液相色谱常见问题PPT课件

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液相色谱的问题与诊断

液相色谱的问题与诊断

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检查样品
检查样品中是否有杂质或其他异常。检查降峰剂或碱性试剂等处理方法是否正确。
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对比对照
通过对比正常的分离结果和出现问题的结果,发现问题所在。
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专业咨询
如果以上方法均不能解决问题,可以寻求专业帮助,如与设备制造商或技术支持人员联系。
如何解决液相色谱中的峰形问题
检查优化参数
如果样品溶液中有较多杂质,试 试在流动相中加入缓冲剂或离子 对。
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分离模式
液相色谱有多种分离模式,包括亲水性、反相、离子交换等。选择正确的分离模式是关键。
3
系统组成
液相色谱由流体泵、样品进样器、色谱柱和检测器等组成。每个组件的性能对结果都有影响。
常见液相色谱问题的介绍
峰形问题
峰形偏差可能是由于样品中存在杂质、非理想 的分离或柱寿命到期等原因造成的。
峰面积问题
峰面积异常可能是由于样品出现偏移,或者是 由于检测器异常等原因造成的。
检查设备
检查流体泵、进样器、柱子及检 测器等组件是否有问题。如果发 现问题,请参考设备说明书的维 护指南进行维护或更换。
更换色谱柱
如果色谱柱寿命到期或者出现柱 子损坏、初装或回收不当等问题, 请立即更换新柱子。
如何解决液相色谱中的峰高问题
检查系统组件
检查每个组件的性能和状态, 例如检测器是否需要维护。
峰高问题
峰高异常可能是由于流体泵、进样器或检测器 等系统组件出现问题,或者是由于柱寿命到期 等原因造成的。
保留时间问题
保留时间偏差可能是由于移液器容量不准确、 流体泵故障或分离柱被污染等原因造成的。
问题的诊断方法
1
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ检查设备
检查流体泵、进样器、柱子及检测器等组件是否有问题。确保设备的正常工作和良好的维护。

《液相色谱分析法》课件

《液相色谱分析法》课件
液相色谱分析法
,
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目录
01 添 加 目 录 项 标 题 03 液 相 色 谱 分 析 法 的
技术原理
05 液 相 色 谱 分 析 法 的 优缺点
02 液 相 色 谱 分 析 法 的 概述
04 液 相 色 谱 分 析 法 的 应用实例
06
液相色谱分析法的 发展趋势和未来展

Part One
单击添加章节标题
数据处理:对检测到的信号 进行处理,得到样品的色谱 图和定量结果
结果分析:根据色谱图和定 量结果,对样品进行分析和 鉴定
Part Four
液相色谱分析法的 应用实例
在药物分析中的应用
药物稳定性研究:研究药物 在储存过程中的稳定性
药物成分分析:分析药物中 的有效成分、杂质等
药物质量控制:控制药物的 质量,确保药物的安全性和
液相色谱分析法的研究热点和前沿技术
超高效液相色谱技术:提高分离效率,降 低检测限
生物样品分析:应用于生物医药、食品安 全等领域
质谱联用技术:提高检测灵敏度和准确性
环境样品分析:应用于环境监测、污染治 理等领域
微流控芯片技术:实现样品的微型化和快 速分析
智能化、自动化技术:提高分析效率,降 低人工操作误差
添加标题
核磁共振检测器:利用核磁共振原理,检测样品中的核磁共振信号,用于结构分析和定量分析
液相色谱分析法的操作流程
样品制备:将样品进行适当 的处理,如稀释、过滤等
样品注入:将样品注入到色 谱柱中
色谱分离:样品在色谱柱 中分离,根据不同组分的 性质和亲和力进行分离
检测器检测:样品经过检 测器时,检测器对样品进 行检测,得到相应的信号பைடு நூலகம்

