实验1-葡萄糖(专业)
高效液相色谱法测量葡萄糖浓度实验报告
高效液相色谱法测量葡萄糖浓度实验报告实验报告-高效液相色谱法测定VE含量实验四高效液相色谱法测定VE含量1 实验目的1.1 了解高效液相色谱仪的基本操作;1.2 了解高效液相色谱仪测定VE的原理。
2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附—解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
VE(维生素E)又名生育酚或产妊酚,在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。
有抗氧化作用,能增强皮肤毛细血管抵抗力,并维持正常通透性;有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。
VE通过高效液相色谱柱进行分离,PDA检测器检测,外标法定量。
3实验器材3.1 实验样品VE样品溶液3.2 实验试剂浓度为50μg/ml的VE标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱:C18柱;流动相速度:0.3ml/min;进样量:5μl;柱温:30℃。
5 实验结果与讨论5.1 实验结果本次实验采用的是单点法测定。
实验结果见表1。
表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5μl×50μg/mL×17369/(5μl×42217)=20.57μg/mL5.2 实验讨论本次实验中,测定标样溶液VE含量时,在指定的保留时间内并未出峰。
讨论分析原因:样品溶液在上周实验后,一直置于离心管中,未避光低温保存,导致样品中VE氧化,液相测定时没有在相应的时间出峰。
本次实验时间较短,且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作,以及液相色谱仪测定VE的原理,故结合前组同学对VE含量的测定数据进行讨论与分析。
高中必修二化学葡萄糖教案
高中必修二化学葡萄糖教案
教学目标:
1. 了解葡萄糖的化学性质和分子结构;
2. 掌握葡萄糖的基本性质,如溶解性、还原性等;
3. 探究葡萄糖在生活中的应用。
教具准备:
1. 实验器材:试管、试管夹、移液器、玻璃棒等;
2. 葡萄糖样品;
3. 碘液、硫酸浓溶液等药品;
4. 实验报告表格。
教学步骤:
一、引入
教师向学生介绍葡萄糖在日常生活中的重要性,并提出研究葡萄糖性质和用途的问题。
二、实验探究
1. 实验一:葡萄糖的溶解性
将一小块葡萄糖加入试管中,加入适量水摇匀观察葡萄糖的溶解性。
2. 实验二:葡萄糖的还原性
将碘液滴入含有葡萄糖的试管中,观察溶液颜色的变化。
3. 实验三:葡萄糖的酸性
将葡萄糖溶液加入硫酸浓溶液,观察气体释放情况。
三、实验讨论
根据实验结果,让学生分析葡萄糖的性质和用途,并填写实验报告表格。
四、拓展应用
讨论葡萄糖在食品、医药等领域的应用,并让学生思考其他可能的应用场景。
五、总结反思
让学生总结本节课的学习收获,并展示对葡萄糖的新认识。
六、作业布置
布置相关的文献查阅作业,让学生更深入地了解葡萄糖的性质和用途。
教学反思:
通过本节课的实验探究和讨论,学生对葡萄糖的性质和用途有了更深入的了解,培养了他们的实验操作能力和科学思维能力。
在今后的教学中,可以通过更多实验和实际场景的讨论,拓展学生对化学知识的应用和创新意识。
糖的性质化学性质实验报告
糖的性质化学性质实验报告一、实验目的本实验旨在探究糖(以葡萄糖为例)的化学性质,通过一系列化学反应实验,观察和分析糖在不同条件下的反应现象,从而深入理解糖的化学特性。
二、实验原理1、糖的氧化反应:葡萄糖具有还原性,能被弱氧化剂如托伦试剂(银氨溶液)和斐林试剂(新制的氢氧化铜悬浊液)氧化。
2、糖的成酯反应:糖中的羟基能与酸发生酯化反应。
3、糖的脱水反应:在浓硫酸等强酸作用下,糖会发生脱水反应。
三、实验仪器与试剂1、仪器:试管、烧杯、玻璃棒、酒精灯、石棉网、三脚架、滴管、药匙。
2、试剂:葡萄糖溶液、托伦试剂、斐林试剂、浓硫酸、乙酸、乙醇。
四、实验步骤1、葡萄糖的银镜反应(1)在洁净的试管中,加入 1mL 2%的硝酸银溶液,然后逐滴加入2%的稀氨水,边滴加边振荡,直至生成的沉淀恰好溶解,得到银氨溶液(托伦试剂)。
(2)向上述银氨溶液中加入 1mL 10%的葡萄糖溶液,振荡后,将试管放在水浴中加热 3-5 分钟。
观察到试管内壁出现光亮的银镜。
2、葡萄糖与斐林试剂的反应(1)配制斐林试剂:将 36g 硫酸铜晶体溶解在 50mL 水中,得到硫酸铜溶液;将 173g 酒石酸钾钠和 5g 氢氧化钠溶解在 50mL 水中,得到酒石酸钾钠氢氧化钠溶液。
将两种溶液混合均匀。
(2)在两支洁净的试管中,分别加入 2mL 斐林试剂,然后分别向其中一支试管中加入 1mL 10%的葡萄糖溶液,另一支试管中加入 1mL蒸馏水作为对照。
将两支试管同时放在沸水浴中加热 2-3 分钟。
观察到加入葡萄糖溶液的试管中产生砖红色沉淀,而对照试管中无明显现象。
3、葡萄糖的酯化反应(1)在一支干燥的试管中,加入 1g 葡萄糖,然后加入 2mL 乙酸和 2mL 浓硫酸,振荡均匀。
(2)将试管放在水浴中加热回流 1-2 小时,然后冷却至室温。
