识与技能：１说明单细胞生物是依靠一个细胞完成生命活动的。２举例说出单细胞生物与人类生活的关系。３学会用显微镜观察酵母菌、草履虫等单细胞生物。过程与方法：通过实验与交流，提高自身的动手能力、思维能力、语言表达能力、探究实验的能力以及自主学习的能力。情感、态度与价值观：认同细胞构成生物体的观点，树立科学的生物观。通过对单细胞生物的观察体验生命存在的美。二教学重点与难点：重点：１、理解酵母菌的结构特点；２、学会用显微镜观察酵母菌、草履虫等单细胞生物。难点：理解单细胞生物的结构特点和生命活动特点。三合作探讨过程：师：复习提问——人体和动物体的组成层次？导入——我们前面学习了解到的生物体是由多细胞组成的……通过预习，同学们一定知道了世界上还有一类只由一个细胞组成的生物吧，请问哪些生物是由一个细胞构成的？生：。

师：很好！我们把这类由一个细胞构成的生物称为单细胞生物，和多细胞生物一样单细胞生物也需要营养、呼吸、排泄、生长、繁殖……，一个细胞如何完成这么多的功能呢？现在请大家根据预习了解到的信息，举例说说单细胞生物是如何依靠一个细胞来完成各项生理功能的？生1：。生2：。生3：。师：播放草履虫的2个视频资料。生：观看、回顾、思考草履虫的生活特点。师：单细胞生物结构简单，个体微小，却与人类有着密切的关系，请同学们举例说说单细胞生物在哪些方面可直接或间接地影响到人类的生产和生活？生：。（有利的方面——可以作为生物科学基础理论的研究材料，研究环境污染的指示动物，鱼类的天然饵料，可以用来净化污水，生产面包和馒头，酿制酒，合成维生素等药物；有害的方面——有些能污染水源造成赤潮，危害渔业，有的会寄生在人的血液里，危害人体健康。）师：下面我们大家一起动手，用显微镜观察与人类关系十分密切的一种单细胞生物——酵母菌，请对照课本P34图8-11看一看酵母菌的形态和细胞结构，思考：（1）酵母菌的结构组成？（出示动画）（2）酵母菌有细胞壁和液泡，它是植物吗？ ——不是，它没有叶绿体。植物依靠叶绿体进行光合作用，制造有机物；而酵母菌通过分解有机物来获得营养物质。

单细胞生物教学设计教案

第四节单细胞生物体教学建议教材和学生分析本节课是本章和全书的最后一节，认识单个细胞也能构成一个具有独立生命活动的生物体。首先以单个细胞能否构成一个生物体的争论吸引学生的思考。再用草履虫的培养叶观察，判断由一个细胞组成的草履虫是否具备生物的基本特征。通过设计实验，看看草履虫是否能对外界做出反应。最后，得出结论。通过实际用环节介绍了更多单细胞组成的生物体，如球藻、酵母菌、大肠杆菌等。教学建议身边事 1.以课本中的讨论作为导入，让学生说出自己的想法和理由。 2.直接以“一个细胞能构成生物体么？”引发学生思考。 3.让学生取一滴水，观察水中的生物体，请学生观察这些生物的结构是怎样的？直接导入探究竟环节中。 4.复习上三节课所学的知识，说说细胞的结构，说说一个细胞可否构成一个生物体呢？探究竟本节“探究竟”活动安排了两个大类的活动：观察和探究。观察活动又安排了两个活动，教师要组织好这两个活动。课前教师一定要准备好草履虫的培养液。草履虫临时装片的制作方法：取一洁净的载玻片，用吸管从草履虫培养液的表面吸取少许液体，滴在载玻片的中央，盖上盖玻片即可。草履虫的运动速度非常快，不易观察，教师应该引导学生设计一些方法来限制草履虫的运动。学生观察完后，教师可组织学生讨论对草履虫生活的看法，并思考回答草履虫是不是一个生物体。通过第一个观察活动，只能说明草履虫是一种生物，但是，并不能说明它是单细胞生物，因为草履虫的结构及其生活是学生课堂上难以观察到的，所以教师要组织好学生观察教科书中的插图或准备好相应的媒体资料，帮助学生学习。第二个观察活动的目的，就是让学生能感受到草履虫既是一个细胞，同时这个细胞还能完成一个生物体的所有生命活动。注意让学生在观察的基础上通过讨论说出他们的理由。最后得出草履虫是一个单细胞生物，一个细胞能构成一个生物体。如果条件允许，教师还可以多提供一些单细胞生物的材料让学生观察，或者提供一些单细胞生物的图片资料也可以。使学生充分认识单细胞生物的存在。教材安排探究“草履虫对外界刺激有反应吗?”这个活动，也是想更进一步说明草履虫是一个生物体，能对外界的刺激做出反应。对外界刺激能做出反应是生物的一个基本特征。这个活动教师在教学时也可以把它安排在完成第一个观察活动之后进行。教师要指导学生在“小辞典”和“技能卡”的帮助下，完成探究活动。要给学生充足的时间讨论交流和做实验，教师不要大包大揽，尽可能让学生自己独立地完成探究活动，学习一种科学探究的方法。教师要组织好实验完成后的讨论交流，尤其要注意让每个小组谈谈他们设计实验的思路和方法，还要学会评价其他小组的实验方案。

