液相常见问题
关于液相常见的一些问题
• 目前的做法都是给用户的柱前（ALS—TCC/column） 目前的做法都是给用户的柱前（ALS TCC/column TCC/column） 的不锈钢毛细管线更换成更粗的， 的不锈钢毛细管线更换成更粗的，但是有时候很 难去找这根管子，我在耗材书上找了一下： 难去找这根管子，我在耗材书上找了一下： • 不带接头的不锈钢毛细管软管与不锈钢接头（部 不带接头的不锈钢毛细管软管与不锈钢接头（ 件号5062 2418） 5062手拧接头（部件号0100 0100件号5062-2418）或PEEK 手拧接头（部件号01001516）配合使用。 1516）配合使用。 • 岛津的不锈钢管线我问过了，是0.3mm的，如果能 岛津的不锈钢管线我问过了， 0.3mm的 建议工厂做出不同长度的kit就好了， kit就好了 建议工厂做出不同长度的kit就好了，中药厂的用 户购买仪器时可选， 户购买仪器时可选，这样既可以让用户感觉到我 们有对特殊方法解决方案的预见性， 们有对特殊方法解决方案的预见性，也可以不给 用户错觉-- 我们HPLC在某些方面不如岛津） --（ HPLC在某些方面不如岛津 用户错觉--（我们HPLC在某些方面不如岛津）
• 一般会表现为，鬼峰出峰较晚，水相 一般会表现为，鬼峰出峰较晚， 高的时间越长，鬼峰越大。 高的时间越长，鬼峰越大。其实在用 户现场，由于水和流动相的质量， 户现场，由于水和流动相的质量，很 难将鬼峰完全消除。 难将鬼峰完全消除。但大家可以用实 验来证明。 验来证明。大家对这样的问题如果先 跟用户沟通好，不是仪器的问题， 跟用户沟通好，不是仪器的问题，是 污染的问题，污染的责任不在我们， 污染的问题，污染的责任不在我们， 而在用户， 而在用户，不要在用户现场去了好几 次后，才对用户说仪器没问题。 次后，才对用户说仪器没问题。让用 户认为工程师不能解决问题以后的推 诿。
液相常见问题及解决方法
液相常见问题及解决方法问题1：液相困扰人群广泛且珍贵液相是化学实验中常见的一种分析技术，它广泛应用于各个领域。
然而，在进行液相分析时，常常出现一些问题，影响了实验结果的准确性和稳定性。
以下是液相常见问题及解决方法的一些示例：问题1.1：样品制备不足导致分析结果不准确•问题描述：样品制备不足是液相实验中常见的问题之一。
样品制备不足可能导致分析结果偏低或波动大，影响实验结果的可靠性。
•解决方法：1.确保样品制备过程中的各个步骤严格按照标准操作进行，避免操作失误。
2.采用适当的提取方法和提取溶剂，确保样品中目标成分的充分提取。
3.样品制备前要进行充分的前处理，如过滤和稀释等，以避免可能影响分析的干扰物质。
问题1.2：柱寿命短导致分离效果下降•问题描述：在液相分析中，柱寿命是一个重要的指标。
柱寿命短可能导致分离效果下降，分析结果不准确。
•解决方法：1.使用高质量的液相色谱柱，选择具有较长寿命的柱材料和填料，以提高柱寿命。
2.避免使用过高的流速和压力，以减少对柱的损伤。
3.注意样品的准备和预处理，以减少对柱的污染。
问题1.3：溶剂残留影响结果准确性•问题描述：溶剂残留是液相实验中常见的问题之一。
溶剂残留可能会干扰分析结果，影响结果的准确性。
•解决方法：1.在制备溶剂和洗涤溶剂时，选择纯度高、溶剂残留低的溶剂。
2.采用适当的溶剂饱和度和流速，以避免溶剂残留的问题。
3.在分析前，进行合适的样品预处理，如蒸发浓缩和固相萃取等，以减少溶剂残留的影响。
问题2：常见的仪器故障及解决方法液相实验中，仪器故障是常见的问题之一。
仪器故障可能导致实验无法进行或结果不可靠。
以下是常见的仪器故障及解决方法的示例：问题2.1：泵压不稳定导致结果波动大•问题描述：泵压不稳定是液相实验中常见的问题之一。
泵压不稳定可能导致分析结果波动大，影响分析结果的可靠性。
•解决方法：1.检查液相泵的密封件是否正常，是否需要更换。
2.确保供液系统中的气泡被完全排除，以避免泵压波动。
液相色谱常见问题及其对策
HPLC如何得到好的结果 …
• 流动相
• 缓冲液 / 溶剂选择, 梯度优化, 流速选择 • 脱气，流速稳定, 流动相制备
•柱
• 高柱效, 二级作用力, lot variation, 温度控制
• 检测
• 灵敏度, 选择性, 温度波动影响
• 样品
• 提取方法选择, 样品溶剂选择, 氧气影响
• 仪器
吸滤头
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液相色谱容易出问题的部件
吸滤头 材料：不锈钢烧结，孔径10um 故障：堵塞 表现：管路中不断有气泡生成 措施：用5％～20％的稀硝酸，超声波清洗，
再用蒸馏水清洗 注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断
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液相色谱容易出问题的部件
LC-10ATvp泵：串联 式往复泵
LC-10ADvp泵：并联式 往复泵
泵漏液 1、单向阀松动 2、泵密封损坏 3、放空阀损坏 4、接头松动（不要拧的太紧）
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液相色谱常见问题及其对策－漏液
进样阀漏液 可能原因 1、转子密封损坏 2、定量环堵塞 3、进样口密封松动 4、进样针尺寸不合适 5、废液管产生虹吸 6、废液管堵塞
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液相色谱常见问题及其对策－漏液
检测器漏液 可能原因 1、流通池垫片损坏 2、流通池透镜破碎 3、手紧接头处漏液 4、废液管堵塞 5、流通池堵塞
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液相色谱容易出问题的部件 柱子
故障：系统高压、峰型变差（拖尾峰、前沿峰、分叉 峰），保留时间的改变
解决措施：清洗
正相柱，正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇 反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05M稀硫酸