将反应混合物倒入盛有 10mL 水的烧杯中,搅拌均匀。
用饱和碳酸钠溶液中和至 pH 约为 7,然后过滤。
得到的滤液进行蒸馏,收集馏分,即为葡萄糖酯。
葡萄糖检验方法化学
葡萄糖检验方法化学葡萄糖是一种重要的碳水化合物,它在人体内起着供能和调节血糖浓度的重要作用。
葡萄糖的检验方法在临床诊断和生物学研究中具有重要意义。
本文将介绍葡萄糖检验的化学方法,包括常用的尿糖试纸法、酶法和光度法,以及其原理、操作步骤和应用范围。
首先介绍尿糖试纸法。
尿糖试纸法是一种简便快捷的葡萄糖定性定量检测方法。
其原理是利用尿液中的葡萄糖和在酸性条件下氧化还原反应产生的色素进行检测。
操作步骤包括取一小片试纸,用尿液浸湿后与容器边缘擦拭,然后在规定的时间内观察试纸颜色变化,并用试纸上的标度比色确定尿糖含量。
其次介绍酶法。
酶法是一种常用的葡萄糖定量检测方法,通过将葡萄糖与葡萄糖氧化酶反应产生过氧化物,并与酶标底物反应产生发光,利用光强度与葡萄糖浓度成正比的关系进行定量分析。
操作步骤包括将标本与反应试剂混合,允许酶促反应进行一段时间后,通过光度计测定发光强度并据此获得葡萄糖含量。
最后介绍光度法。
光度法是一种常用的葡萄糖定量检测方法,通过测定葡萄糖与某种特定试剂发生的反应产生的吸收、荧光或发光信号来定量分析葡萄糖。
其操作步骤包括将样品与试剂混合后,允许反应一段时间,然后通过光度计测定吸收、荧光或发光强度,并根据标准曲线确定葡萄糖浓度。
葡萄糖检验方法化学的应用范围非常广泛,包括但不限于临床糖尿病筛查、胰岛素抵抗检测、葡萄糖代谢疾病诊断、食品和饮料质量检验等。
葡萄糖检验方法化学在医学和生物学领域中具有重要意义,不断的技术革新和方法优化将进一步提高葡萄糖检测的准确性和灵敏性,有利于更好地指导临床诊断和治疗。
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)ppt课件
(葡萄糖氧化酶法)
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
1
一、实验目的和要求:
1. 掌握酶联法测定血糖含量的基本原理。 2. 熟悉分光光度计的操作。 3. 掌握血糖正常水平及其测定的临床意义。 4. 复习血糖的来源、去路及其调节的有关理
论知识。
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
步骤:
过氧化物酶
醌亚胺 + 4H2O
空白管
标准管
样品管
工作液 蒸馏水
标准液 (10mM)
样品
1.5 mL 0.03mL
1.5 mL
1.5 mL
0.03mL
0.03mL
取3根试管,分别加入试剂混合均匀后,37摄氏度孵育10min,505nm比色, 以空白管试剂调零,分别读取标准管和样品管的吸光值,并计算样品的实际浓 度。
结果:请记录实验数据并列出计算公式
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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葡萄糖标准溶液的配制
配制10mmol/L葡萄糖溶液:
1. 准确称量0.18g葡萄糖粉末; 2. 用双蒸水溶解,充分溶解后,定容至100ml。
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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标准曲线
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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五、实验结果:
【计 算】 • 待测样品中葡萄糖浓度(mmol/L)
= ——测定—管—吸—光—度 ×10
标准管吸光度
= —— ×10
A样 A标
血糖的测定 - (葡萄糖氧化酶法)(对比法、标准曲线法)
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空白管标准管样品管工作液15ml15ml15ml蒸馏水003ml标准液10mm003ml样品003ml取3根试管分别加入试剂混合均匀后37摄氏度孵育10min505nm比色以空白管试剂调零分别读取标准管和样品管的吸光值并计算样品的实际浓葡萄糖氧化酶葡萄糖酸过氧化物酶醌亚胺4h结果
碘量法测定葡萄糖实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除碘量法测定葡萄糖实验报告篇一:实验一葡萄糖含量测定实验一、果蔬样品中葡萄糖含量的测定(碘量法)一、目的要求1、复习碘量法的原理及操作。
2、掌握还原糖的测定方法。
3、学习样品的前处理方法。
二、原理果蔬中的葡萄糖可用水提取,除去干扰物质后,其中的葡萄糖可用碘量法测定。
碘与naoh作用能生成naIo(次碘酸钠),而c6h12o6(葡萄糖)能定量地被naIo氧化。
在酸性条件下,未与c6h12o6作用的naIo可转变成I2析出,析出的I2可用na2s2o3标准溶液滴定。