(七年级生物教案)单细胞生物教案

单细胞生物教案七年级生物教案学习目标 1、了解单细胞生物的概念和常见种类 2、描述草履虫的结构特点和生理功能特点 3、举例说明单细胞生物与我们人类的关系学习重难点重点：掌握草履虫的结构及草履虫的生理功能特点难点：草履虫的生理功能特点教学方法：新课程问题教学法课前准备教学过程课题引入：构成植物和动物的基本结构单位是什么?像我们常见的芒果树，鸡、鸭、鹅、马、牛、羊他们是由多个细胞组成还是一个细胞组成?世界上有没有只由一个细胞组成的生物呢? 预习小卡片 1.身体只有一个细胞的生物称为。 2.常见的单细胞生物有、、、等。 3.草履虫靠的摆动在水中旋转前进。 4.食物由进入草履虫体内，在内逐渐被消化，不能消化的食物残渣从排出。 5.草履虫氧的摄入、二氧化碳的排出都通过。 6.草履虫通过和把体内多余的水分和废物收集起来，排出体外。 7.一个草履虫每天大约能吃个细菌，因而对污水有的作用。问题教学 1、教学流程 (1)请各小组派代表解答预习卡片上的问题。 (2)播放影片，展示出收集的各种单细胞生物的图片，引导认识常见的单细胞生物。

(3)播放观察草履虫的实验视频，并展示草履虫的结构图，引导学生对照示意图明确草履虫各部分的名称、作用。 (4)复习生物的基本特征有哪些?掌握草履虫的生理特点。 (5)播放影片、展示图片，引导学生从有害与有利两方面分析总结单细胞生物与人类的关系。 2、学习流程 (1)各小组代表纷纷说出自已小组对预习卡片的看法。 (2)学生通过观看影片、图片展示，明确单细胞生物概念。 (3)学生通过观看视频掌握草履虫的结构及各部分结构的作用。 (4)学生回忆生物的七大基本特征?掌握草履虫的生理特点。 (5)学生通过观看影片、图片展示，掌握单细胞生物与人类的关系。问题乐园问题1：从草履虫培养液吸培养液时，为什么要吸表层，而不吸下层? 问题2：假如草履虫在显微镜下运动得很快，如何让它慢下来? 问题3：草履虫的外形像什么?如何运动的? 问题4：草履虫通过什么结构进行呼吸? 问题5：草履虫以什么为食物?食物由什么结构进入体内?食物残渣由什么结构排出? 问题6：单细胞生物与人类生活有什么关系? 设问练习 1、观察草履虫时，用吸管从草履虫培养液中吸取草履虫的最好部位是( ) A、培养液的中层 B、培养液的任意部分 C、培养液的表层 D、培养液的下层 2、草履虫在水中是怎样运动的( ) A、利用鞭毛摆动做螺旋运动 B、利用纤毛摆动做螺旋运动 C、利用鞭毛摆动做直线运动 D、利用纤毛摆动做直线运动 3、草履虫生活在( ) A、海水中 B、人体中 C、土壤中 D、池塘或水沟 4、草履虫体内多余的水分和废物的排出是通过( ) A、胞肛 B、伸缩泡 C、口沟 D、胞咽 5、观察草履虫时，常放一些棉花纤维，目的是( ) A、固定草履虫 B、使草履虫运动缓慢，便于观察

