葡萄糖测定方法
血清葡萄糖浓度的测定
2. 葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)
葡萄糖氧化酶GOD (glucose oxidase) 将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧 化氢。过氧化物酶POD (peroxidase)将过氧化氢分解为水和氧，并将无色的4氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物(Trinder反应)，其红色深 浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。
• 空腹血糖损害IFG (impaired fasting glucose) 和糖耐量减退IGT (impaired
glucose tolerance) 是正常向糖尿病的过渡状态，这部分人虽然现在还不是糖尿
病， 但是将来发生2型糖尿病的危险性非常高，可以说是糖尿病的后备军。据
有关研究报道，每年5-8%的 IGT者将发展成为2型糖尿病。
人体对糖的耐受现象 OGTT为口服葡萄糖负荷试验，可了解人体进食葡萄糖后的血
糖调节能力，早期发现糖代谢异常，早期诊断糖尿病，是一种简
单、快捷的诊断方法。 OGTT重复性差，操作繁琐，并非必需的糖尿病诊断方法，因 此不推荐临床常规应用。
方法：试验前三天，受试者每日食物中糖含量不应低于150 g，且维持正常活 动。影响试验的药物应在三天前停用，受试前应空腹10-16 h。空腹取血后，5 分钟内饮入250 mL含75 g无水葡萄糖的糖水(妊娠妇女用量为100 g，儿童按1.75
实验步骤
B S T
工作液 dH2O
葡萄糖标准液 血清
1.00 mL 10 uL
-
1.0 mL 10 uL -
1.0 mL 10 uL
混匀， 37C， 15 mins dH2O 0.50 mL 0.50 mL 0.50 mL 混匀，以B管调零，在510nm波长处读取S管和T管的吸光度. 计算:
葡萄糖cod的测定方法
葡萄糖cod的测定方法摘要：一、葡萄糖COD的测定方法概述二、葡萄糖COD测定的原理1.重铬酸盐回流法2.高锰酸钾法3.分光光度法4.快速消解法三、各测定方法的优缺点对比四、选择合适的方法的重要性正文：葡萄糖COD的测定方法是评估水质污染程度的重要手段。
在水处理和环保领域，正确快速地测定葡萄糖COD含量对于水质监测和污染治理具有重要意义。
本文将对葡萄糖COD的测定方法进行详细介绍，以帮助读者更好地理解和选择合适的方法。
葡萄糖COD的测定方法主要包括重铬酸盐回流法、高锰酸钾法、分光光度法和快速消解法。
重铬酸盐回流法是一种常用的葡萄糖COD测定方法。
其原理是在硫酸酸性介质中，以重铬酸钾为氧化剂，硫酸银为催化剂，硫酸汞为氯离子的掩蔽剂。
通过加热使消解反应液沸腾，以水冷却回流加热反应2小时。
然后以试亚铁灵为指示剂，以硫酸亚铁铵溶液滴定剩余的重铬酸钾，根据硫酸亚铁按溶液的消耗量计算水样的COD值。
高锰酸钾法是另一种常见的葡萄糖COD测定方法。
该方法以高锰酸钾作氧化剂，所测出来的COD称为高锰酸盐指数（CODMn）。
水样加入硫酸呈酸性后，加入一定量的高锰酸钾溶液，并在沸水浴中加热反应30分钟。
剩余的高锰酸钾加入过量草酸钠溶液还原，再用高锰酸钾溶液回滴过量的草酸钠，通过计算求出高锰酸盐指数。
分光光度法是一种较为便捷的葡萄糖COD测定方法。
该方法在酸性溶液中，试液中还原性物质与重铬酸钾反应，生成三价铬离子。
三价铬离子对波长为600nm的光有很大的吸收能力，通过测定三价铬的吸光度可以间接测出试液的COD值。
快速消解法是近年来发展较快的一种葡萄糖COD测定方法。
主要通过提高消解反应体系中氧化剂浓度，增加硫酸酸度，提高反应温度，增加助催化剂等条件来提高反应速度。
然而，不同的葡萄糖COD测定方法各有优缺点。
重铬酸盐回流法、高锰酸钾法和分光光度法在实验过程中产生的污染相对较小，但重铬酸盐回流法和分光光度法操作较为繁琐，耗时较长。
葡萄糖检测标准操作规程SOP
葡萄糖1.目的规范葡萄糖测定的操作程序，确保葡萄糖测定结果准确。
2.检验方法氧化酶法（两点终点法） 3.检验原理 葡萄糖+O 2+H 2O 葡萄糖酸+H 2O 2H 2O 2+4-AAP+苯酚红色醌亚胺+4H 2O在波长505nm 处比色，计算出GLU 浓度。
4.临床意义临床检测GLU 浓度主要用于糖尿病诊断、昏迷鉴别诊断及糖代谢研究。
血糖增高主要见于：①生理性高血糖：可见于饭后1-2小时或情绪紧张肾上腺分泌增加时;②病理性高血糖：可见于内分泌功能障碍引起的糖尿病、颅外伤、颅内出血、脑膜炎引起的颅内高压、脱水引起的高血糖、急慢性胰腺炎、肝功能障碍等。
血糖降低主要见于：①生理性低血糖：常见于饥饿和剧烈运动后。
②病理性低血糖：可见于高胰岛素血症、非胰性肿瘤、糖原累积症、自身免疫性疾病、半乳糖血症和肾脏疾病等。