反应应用2:碘量法测定葡萄糖含量(返滴定法)示意如下:46三、试剂基本单元:1/(:碘量法测定葡萄糖实验报告)2(葡萄糖)I2标准溶液(0.05mol·L-1)na2s2o3标准溶液(0.1mol·L-1)naoh溶液(2mol·L-1);hcl溶液(6mol·L-1);淀粉指示剂(w为0.01)。
四、实验步骤1、样品准备水果样品去皮、去核后搅碎、匀浆;称量适量的匀浆于250mL容量瓶中定容。
于40~50℃的水浴中提取30min后用干滤纸抽滤,弃去前面的少量滤液,保留后面的滤液。
2、葡萄糖含量的测定用移液管吸取25mL滤液置于碘量瓶中,准确加入25mLI2标准溶液。
一边摇动,一边慢慢滴加2mol/Lnaoh溶液,直至溶液呈淡黄色(加碱速度不能过快,否则过量naIo来不及氧化c6h12o6而歧化为不与葡萄糖反应的naIo3和naI,使测定结果偏低)。
将碘量瓶加塞于暗处放置10~15min后,加2mL6mol·L-1hcl溶液酸化,立即用na2s2o3标准溶液滴定至溶液呈淡黄色,加入1mL淀粉指示剂,继续滴定到蓝色消失。
记录读数。
再重复测定二次。
计算样品中葡萄糖的质量分数。
篇二:14葡萄糖含量的测定碘量法。
葡萄糖杂质检查(一般杂质检查)
实验一葡萄糖杂质检查(一般杂质检查)(一)实验类型:操作(二)实验类别:专业实验(三)实验学时数:4学时(四)实验目的1.通过葡萄糖分析了解药物的一般杂质检查项目和意义2.掌握葡萄糖分析中氯化物、硫酸盐、乙醇溶液澄清度、可溶性淀粉、干燥失重及蛋白质限度检查的原理和方法。
(五)实验内容1.酸度检查取本品2.0 g,加水20mL溶解后,加酚酞指示液3滴与0.02M NaOH滴定液0.20mL,应显粉红色。
2.氯化物检查取本品0.60 g,加水溶解使成25 mL,再加稀硝酸10 mL(溶液如不澄清,滤过),置50 mL纳氏比色管中,加水使成约40 mL,摇匀,即得供试品溶液。
另取标准NaCl溶液(每1mL相当于10μg的Cl-)6.0 mL,置50 mL纳氏比色管中,加稀硝酸10 mL,加水使成约40 mL,摇匀,即得对照溶液。
于供试品溶液与对照溶液中,分别加入0.1 M AgNO3溶液1 mL,用水稀释成50 mL,摇匀,在暗处放置10 min,同置黑色背景上,从比色管上方向下观察比较。
供试液如发生浑浊,与对照液比较不得更浓(0.010%)。
3.硫酸盐检查取本品2.0 g,加水溶解使成约40 mL(溶液如不澄清,滤过),置50 mL纳氏比色管中,加稀盐酸2 mL,摇匀,即得供试品溶液。
另取标准K2SO4溶液(每1mL相当于100μg的SO42-)2.0 mL,置50 mL纳氏比色管中,加水使成约40 mL,加稀盐酸2 mL,摇匀,即得对照溶液。
于供试品溶液与对照溶液中,分别加入25% BaCl2溶液5 mL,用水稀释成50 mL,充分摇匀。
放置10min,同置黑色背景上,从比色管上方向下观察比较,供试液如发生浑浊,与对照液比较不得更浓(0.010%)。
4.乙醇溶液得澄清度取本品1.0 g,加90%乙醇30 mL,置水浴上加热回流约10min,溶液应澄清。
如显浑浊,与5.亚硫酸盐与可溶性淀粉检查取本品0.1 g,加水10 mL溶解后,加0.1 M碘试液1滴,应即显黄色。
生物化学:葡萄糖测定(酶法)
葡萄糖氧化酶法
1
【实验要求】
1. 掌 握 掌 握 血 糖 测 定 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 ( GODPOD法)的原理,操作方法 2.熟悉葡萄糖测定的临床意义; 3.巩固分光光度计的使用。
2
【实验原理】
葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖 酸,并产生过氧化氢。在过氧化氢酶(POD)及色原性 受体4-氨基安替比林(4-AAP)的存在下,过氧化氢释 放氧使色素原氧化生成红色醌类化合物。醌的生成量与 葡萄糖成正比,在波长520nm处比色,求得葡萄糖含量。
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【临床意义】
3.生理性或暂时性低血糖 见于饥饿、剧烈运动、注射胰岛 素后、妊娠和服用降糖药后。 4.病理性低血糖 见于(1)胰岛β细胞增生瘤等,使胰岛素分 泌过多;(2)对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能 减退,肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、 肾上腺皮质激素分泌减小;(3)严重肝病患者,由于肝脏储 存糖原及糖异生等功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。
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【注意事项】
1、注意准确的加入所需要的液体量。 2、注意胆红素、谷胱甘肽、尿酸和维生素C等一些还 原性物质将使结果受到干扰。
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【打扫卫生】
1、实验结束后对自己用过的试管、移液管等物 品进行清洗。 2、打扫桌面与地面卫生。 3、带齐本人物品,离开实验室。
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谢 谢!