2019-2020年七年级生物上册《单细胞生物》教案1 苏教版

2019-2020年七年级生物上册《单细胞生物》教案1 苏教版教学目标 1、描述单细胞生物的的形态结构和生命活动的特点。 2、举例说出单细胞生物对外界刺激能产生反应。 3、培养学生探究能力。 4、丰富学生对生物多样性和生物对环境适应性的认识。教学重点描述单细胞生物的形态结构和生命活动的特点教学难点教具准备草履虫的形态结构示意图，念草履虫的稻草培养液、载玻片、盖玻片、滴管、显微镜、擦镜纸、脱脂棉、解剖针、食盐、蔗糖，投影仪。教学过程引言：我们已学习了多细胞生物体的组成，多细胞植物体的结构层次是：细胞、组织、器官、个体,多细胞动物体的结构层次是：细胞、组织、器官、系统、个体,它们的结构复杂，单细胞生物体的结构和生命活动是怎样进行的呢？新授第三节单细胞生物（板书）一、单细胞生物的形态结构和生命活动特点。单细胞生物种类很多，分布于淡水、海水、潮湿的土壤中，平时很难见到。看书上不同形态的单细胞生物、变形虫、草履虫，书本P43形形色色的单细胞生物，小瓜虫、喇叭虫、有孔虫、带澡等。单细胞生物很小，只有在显微镜下才能看到它们的结构怎样呢？又是怎样完成生命活动的呢？见书P41第1节 1、单细胞生物的形态结构和生命活动中特点（看书并描述）（1）身体仅由一个细胞构成。（2）能独立完成营养、呼吸、排泄、运动、生殖等生命活动。 2、草履虫的形态结构：（挂图、观察）

（1）形态：像倒转的草鞋底。（2）结构：表膜、细胞质和细胞核，食物泡、伸缩泡。 3、生命活动（阅读、投影、填充）运动：纤毛摆动营养：食物细菌、单细胞藻类，在食物泡中消化吸收。排泄：伸缩泡、表膜呼吸：表膜生殖：细胞分裂思考（投影）简答：为什么说草履虫有净化污水的作用？消耗水中的有机质，吞掉细菌。二、单细胞生物对环境变化的反应单细胞生物不仅依靠一个细胞完成各种生命活动，也能对周围环境变化作出反应。探究草履虫对刺激的反应（完成《生物实验》P17探究报告1~4）指导1、学生2—3人一组，尝试提出有关草履虫对各种刺激（如光、化学物质等）可能产生反应的问题 2、针对问题，提出假设。例如，草履虫能够对某种刺激产生趋向或避开的反应。 3、参照4—7，设计实验，验证提出的假设。（提出建议并巡回指导）学生探究（1）制作临时装片教师建议放少许棉花，以限制草履虫的运动。（2）对照书本P41图，观察草履虫的形态、结构。以及它们是怎样进行生命活动的。指导学生根据提出的问题、假设和实验设计进行探究。（3）注意点：（a）若用化学物质注意量小且颗粒细。（b）若探究光注意遮光后，再观察，动作要迅速。（c）观察时物镜不碰到载玻片上的液滴。

离子交换层析分离纯化蔗糖酶

实验报告课程名称：生物化学实验（甲）指导老师：成绩：__________________ 同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、实验材料与试剂（必填）四、实验器材与仪器（必填）五、操作方法和实验步骤（必填）六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析（必填）八、讨论、心得离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶一、实验目的和要求： 1、学习离子交换层析的基本原理； 2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术； 3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。二、实验内容和原理： 1、离子交换层析（Ion Exchange Chromatography 简称为IEC ）离子交换层析是常用的层析方法之一。它是以离子交换剂为固定相，根据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。离子交换剂与流动相中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。这些过程都是可逆的。在某一pH 值的溶液中，不同的蛋白质所带的电荷存在差异，因而与离子交换剂的亲和力就有区别。当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时，使某一种蛋白质的电荷被中和，与离子交换剂的亲和力降低，不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来，达到分离的目的。离子交换剂是由基质、电荷基团（或功能基团）和反离子构成。基质————电荷基团————反离子专业：姓名：学号：日期：地点：装订线溶液中的离子或离子化合物