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液相色谱容易出问题的部件
峰产生有肩或分叉的原因
1. 柱子劣化 （进口处产生不均匀的空隙）
液相常见问题
液相的常有问题 :一、在实质工作中 ,我们常常能碰到基线的漂移的状况。
对于基线漂移(或上下波动 )的原由 ,可能有以下几种 :1、柱子的均衡时间长。
一般来说,新柱子的均衡时间要短。
有些老柱子的均衡就是时间长。
自然 ,柱子的均衡就是时间也与它使用的流动相有关系。
假如使用了离子对试剂 ,那么比一般的简单的流动相(比如二元流动相 :甲醇 :水,乙腈 :水,,,,,,)2、系统存在漏点。
假如系统存在漏点,那么出现基线向下漂移。
需要检漏3、PUMP 头有气泡。
PUMP 头的气泡会致使基线的漂移与颠簸。
假如思疑就是PUPM 头有气泡致使基线不稳 ,只要要瞧仪器的压力就能否稳固就好。
4、流动相脱气。
假如流动相没有脱气,基线必定就是不稳的5、柱后气泡。
在柱子后有气泡产生,致使检测器中的读数有颠簸。
6、PUMP 密封不好。
密封不好 ,也会致使 PUMP 头的气泡 (好象不可以能 )与漏夜 , 基线自然不稳固了。
7、系统的环境。
仪器的使用 ,如温度的变化 ,流速的变化 ,,,,,,,以及梯度洗脱 ,自然基线漂移8、单向阀睹塞或污染。
单向阀的睹塞与污染,能造成流量不正确 ,压力颠簸。
故也会颠簸 ,漂移9、检测器污染或有杂质10、假如就是紫外或二极管阵列检测器(PDA), 清除以上原由还出现基线噪音大,就有可能就是氘灯的能量不足了二、主峰后边有好多杂质峰可能原由1,仪器问题 :最有可能的就就是系统污染,特别就是管路 ,比方 ,进口单向阀或各接口处等有盐残留 ;2,色谱柱问题 :这个好办 ,换新的色谱柱 ,大多半能解决问题 ;3,试剂试药问题 : 所用试剂、试药达不到色谱级别所需 ,或许不同批号不同厂家的东西都有可能影响 ,最直接影响的就就是物质的纯度影响流动相的汲取 ; 4,梯度洗脱程序 :梯度洗脱程序设置不合理 ,比方在某个时间段急巨变化 ; 5,其她 :如配制方法不同 ,超声方法不相同。
此刻 ,瞧似很简单的问题,在经过很长一段时间的探索后发现,上述原由其实都就是比较客观的 ,假如以上 4 点都解决不了 ,能够考虑以下原由 :仪器自己功能上的差别致使。
液相常见问题
HPLC常见问题及解决办法1.保留时间的变化（对于反相液相色谱，正相相反）1.1怎么样缩短保留时间（1）加大流速（2）加大有机相（A相）比例，极性缩小，其基本原理可以用相似相容原理解释，以此也可以用来解释薄层色谱中极性过大，点会出现在溶剂前沿。
（3）梯度洗脱，N分钟后（前面峰出来之后），加大A相比例。
与（2）相比更适用，如果直接加大有机相比例，可能导致前面的峰分不开。
（4）改变有机相，换成洗脱能力更强的，如甲醇换成乙腈。
（5）适当调高柱温。
（6）柱子缩短，减小柱子的内径，1.2 如何延长保留时间（1）换新柱子，新柱子一般较旧柱子保留时间长，当然指的是同等规格的柱子。
(2)色谱柱填料粒径减小，延长保留时间，分离效果和柱效变高。
但是粒径和孔径的变小，会使柱压升高，，因而会用比较小的流速，从而造成分离时间的延长和一定程度的峰展宽。
（3）其他的方法与缩短保留时间的方法相反。
2.怎么样提高分离度（1）一般提高液相的分离，主要就是从增加色谱柱的理论塔板数，从而提高柱效，使分离效果更好。
减小色谱柱填料的粒径。
使用粗长的色谱柱。
（2）提高柱温可缩短分析时间；降低柱温可使色谱柱选择性增大，有利于组分的分离和色谱柱稳定性提高。
（3）延长保留时间。
3.谱峰拖尾影响因素（1）在缓冲不好或离子强度过低的分离中，也会出现保留值重现性差和峰拖尾。
增加缓冲浓度(与样品大小相匹配)能大大改善此情况。
（2）干扰峰的影响，通过使用更长的色谱柱或改变流动相的比例，可以减小干扰峰的影响。
（3）筛板阻塞，解决方法有a反冲色谱柱b更换进口筛板、c更换色谱柱（4）色谱柱塌陷，可以通过填充色谱柱来解决。
（5）流动相PH选择错误，调整PH，对于碱性化合物，低PH更易于得到对称峰。
液相色谱仪常见故障处理 液相色谱如何做好保养
液相色谱仪常见故障处理液相色谱如何做好保养液相色谱仪常见故障处理1、气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。
原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,堵塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。
处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,连续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。
打开泄压阀,打开泵,流速调至 1.0～3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。
即可将过滤器清洗干净。
关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。
2、柱压高原因（1）缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内；（2）样品污染沉积。
处理对于第一种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压渐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟；对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定）,再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
3、既无压力指示,又无液体流过（1）泵密封垫圈磨损；（2）大量气泡进入泵体。