5.标本采集及干扰因素 5.1标本要求空腹不抗凝静脉血2~3ml 。
5.2标本保存室温保存，及时送检。
血清ALT 在20-25℃可稳定24小时，在2-8℃储存可稳定7d ，-20℃冰冻保存可稳定30d 。
5.3注意事项推荐选用血清，避免溶血，红细胞中ALT 比血浆高约7倍，溶血时红细胞内ALT 可进入血浆，导致测定结果偏高。
标本应避免溶血、脂血、黄疸。
6.检测仪器日立7180全自动生化分析仪，使用具体要求和校准程序详见《仪器GOPOD操作规程》。
7.试剂 7.1试剂品牌美康生物 7.2包装规格200mL （R1:2×65mL+R2:1×70mL ） 7.3主要组成成分 试剂成分含量（最终反应体系） 试剂1 磷酸盐缓冲液 0.1mol/L 苯酚0.01×10-3mol/L 试剂2葡萄糖氧化酶 16000u/L 过氧化物酶 1000u/L 4-氨基安替比林0.02×10-3mol/L不同批次的试剂不推荐混合使用 7.4储存条件有效期试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
葡萄糖含量的测定方法
葡萄糖含量的测定方法
葡萄糖含量的测定方法有以下几种常用的方法：
1. 试纸法：使用葡萄糖试纸，将样品滴在试纸上，根据试纸变色的程度来判断葡萄糖含量的高低。
2. 酶法：使用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，然后使用染色剂和催化剂形成有色产物，并通过光度计检测产物的吸光度来确定葡萄糖含量。
3. 高效液相色谱法：利用高效液相色谱技术分离和测定样品中的葡萄糖。
通常需要配备专用的色谱柱、检测器和流动相等设备。
4. 球团光度法：基于葡萄糖在碱性条件下与邻苯二甲酸酐反应生成有色产物的原理，通过测定产物的吸光度来确定葡萄糖含量。
5. 环境传感器法：利用特定的生物传感器或化学传感器，将葡萄糖与传感器反应产生信号，并通过测量信号的强度来测定葡萄糖含量。
这些方法各有优缺点，适用于不同的实验需求和场景。
在实际应用中，可以根据实验目的、设备和条件选择合适的方法进行测定。
葡萄糖含量的测定实验报告
葡萄糖含量的测定实验报告葡萄糖含量的测定实验报告引言：葡萄糖是一种重要的单糖，广泛存在于自然界中。
了解食物和饮料中的葡萄糖含量对于我们的健康和饮食管理至关重要。
本实验旨在通过一系列实验步骤，准确测定不同食物和饮料中的葡萄糖含量。
实验步骤：1. 样品制备：选取不同种类的食物和饮料作为样品，包括苹果、香蕉、葡萄、饼干、果汁和碳酸饮料。
将样品分别切碎或挤汁，制备成适合实验的样品。
2. 糖水制备：制备一定浓度的葡萄糖溶液作为标准溶液。
按照一定比例将葡萄糖粉溶解在蒸馏水中，搅拌均匀，得到一定浓度的糖水。
3. 比色管法测定：将样品和标准溶液分别倒入不同的比色管中。
使用比色管是因为它具有较高的精确度和方便的操作性。
在实验中，我们使用了光度计来测定溶液的吸光度。
4. 光度计测量：将比色管中的溶液分别放入光度计中，设置合适的波长，并记录吸光度值。
通过比较样品的吸光度值与标准溶液的吸光度值，可以得出样品中葡萄糖的含量。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了不同食物和饮料中的葡萄糖含量。
结果显示，苹果中葡萄糖含量最高，而饼干中葡萄糖含量最低。
这与我们的预期相符，因为苹果是富含糖分的水果，而饼干则通常不含太多糖分。
此外，我们还发现果汁和碳酸饮料中的葡萄糖含量相对较高。
这是因为这些饮料通常会添加糖来增加口感和甜度。
然而，过多的糖分摄入对健康不利，因此我们应该适度控制果汁和碳酸饮料的摄入量。
在实验过程中，我们使用了比色管法测定葡萄糖含量。
这种方法简单、快速，并且具有较高的准确性。
然而，我们也意识到该方法可能存在一定的误差。
因此，为了提高实验结果的准确性，我们可以尝试其他测量方法，例如高效液相色谱法或质谱法。
结论：通过本实验的测定，我们成功地测定了不同食物和饮料中的葡萄糖含量。
结果显示，苹果中的葡萄糖含量最高，而饼干中的葡萄糖含量最低。
果汁和碳酸饮料中的葡萄糖含量相对较高。
掌握这些信息有助于我们更好地了解食物的营养价值，并合理安排饮食。
测定葡萄糖含量的方法
测定葡萄糖含量的方法测定葡萄糖含量的方法有多种，下面将介绍几种常用的方法。
1. 离子色谱法：离子色谱法是目前常用的测定葡萄糖含量的方法之一。
该方法基于葡萄糖可被离子交换柱吸附，并通过洗脱来分离和测定样品中的葡萄糖。
该方法具有灵敏、准确、稳定等优点。
2. 光度法：光度法是一种简单、快速测定葡萄糖含量的方法。
该方法基于葡萄糖溶液可与酚类试剂发生氧化反应，并具有比色反应。
通过测定样品反应后的吸光度，并与标准曲线比对，可以确定样品中的葡萄糖含量。
3. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC法是一种测定葡萄糖含量的常用方法。
该方法通过将样品中的葡萄糖分离，再通过检测器进行检测和定量。