阳离子交换剂基质—+ 《==可逆交换==》+ 阴离子交换剂基质+ —《==可逆交换==》— 由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液环境中，粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷，因此我们用阴离子交换剂可以先与蔗糖酶样品可逆交换吸附，然后通过用盐离子强度逐渐提高的洗脱液，使蔗糖酶和其他杂蛋白质的电荷被中和，与离子交换剂的亲和力降低，把不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来，从而达到分离蔗糖酶的目的。 2、酶活力检测(定性检测）蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），是一种水解酶。它能催化非还原性双糖（蔗糖）的1,2－糖苷键裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖（还原糖）。因此，每水解1mol蔗糖，就能生成2mol还原糖。还原糖的测定有多种方法，如采用3.5－二硝基水杨酸法，其原理是 3.5－二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。本实验在离子交换层析分离纯化的过程中，对分离纯化样品采用 3.5－二硝基水杨酸法来初步判定样品中还原糖含量的多少，由此来确定并收集蔗糖酶纯化样品。三、实验材料与试剂：

2.4单细胞的生物体教案2

单细胞生物体教材分析本节通过讲述草履虫的形态结构特点和生命活动特点，使学生认识到单细胞生物可以独立完成生命活动，这也是本节的重点和难点，因此，教材安排了两大类活动：观察和探究。通过第一个观察活动，说明草履虫是一种生物；通过第二个观察活动，让学生能感受到草履虫既是一个细胞，同时这个细胞还能完成一个生物体的所有生命活动；通过探究“草履虫对外界刺激有反应吗？”这个活动，更进一步说明草履虫是一个生物体。在这两大类活动过程中，既培养了学生的观察能力、思维能力、分析问题以及解决问题的能力，又培养了学生的小组合作意识。学生分析由于学生平时对草履虫缺乏感性认识，因此，在学习过程中会对草履虫的形态结构和如何完成某些生命活动难以理解。设计理念本节以素质教育理论为指导，以突出学生自主学习、自主发展为主题，采用的是美国教育家萨斯曼提出的探究性教学法。 “探究式”教学法是充分利用学生对新奇的事物进行探索、调查、研究的心理，由教师向学生提出课题和方法，引导学生去观察、思维、分析、推理并得出结论。教学目标知识性目标说明单细胞生物可以独立完成生命活动。技能性目标提高制作及观察临时装片的技能；通过科学探究活动，培养观察能力、实验能力、思维能力、自学能力以及语言表达能力等。情感性目标通过学习，再次认同细胞构成生物体的观点；通过科学探究，养成实事求是的科学态度和小组合作精神课时安排：本节教学需1课时教学准备

教师：①草履虫培养液、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、放大镜、棉花纤维、细线、胶水、糖、食盐水、牛肉汁。 ②挂图或录像（有关草履虫的结构及其生活方面）。学生：教材、笔记本。教学过程教师提问：前面我们学习过一种藻类植物一一小球藻，谁能给大家描述一下小球藻的形态。学生回答：略。教师导入：象这种整个身体是由一个细胞构成的生物，被称为单细胞生物。今天我请同学们观察实验台上放置的培养液，你知道里面培养的是哪种生物吗？学生状态：观察、思考，引起了强烈的好奇心。（还可利用学生自编的有关人得了某些单细胞生物寄生而引起疾病的小品，由问题“该病的病因是什么？”导入新课。）教师启发：培养的也是单细胞生物的一种一一草履虫。这类生物的形态结构和生活方式是怎样的呢？下面请同学们利用已给的实验仪器（草履虫培养液、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、放大镜、棉花纤维、细线、胶水），以小组为单位，想办法设计实验：怎样才能观察到草履虫的外形和运动。学生活动：讨论、交流、实验、观察。教师引导：老师观察到每组同学都操作地非常认真、仔细。有的组实验很成功，有的组也出现了一些问题，下面同学们之间互相交流一下。交流的时候，可以说一说你们组是怎样做的实验？在实验过程中出现了什么问题，你们又是怎样解决的或请教其他组同学帮助想办法解决问题。学生活动：互相交流、吸取教训、学习经验。学生总结：草履虫的外形像一只倒转的草鞋，它是翻转着向前运动的，由此，可证明草履虫是生物。教师提问：同学们刚接触这门学科时，我们共同分析了判断生物的基本标准是什么？下面请同学们再谈一谈。学生回答：略教师设疑：其中判断标准之一是生物能对外界的刺激做出反应，草履虫对外界的刺激有反应吗? 学生状态：思考。教师引导：同学们按照科学探究的步骤，结合“技能卡”和“小词典”，以小组为单位，合作探究、解决此问题。学生表现：自学、合作探究、解决问题。

教学设计：单细胞生物(优质课)