处理对于第一种情况,更换密封垫圈；对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮忙抽出空气。
4、压力波动大,流量不稳定原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。
处理工作中注意察看流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避开吸入空气,流动相要充分脱气。
高效液相色谱常见问题原因及处理方法
高效液相色谱法一．仪器的维护与常见问题处理若液相出现规律性基线波动，长时间不平稳可能原因是什么？快速解决方法：一般为仪器系统出现气泡，最好使用纯甲醇长时间冲洗系统（不少于3小时，特殊情况要12小时左右）柱压逐渐升高可能原因是什么？快速判断①色谱柱出现堵塞②针座堵塞③进样针出现堵塞④系统管路中有未冲洗干净的盐⑤滤芯脏了解决方法①色谱柱出现堵塞：一种是将堵塞了色谱柱的位置拆卸，取出里面的筛网用水或甲醇超解（不建议采用，除非没有其他方法）另一种是将堵塞一头色谱柱链接在仪器上另一头不要链接，先用10%甲醇根据色谱柱柱压调节流速冲洗一小时左右，然后换成纯甲醇再以此方法继续冲洗，根据其柱压随时调整流速。
②针座堵塞与进样针出现堵塞：情况不严重则将它们拆卸后用水超解几分钟就可以了，若堵塞严重只有更换新的（堵塞不代表不能用，若无明显的质量损坏如：变形，滑口，开裂等，后续修好后还能做备件使用）③系统管路中有未冲洗干净的盐：用水或10%异丙醇对系统冲洗，冲洗后柱压正常，则可正常使用。
（注意不建议对系统反冲洗，会造成管路中的残留盐类物质重新回到系统中造成二次堵塞。
）④滤芯脏了：更换滤芯若出现保留时间飘移可能原因是什么？快速判断原因：①流动相混合不均匀②柱温不稳③压力不稳④密封圈松动⑤对于是四元泵的液相，其比例阀区域有堵塞情况（流动相是按比例配置，若比例阀区域堵塞，进样第一针时，可能有一个阀只进入25%另一个阀则是75%，进样第二针时则会变成一个阀进入20%，另一个阀80%）快速解决方法：①流动相重新配置，并按要求混匀②保证环境温度与仪器设定温度相差不大并稳定③系统冲洗平衡后方能实验④更换或调整密封圈⑤将出现堵塞区域的设备进行超声清洗。
1.气相检验化学残留：对照品重复性必须符合要求，但供试品重复性不做要求（上海海尼是对照品重复性必须符合要求，但配置两个供试品，各进一针不计算重复性。
目前海陵是对照品与供试品都要计算重复性）液相进样针无法正常采集?解决方法：一般为仪器机械故障，若进样器显示信号一直为红色，可能是进样针损坏或机械臂故障。
液相色谱使用中的常见细节问题 液相色谱常见问题解决方法
液相色谱使用中的常见细节问题液相色谱常见问题解决方法液相色谱对于多数人来说都是很好上手的仪器了，但是就算是用过几年、阅历丰富的分析员都会习惯于一些错误的操作（师傅教错了？），常常导致一些仪器故障。
便利快捷的分析过程当然紧要，但是为了多做样品而疏忽了一些必不可少的步骤，往往得不偿失，哪些操作不能做？哪些懒儿不能偷？那些小概率的故障师傅没教怎么办？液相使用过程中有哪四大关键因素要注意？本文一一告知你哦！流动相不过滤。
由于尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。
流动相在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可接受Millipore滤膜（0.2m 或0.45m）等滤器。
泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。
输液泵的滤器应常常清洗或更换。
使用后没有适时清洗泵流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。
假如将含缓冲液的流动相留在泵内，由于蒸发或泄漏，甚至只是由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。
因此，必需泵入纯水将泵充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂（对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇—水）。
流动相走空。
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，zui终产生漏液。
没有流动相流出，又无压力指示怎么办？可能是泵内有大量气体，这时可打开泄压阀，使泵在较大流量（如5ml/min）下运转，将气泡排尽，也可用一个50ml针筒在泵出口处帮忙抽出气体。
另一个可能原因是密封环磨损，需更换。
压力和流量不稳了？原因可能是气泡，需要排出；或者是单向阀内有异物，可卸下单向阀，浸入丙酮内超声清洗。
有时可能是砂滤棒内有气泡，或被盐的微细晶粒或繁殖的微生物部分堵塞，这时，可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡，或将砂滤棒浸入稀酸（如4mol/L硝酸）内快速除去微生物，或将盐溶解，再立刻清洗。
高效液相常见问题
在高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）中在使用过程中可能会遇到一些常见问题，常见的问题包括：
1. 色谱峰形状异常：可能出现尖峰、宽峰、不对称峰等情况。
这可能是由于流速不稳定、柱温度不恰当、样品溶液中存在杂质或沉淀等原因引起的。
2. 噪音和基线波动：色谱图上出现明显的噪音或基线波动，可能是由于进样器、柱、检测器或其他仪器部件故障、大气压力变化、流动相污染等原因导致的。
3. 分离不良：某些目标化合物无法得到有效的分离，可能是由于柱选择不当、流动相组成不适合、进样量过大或样品混杂等原因引起的。
4. 柱寿命问题：柱子的寿命会受到样品残留、样品破坏柱子、流动相pH值不适宜等因素的影响。
如果柱子寿命较短，可能需要重新考虑进样前的样品预处理以减少对柱的损害。
5. 检测器响应异常：检测器对目标化合物的响应异常，可能是由于检测器灵敏度调整不当、光源衰减、检测器污染等原
因导致的。