该方法具有高灵敏度、高准确性、高分辨率等优点，被广泛应用于食品、饮料、药品等行业。
4. 酶法：酶法是一种常用的测定葡萄糖含量的方法。
该方法利用特定的酶（例如葡萄糖氧化酶）催化样品中的葡萄糖与氧发生反应，生成过氧化氢。
通过测定生成的过氧化氢数量，可以确定样品中的葡萄糖含量。
该方法具有高特异性、高灵敏度等特点。
5. 毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种快速、准确的测定葡萄糖含量的方法。
该方法利用毛细管电泳技术，将样品中的葡萄糖分离，并通过检测器进行检测和定量。
该方法具有分离能力强、重复性好等优点。
同时需要注意的是，根据实际需要以及样品的性质，选择合适的测定方法进行葡萄糖含量的测定。
为了提高测定的准确性和可靠性，需重复测量，并进行平均处理。
此外，在实验过程中还需要注意样品的处理、实验条件的控制等因素，确保测定结果的准确性。
葡萄糖标准曲线测定
葡萄糖标准曲线测定
葡萄糖是人体内重要的能量来源，对葡萄糖的测定具有重要的临床意义。
葡萄
糖标准曲线测定是一种常用的方法，通过该方法可以准确地测定样品中葡萄糖的含量。
下面将介绍葡萄糖标准曲线测定的步骤及注意事项。
1. 实验仪器和试剂。
实验所需的仪器和试剂包括分光光度计、葡萄糖标准溶液、试管、移液器、吸
光度皿等。
在进行实验前，需要检查仪器是否正常，试剂是否过期。
2. 样品处理。
首先，需要准备好待测样品，样品的处理包括样品的提取、稀释等步骤。
在处
理样品时，需要注意避免污染和样品的损失。
3. 制备标准曲线。
取一系列葡萄糖标准溶液，分别加入吸光度皿中，然后使用分光光度计测定各
标准溶液的吸光度值。
将吸光度值作为横坐标，标准溶液的葡萄糖浓度作为纵坐标，绘制标准曲线。
4. 测定样品。
将处理好的样品加入吸光度皿中，使用分光光度计测定样品的吸光度值。
然后
根据标准曲线，找到样品对应的葡萄糖浓度。
5. 注意事项。
在进行葡萄糖标准曲线测定时，需要注意以下几点：
操作要规范，避免操作失误导致结果不准确；
仪器的使用要正确，保证测定结果的准确性；
样品的处理要细致，避免样品受到污染或损失；
实验环境要干净整洁，避免外界因素对实验结果的影响。
葡萄糖标准曲线测定是一种常用的方法，通过该方法可以准确地测定样品中葡萄糖的含量。
在进行实验时，需要严格按照步骤操作，并注意实验中的细节和注意事项，以确保实验结果的准确性和可靠性。
分光光度计检测葡萄糖
如何用分光光度计检测食品中的葡萄糖1、分析原理：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质，此有色物质在625nm 波长下与葡萄糖浓度成正比。
通过测定蓝色物质的吸光度可计算样品中葡萄糖的含量。
2、仪器：722分光光度计。
3、试剂：除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
（1）乙醇。
（2）40%三氯乙酸：称取40g 三氯乙酸，用水溶解并稀释至100ml。
（3）2 mol/LNaOH 溶液：称取8gNaOH，用水溶解并稀释至100ml。
（4）1 %邻联甲苯胺溶液：称取0.1g 邻联甲苯胺溶解于10ml无水乙醇中，倒入棕色瓶中，4℃冰箱保存。
（5）乙酸缓冲液（pH5.0）：称取14.28g乙酸钠（CH3COONa•3H2O）溶于水中，加入2.7ml冰乙酸，并调节pH5.0，用水定容至1L。
（6）葡萄糖氧化酶溶液：称取一定量的葡萄糖氧化酶（Sigma公司）用水溶解，使酶含量为100U/ml。
4℃冰箱保存一周。
（7）过氧化物酶溶液：0.010g 辣根过氧化物酶溶于10ml 水中，4℃冰箱保存一周。
（8）酶溶液：取100ml乙酸缓冲液，分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各1ml，混匀。
4℃冰箱可保存七周。
（9）酶空白液：取100ml 乙酸缓冲液，分别加入邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各1ml，混匀。
4℃冰箱保存一周。
（注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶）（10）葡萄糖标准液：将葡萄糖标准品（纯度大于99%）于80℃干燥至恒量。
精确称取0.050g，用水移入100ml 容量瓶中，定容至刻度线。
相当于浓度为0.5mg/ml。
4.操作步骤之样品的处理：（1）固体样品：称取0.5～5g已粉碎的样品于锥形瓶中，/加入50ml水后沸水浴15min。
冷却后，转移至100ml容量瓶中并用水定容至刻度。
反复摇动混匀样品，过滤，弃初始几滴滤液。
葡萄糖含量测定计算公式
葡萄糖含量测定计算公式葡萄糖含量测定计算公式是用于计算葡萄糖含量的公式，在食品工业、生物科学等领域广泛应用。
葡萄糖作为一种重要的能量源和碳源，其含量的测定对于食品质量控制、生物研究以及医学诊断都具有重要意义。
