枯草芽孢杆菌习性及其培养.ppt

成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
适应生长条件
相关试验结果表明：该株枯草芽孢杆菌具有良好 的耐高 温、耐酸性和耐胆盐能力， 在90 ℃水浴中处理10 min后其存活率接近80 %
在pH等于2的人工胃液中处理6 h后存活率仍超过76 %
6.枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘 菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质 对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
7.枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低 氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降 低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长。
8.刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞， 提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫 功能，提高群体免疫力。
它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及 动物肠道等处。
芽孢杆菌bacillus 杆菌科的一属细菌。 为好氧或兼性厌氧的杆菌，一般为革兰氏染色阳性。 在某种环境下，菌体内的结构发生变化，经过前孢子阶段，形成一个
完整的芽孢。 芽孢对热、放射线和化学物质等有很强的抵抗力。
枯草芽孢杆菌：
仪器设备 控温摇床、高压蒸气灭菌锅、电子天平 、pH测定仪、无菌操作台和紫外分光光度计。
制备培养基 称取33g营养琼脂，蒸馏水1000ml， 121℃灭菌30min。
分装 按照实验要求，可将配置的培养基分 装入试管内或三角瓶中。 液体分装：分装的高度以试管高度的ห้องสมุดไป่ตู้1/4左右为宜；分装三角瓶的量则根 据需要而定，一般以不超过三角瓶的 一半为宜。 固体分装：分装于试管中的应不超过 试管的1/5，灭菌后制成斜面；分装 三角瓶的量以不超过一半为宜。
枯草芽孢杆菌生长习性 及其培养
主要内容
1.枯草芽孢杆菌的特性 2适应生殖条件 3.作用机理 4.应用范围 5. 斜面培养 6.无菌操作
枯草芽孢杆菌特性
芽孢杆菌（Bacillaceae），细菌的一科，能形成芽孢（内生孢子） 的杆菌或球菌。
包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠 球菌属等。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。 在不同质量浓度猪胆盐液 体培养基中，枯草芽孢杆 菌均得到了增殖，但增殖 幅度不大，说明猪胆盐对 枯草芽孢杆菌的增殖具有 抑制作用，当猪胆盐质量 浓度为0.3 %时，其抑制作 用明显增加。
枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应该比较广泛，在污水处理 及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛，是一种 多功能的微生物。
应用范围：
枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应用比较广泛，在污水处理及生物肥发酵或发 酵床制作中应用也相当广泛,是一种多功能的微生物. 1． 市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜 牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理； 2．畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖； 3．可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用。
枯草芽孢杆菌，是芽 孢杆菌属的一种。单 个细胞 0.7～0.8×2～ 3微米，着色均匀。无 荚膜，周生鞭毛，能 运动。革兰氏阳性菌， 芽孢0.6～0.9×1.0～ 1.5微米，椭圆到柱状， 位于菌体中央或稍偏， 芽孢形成后菌体不膨 大。
菌落
菌落表面粗糙不透明， 污白色或微黄色，在液体培 养基中生长时，常形成皱醭。 需氧菌。可利用蛋白质、多 种糖及淀粉，分解色氨酸形 成吲哚。在遗传学研究中应 用广泛，对此菌的嘌呤核苷 酸的合成途径与其调节机制 研究较清楚。广泛分布在土 壤及腐败的有机物中，易在 枯草浸汁中繁殖，故名。
在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活率超过 90 % 在含猪胆盐的培养基中，仍可以生长增殖。
为微生物添加剂产品的开发提供了优良的菌种。
将枯草芽 孢杆菌在90 ℃ 水浴中处理10 min后其存活 率接近80 %， 说明枯草芽孢 杆菌具有较好 的耐高温性能。
当培养基初始 pH为2和3时，枯 草芽孢杆菌培养 液OD600值始终 约为0.3，当初始 pH为4、5、6和7 时，在培养12 h后 OD600值接近。 这说明，枯草芽 孢杆菌在强酸性 条件下生长性能 较差，在弱酸性 和中性环境中生 长旺盛。
作用机理：
1．枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源 性感染的条件致病菌有明显的抑制作用 2．枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促 进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间 接抑制其它致病菌生长 3．刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免 疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体 免疫力 4．枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤 维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用 5．能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动 物体内干扰素和巨噬细胞的活性。
加塞 培养基分装完毕后，在试管口上塞上棉塞，以阻 止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证 有良好的通气性能。
包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包 一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，外 边再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称， 组别，配制日期。三角瓶加塞后，外包牛皮纸， 用麻绳以活结扎好，使用时容易解开，同样注明。