解决这些问题的方法包括：检查仪器设备是否正常运行、保证流动相的纯净性、选择适当的柱和方法条件、优化样品预处理步骤等。
如果问题持续存在，建议咨询专业的技术支持人员以获得更具体的指导和解决方案。
液相常见问题及解决方法
液相常见问题及解决方法液相技术是化学和生物学研究中常用的分离和纯化方法。
然而，在液相实验中，常常会遇到各种问题。
本文将介绍液相实验中常见的问题及其解决方法，帮助读者更好地进行实验。
1. 样品溶解不彻底问题描述：在液相实验中，有时样品无法完全溶解，导致分析结果不准确或无法得到预期的结果。
解决方法： - 加热：将样品加热到适当温度，有助于提高溶解度。
- 使用溶剂辅助溶解：使用适当的溶剂辅助样品的溶解。
可以尝试不同比例的混合溶剂。
-超声处理：使用超声波处理仪器进行样品处理，能够增加样品与溶剂之间的接触面积，促进溶解。
- 搅拌：使用磁力搅拌器或振荡器等设备进行搅拌，有助于加速样品与溶剂的混合。
2. 色谱柱压力过高问题描述：在色谱柱操作过程中，发现色谱柱的压力异常高，可能导致柱子破裂或分析结果不准确。
解决方法： - 检查进样量：减少样品进样量，避免过高的样品负荷。
- 检查流速：降低流速，可以减少柱子内部的阻力，从而降低压力。
- 更换柱头过滤器：如果柱头过滤器堵塞，也会导致压力升高。
及时更换过滤器。
- 检查固定相状况：如果固定相老化或受污染，也会导致压力升高。
及时更换固定相。
3. 色谱峰形状异常问题描述：在液相色谱分析中，有时会出现色谱峰形状异常的情况，如尾峰、分离不良等。
解决方法： - 调整流速和梯度程序：适当调整流速和梯度程序可以改善色谱峰形状。
较低的流速和合理的梯度程序可以提高分离效果。
- 更换柱子：如果柱子老化或受污染，也会导致色谱峰形状异常。
及时更换柱子。
- 检查进样量：过高的进样量可能导致色谱峰形状异常。
减少进样量可以改善峰形。
- 检查溶剂：溶剂的质量和纯度也会影响色谱峰形状。
使用高质量和纯度的溶剂。
4. 色谱峰漂移问题描述：在液相色谱分析中，有时会出现色谱峰漂移的情况，即色谱峰位置发生变化。
解决方法： - 检查流速和梯度程序：适当调整流速和梯度程序可以减少色谱峰漂移。
较低的流速和合理的梯度程序可以提高分离效果。
液相色谱常见问题以及处理方法
液相色谱常见问题及处理方法液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要缘由及解决方法1、样品量不足，解决方法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。
可依据样品的化学性质转变流淌相或柱子3、样品与检测器不匹配。
依据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多。
调整衰减即可。
5、检测器时间常数太大。
解决方法为降低时间参数6、检测器池窗污染。
解决方法为清洗池窗。
7、检测池中有气泡。
解决方法为排气。
8、纪录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
9、流淌相流量不合适。
调整流速即可。
10、检测器与纪录仪超出校正曲线。
解决方法为检查纪录仪与检测器，重作校正曲线。
为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常遇到的问题。
其缘由有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。
1、拆去爱护预柱，看柱压是否还高，否则是爱护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流淌相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流淌池）。
这时，假如柱压仍不下降，再检查：4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力提升。
若柱压还高，请与厂商联系。
一般状况下，在进样器与爱护柱之间接一个在线过滤器便可避开柱压过高的问题，SGE供应的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
液相色谱中峰消失拖尾或消失双峰的缘由是什么？1、筛板堵塞或柱失效，解决方法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。
2、存在干扰峰，解决方法为使用较长的柱子，改换流淌相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1、温度掌握不好，解决方法是采纳恒温装置，保持柱温恒定2、流淌相发生变化，解决方法是防止流淌相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡快速变化现象1.流速发生变化，解决方法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
液相色谱常见问题与解决方法
（一）峰形及保留时间变化（二）进样阀可能发生的问题（三）压力异常问题（四）漏液问题（六）色谱柱使用前注意事项色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理：a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制：液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。
如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。
除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择：因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。
对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。