设计人：_______________ 备课时间： 2019 年8 月 25 日编号：____________

作业/拓展1、下列不是单细胞生物的是（） A、酵母菌 B、衣藻 C、草履虫 D、水绵 2、草履虫吸入氧，排出二氧化碳的过程是通过下列那一结构完成的（） A、细胞核 B、细胞质 C、表膜 D、伸缩泡 3、观察草履虫时，用吸管从草履虫培养液中吸取草履虫的最好部位是（）Ａ培养液的中层Ｂ培养液的任意部分Ｃ培养液的表层Ｄ培养液的下层 4、草履虫在水中是怎样运动的（）Ａ利用鞭毛摆动做螺旋运动Ｂ利用纤毛摆动做螺旋运动Ｃ利用鞭毛摆动做直线运动Ｄ利用纤毛摆动做直线运动 5.生物体对外界刺激都能作出一定的反应.。虽然草履虫的结构很简单,但是他对外界的有力刺激或有害刺激能够作出反应.。图甲、乙表示两块载玻片，分别在载玻片两端各滴一滴草履虫培养液，并使两滴培养液连通。当在两块载玻片右侧培养液的边缘分别放一小粒食盐和一滴肉汁时，分析可能出现现象以及出现这种现象的原因，你能从中得出什么结论? (1)在甲,乙载玻片下方的( )内用箭头表示草履虫移动的方向. (2)出现不同现象的原因是甲：___________________。乙: ___________________。 (3)结论是: ___________________。 1.理念：基于课程标准，追求目标—教学—评价的一致性，以评价驱动教学，有效落实国家课程,实现有效教学。 2.内涵：(1)既定教学目标、课中学习目标及评估目标三者内容上的同一性(2)教学目标、学习方法、评估工具三者本质上的同一性

3.基本程序与原则：以“教学效益”为纬线，“教师的教学哲学、智慧与能力”为经线，遵循“教—学—评一致性”，处理好三个程序：制定学习目标（回答：什么最值得学习）——设计课堂评价（回答：如何证明实现了目标）——选择教学策略（回答：怎样安排教学活动帮助达标）。 4.构成：包括四部分：（1）学习目标的设置（2）评价任务的设计（3）教学设计（4）作业/拓展设计。 5.操作方法：首先，确立清晰的学科目标。依据制定目标的三个依据:课标在哪里？——回答：学生需要学什么？文本在哪里？——回答：学什么最有价值？学生在哪里？——回答：学生学习的起点是什么？通过一系列的目标具体化技术,制定出准确、清晰、可测量的学习目标。其次，设计基于目标的评价任务。明确目标之后，教师就应该设想“我用什么样的检测工具可以检测学生目标达成的程度”，了解学生已经学习到了什么，离预设的目标还有多远，以便于自己作出基于证据的教学决策。第三，规划基于目标的教学过程。即如何在教学过程中落实上述的评价任务，以便于学生有更好的表现，同时也便于自己不断了解学生的目标达成情况。这样既体现基于课程标准的教学、以学定教、目标导向教学等思想，也体现了教学与评价二合一的思想。第四，实施规划好的教学过程。这一环节最关键的问题有三个：一是自始至终把目标当作一节课的灵魂，教学的关键行为都应指向目标的达成；二是把教的过程当作评的过程，不断了解学生学到了什么，不断作出后续基于证据的教学决策；三是处理好预设与生成的问题。第五，布置基于目标检测的有效作业。在设计、实施教学的基础上，进一步地思考作业的问题，如，布置的作业是检测什么目标的，与目标相匹配的作业是什么样的，如何反馈作业结果才能促进学生的后续学习等。第六，撰写教学反思与评价。通过思考总结教学过程中的成功之处、不足之处、教学机智等，以写促思，以思促教，实现专业成长。