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【计算】
血清葡萄糖(mmol/L)= Au Cs As
Au:测定管吸光度 As:标准管吸光度 Cs:标准管浓度
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【参考范围】
血清葡萄糖:3.89~6.11 mmol/L
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【临床意义】
1.生理性高血糖 见于饭后1~2h,注射葡萄糖或摄入高糖 食物后、情绪紧张肾上腺素分泌增加时,但不应超过 10mmol/L。 2.病理性高血糖 见于(1)内分泌腺功能障碍能引起高血糖, 如胰腺β细胞损害导致胰岛素分泌缺乏,血糖可超过正常, 临床上称为糖尿病。其他内分泌疾病引起的各种对抗胰岛 素的激素分泌增加也会出现高血糖;(2)颅内压增高:颅内 压增高刺激血糖中枢,如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等; (3)由于脱水引起的高血糖:如呕吐、腹泻和高热等可使血 糖轻度增高。
葡萄糖耐受实验(GTT)
葡萄糖耐受实验(GTT)试剂和仪器:葡萄糖(Cat: G6125, Sigma-Aldrich),生理盐水(0.85% NaCl),血糖仪(GLUCOCARD II Series Test Meter, ARKRAY)和血糖试纸(GLUCOCARD Test Strip II, ARKRAY)。
注意事项:小鼠葡萄糖耐受实验的葡萄糖使用量一般为1.5g或者2g每公斤体重(1.5 or 2 g/kg),根据具体的实验要求配置合适的浓度的葡萄糖溶液。
如葡萄糖使用量是2g/kg,则用生理盐水(saline)配置20%的葡萄糖溶液。
操作步骤:1.小鼠准备:每组实验(如不同基因型或给药组)小鼠数量不得少于6只,对照组必须是同年龄、同性别的小鼠。
于实验前一天下午5点将小鼠换入干净的笼子禁食,禁食16小时,至次日上午9点。
禁食期间,小鼠保持正常的饮水;2.次日上午九点,开始葡萄糖耐受实验。
称取每只小鼠的体重,并用标记笔在小鼠尾巴的根部标记序号,以便在实验过程中能快速的辨认所测小鼠;3.空腹基础血糖的测定:将小鼠从笼子中取出,轻放于铁网格之上,用剪刀剪去小鼠尾巴末端约1-2mm,轻轻挤压小鼠尾巴,让血液富集成一滴,用血糖仪测定空腹血糖,测定值认定为0min的血糖值。
操作尽量轻柔,使小鼠不至于过度惊吓;4.让小鼠适应30min之后,开始准备腹腔注射葡萄糖(IP GTT)或灌胃葡萄糖(OGTT)。
5.IP GTT:将小鼠轻轻抓起,按照标准的腹腔注射操作用1ml注射器给小鼠注射葡萄糖溶液。
注射的体积根据小鼠的体重决定,每g体重注射0.01ml。
从注射完毕一刻起,开始计时;OGTT:将小鼠轻轻抓起,按照标准灌胃操作用1ml注射器连接灌胃针给于小鼠葡萄糖溶液。
灌胃的体积根据小鼠的体重决定,每g体重灌胃0.01ml。
从灌胃完毕一刻起,开始计时。
一般情况下,每只小鼠的操作间隔在1min,这样可以准确的按照所规定时间完成对每只小鼠的血糖测定。
实验一葡萄糖一般杂质检查
实验一:葡萄糖一般杂质检查验一:葡萄糖一般杂质检查一、教学目的:1.掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等限量的检方法、原理、反应条件及计算。
2.熟悉纳氏比色管、验砷瓶、量筒、天平等使用方法。
3.了解药物一般杂质检查项目的意义。
二、实验内容:1.氯化物的限量检查取本品0.6g ,加水溶解使成25ml,再加稀硝酸10ml,溶液若不澄清、滤过,置50ml纳氏比色管中,加水使成40ml,加硝酸银试液1ml,用水稀释至50 ml,摇匀在暗处放置5分钟,如发生混浊,与标准氯化钠6 ml同法操作所制的对照液比较,不得更深(0.01)。
2.硫酸盐的限量检查取本品2g ,加水溶解使成40ml,溶液若不澄清、滤过,置50ml纳氏比色管中,加稀HCl2ml,摇匀,加25氯化钡溶液5ml,用水稀释成50 ml,摇匀,放置10分钟,如发生混浊,与标准硫酸钾溶液2 ml同法操作所制的对照液比较,不得更深(0.01)。
3.重金属的限量检查取本品4g ,加水23 ml溶解,再加稀醋酸2ml,加硫化氢试液10ml,摇匀在暗处放置10分钟,与标准铅溶液2 ml同法操作所制的对照液比较,不得更深(5ppm)。
4.铁盐的限量检查取本品2g ,加水20 ml溶解,再加硝酸3滴,缓缓煮沸5分钟,用水稀释至45 ml,加硫氰酸铵溶液(3→100)3 ml摇匀,如显色,与标准铁溶液2 ml同法操作所制的对照液比较,不得更深(0.001)。