对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml／min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml／min为佳。
当选用最佳流速时，分析时间可能延长。
可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
注意：1．由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。
液相色谱故障处理
液相色谱故障处理背景介绍液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是化学分析中常用的一种分析技术，它以液体为移动相，在色谱柱中进行化合物的分离。
液相色谱是一种高效、灵敏和精确的分离和定量分析技术，广泛应用于药物、化学、生物、环境等领域的分析试验中。
然而，在实验操作过程中，难免会出现仪器故障，下面将介绍常见液相色谱故障及其处理措施。
常见故障及处理措施流量异常1.缓冲液流量异常原因：缓冲液中的盐分浓度过高，柱子内部出现盐颗粒等堵塞物抑制缓冲液流动，或者柱子内部压力过大等等。
解决方法：检查缓冲液中盐分浓度是否合适，清洁柱子。
2.流量计问题原因：流量计故障或者气泡引起的不稳定。
解决方法：检查流量计并更换或调整。
3.泵压异常原因：泵装置故障或挡板不启动。
解决方法：检查泵装置、更换出现问题的部件。
峰形异常1.前驱峰过宽原因：注入体积过大、流速过快、柱子内部存在异物等等。
解决方法：检查注射器、调整流速、清洗柱子。
2.分离不良原因：柱子老化、柱内填充物流速不匹配等等。
解决方法：检查柱子是否到期、更换柱子。
3.后峰异常原因：柱内填充物表面污秽和老化，柱子内部流速不匹配。
解决方法：更换柱子内部填充物。
噪声问题1.底噪过高原因：仪器的部分环境噪声，如压力传感器、泵装置等等。
解决方法：检查周围环境是否干净，其他仪器是否产生干扰。
2.漂移噪声原因：流动相组成不稳定，温度变化大等等。
解决方法：检查液相分离液压力、温度等。
结论液相色谱检测是化学分析中常用的测试技术，流量、峰形和噪声都是故障发生的常见原因，只有全面分析各种原因，并找到相应的解决方法，才能顺利进行实验，保证实验准确性和可靠性。
液相色谱常见问题的解决方法
液相色谱常见问题的解决方法一.保留时间不稳定1.柱温变化柱恒温2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱二.保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温三.保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5四.出现肩峰或分叉1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子五.鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水六.基线噪声1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压七.峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品4.同前(四)4 同前(四)45.同前(四)3 同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整, 尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱八.峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品色谱柱预防性保护与柱寿命的延长通常，一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好，但也有的柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。
液相常见问题15小问！
液相常见问题15小问！食品实验室服务1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决?关于漂移问题①温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定②流动相发生変化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等③柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡关于快速变化问题①流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定②泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。
③流动相不合适,解決办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合2.为何会基线漂移原因①柱温波动。
(即使是很小的温度变化都会引起基线波动。
通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。
)②流动相不均匀。
(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。
)③流通池被污染或有气体④检测器出口阻塞。
(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线)⑤流动相配比不当或流速变化⑥柱平衡慢,特別是流动相发生变化时⑦流动相污染、变质或由低品质溶剂配成⑧样品中有强保留的物质(高K值)以头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
⑨使用循环溶剂,不提倡。
未调整检测器。
⑩检测器没有设定在最大吸收波长处。
解决方法①控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器。