葡萄糖含量测定可以采用多种方法，例如酶法、光度法和高效液相色谱法等。
其中，酶法是一种常用的方法，通过葡萄糖氧化酶催化葡萄糖产生过氧化物，再用某种指示剂指示过氧化物的生成，从而实现葡萄糖含量的测定。
计算公式是将实验测得的吸光度值或发光强度值代入公式计算出葡萄糖含量。
下面是一种常用的光度法计算公式：葡萄糖浓度（mg/ml）= [(吸光度样品 - 吸光度空白) / 斜率] ×稀释倍数其中，吸光度样品为实验测得的葡萄糖样品的吸光度值，吸光度空白为测得的不含葡萄糖的空白试剂的吸光度值。
斜率是指标准曲线的斜率，用于校准样品光度值和葡萄糖浓度之间的关系。
稀释倍数是指样品在测定过程中进行的稀释倍数，用于将测得的吸光度值或发光强度值校正为原始样品的浓度。
在进行葡萄糖含量测定时，首先要制备一系列不同浓度的标准溶液，然后测量各标准溶液的吸光度或发光强度，绘制标准曲线。
通过测量待测样品的吸光度或发光强度，然后代入计算公式中，即可计算出样品中的葡萄糖含量。
需要注意的是，不同的测定方法和仪器可能有不同的计算公式。
因此，在具体的实验中，需要根据实验方法和仪器的要求，选择相应的计算公式进行计算。
此外，葡萄糖含量测定还可以采用其他方法，如高效液相色谱法。
在高效液相色谱法中，葡萄糖含量的计算公式是根据标准曲线的峰面积或峰高与葡萄糖浓度之间的线性关系进行计算的。
总结起来，葡萄糖含量测定计算公式是根据实验测得的吸光度值、发光强度值或峰面积、峰高等代入相应的计算公式，计算出样品中的葡萄糖浓度的公式。
不同的测定方法和仪器可能有不同的公式，因此在实验中需要根据具体情况选择合适的计算公式。
在葡萄糖含量测定中，光度法是一种简单、快速、准确的方法。
葡萄糖的含量测定实验报告
葡萄糖的含量测定实验报告葡萄糖的含量测定实验报告引言：葡萄糖是一种重要的碳水化合物，在生物体内起着提供能量的作用。
因此，准确测定葡萄糖的含量对于食品、医药等领域具有重要意义。
本实验旨在通过化学方法测定葡萄糖的含量，并探讨实验结果的准确性和可行性。
材料与方法：1. 实验材料：葡萄糖标准溶液、硫酸铜溶液、碳酸钠溶液、菲涅耳试剂、试管、移液管等。
2. 实验步骤：a. 准备一系列葡萄糖标准溶液，浓度分别为0.1mol/L、0.05mol/L、0.025mol/L、0.0125mol/L和0.00625mol/L。
b. 取一定量的葡萄糖标准溶液，加入试管中。
c. 加入适量的硫酸铜溶液和碳酸钠溶液，混合均匀。
d. 加入菲涅耳试剂，使溶液呈现深蓝色。
e. 使用分光光度计测定溶液的吸光度。
f. 将待测样品按照相同步骤进行处理，并测定吸光度。
g. 制作葡萄糖标准曲线，通过吸光度与葡萄糖浓度的线性关系，计算出待测样品的葡萄糖含量。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了一系列葡萄糖标准曲线，其吸光度与葡萄糖浓度呈线性关系。
根据待测样品的吸光度，我们可以通过标准曲线得出其葡萄糖含量。
然而，实验中可能存在一些误差。
首先，在样品处理过程中，操作的不准确性可能导致结果的偏差。
其次，仪器的精确度也会对实验结果产生影响。
为了提高实验结果的准确性，我们需要在实验操作上更加细致和严谨，并使用精确度更高的仪器。
此外，实验中还存在一些局限性。
首先，该实验只能测定葡萄糖的含量，对于其他碳水化合物的测定并不适用。
其次，实验条件的限制可能导致结果的不准确性。
因此，在实际应用中，我们需要根据具体情况选择合适的测定方法。
结论：通过本实验，我们成功测定了葡萄糖的含量，并得到了一系列葡萄糖标准曲线。
实验结果表明，我们可以通过化学方法准确测定葡萄糖的含量。
然而，在实际应用中，我们需要注意操作的准确性和仪器的精确度，以提高测定结果的准确性。
此外，我们还需要根据具体情况选择合适的测定方法，以满足实际需求。
水果中的葡萄糖含量测定
实训二:水果中的葡萄糖含量测定1、学会剩余碘量法测定水果中葡萄糖含量的原理及方法2、学会标准溶液的配制及标定3、严格控制滴定条件二、实验原理I 2与NaOH作用可生成次碘酸钠（NaIO)，次碘酸钠可将葡萄糖（C6H12O6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。
未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI和NaIO3，当酸化时NaIO3恢复成I2析出，用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2，从而可计算出葡萄糖的含量。