5.砷盐的限量检查演示。
思考题1.在进行氯化物检查、硫酸盐或重金属检查时,遇到有颜色的样品如何处理?2.重金属检查有几种方法?本实验采用何种方法?该法的最适pH为多少?3.何谓“限度检查”?杂质限度应如何计算?实验二特殊杂质检查一、目的要求:熟悉阿斯匹林、盐酸普鲁卡因中的一些特殊杂质的检查原理及操作方法。
二、提要1. 特殊杂质是指药物本身特有的根据其生产主艺、自身牲质,而产生的杂质其检查方法在药典中列在各药品的检查项下。
实验一-葡萄糖杂质检查(一般杂质检查)
—药/囱分:沂姿蟲r11A-203-1《药物分析实验》要求:实验前:预习实验过程中:安静、整洁、公用试剂的使用.实验原始记录.合作又动手实验结束:清理、实验报告、值日《药物分析专业术语与规定》w 本课程为独立的一门课程,以100分计,具体 分配如下:平时成绩(迟早退、预习提问、态度. 值日等)操作成绩 实验报告 书面考核 实验一葡萄糖杂质检査(一般杂质检査) 一、实验目的◎熟悉药物一般杂质检查的项目.原理和 意义.@掌握一般杂质检查的操作方法。
《药物分析实验》成绩评定标准:20%20%30%30%标准浓度X 体积XlOO%供试品量、溶液的澄清度与颜色!浊度标准液:甲醛腺白色沉淀加水配制颜色对照液:CoCl? l ・5tnL+ KzCqO, l ・5mL + CUSO4 3mL+H2OT 25.0mL0本品5g+热水(vlOmL)溶解T 放冷+水—lOmL 會 S ■: EOmL 颜色对照液+水—lOniL 二、实验内容:3、氯化物!SA 本品0.30g+ 水 12mL.5mL 稀HNO3 +水一> 20mL 标准N JJ CI 溶液3.0mlJ T + 0.5mLAgNO,+ 水t 25mL(lOiiffCl/mL)—>摇匀.暗处放5min —>比浊不得更深(0.010%)杂质限量%=杂蠶當量“00%二、实验内容:Y 、酸度;本品2・0g(L20mL 溶液 W 0_NaOH比色20mL实验内容:f 6、亚硫酸盐与可溶性淀粉:7*干燥失重: 本品约1窝,平铺于已干燥至恒重/©的称量瓶中,精 称加2 -* 105C 干燥Ih -*冷却称重切3 -*继续1059 干燥1h —»冷却称重加4 —*至恒重△加<0.3nig —>失重 率不得超过9.5%.失重率.叫xlOG%<9.5%m 、—專忙、实验内容:' 4.硫酸盐:本品l ・0g +水20mL][+ ImL 稀 IIC1 -> + 2.5mL 25%BaC12标准K,SO4 l.OniL (lOOpg SOymL) +19mL 水5、乙醇中不溶物:+水T25mL T 摇匀,暗处放lOmiti -比浊不得更浓(0.010%) 本品 30mI>应成澄明 ted 90%乙爭 说明不存在淀粉和糊精Id 昱巴土 —应显黄色 HzO 碘试液 本品ixb ;三、下次实验:实验五药用辅料苯甲酸钠的质量分析实验八维生素B12注射液检验。
葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定--实验报告
葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定--实验报告设计性实验报告题目:葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定课程名称:姓名:学号:系别:专业:班级:指导教师(职称):实验学期:至学年第学期不褪色即为终点[1]。
根据滴定消耗223Na S O 溶液的体积计算试样中葡萄糖的含量。
这种方法简便易行,且准确度较高。
第二种方案:旋光法:由于葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子,具有旋光性,可采用旋光法测定含量。
操作方法:取出旋光计的测定管,先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。
用供试液(5%葡萄糖注射液)冲洗数次,缓缓注入供试液适量(注意勿使发生气泡)。
置于旋光计内,读取旋光度,连续测定3次,取平均值。
在一定温度下,根据[2]计算试样中葡萄糖的含量。
这种方法简便易行,实验误差小。
本实验采用第一种方案进行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定。
﹙本方法的相对误差约为0.1%,在误差要求范围之内﹚。
2 实验原理2.1 223Na S O (0.1mol/L)的标定因为在酸性溶液中227Cr O -会将223S O -氧化为246S O-及24SO -等混合物,使得反应无定量关系。