②使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。
流动相在使用前进行脱气,使用中使用在线脱气或氦气脱气。
③用甲醇或其他强极性溶剂中洗流通池。
如有需要,可以用1N的的酸,(不要用盐酸）。
④取出阻塞物或更换管子。
参考检测器手册更换流通池窗。
⑤更改配比或流速。
为避兔这个问题可定期检查流动相组成及流速。
⑥用中等强度的溶剂进行冲洗。
更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
使用离子对试剂、缓冲盐更应注意平衡柱。
⑦检查流动相的组成。
使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。
⑧改变分析条件。
使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
液相常见问题原因及解决方法
高效液相色谱使用维护注意事项及常见问题排除现象：柱压高于正常值判断————————————-------- 排除方法（1）柱端过滤器堵塞——-------------（1）拆下过滤器用稀硝酸超声清洗（2）长期使用柱端固定相板结，塌陷----（2）挖掉板结部分修补柱端或更换色谱柱（3）分析生化、染料等易污染固定相的样品导致柱污染----（3）采用保护柱现象：柱压低于正常值判断————————————-------- 排除方法某连接处泄漏————————------- 高压查找泄漏处，连接处更换密封刃环现象：塔板数下降判断————————————-------- 排除方法（1）色谱柱老化--------------------（1）柱再生或换柱（2）柱被污染----------------------（2）依色谱柱说明书清洗现象：进样后不出峰判断————————————----------- -排除方法（1）检测器选择不当，样品无吸收----------（1）正确选择检测器，如样品无吸收就不应选择UV检测器，而应选其他检测器（2）试样溶液浓度太低，而检测灵敏度不高---（2）适当提高样品浓度和进样量，提高检测灵敏度（3）检测器到色谱工作站之间的信号线连接处不好或断开---（3）修复接好信号线并将灵敏度调到适当的位置（4）进样用注射器堵塞或泄漏使样品溶液不能进入进样阀---（4）修理或更换注射器或进样阀现象：进样不出峰或者峰高不正常判断————————————---------------- 排除方法（1）注射器泄漏----------------------------（1）更换新注射器（2）阀转子上针头密封垫磨损导致泄漏----------（2）更换新的零件（3）选用的注射器针头与进样阀不匹配----------（3）更换合适的针管（4）定子与转子接触密封面损坏引起内通道断路---（4）损坏不严重的转子重新研磨，使之恢复性能，否则更换新的转子（5）定量管堵塞-----------------------------（5）设法疏通，或更换定量环现象：出现未知杂峰判断————————————---------排除方法（1）进样阀或进样针污染-------------（1）清洗进样阀的样品通路和进样针（2）流动相中有气泡流入检测器------- （2）排出气泡，方法参照仪器说明书现象：峰形拖尾判断————————————---------------排除方法（1）定量管与进样阀连接处出现死体积--------（1）更换新管消除死体积（2）进样器内有污染或不干净----------------（2）可先用2：1：4的硫酸-硝酸-水的混合溶液清洗，接着用蒸馏水洗净，然后用丙酮或乙醚等溶剂清洗烘干（3）色谱柱选择不当，试样与固定相间有作用---（3）更换色谱柱（4）进样技术有误------------------------（4）提高进样技术（5）样品在流动相中溶解度小----------------（5）选用对试样溶解能力强的溶剂作为流动相（6）进样量太大--------------------------（6）减少进样量（7）色谱柱与阀、检测器连接处出现死体积-----（7）重新装柱或更换连接管路现象：分离度变差判断————————————-----------排除方法（1）柱端固定相板结------------------（1）挖掉修补，重填固定相（2）柱端床层塌陷--------------------（2）修补柱床（3）柱子寿命已到--------------------（3）更换新柱（4）进样量过大----------------------（4）减少进样量（5）样品浓度过大------------------- （5）减少配样浓度（6）试样溶解不完全------------------（6）换溶剂使其完全溶解（7）色谱柱污染柱效下降--------------（7）更换柱子或用极性溶剂冲洗现象：保留时间不重复判断————————————----------------排除方法（1）更换流动相对旧流动相末完全被替换------（1）延长平衡时间（2）正相柱中流动相脱水不完全--------------（2）重新脱水（3）柱温变化-----------------------------（3）用柱温箱恒温（4）缓冲液容量不够-----------------------（4）用较浓的缓冲液（5）柱内条件变化-------------------------（5）稳定进样条件，调节流动相（6）柱塌陷或形成短路通道------------------（6）更换色谱柱现象：出现无规律色谱峰判断————————————-------------排除方法长期进样滞留在柱中的组分被洗脱出来------用强极性溶剂冲洗再用流动相平衡现象：平顶峰判断————————————----------------排除方法（1）色谱柱超载---------------------------（1）减少进样量（2）检测池及其透镜、池窗等光学附件污染-----（2）清洗检测池以及透镜、池窗等光学附件现象：峰分裂（一个组分有两个峰）判断————————————-----排除方法（1）样