涉及到的反应如下：1） I2与NaOH作用生成NaIO和NaI：I2 + 2NaOH == NaIO + NaI + H2O2） C6H12O6与 NaIO定量作用：C6H12O6 + NaIO == C6H12O7+ NaI3）C6H12O6作用完后，剩下未作用的NaIO在碱性条件下发生歧化反应：3NaIO == NaIO3+ 2NaI4）在酸性条件下：NaIO3 + 5NaI + 6HCl == 3I2+ 6NaCl + 3H2O5）析出过量的I2可用标准Na2S2O3溶液滴定：I2 + 2Na2S2O3== Na2S4O6+2NaI三、实验所需仪器、试剂洗仪器：袁驰仪器：水浴锅、搅拌机、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、烧杯、量筒、电子天平、移液管、小纸片、洗耳球、烧杯、干燥的纱布、锥形瓶、酸碱滴定管、棕色瓶、铁架台试剂：0.1000mol/L的Na2S2O3标准溶液、0.05000mol/L的I2标准溶液、重铬酸钾、无CO2的蒸馏水、3mol/L硫酸溶液、0.5mol/L的NaOH溶液、0.5mol/L硫酸溶液、淀粉指示剂、碘化钾、水果试样、四、实验步骤1、0.1000mol/LNa2S2O3溶液标定（1）精密称取基准物K2Cr2O7约1.2g于烧杯中加100ml的水搅拌使完全溶解，定量转移至250ml容量瓶中，稀释定容，摇匀。
（2）准确移取K2Cr2O7溶液20.00ml 3份分别于锥形瓶中，各加无CO2的蒸馏水25ml,15ml硫酸，碘化钾7.5ml,摇匀，密封，在暗处放置10min。
葡萄糖的鉴定方法
葡萄糖的鉴定方法
葡萄糖是一种单糖，是人体能量的主要来源之一。
以下是一些常见的葡萄糖鉴定方法：
1. 斐林试剂法：斐林试剂是一种含有硫酸铜和氢氧化钠的试剂。
将待测溶液与斐林试剂混合后，加热，如果溶液中含有葡萄糖，会产生砖红色沉淀。
2. 班氏试剂法：班氏试剂是一种含有硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠的试剂。
将待测溶液与班氏试剂混合后，加热，如果溶液中含有葡萄糖，会产生砖红色沉淀。
3. 血糖仪测定法：血糖仪是一种通过测量血液中葡萄糖浓度来确定血糖水平的仪器。
将一滴血液滴在血糖仪的试纸上，血糖仪会测量血液中的葡萄糖浓度，并显示结果。
4. 高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种分离和分析化合物的方法。
将待测溶液通过高效液相色谱仪，根据葡萄糖的保留时间和峰面积来确定溶液中葡萄糖的含量。
葡萄糖注射液的含量测定
葡萄糖注射液的含量测定一、目的要求• 1.掌握旋光法测定葡萄糖注射液含量的基本原理、操作方法及结果计算。
• 2.学会正确使用自动旋光仪。
二、仪器与试剂• 仪器自动旋光仪，旋光管，移液管（50ml ），容量瓶(100ml)。
• 试剂葡萄糖注射液（含量在10%以上），氨试液（取浓氨溶液400ml ，加水使成1000ml ）。
三、方法原理• 葡萄糖分子结构中有多个不对称碳原子，具有旋光性，为右旋体。
一定条件下的旋光度是旋光性物质的特性常数，测定葡萄糖的比旋度，可以鉴别药物，也可以反映药物的纯杂程度。
• 旋光度（α）与溶液的浓度（c ）和偏振光透过溶液的厚度（L ）成正比。
当偏振光通过厚1dm 且每1ml 中含有旋光性物质1g 的溶液，使用光线波长为钠光D 线（589.3nm ），测定温度为t ℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以[α]Dt=α/Lc 。
• 2.0852的由来：+52.75为无水葡萄糖的比旋度，按下式计算无水葡萄糖的浓度：• 无水葡萄糖浓度（c ）=100 α /[α]D20l• 如果换算成一水葡萄糖浓度（c ˊ）时，则应为：• c ˊ = c × = α× × =α×2.0852• 所以，测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。
四、旋光仪的工作原理WZZ-2自动旋光仪构造原理1.光源2.小孔光栏3.物镜4.滤光片5.偏振镜6.磁旋线圈7.样品室8.偏振镜9.光电倍增管10.前置放大器11.自动高压12.选频放大器13.功率放大器14.伺服电机15.蜗轮蜗杆16.计数器• 使用方法（1）将仪器电源插头插入220V 交流电源，并将接地脚可靠接地。
（2）打开电源开关，这时钠光灯应启亮，需经5min 钠光灯预热，使之发光稳定。
（3）打开电源开关（若光源开关打开后，钠光灯熄灭，则再将光源开关上下重复打开1到2次，使钠光灯在直)(16.180)(17.198无水葡萄糖的分子量一水葡萄糖的分子量175.52100 16.18017.198流下点亮，为正常）。
氧化酶法测定葡萄糖的原理
氧化酶法测定葡萄糖的原理一、引言在生化分析中，准确测定物质的含量是非常重要的，而葡萄糖作为一种常见的单糖，其测定方法也备受关注。
本文将介绍一种常用的方法——氧化酶法，该方法以氧化酶作为催化剂，将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并通过测定葡萄糖酸的含量来间接测定葡萄糖的浓度。
二、原理1. 葡萄糖的氧化反应氧化酶可以催化葡萄糖与待定电子受体（如辅酶NAD+）之间的氧化反应，生成相应的葡萄糖酸和还原型辅酶NADH。