蔗糖酶的分离提纯讲解

蔗糖酶的分离提纯【实验目的】 1．了解蔗糖酶分离提纯的方法。 2．掌握离心技术、电泳技术、层析技术、膜分离技术和分光光度法。【实验原理】蔗糖酶[Ec 3．2．1．26]习惯命名β--D--Fructofuranosidase 系统命名：β--D —Fructofuranosideffructonydrolase 。蔗糖酶是一种水解酶，能使蔗糖水解为果糖和葡萄糖。它所催化的反应是： H OH OH H 蔗糖 + H OH OH H 葡萄糖果糖蔗糖酶的分布相当广，在微生物、植物及动物中都有它的存在。在微生物中，酵母中的含量很丰富。在研究中用的最多的是面包酵母和啤酒酵母。研究表明采用菌体自溶法破碎酵母细胞，采用乙醇分级和DEAE--纤维素柱层析两步分离提纯步骤，就可制备纯度较高的蔗糖酶制剂，而且收率也较好。从酵母中制备蔗糖酶，材料来源十分方便，而且以自己提纯的酶制剂进行蔗糖酶的性质、动力学研究也十分方便。【实验材料、仪器和试剂】 1．实验材料和试剂 (1)0．2％葡萄糖标准液；(2)3，5-二硝基水杨酸试剂；(3)新鲜啤酒酵母； (4)甲苯；(5)乙酸钠；(6)稀乙酸溶液；(7)95％乙醇；(8)DEAE--纤维素；(9)0.5mol ／L NaOH ；(10)0.5mol ／L HCl ；(11)0.005mol ／L ，pH6.0的磷酸钠缓冲液；(12)含O.15mol ／L NaCl 的O.005mol ／L ，pH6.0的磷酸钠缓冲液； CH 2OH H OH H H OH CH 20H

(13)5％蔗糖；(14)测定蛋白质浓度试剂；(15)聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂2．仪器 (1)恒温水浴；(2)烧杯、量筒、移液管、容量瓶、玻棒；(3)冰盐浴； (4)离心机；(5)721型分光光度计；(6)柱层析装置；(7)天平；(8)pH计； (9)滴管、试管和血糖管；(10)秒表【方法】一、葡萄糖浓度标准曲线的制作 1．取10支血糖管，按下表加入0．2％葡萄糖溶液、水及3，5一二硝基水杨上述试剂混匀后，在沸水浴中加热5min，取出立即冷却，以蒸馏水稀释至25mL，摇匀，于540nm测光密度。 2．以葡萄糖含量(mg)为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制标准曲线。二、蔗糖酶的分离提纯 1．蔗糖酶粗品的制备 (1)自溶称取10克干酵母，放在200mL的烧杯中，加30mL蒸馏水搅成糊状，再加入 1.5克乙酸钠。然后在35℃水浴中搅拌30min，此时会观察到菌体自溶的现象。 (2)提取及粗酶的制备往上述自溶液中加60mL蒸馏水，将烧杯用表面皿或玻璃纸盖好，于35℃保温过夜。第二天，将自溶液于4500r／min离心20min。取出离心管，小心将上清液倒入烧杯中，弃沉淀。得到的上清液就是无细胞抽提液，即粗酶液（E1）。量出粗酶液体积，记录。取2mL作为待测活力和蛋白浓度的样品（4℃保存）。2．乙醇分级将粗酶液用稀醋酸调pH至4.5。 (1)32％乙醇饱和度按下面的公式算出使粗酶液的乙醇浓度达32％时所需乙醇体积。