品中可能有异构体---------（1）按异构体特征选择条件，使两组分完全分离（2）样品不稳定有部分分解-------（2）采取措施，防止试样组分的分解（3）进样量大，柱超载-----------（3）减小进样量现象：色谱峰摆动判断————————————-----排除方法检测池内有气泡-----------------排除检测池内的气泡现象：基线有尖峰不规则地漂移判断————————————-------排除方法（1）色谱柱污染变脏---------------（1）冲洗柱子，重新装柱或更换新柱子（2）检测池内有气泡通过------------（2）溶剂脱气并彻底冲洗系统（3）实验室内其他大功率电器的影响---（3）消除噪音来源，确保装置接地良好现象：出负峰判断————————————-------排除方法（1）工作站和检测器极性接反-------（1）纠正极性连接错误（2）用示差折光检测器检测时，样品的折光指数小于流动相溶剂的折光指数--- （2）若要得到正峰，可改变检测器和工作站的极性（3）使用的流动相不纯净-----------（3）使用纯净的流动相（4）样品池与参比池接反----------（4）掉换（5）进样故障-------------------（5）确保在进样期间样品环中没有气泡（6）光电池与放大器接错---------- （6）检查后正确连接（7）用UV检测器时，溶解样品所用的溶剂与流动相溶剂不能互溶或两溶剂PH值不同。
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1.如何排除流动相中的气泡？如何排出流动池中的气泡？避免流动相中产生气泡的最佳方式是将流动相经脱气装置进行脱气。
如果没有脱气装置，则可以在流动相溶剂瓶中通入氦气进行脱气。
也可以在检测器的出口端加一根细管线以调节流动池中的背压，但必须注意不要超过流动池的最大压力，否则会造成流动池漏液或流动池损坏。
如果流动池中出现气泡，则先摘下色谱柱，用一根管线直接将流动相接入检测器的入口。
将异丙醇以较大的流速注入流动池。
直到基线上看不到毛刺为止。
气泡就应该清除掉了。
2 如何减少基线噪音？无规律噪音可能与污染有关。
请冲洗色谱柱，对样品做合适的前处理以避免污染，并使用HPLC 级别的溶剂。
连续噪音有可能由检测器或泵造成。
要确定问题是否发生在检测器还是在泵，请先关泵停掉流量，监测基线。
如果此时基线平稳，则噪音可能与泵有关系。
使用ChemStation 在线诊断或LC 手持控制器检查泵方面的故障。
如果停泵后噪音继续存在，则说明噪音与检测器有关。
首先，请尝试更换灯。
如果问题依然存在，则请与安捷伦科技公司联系。
在中国，请拨打800 820 3278。
3 什么原因导致基线毛刺？这很有可能是流动池内有气泡。
请先停泵来进行确认，如果毛剌消失，则很有可能是由于流动池内有气泡。
需要冲洗流动池。
如果毛剌仍然存在，则需检查检测器本身的电噪音有关。
如果需要更多帮助，则请致电安捷伦科技公司。
在中国，请拨打800 820 3278。
4 色谱图上出现鬼峰。
如何消除？可能的原因：1.上次进样遗留组分产生2.有污染3.有气泡4.色谱柱问题5.保护柱失效建议用户：1.做样品后应保证有足够时间冲洗色谱柱，有必要的话在运行结束后使用更强溶剂冲洗色谱柱。
2.洗脱原色谱柱中的原有污染。
3.为确保系统中没有气泡，只使用彻底脱气后的溶剂。
4.更换色谱柱。
5.更换保护柱。
6.检查流动相纯度。
7.检查样品中的其他成分5 如何决定何时更换保护柱？许多色谱人员在测试一定数量的样品和标准样后更换保护柱。
样品数量通常由实验决定，在长时间未更换保护柱而造成分析柱破损时或样品分析数量增加，而保护柱需要更换。
保护柱的更换频率通常根据经验而定，按照每个方法/样品类型综合考虑，但是许多分析人员会在完成一定数量的样品分析或测试一些柱的性能指标（例如增加10% 峰展宽或拖尾因子，或降低10% 的柱效（塔板数））后更换保护柱。
6 什么原因导致液相色谱仪压力过高？可能的原因：1.吹扫阀的PTFE 虑芯堵塞。
2.压力上限设置太低。
3.压力传感器堵塞。
建议的措施：1.打开排气阀。
如果压力依然很高，则更换排气阀的PTFE 虑芯。
2.查看软件的压力上限设置并确保设置值适于分析。
3.检查系统内的堵塞部位。
（如下所述）要检查是否堵塞，请采用隔离系统的方法来排除故障：将安装的色谱柱、预色谱柱和预色谱柱过滤器摘开。
1.如果压力恢复到正常值，则在色谱柱的位置安装ZDV 接头。
1.如果压力正常，则色谱柱、预色谱柱或过滤器是产生问题的原因。
请进行更换。
2.如果压力仍然很高，则在色谱柱的另一端查找堵塞位置（例如：通入检测器或从其通出的管路）。
2.如果取出色谱柱后压力依然很高，则检查从排气阀到自动进样器的管路。
如果压力正常，则使用进样步骤命令将自动进样器的进样阀切换到路模式。
1.如果压力正常，则说明自动进样器堵塞。
请检查针、针座、针座毛细管和转子密封垫。
2.如果压力依然很高，则检查从进样六通阀到色谱柱入之间口的管线。
7 何时应更换泵密封圈？泵密封圈应定期更换。
建议每个液相色谱仪用户建立一个泵密封圈更换的定期检修计划。
这应根据泵的使用和流动相组成情况而定。
由于它们易磨损的特点，盐缓冲大大加速密封圈和活塞的磨损。
在活塞下面的泵头上检测到泄漏时，保留时间不稳定时，或系统压力不稳定时，都应更换密封圈。
请按照以下程序更换所维护的泵的密封圈。
8 当LC检测器灯强度测试没有通过时我该如何办?强度测试是内置的UV / Vis检测器诊断测试功能. 是用于测试光学单元在全波长范围内的性能。
安捷伦化学工作站在多个波长范围测量检测器的光谱强度，针对每个范围的极限值报告Pass（通过）/ Fail（失败）状态。
这一测试的失败是由于1.灯老化了2.流通池中有吸光的溶剂/空气泡3.流通池脏了/ 污染了4.光学窗口/透镜等被污染了要纠正这些问题，需要在流通池充满水/ 并用足够的时间让检测器稳定。
检查开灯的运行时间，并当其寿命到期时更换之。
用甲醇/无棉布清洗光学窗口。
9 标准HPLC柱和RRLC柱有何区别?一般来说，RRLC (快速分离液相色谱)柱有较小的填料粒度- 1.8 微米，而传统的柱为 2 到10 微米。