该反应的化学方程式如下：葡萄糖+ NAD+ + H2O → 葡萄糖酸 + NADH + H+这个氧化反应是一个底物与辅酶之间的双电子转移反应。
2. 氧化酶的作用氧化酶作为催化剂可以显著加速上述葡萄糖的氧化反应，降低反应的活化能，提高反应速率。
同时，氧化酶本身不参与反应，因此可以被反复使用。
3. 检测葡萄糖酸含量利用化学分析方法，可以测定葡萄糖酸的含量，进而间接推算出葡萄糖的浓度。
常用的方法包括光度法、电化学法等。
三、方法步骤1. 准备样品将待测样品中的葡萄糖转化为葡萄糖酸，通常需要进行酸水解、酶水解等预处理步骤，以使葡萄糖完全转化为葡萄糖酸。
2. 添加试剂向样品中加入适量的辅酶NAD+和氧化酶，使其与葡萄糖酸反应生成NADH。
3. 反应控制根据实验要求，可以控制反应的温度、 pH 值等条件，以提高反应效率和准确性。
4. 测定吸光度利用光度法或其他适用的方法，测定反应体系中产生的NADH的吸光度，通过标准曲线或计算公式，推算出样品中葡萄糖的浓度。
四、应用与优势氧化酶法测定葡萄糖的原理基于酶的催化作用，具有以下优势：1. 高灵敏度：由于酶的催化作用，可以极大地提高反应速率，使测定结果更加灵敏。
2. 高选择性：氧化酶对葡萄糖的催化作用非常特异，能够准确测定葡萄糖的浓度。
3. 容量小：只需少量的酶即可进行检测，可以大大减少实验所需的试剂量。
4. 适用范围广：氧化酶法不仅可以用于葡萄糖的测定，还可以应用于其他单糖的测定，具有广泛的应用前景。
葡萄糖含量测定——碘量法
实验十三 葡萄糖含量的测定——碘量法一、实验目的1、 学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法原理，进一步掌握返滴定法技能。
2、 进一步熟悉酸滴定管的操作，掌握有色溶液滴定时体积的正确读法。
二、实验原理I 2与NaOH 作用可生成次碘酸钠(NaIO)，次碘酸钠可将葡萄糖(C 6H 12O 6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。
未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI 和NaIO 3，当酸化时NaIO 3又恢复成I 2析出，用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2，从而可计算出葡萄糖的含量。
涉及到的反应如下：1、I 2与NaOH 作用： I 2+2NaOH=NaIO+NaI+H 2O2、C 6H 12O 6和NaIO 定量作用： C 6H 12O 6+ NaIO=C 6H 12O 7+NaI3、总反应式： I 2+C 6H 12O 6+2NaOH=C 6H 12O 7+2NaI+H 2O4、C 6H 12O 6作用完后，过量的NaIO 发生歧化反应： 3NaIO=NaIO 3+2NaI5、在酸性条件下NaIO 3和NaI 作用： NaIO 3+5NaI+6HCl=3I 2+6NaCl+3H 2O6、析出过量的碘用Na 2S 2O 3标准溶液滴定： I 2+2Na 2S 2O 3=Na 2S 4O 6+2NaI实验还涉及到Na 2S 2O 3和 I 2溶液的标定1、Na 2S 2O 3的标定 Cr 2O 72-+6I -+14H +=2Cr 3++3I 2+7H 2OI 2+2S 2O 32-=S 4O 62-+2I -Cr 2O 72-~3I 2~6S 2O 32-32232272232200.256)(6O S Na O S Na O Cr K O S Na V c V cV c ⨯⨯=⨯=2、碘的标定 I 2+2S 2O 32-=S 4O 62-+2I -V V c 322322O S Na O S Na c 2/1=3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量计算式：%100506126⨯=L g O H C W 标示量葡萄糖含量三、实验仪器及材料1、 仪器称量瓶、电子台秤、分析天平、容量瓶（250ml ）、移液管（25ml ）、量筒（10ml ）、锥形瓶（25ml ，3个）、酸式滴定管（50ml ）、烧杯（50ml ）、玻璃棒、碘量瓶2、 药品K 2Cr 2O 7（S ）、盐酸（6mol/L ）、KI 溶液（100g/L)、淀粉（5g/L)、Na 2S 2O 3溶液（0.1mol/L ）、I 2溶液（0.05mol/L ）、NaOH 溶液（1mol/L ）、葡萄糖注射液（5%）四、 实验步骤1、 0.1mol/L Na 2S 2O 3标准溶液的标定()()()()())(100000.25100021101612632232222-⋅⨯⨯⎥⎦⎤⎢⎣⎡⋅-⋅L g O H C M O S Na v O S Na c I v I c 葡萄糖含量＝（1）K2Cr2O7标准溶液的配制准确称取1.2~1.3g分析纯K2Cr2O7固体于小烧杯中，加少量的水溶解并转入到250mL 的容量瓶中，用水稀释到刻线，摇匀。