所以不能用227K Cr O 直接标定标准溶液。
通常采用227K Cr O 作为基准物,以淀粉为指示剂,用间接碘量法标定溶液。
有关反应如下:232722614237Cr O I H Cr I H O--++++=++222324622S O I S O I ---+=+∴相关计算式:2272272232236K Cr O K Cr O Na S O Na S OC V C V ⨯=2272272232236K Cr O K Cr O Na S O Na S OC V C V ⨯=2.2 2I (0.05mol/L)的标定2I 溶液可用23As O 为基准物进行标定,但23As O 有剧毒,故采用标准溶液进行标定。
反应如下:222324622S O I S O I ---+=+∴相关计算式:222232232Na S O Na S OI I C V CV ⨯=2.3 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定将一定量过量的2I 在碱性条件下加入葡萄糖溶液中,2I 与OH-作用可生成IO-,而葡萄糖分子中的醛基能够定量地被IO-氧化为羧基。
实验葡萄糖含量的测定——碘量法-
实验葡萄糖含量的测定——碘量法一、实验目的1、学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法原理,进一步掌握返滴定法技能。
2、进一步熟悉酸滴定管的操作,掌握有色溶液滴定时体积的正确读法。
二、实验原理I2与NaOH作用可生成次碘酸钠(NaIO),次碘酸钠可将葡萄糖(C6H12O6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。
未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI和NaIO3,当酸化时NaIO3又恢复成I2析出,用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2,从而可计算出葡萄糖的含量。
涉及到的反应如下:1) I2与NaOH作用生成NaIO和NaI:I2 + 2OH- = IO- + I- + H2O2) C6H12O6和NaIO定量作用:C6H12O6 + IO- = C6H12O7 + I-总反应式为:I2 + C6H12O6 + 2OH- = C6H12O7 + 2I- + H2O3) 未与葡萄糖作用的NaIO在碱性溶液中歧化成NaI和NaIO3:3IO- = IO3- + 2I-4) 在酸性条件下,NaIO3又恢复成I2析出:IO3- + 5I- + 6H+ = 3I2 + 3H2O5) 用Na2S2O3滴定析出的I2I2 + 2S2O32- = S4O62- + 2I-因为1mol葡萄糖与1mol I2作用,而1mol IO-可产生1mol I2从而可以测定出葡萄糖的含量。
三、仪器与试剂分析天平、台秤、烧杯、酸式滴定管、碱式滴定管、容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碘量瓶(250mL)I2(s)(A.R.)、KI(s)(A.R.)、Na2S2O3(s)(A.R.)、Na2CO3(s)(A.R.)、K2Cr2O7(s)(A.R. ,于140℃电烘箱中干燥2h,贮于干燥器中备用)、KI(20%)、HCl(6mol·L-1)、淀粉溶液(0.5%)、NaOH(2mol·L-1)、葡萄糖试样(0.05%)。
葡萄糖测定实验
葡萄糖酸+H2O2
POD
2 H2O2+4-氨基安替吡林啉+酚
醌亚胺+4H2O
试剂主要成分与浓度:
试剂 主要成分 葡萄糖氧化酶(GOD) R1 过氧化物酶(POD) 磷酸缓冲液(PH7.0) R2 酚 4-氨基安替吡林啉 11mmol/l 0.77mmol/l 900U/L 100mmol/L 实验浓度 13000U/L
2.如果x、y之间呈直线关系,即可用经典 的直线回归分析法作统计处理,其结果 可以显示候选方法的测定结果有无系统 误差存在 直线回归方程y=a+bx,a为回归直线 的截距,代表恒定误差的大小;b回归系 数,即直线的斜率,代表比例误差的大 小
3.作相关分析 在方法比较试验中,相关系数可作 为被评价方法可否被接受的一项统计学 指标. 对求出的相关系数还应作相关系数 的t检验
方法学比对概念
• 用两种方法同时测定一批标本计算出两 种方法间检测的差值,以此来估计被评价 方法在实际测定病人标本时可能引入的 总系统误差的水平.