《液相色谱技术》课件

《液相色谱技术》课件
通过液相色谱技术,可以检测环境中的有毒有害物质,如农药、酚类等,为环境治理和保护提供科学依据。
生态毒理学研究
液相色谱技术可以用于研究环境污染物对生物体的毒理学效应,有助于了解环境污染对生态系统的危害。
液相色谱技术的未来发展与挑战
高效液相色谱法(HPLC)
HPLC是液相色谱技术中的一种,具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点,被广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着技术的不断发展,HPLC的分离柱、检测器等关键部件也在不断改进,提高了分离效果和检测灵敏度。
智能化与自动化:随着机器人技术和自动化控制技术的发展,液相色谱技术的操作将更加智能化和自动化。未来的液相色谱仪将更加便捷、高效,能够实现自动化进样、自动优化分离条件等功能,大大提高分析效率。
感谢观看
THANKS
流动相的准备与更换
根据实验要求,准备好适量的流动相,并定期更换以保证实验结果的准确性。
定期清洗进样器、色谱柱和检测器,保持仪器表面清洁。
日常保养
定期校准
常见故障排除
对仪器进行定期校准,确保检测结果的准确性。
遇到问题时,应先检查电源、管线连接等基本情况,再根据仪器手册排查故障。
03
02
01
液相色谱技术的实验设计
色谱柱
检测色谱柱流出的组分,并将其转化为电信号,便于记录和检测。
检测器
用于采集、处理、分析和存储色谱数据。
数据处理系统
数据处理与分析
采集色谱数据,进行峰识别、定量和合适的流速、检测波长等参数,开始色谱分离。
进样
将样品注入进样器,设定进样量,启动进样程序。
准备工作
检查仪器是否正常,准备好流动相、色谱柱和样品。
样品前处理的挑战:液相色谱技术对于样品的要求较高,需要进行适当的前处理以去除杂质、提高分离效果。目前常用的样品前处理方法包括沉淀、萃取、吸附等,但这些方法操作繁琐、耗时长且效果不稳定。为解决这一问题,新型的样品前处理技术如固相萃取、免疫吸附等正在不断发展,以提高样品处理的效率和效果。

液相色谱常见问题及其对策-三PPT课件

液相色谱常见问题及其对策-三PPT课件
堵塞
检查进样针头是否堵塞、进样阀是否 损坏、管路是否畅通等,采取相应措 施进行疏通或更换。
泄漏
检查接口是否松动、密封垫是否老化 、管路是否破损等,及时紧固或更换 相关部件。
其他辅助设备故障处理
柱温箱故障
检查温度传感器是否损坏、加热 元件是否正常工作、控温系统是 否稳定等,根据情况进行维修或
更换。
脱气机故障
考虑方法的回收率、精密度、准确性和操作简便性等因素。
对于复杂样品,可能需要采用多种前处理方法的组合。
避免干扰物质引入
使用高纯度的试剂和清洁的容器和设备,以减少干扰 物质的影响。
在前处理过程中,要注意避免引入干扰物质,如试剂 中的杂质、容器和设备的污染等。
对于可能引入干扰物质的步骤,要进行严格的控制和 验证。
流动相通过固定相时,与固定相 发生作用(吸附、分配、离子交 换等),使各组分在两相间的分
配系数发生变化。
反复多次利用上述过程,各组分 在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流
出。
系统组成及功能
进样系统
将样品注入色谱柱。
检测系统
检测色谱柱流出物 的组分及含量。
输液系统
提供稳定、可调的 流动相流速。
自动化前处理技术可以减少人为操作误差和样品交叉污染的风险。
在使用自动化前处理技术时,要注意设备的维护和校准,确保设备的正常运行和准确性。
06 环境条件改善举措
实验室温湿度控制要求
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温湿度对液相色谱仪器的影响
过高或过低的温度和湿度可能导致仪器性能不稳 定、色谱柱效降低等。
温湿度控制标准
建议将实验室温度控制在20-25℃,相对湿度保 持在40%-60%之间。