葡萄糖的含量测定方法
葡萄糖的含量测定方法
葡萄糖的含量测定方法有很多种，以下列举几种常用的方法：
1. 麦芽糖法：将待测样品经过酶解、酸化、有机溶剂萃取等处理后，使用酶促反应使麦芽糖水解为葡萄糖，再经过比色或滴定的方法测定葡萄糖的含量。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：将待测样品经过预处理后，采用高效液相色谱技术进行分离和定量分析，根据葡萄糖在色谱柱中的保留时间和峰面积来测定葡萄糖的含量。
3. 空间滴定法：将待测样品与一定浓度的溴酸溶液反应生成溴分子，并滴加碘化钾溶液进行滴定，直至出现持久的黄棕色终点，根据滴定液的用量计算葡萄糖的含量。
4. 加热滴定法：将待测样品与酚酸缓冲液和硝酸铜溶液混合，加热至70-80C，然后滴加碘化钠溶液进行滴定，根据滴定液的用量计算葡萄糖的含量。
这些方法的选择取决于实验条件、样品性质以及需要的精确度和灵敏度等因素。
在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法进行葡萄糖含量测定。
实验葡萄糖含量的测定——碘量法-
实验葡萄糖含量的测定——碘量法一、实验目的1、学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法原理，进一步掌握返滴定法技能。
2、进一步熟悉酸滴定管的操作，掌握有色溶液滴定时体积的正确读法。
二、实验原理I2与NaOH作用可生成次碘酸钠(NaIO)，次碘酸钠可将葡萄糖(C6H12O6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。
未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI和NaIO3，当酸化时NaIO3又恢复成I2析出，用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2，从而可计算出葡萄糖的含量。
涉及到的反应如下：1) I2与NaOH作用生成NaIO和NaI：I2 + 2OH- = IO- + I- + H2O2) C6H12O6和NaIO定量作用：C6H12O6 + IO- = C6H12O7 + I-总反应式为：I2 + C6H12O6 + 2OH- = C6H12O7 + 2I- + H2O3) 未与葡萄糖作用的NaIO在碱性溶液中歧化成NaI和NaIO3：3IO- = IO3- + 2I-4) 在酸性条件下，NaIO3又恢复成I2析出：IO3- + 5I- + 6H+ = 3I2 + 3H2O5) 用Na2S2O3滴定析出的I2I2 + 2S2O32- = S4O62- + 2I-因为1mol葡萄糖与1mol I2作用，而1mol IO-可产生1mol I2从而可以测定出葡萄糖的含量。
三、仪器与试剂分析天平、台秤、烧杯、酸式滴定管、碱式滴定管、容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碘量瓶(250mL)I2(s)(A.R.)、KI(s)(A.R.)、Na2S2O3(s)(A.R.)、Na2CO3(s)(A.R.)、K2Cr2O7(s)(A.R. ，于140℃电烘箱中干燥2h，贮于干燥器中备用)、KI(20%)、HCl(6mol·L－１)、淀粉溶液(0.5%)、NaOH(2mol·L－１)、葡萄糖试样(0.05%)。
实验七 葡萄糖含量的测定(碘量法)
三、 实验试剂
1．2mol/L HCl 2．0.2mol/L NaOH溶液 3．0.05mol/L Na2S2O3标准溶液 4．0.05mol/L I2溶液 5．0.5％淀粉溶液。 6．KI（固体）分析纯。
四、实验步骤
1、0.05M碘标准溶液配制 称取6.5g碘于500ml烧杯中，加入10g碘化钾， 加适量水溶解后，加水至500ml，摇匀，存于棕色 瓶。 标定：
溶液的标定：称取0.15g（精确到0.0001g） 于120℃烘至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶 中，溶于25ml水，加2g碘化钾及6MHCl5ml,摇 匀，盖表面皿，于暗处放置10min，加50ml水， 用配制好的Na2S2O3（0.1mol/L）滴定，近终点 时（浅黄绿）加3ml淀粉指示剂（5g/L），继续 滴定至溶液由蓝色变为亮绿色，同时作空白试验。
准确量取20ml碘液，加50ml水，摇匀，用 0.1 M(Na2S2O3)的标准溶液滴定近终点（微黄色）时 加2ml 0.5％淀粉指示剂，继续滴定至溶液兰色消 失。
附：0.1M硫代硫酸钠标准溶液的配制 称取13gNa2S2O3·5H2O或16g Na2S2O3，溶于 500ml新煮沸的冷蒸馏水中，加0.1克碳酸钠，存 于棕色瓶，放置一周后过滤备用。
主讲： 楚刚辉 讲师
实验七 葡萄糖含量的测定（碘量法）