由于填料粒度小，故比普通柱的操作压力(400 Bar)高(600 Bar )。
10 我什么时候应当更换自动进样器阀的转子密封件?最经常的进样阀维护之一就是更换转子密封件。
需要更换的标志包括：1.转子密封件堵塞。
2.转子密封件中接头点之间泄漏。
通过观察注射针从样品瓶抽取样品后抬起时，针头有流动相液滴渗出，就可判断接头点之间有泄漏。
注意：接头点之间泄漏也可通过压力测试来判断。
当您发现进样体积精度变差时，您可能首先要考虑接头点之间有泄漏。
11 在我的二极管阵列检测器上，为什么在我更换了新的灯和流通池以后仍然有基线噪声和漂移？该问题应该与流速有关。
拆下流通池检查基线。
如果问题消除了，说明流通池被污染了(更换/清洗检测窗口)，或者泵/进样器有问题。
或者该问题在光学系统或光学系统的部件。
或者更换整个光源透镜组件（部件号G1315-65201）(或者组件的单个部件，如光谱窗口，部件号79880-28111 以及单色器透镜，部件号1000-0486)，或者更换检测池支持窗口G1315-65202。
如果问题仍然存在，请联系您最近的安捷伦技术代表。
12 什么时候需要更换溶剂输送模块（泵）的冲洗阀中的过滤芯?确定冲洗阀滤芯是否需要更换的常见方法是打开冲洗阀，设定甲醇流速为 1 ml/min。
如果压力大于7 BAR，就应该更换滤芯。
13 在进样过程中HPLC的自动进样器为什么有压力的突变?自动进样器进样阀中的转子密封垫可能部分堵塞了。
请清洗转子密封垫或者更换之。
14 怎样知道UV 检测器的流动池被污染了？用工作站诊断功能作池体测试，是比较流动池二极管的样品边与参考边所测到的氘灯强度。
强度比值的结果(样品:参考) 是测试流动池吸收的光的量。
测试可用来检验流动池窗口是脏了或者被污染了。
用水通过流动池作测试。
工作站自动计算强度比值。
强度比取决于流动池窗口污染的程度。
以及所用的流动池的类型。
理想的比值是1，比值为7或更大也可以接受。
比值较低，说明流动池窗口有一些涂层或者流动池里有气泡。
更多的光被流动池吸收。
用水冲洗流动池以去除污染物。
这样可以来代替溶剂，用水来冲洗。
这时样品溶解在水。
15 什么是1100/1200自动进样器马达温度错误？传动部分的马达运行时所需电流过大，引起过热。
处理器将马达关掉，以免损坏它。
可能的原因:1.机械故障。
2.传动部分摩擦力过大。
3.马达皮带张力过高。
4.马达损坏。
5.传动部分弯板损坏。
建议:1.关掉自动进样器电源开关。
等至少10分钟之后再开开关。
2.确认传动部分的运动不受阻碍。
3.更换传动部分。
16 为什么我的灯点不着？最大的可能是它已经超过使用期限了或者坏了。
根据检测器类型作诊断测试。
如果需要，更换灯。
如果问题依然存在，请联系Agilent公司。
17 用什么溶剂冲洗LC 管线，以去除污染？已发现各含50%的IPA和水的混合溶液，能有效地除去HPLC系统的溶液管线里，毛细管里，以及流动池里的污染物。
水能清除盐类和其他的污染物，IPA 能清除极性和非极性的污染物。
准备一瓶各含50%的IPA 和水的混合溶剂，并对溶剂脱气。
将所有的溶剂管线连到这个瓶子里(例如连四元泵的A,B,C 和 D 溶剂管线，连二元泵的 A 和 B 溶剂管线，连单元泵的溶剂管线)。
可以关掉所有检测器的灯，如果不希望IPA和水的混合液通过柱子时，可以在柱子的位置安装一个两通接头替换它。
18 易弯折的不锈钢毛细管线外表面上的颜色标记是什么意思？Agilent 易弯折的不锈钢毛细管线外表面上的颜色标记，指示管子的内径(ID)红色指示内径为0.12 mm 或者0.005 英寸。
绿色指示内径为0.17 mm.或者0.007 英寸。
蓝色指示内径为0.25 mm 或者0.010英寸。
桔色指示内径为0.50 mm 或者0.020 英寸。
19 蒸发光散射检测法的好处是什么？实质上可以检测到所有的化合物。
检测基于所有分析物的通用属性，不需要存在发色基团和电活化基团等。
检测器的响应直接与洗提过的化合物质量相关。
可以获得无法识别化合物的精确定量分析数据。
20 什么是蒸发光散射检测器或ELSD？对于挥发性低于流动相的化合物，蒸发光散射检测器（ELSD）能够有效地执行敏感检测。
它提供了一种在等度和梯度条件下实质上通用的测量法，独立于化合物的吸收、荧光性或电活性。
低温蒸发技术能够检测半挥发性性和低水平感热性化合物。
21 H3PO4清洗HPLC 色谱柱有什么目的？经证明，磷酸洗涤剂能有效减少由于样品与HPLC系统中的金属络合而导致的拖尾。
一般建议用1% 磷酸来清洗系统和色谱柱，以此消除这种脱尾现象，这很有效。
在安捷伦ZORBAX StableBond 反相HPLC 产品上使用这些推荐的清洗条件会取得非常理想的效果。
StableBond HPLC 色谱柱在低PH条件下性能非常稳定- SB-C18 色谱柱在0.8 PH值和90癈条件下可保持稳定。
如何肯定峰拖尾是由于金属络合而引起的？只要辨别N或O原子上的孤对电子能否与金属螯合并形成5 或者6元环。
金属络合物是一个普遍被忽视的峰拖尾成因，每个HPLC系统中都存在金属。
22 如何处理HPLC中的盐带来的问题?现在有很多问题是由于用户的流动相含有盐成分造成的。
建议用户在清洗时将水加热后再冲洗，这样既可以将盐溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物质，会减少很多问题的发生，包括管路堵塞，盐析出，基线噪音…23 HPLC出“鬼峰”，如何排除HPLC出“鬼峰” 大部分发生在反相体系（甲醇，乙腈，水），是溶剂被污染造成的。
还有一种原因是进样系统有残留。
正相色谱：固定相极性大于流动相极性反相色谱：固定相极性小于流动相极性∙让用户运行一个空白梯度洗脱的方法，从100%水过渡到100%有机溶剂，如果“鬼峰”出现，可以判断是水被污染了（水中有藻类Algae的污染）。
如果用户是使用纯水机制作的水，这种现象是最常见的。
建议用户更换“娃哈哈” 纯净水。
∙进样系统有残留很容易判断，建议用户加强或改善洗针程序，延长冲洗Loop的时间。
24 峰面积或峰高重现性不好，偏差大?如果HPLC系统配有自动进样器，这种情况主要是自动进样器的问题。