液相色谱分析中常见问题及其解决方法

液相色谱分析中常见问题及其解决方法

六通阀的示意图
色谱柱系统的故障
柱温箱的温度控制失灵 系统和保留时间压力改变, 色谱柱堵塞 系统压力升高 色谱柱柱效下降或色谱柱损坏 样品出峰时间改变,峰形变坏,分离效果 变差
检测器
检测器的类型 紫外或二极管阵列检测器 荧光检测器 示差折光检测器 电化学检测器 蒸发光散射检测器
紫外/可见光检测器的光路系统, 氘灯提供190nm~600nm 紫外/可见光检测器的光路系统,由氘灯提供190nm~600nm 宽带光谱,光线径直射到全息凹面光栅上 宽带光谱,光线径直射到全息凹面光栅上,衍射的单色光射到 半透射反光镜,被分成两束光线,一束经流通池后照射到测量 半透射反光镜,被分成两束光线,一束经流通池后照射到测量 光电池上,另一束经参比池照射到参比光电池上, 光电池上,另一束经参比池照射到参比光电池上,光电池把光 能量转换成微小电流信号, 能量转换成微小电流信号,光栅由一台微机控制的步进电机精 确地驱动以改变波长。 确地驱动以改变波长。如图所示:
泵头有气泡 排气 进口阀或出口阀失灵 超声清洗或更换 系统泄露 用了错误的流动相或流动相比例不对 用了错误的色谱柱 色谱柱或保护柱或混合过滤器有堵塞的现象 色谱柱的柱温不对 压力模块出现故障,通常是压力传感器或仪器主板的问题
基线问题 (一)基线的漂移
光源的未完全稳定,解决方法:延长仪器预热时间, 流动相的比例在变化,和色谱柱之间未达到化学平衡,延 长平衡时间 环境温度在变化 保持恒温 色谱柱或流通池被污染
基线问题 (二)基线的噪声
电信号噪音 特征: ①很均匀密集的毛刺,光源能量过低或者光路污染,更换光 源或清洗光路,仪器接地不良 ②突然出现的无规则的脉冲式尖锐信号,且与流动相流速无 关,仪器的电路板的问题,检查仪器接地情况或者报修

液相色谱仪日常维护及常见故障ppt课件

液相色谱仪日常维护及常见故障ppt课件
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
6 检测器
VWD的光源—氘灯有一定的半衰期, 一般为1000小时左右,所以在没有样 品分析任务时要关闭氘灯,以延长氘 灯的使用寿命。
流动池污染后,会造成灵敏度下降、 噪声加大,应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺。 再生纤维素滤膜:具有蛋白质吸收低,同样适用于水溶性样品和有
机溶剂。
注意:1,每张滤膜只能用一次。 2,水相和有机相不要搞混。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
5 色谱柱
从泵来的 流动相
预柱
预柱是针对流动相来保护色谱柱 保护柱是针对样品来保护色谱柱
进样口
保护柱
分析柱 至检测器
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
色谱柱保护
过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱 仪器在使用完毕,要冲洗整个系统,移走系统中的缓冲液。 柱子在不使用时,两端密封保存 在适当的溶剂中保存柱子 注意色谱柱的pH值使用范围 不要高压冲洗柱子 不要高温下过长时间使用硅胶键合相