一、实验目的 了解碘量法测定葡萄糖含量的方法。
二、实验原理 1.I2与 NaOH 作用 I2 + 2NaOH == NaIO + NaI + H2O 2.C6H12O6 和 NaIO 定量作用 C6H12O6 + NaIO == C6H12O7 + NaI 3.总反应式
葡萄糖测定实验原理
葡萄糖测定实验原理葡萄糖是一种常见的单糖，也是人体最重要的能量来源之一。
葡萄糖测定实验是一种常用的化学分析方法，用于确定样品中葡萄糖的含量。
本文将介绍葡萄糖测定实验的原理和步骤。
葡萄糖测定实验主要是通过酶促反应测定葡萄糖的含量。
在实验中，首先需要将待测样品中的葡萄糖转化为葡萄糖-6-磷酸。
这一转化反应需要葡萄糖激酶酶作用，将葡萄糖与磷酸化剂磷酸转化为葡萄糖-6-磷酸。
葡萄糖-6-磷酸是一种稳定的化合物，可以方便地测定其含量。
葡萄糖-6-磷酸的测定是通过酶促反应实现的。
在反应中，葡萄糖-6-磷酸被葡萄糖-6-磷酸脱氢酶作用，转化为6-磷酸葡萄糖酸。
这一反应伴随着NADP+的还原为NADPH的过程，可以通过测定NADPH 的吸光度来间接测定葡萄糖-6-磷酸的浓度。
具体的实验步骤如下：1. 准备工作：将实验所需试剂及设备准备齐全，包括葡萄糖激酶、磷酸、NADP+、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶等试剂，以及分光光度计、比色皿等实验设备。
2. 样品处理：将待测样品进行必要的前处理，如稀释、过滤等，以确保测定结果的准确性。
3. 反应体系的制备：按照一定比例将样品、试剂和缓冲液混合，制备葡萄糖测定的反应体系。
4. 反应过程的测定：将反应体系置于分光光度计中，设定适当的波长，并记录下初始吸光度。
5. 反应启动：向反应体系中加入葡萄糖激酶，启动酶促反应。
在反应过程中，葡萄糖-6-磷酸逐渐生成，同时NADP+被还原为NADPH，反应体系的吸光度随之发生变化。
6. 吸光度测定：在一定时间间隔内，记录下反应体系的吸光度变化，并绘制吸光度与时间的曲线。
7. 结果计算：根据吸光度-时间曲线，计算出样品中葡萄糖的含量。
葡萄糖测定实验的原理基于酶促反应和光度测定技术，具有灵敏度高、操作简便、结果准确等优点。
该方法广泛应用于食品、医药、生物科学等领域中对葡萄糖含量的测定。
葡萄糖测定实验是一种基于酶促反应和光度测定原理的方法，通过测定葡萄糖-6-磷酸生成过程中NADPH的吸光度变化，间接测定葡萄糖的含量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
葡萄糖测定方法
原理
3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，该物质在520 nm处有最大吸收峰，且在一定范围内吸收峰的强度（OD值）与还原糖浓度成线性关系，利用比色法可测得样品的含糖量。
该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰少。
试剂
1）3, 5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）
甲液：溶解6.9 g苯酚于15.2 mL 10% NaOH中，并稀释至69 mL，在此溶液中加入6.9
g NaHSO3；
乙液：称取255 g酒石酸钾钠，加到300 mL 10% NaOH中，再加入880 mL 1%的3,5-二硝基水杨酸。
甲、乙液混合得黄色试剂，贮存于棕色瓶中，室温放置7-10天后备用。
2）0.1%葡萄糖标准液（1 g/L）
准确称取100 mg分析纯的葡萄糖（预先在105℃干燥至恒重），加少量的蒸馏水溶解后定容至100 ml，冰箱中保存备用。
操作步骤
2 mL样品（稀释）+ 1.5 mL DNS →沸水浴5 min →流水立即冷却至室温→定容至25 mL → 520 nm处检测OD值
浓度范围
0 ~ 0.5 g/L
标准曲线
葡萄糖母液1 g/L：称取1.1 g葡萄糖，溶于1000 mL去离子水。
反应体系：
DNS（mL） 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
葡萄糖母液（mL）0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
水（mL） 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1
注意事项
1）考虑葡萄糖的结晶水；
2）可以根据稀释倍数计算加入反应体系的样品量，不足的补水。
3）OD520在0.1~1.0之间时，葡萄糖的浓度基本上与吸光值呈线性关系，超过该范围，则应当适当稀释。
参考文献
[1] Miller G L. Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugars [J]. Anal.
Chem., 1959, 31: 426-428。