意义
• 将候选方法与准确度已知的方法(如参考 方法)作对比分析,以评价候选方法的准确 度,是考核候选方法是否可被采用的重要 试验.方法比较试验是用于检测候选方法 系统误差的大小包括恒定误差和比例误 差,如对适当的数据进行分析,也可以提供 误差的性质.本实验以己糖激酶法为参考 方法,用来评价葡萄糖氧化酶法的总系 统误差
葡萄糖校准液:5.55mmol/l
• 将10 mlR1 与90 ml R2混合均匀,即 为工作液. • 样品: 新鲜无溶血血清(1-15号样本)
操作步骤:
空白管 工作液 蒸馏水 校准 样品 3.0ml 0.02ml 0.02ml 0.02ml 校准管 3.0ml 样品管 3.0ml
葡萄糖检测方法
葡萄检测方法汇总与葡萄糖检测相关的国家地方标准汇总:GB/T 30390-2013 油料种籽中果糖、葡萄糖、蔗糖含量的测定高效液相色谱法DB41/T 321-2003 食品添加剂。
葡萄糖含量测定方法NY/T 2279—2012 食用菌中岩藻糖、阿糖醇、海藻糖、甘露醇、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、核糖的测定离子色谱法GB/T 22428.1-2008 淀粉水解产品还原力和葡萄糖当量测定GB/T 20379-2006 淀粉衍生物葡萄糖浆、果糖浆和氢化葡萄糖浆成分的测定GB/T 16285—2008 食品中葡萄糖的测定酶—比色法和酶-电极法CNS 2874—N5083 葡萄糖浆及干葡萄糖浆GB/T18932.22—2003蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法液相色谱示差折光检测法GB/T22221-2008食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定高效液相色谱法YC/T252—2008烟用料液葡萄糖、果糖、蔗糖的测定离子色谱法国家地方标准检测方法汇总表葡萄糖的应用范围葡萄糖作为人体的基本元素和最基本的医药原料,其作用和用途十分广泛。
尤其是随着广大人民生活水平的提高,葡萄糖作为蔗糖的替代用糖应用于食品行业,为葡萄糖的应用开拓了更广阔的领域.(一)发酵工业微生物的生长需要合适的碳氮比,葡萄糖作为微生物的碳源,是发酵培养基的主料,如抗生素、味精、维生素、氨基酸、有机酸、酶制剂等都需大量使用葡萄糖,同时也可用作微生物发酵多聚糖和有机溶剂的原料。
1。
抗生素发酵葡萄糖是医药工业的重要原料,尤其是抗生素发酵必不可少的原料,抗生素中最主要的品种是青、链霉素,而这两种抗生素发酵都是以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为碳底物。
链霉素发酵以结晶葡萄糖为主,也可用高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液);其他如利福平也以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为主要碳源;沽霉素、红霉索、麦迪霉素也是以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为底物;卡那霉素、庆大霉素等也需要用葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为底物.2。
葡萄糖氧化酶法的实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除葡萄糖氧化酶法的实验报告篇一:葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,goD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase,poD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
【试剂】1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(ph7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调ph至7.0,用蒸馏水定容至1L。
2.酶试剂称取过氧化物酶1200u,葡萄糖氧化酶1200u,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml 中,用1mol/Lnaoh调ph至7.0,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳定3个月。
3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg 溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。
4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。
5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中,加温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。
6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。
2h以后方可使用。
7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。
【操作步骤】1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2.手工操作法取试管3支,按下表操作。
读取标准管及测定管吸光度。
【计算】【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89~6.11mmol/L。
葡萄糖实验报告
一、实验目的1. 了解葡萄糖的化学性质和生理作用。
2. 掌握葡萄糖的测定方法,包括葡萄糖氧化酶法、还原性滴定法等。
3. 学习实验操作技能,提高实验动手能力。
二、实验原理葡萄糖是一种单糖,是人体重要的能量来源。
在生物体内,葡萄糖的代谢主要通过糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化等途径进行。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,其原理如下:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应,生成葡萄糖酸和过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的作用下,将色原性受体氧化,产生红色化合物。
在一定波长下,该化合物的吸光度与葡萄糖浓度成正比,从而可以测定葡萄糖含量。
三、实验材料1. 试剂:葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、磷酸盐缓冲液、硫酸铁溶液、硫酸铜溶液、邻苯二胺溶液等。
2. 仪器:分光光度计、移液管、试管、容量瓶等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制(1)取6支试管,分别加入不同浓度的葡萄糖标准溶液。
(2)向各试管中加入适量的磷酸盐缓冲液,混匀。
(3)向各试管中加入适量的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶,混匀。
(4)室温反应5分钟后,用分光光度计在特定波长下测定吸光度。
(5)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定(1)取一定量的待测葡萄糖溶液,按照标准曲线绘制步骤进行操作。
(2)根据标准曲线计算待测葡萄糖溶液的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据,绘制标准曲线,得到线性方程:y = ax + b,其中y为吸光度,x为葡萄糖浓度。
2. 样品测定根据标准曲线,计算待测葡萄糖溶液的浓度。
六、实验讨论1. 葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,是临床和科研中常用的测定方法。
2. 实验过程中,应注意以下几点:(1)严格控制反应时间,避免过氧化酶的活性降低。
(2)准确配制试剂,保证实验结果的准确性。
(3)使用干净、无污染的仪器和试剂。
七、实验总结本实验通过葡萄糖氧化酶法测定了葡萄糖含量,掌握了实验操作技能。
实验十 血糖的测定
实验(一)十血糖的测定血液中的葡萄糖称血糖。
正常人血糖浓度较恒定,维持在3.9mmol /L ~6.1mmol /L 之间。
血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一,有着双重实际意义:其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。
其二,保证机体不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失。
因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。
血糖测定按其发展过程及反应原理的不同,大致分三类:氧化还原法 ,缩合法(主要有邻甲苯胺法),酶法(主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法)。
下边介绍两种方法供选择。
一、葡萄糖氧化酶法【目的】1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理,能进行血糖测定的操作。
2. 掌握血糖测定的临床意义。
【原理】葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ,GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。
后者在过氧化物酶 (peroxidase ,POD)作用下,分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,即 Trinder 反应。
其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比,在505nm 波长处测定吸光度,与管比较可计算出血糖的浓度。
反应式如下:2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚红色醌类化合物POD2H 2O2H 2O 2O 2葡萄糖+葡萄糖酸+GOD+【器材】试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于800ml 蒸馏水中,用1mol/L 氢氧化钠(或1mol/L 盐酸)调节pH 至7.0,然后用蒸馏水稀释至1L 。
2. 酶试剂称取过氧化物酶1200U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/L NaOH调pH至7.0,加磷酸缓冲液至100ml。