酶的分离纯化方法介绍

酶的分离纯化方法介绍酶的分离纯化一般包括三个基本步骤：即抽提、纯化、结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液，此时不可避免地夹带着一些杂质，然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来，或者从此溶液中选择性地除去杂质，然后制成纯化的酶。关键词：酶抽提纯化结晶制剂细胞破碎cell disruption 盐析亲和沉淀有机溶剂沉淀生物细胞产生的酶有两类：一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶，称为细胞外酶。这类酶大都是水解酶，如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶，就是由枯草杆菌和根酶发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高，容易得到；另一类酶在细胞内产生后并不分泌到细胞外，而在细胞内起催化作用，称为细胞内酶，如柠檬酸、肌苷酸、味精的发酵生产所进行的一系列化学反应，就是在多种酶催化下在细胞内进行的，在类酶在细胞内往往与细胞结构结合，有一定的分布区域，催化的反应具有一定的顺序性，使许多反应能有条不紊地进行。酶的来源多为生物细胞。生物细胞内产生的总的酶量虽然是很高的，但每一种酶的含量却很低，如胰脏中期消化作用的水解酶种类很多，但各种酶的含量却差别很大。因此，在提取某一种酶时，首先应当根据需要，选择含此酶最丰富的材料，如胰脏是提取胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、淀粉酶和脂酶的好材料。由于从动物内脏或植物果实中提取酶制剂受到原料的限制，如不能综合利用，成本又很大。目前工业上大多采用培养微生物的方法来获得大量的酶制剂。从微生物中来生产酶制剂的优点有很多，既不受气候地理条件限制，而且动植物体内酶大都可以在微生物中找到，微生物繁殖快，产酶量又丰富，还可以通过选育菌种来提高产量，用廉价原料可以大量生产。由于在生物组织中，除了我们所需要的某一种酶之外，往往还有许多其它酶和一般蛋白质以及其他杂质，因此为制取某酶制剂时，必须经过分纯化的手续。酶是具有催化活性的蛋白质，蛋白质很容易变性，所以在酶的提纯过程中应避免用强酸强碱，保持在较低的温度下操作。在提纯的过程中通过测定酶的催化活性可以比较容易跟踪酶在分离提纯过程中的去向。酶的催化活性又可以作为选择分离纯化方法和操作条件的指标，在整个酶的分离纯化过程中的每一步骤，始终要测定酶的总活力和比活力，这样才能知道经过某一步骤回收到多少酶，纯度提高了多少，从而决定着一步骤的取舍。酶的分离纯化一般包括三个基本步骤：即抽提、纯化、结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液，此时不可避免地夹带着一些杂质，然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来，或者从此溶液中选择性地除去杂质，然后制成纯化的酶制剂。下面就酶的分离纯化的常用方法作一综合介绍：一、预处理及固液分离技术 1.细胞破碎（cell disruption）高压均质器法：此法可用于破碎酵母菌、大肠菌、假单胞菌、杆菌甚至黑曲霉菌。将细胞悬浮液在高压下通入一个孔径可调的排放孔中，菌体从高压环境转到低压环境，细胞就容易破碎。菌悬液一次通过均质器的细胞破碎率在12%-67%。细胞破碎率与细胞的种类有关。

蔗糖酶的提取分离

蔗糖酶的发酵生产及酶学性质研究摘要：本实验酵母中蔗糖酶进行分离纯化并对酶学性质进行了初步的研究。结果表明:酵母蔗糖酶的最适pH为5.0, 最适温度为45℃。关键词：蔗糖酶、酶学性质 1前言蔗糖酶(Sucrase, EC3.2.1.26) 又称转化酶(Invertase)。可作用于β-1,2糖苷键,将蔗糖水解为D-葡萄糖和D-果糖。由于果糖甜度高,可用以转化蔗糖,增加甜味,制造人造蜂蜜,防止高浓度糖浆中的蔗糖析出,制造含果糖和巧克力的软心糖,还可为果葡糖浆的工业化生产提供新的方法。本实验对酶的动力学性质分析, 是酶学研究的重要方面。本研究通过一系列实验对酵母蔗糖酶的动力学性质如最适温度、最适pH、酶的固定化等进行了初步研究，更好的了解了没得性质。 2材料与方法 2.1 材料与设备 2.1.1 实验材料酵母、活性干酵母、壳聚糖 2.1.2 试剂及配制方法葡萄糖、蔗糖、豆芽汁浸汁、Na 2HPO 4 、KH 2 PO 4 、MgSO 4 、NaCl、NaOH、Na 2 CO 3 、盐酸、氨水、琼脂、酒精均为国产分析纯。 95%乙醇溶液、DEAE-Sepharose Fast Flow、1 mol/L醋酸溶液、0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液(pH值7.3)0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液(内含0.5 mol/L NaCl溶液，pH值7.3) 葡萄糖标准液配制（1mg/ml）：预先将分析纯葡萄糖置80℃烘箱内约12小时。准确称取500mg葡萄糖于烧杯中，用蒸馏水溶解后，移至500ml容量瓶中，定容，摇匀（冰箱中4℃保存期约一星期）。 1% 3，5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：酒石酸钾钠100 g溶于400 mL蒸馏水，加热中依次加入NaOH 5 g，3，5-二硝基水杨酸5 g，苯酚1 g，亚硫酸钠0.25 g，搅拌至溶。冷却后定容至500 mL，储于棕色瓶室温保存。 10%蔗糖溶液：10g蔗糖溶解于蒸馏水中，定容至100ml 0.1 mol/L pH 7.8 Tris-HCl缓冲液