高效液相色谱法培训PPT课件

高效液相色谱法培训PPT课件

注意事项与常见问题解答
样品处理注意事项
01
避免样品污染、损失或变质,确保处理过程的准确性和可重复
性。
常见问题及解决方法
02
针对样品处理过程中可能出现的问题,如回收率低、干扰物质
多等,提供相应的解决方法。
安全与防护
03
注意有毒有害试剂的使用安全,做好个人防护和环境保护工作。
04 方法开发与优化策略
梯度洗脱程序设计思路
初始比例确定
根据待测组分的极性差异,选 择合适的初始流动相比例。
梯度斜率设置
根据组分的分离情况,调整梯 度斜率,使各组分在合适的保 留时间内洗脱出来。
梯度时间设置
确保梯度洗脱过程中,各组分 能够充分分离,同时避免过长 的分析时间。
梯度曲线类型
根据实际需求选择合适的梯度 曲线类型,如线性梯度、凹形
梯度或凸形梯度等。
方法验证内容及标准
精密度
准确度
通过添加回收率试验,验证方法 的准确度,确保测定结果可靠。
考察方法的重复性和中间精密度, 确保测定结果的稳定性。
线性范围
确定方法的线性范围,确保待测 组分浓度在该范围内时,测定结 果准确可靠。
专属性
考察方法对待测组分的选择性, 确保其他共存物质不干扰测定。
长期稳定性
考察样品在规定的储存条件下放置一定时间后的稳定性,以确定 样品的保质期和储存条件。
方法学考察
对分析方法本身进行稳定性考察,包括方法的耐用性、重复性和 中间精密度等指标的评估。
质量控制图绘制和应用
质量控制图绘制
根据长期稳定性考察数据,绘制质量控 制图,包括平均值、标准差和控制限等 指标。
VS
发展历程及应用领域
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2
液相色谱容易出问题的部件
维护流程图
线路过滤器
单向阀
检测器 柱塞密封圈 手谱容易出问题的部件
单向阀结构
宝石球 抛光面
透明塑料垫片 流动相
单向阀原理
吸液冲程
排液冲程
出口单向阀
泵头
进口单向阀
4
液相色谱容易出问题的部件
单向阀
故障1:宝石球粘附于垫片 表现:泵无法吸液或排液,流路不通 措施:1)用针筒抽出口单向阀以产生负压,
1、在使用新柱之前,最好用强溶剂在低流量下 (0.2-0.3
ml/min)冲洗 30 mins,长时间未用的分析柱也要同样
处理
2、定期使用强溶剂冲洗柱子
3、使用缓冲盐时,要先用低浓度含水有机溶剂冲洗,
再用纯有机溶剂冲洗
4、净化样品
5、分离条件
6、不使用时,要盖上盖子,避免固定相干枯
7、使用预柱
8、避免流动相组成及极性的剧烈变化
措施:5%稀硝酸,超声波清 洗
流动相
压力传感器 判断依据:关闭排液阀,断开出
口管路,设定流速1mL/min,
排液阀
如压力>3kgf/cm2,则可能堵 塞。
7
液相色谱容易出问题的部件
延长柱寿命方法: 倒冲柱 换过滤片 修补柱头
8
液相色谱容易出问题的部件
柱的补修
9
液相色谱容易出问题的部件
分析柱的维护
液相色谱常见问题及解决 方法
解决方案
1
溶剂的过滤 滤膜类型: 聚四氟乙烯滤膜: 适用于所有溶剂,酸和盐。 醋酸纤维滤膜: 不适用于有机溶剂,特别适用于水基溶剂。 尼龙66滤膜: 适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可以用于强酸,不
适 用于二甲基甲酰胺。 再生纤维素滤膜: 蛋白吸收低,同样适用于水溶性样品和有机溶剂
使宝石球与垫片分开 2)拆下单向阀,放入异丙醇或水中,用超声 波清洗
5
液相色谱容易出问题的部件
单向阀
故障2:宝石球或塑料垫片受污导致密封不好 表现:系统压力波动大 措施:拆下单向阀,放入异丙醇或水中,用超
声波清洗
6
液相色谱容易出问题的部件
故障:堵塞
线路过滤器
现象:系统压力波动大或压 力偏高
线路过滤器
9、避免压力脉冲的剧烈变化
10
其他问题
脱气: 除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡
气泡对测定的影响: 1)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积 2)柱中气泡使流动相绕流,峰变形 3)检测器中的气泡产生基线波动
11
个人观点供参考,欢迎讨论!
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