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Pharmaceutical Analysis
1. Aims: To practice with chemical identification and limit test for common impurities.
2. Principles: Be based on specific chemical reactions. 3. Procedures: To operate as follows.
原理: Cl- + Ag+ 稀硝酸 AgCl (白色浑浊)
方法:
取本品0.6g,依法检查?, 与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较, 不得更浓(0.01%)。RS Nhomakorabea比较浊度
S:供试品溶液 R:标准溶液 (Cl▬ 60µg)
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附录 Ⅷ A 氯化物检查法
Pharmaceutical Analysis
Experiment Ⅰ
Identification and Test of Glucose
Pharmaceutical Analysis
(+)-D-glucopyranose monohydrate
C6H12O6,H2O 198.2 5996-10-1 D-(+)-吡喃葡萄糖一水合物
3.4 Limit Test for Arsenic 砷盐检查
原理:古蔡(Gutzeit)氏法
As3++3Zn+3H+ AsO33-+3Zn+9H+
3Zn2++AsH3 3Zn2++3H2O+AsH3
AsO43-+4Zn+11H+
4Zn2++4H2O+AsH3
AsH3+3HgBr2
3HBr+As(HgBr)3 (黄色)
Results:A red precipitate is formed.
取本品约0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热 的碱性酒石酸铜试液中,并加热。
现象:即生成氧化亚铜的红色沉淀。
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3.2 Limit test for chlorides 氯化物检查
2As(HgBr)3+AsH3 As(HgBr)3+AsH3
3AsH(HgBr)2 (棕色) 3HBr+As2Hg3 (黑色)
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装置 与 试剂作用
试砷装置
试剂: 无砷锌粒 醋酸铅棉花 KI-SnCl2试液
对照 样品
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供试溶液与对照溶液中,分别加入硝酸银试液1.0ml, 用水稀释使成50ml,摇匀,在暗处放置5分钟。同置 黑色背景上,从比色管上方向下观察、比较,即得。
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3.3 Limit Test for Heavy Metals 重金属检查
原理:硫代乙酰胺法
方法:
取本品4.0g,加水23ml溶解后, 加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml,依法检查? 含重金属不得过百万分之五。
3.5 Limit test for sulphated ash 炽灼残渣
取本品1~2g,依法操作?不得过0.1%(附录Ⅷ N)
Dissolve 1.0 g in 1 ml of water R, add 0.5 ml of sulphuric acid R, evaporate to dryness on a hot plate and ignite to constant mass. If necessary, repeat the heating with sulphuric acid R.
取规定量的供试品,加水溶解使成25ml(溶液如显碱性, 可滴加硝酸使成中性),再加稀硝酸10ml;溶液如不 澄清,应滤过;置50ml纳氏比色管中,加水使成约 40ml,摇匀,即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液,置50ml纳氏 比色管中,加稀硝酸10ml,加水使成40ml,摇匀, 即得对照溶液。
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附:随堂板书笔记
1、Cl-1
2、重金属
丙≥甲管时:供试品不得深于甲管 合格 丙浅于甲管时:改用第二法
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3、As盐
4. Residue on ignition
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Pharmaceutical Analysis
S R S+R
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依法检查(附录Ⅷ H第一法): 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物,是最常用的方法。
CH3CSNH2+ H2O
CH3CONH2 + H2S
H2S + Pb2+ pH3.5 PbS + 2H+
[Pb2+] 10µg ~ 20µg/25ml,相当于标准铅溶液1 ~ 2ml。
温馨提示
天平室在本层楼西侧414房间,
实验完成后请及时值日哦!
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4. Discussions 1) BP 葡萄糖标准中,铅的限度检查方法与限量? 2) BP与ChP炽灼残渣检查法的异同? 3) 砷盐检查中各试剂的作用? 4) 各检查试验中的注意事项。
温馨提示 实验结束后请将有毒溶液回 收至通风橱内的废液瓶中!
实验结束后 请您按照上图摆放整齐
2012-9
Pharmaceutical Analysis
3.1 Identification 【鉴别】
Dissolve 0.2 g in 5 ml of water R and add drop wise to 3 ml of warm cupri-tartaric solution R and heat.