木瓜蛋白酶的提取

木瓜蛋白酶的提取、分离纯化及其生物学研究综述及实验方法 13生物技术第二大组第二小组组员：王玓玥（组长）、王子贺、王思瑶、王宇涛、王守鑫、谭国栋一、研究背景：在经济飞速发展的今天，人们的生活水平已远远不只在于吃饱穿暖，食品的安全和营养问题受到人们越来越多的关注，绿色健康的生活也成为大家共同的追求，木瓜蛋白酶以它自身耐热及特殊结构等特点被广泛的用于食品行业，如何分离纯化得到高纯度低成本的木瓜蛋白酶则是人们现在研究的重点，本小组便也以此为研究主题展开实验。二、木瓜蛋白酶基本介绍：木瓜蛋白酶，又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，这种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，当Cys25被氧化剂氧化或与金属离子结合时，酶的活力被抑制，而还原剂半胱氨酸（或亚硫酸盐）或EDTA能恢复酶的活力木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。它的外观

为白色至浅黄色的粉末，微有吸湿性；木瓜蛋白酶溶于水和甘油，水溶液为无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，但几乎不能分解蛋白胨。木瓜蛋白酶的最适合PH值6～7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点（pI）为8.75；木瓜蛋白酶的最适合温度55～65℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。。另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。纯木瓜蛋白酶制品可含有：（1）木瓜蛋白酶，分子量21000，约占可溶性蛋白质的10%；（2）木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000，约占可溶性蛋白质的45%；（3）

生物《只有一个细胞的生物体》教案(人教版七年级下)

第二单元第三章第三节只有一个细胞的生物体学习目标： 1、通过观察草履虫的取食、运动和各种视频资料，能够利用事实说明只有一个细胞的生物也能独立完成各项生命活动； 2、通过对单细胞生物生命活动的观察，认同细胞构成生物体的观点； 3、举例说明单细胞生物和我们人类的关系，养成珍惜生命，爱护生命的情感。重点和难点重点：观察草履虫的生命活动、了解草履虫运动、呼吸、消化等生理功能。难点：利用事实说明对于单细胞生物来说，一个细胞就是一个完整独立的生物体。一、情境引入：你了解的生物之最：如最快、最大等，引入最小的生物------单细胞生物。课件展示：各种单细胞生物的图片，包括单细胞动物、单细胞植物和真菌等各个类群。教师介绍：这些美丽的生物就悄悄地生活在我们周围。在水里、土壤、空气中都有他们的身影，但是他们如此之小----只有一个细胞构成，以致我们看不见它们。二、自主探究，合作交流学习任务一：观察草履虫 1、观察草履虫的永久装片，简单识别草履虫的形态、大小、结构。 2、汇报观察结果，并提出自己的疑问。思考：小小的草履虫只有一个细胞，它能像高等动物那样呼吸、消化、运动甚至思考么？ 3、自学教材69页，观察草履虫的外形和运动，并结合课后练习2中的实验，设计实验方案，探究草履虫的应激性。 4、课件展示草履虫的结构并引导学生总结草履虫的生理：呼吸---- 消化---- 排泄---- 运动----

应激性--- 教师总结：单细胞生物如草履虫虽只是一个细胞，但像高等动物那样能完成呼吸、消化、排泄等生理活动，能正常的生活，同样构成了一个完整的生命体。学习任务二：列举单细胞生物与人类的关系学生阅读教材相关内容，小组内探讨单细胞生物与人类的关系。拓展延伸：你知道赤潮现象吗？三、系统总结：引导学生构建知识体系四：诊断评价 1、下列那一单细胞生物没有运动能力（） A. 酵母菌 B. 草履虫 C. 衣藻 D. 变形虫 2、下列那一单细胞生物细胞里含有叶绿体,能进行光合作用? ( ) A. 酵母菌 B. 草履虫 C. 衣藻 D. 变形虫 3、珊瑚虫和草履虫的比较,下列那一句描述是正确的 ( ) A.草履虫是单细胞生物,故单一细胞行使的生理机能较珊瑚虫的一个细胞多。 B.草履虫是单细胞生物,故细胞内的多种构造没有特定的功能。 C.珊瑚虫细胞间的依赖性较草履虫小 D.珊瑚虫的细胞间彼此没有分工合作的现象 4、如果下列语句叙述正确，请在句后（）里写T；如果错误，请在句后（）里写F。 ①草履虫污染水源，对人类是有害的。( ) ②生物圈里的大多数生物都是单细胞生物。 ( ) ③单细胞生物也可以叫做原生动物。( ) ④近年来赤潮的不断发生，是海洋受到污染的结果，是渔业的一大灾难。 ( ) ⑤海洋单细胞植物可以进行光合作用，是大气中氧气的重要来源之一。( )