枯草芽孢杆菌 (2)ppt课件
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枯草芽孢杆菌PPT精选文档PPT文档共36页
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
1、不要轻言放弃，否则对不起自己。
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
枯草芽孢杆菌PPT精选文档 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管来生多么美丽，我不愿失 去今生对你的记忆，我不求天长地久的美景，我只要生生世世的轮 回里有你。
枯草芽孢杆菌习性及其培养ppt课件
2．枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促 进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间 接抑制其它致病菌生长
3．刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免 疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体 免疫力
4．枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤 维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
PPT学习交流
9
枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。
在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活 率超过90 %
在含猪胆盐的培养基中，P仍PT学习可交流以生长增殖。
7
将枯草芽
孢杆菌在90 ℃ 水浴中处理10 min后其存活 率接近80 %， 说明枯草芽孢
杆菌具有较好 的耐高温性能。
PPT学习交流
8
当培养基初始 pH为2和3时，枯 草芽孢杆菌培养 液OD600值始终 约为0.3，当初始 pH为4、5、6和7 时，在培养12 h后 OD600值接近。 这说明，枯草芽 孢杆菌在强酸性 条件下生长性能 较差，在弱酸性 和中性环境中生 长旺盛。
• 包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠 球菌属等。
• 它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及 动物肠道等处。
3．刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免 疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体 免疫力
4．枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤 维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
PPT学习交流
9
枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。
在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活 率超过90 %
在含猪胆盐的培养基中，P仍PT学习可交流以生长增殖。
7
将枯草芽
孢杆菌在90 ℃ 水浴中处理10 min后其存活 率接近80 %， 说明枯草芽孢
杆菌具有较好 的耐高温性能。
PPT学习交流
8
当培养基初始 pH为2和3时，枯 草芽孢杆菌培养 液OD600值始终 约为0.3，当初始 pH为4、5、6和7 时，在培养12 h后 OD600值接近。 这说明，枯草芽 孢杆菌在强酸性 条件下生长性能 较差，在弱酸性 和中性环境中生 长旺盛。
• 包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠 球菌属等。
• 它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及 动物肠道等处。
枯草芽孢杆菌的培养、筛选分离和鉴别
03
枯草芽孢杆菌的筛选分离
枯草芽孢杆菌的分离纯化
制样品稀释液
取得土壤样g，放入盛 1 有99ml的无菌水锥形
瓶中，充分振荡。
培养
用移液枪将各个浓度梯度的一 3 定量稀释液接种到开始时制作 好的培养基上，用无菌刮铲涂 匀。37℃下倒置培养24小时。
加热筛选能形成芽孢的 细菌
在超净工作台中，将装有锥形瓶 2 的菌悬液加塞、包扎、摇匀后放
3
高压灭菌：将分装包扎的培养基放入 高压蒸汽灭菌锅中进行高压蒸汽霉菌， 用0.075MPa灭菌30分钟。（使用高 压蒸汽灭菌锅要注意放完冷气。灭菌 结束后等到气压降到“0”时才能打 开放气阀。）
培养基 制备
2
精确称取蔗糖30g、磷酸二氢钾4.5g、 硫酸铵2.5g、蛋白胨10g、碳酸钙 2g、酵母膏5g和琼脂20g，然后在 1000ml水中充分溶解。
道中的游离氧，造成肠道
2
低氧，促进有益厌氧菌生
长，间接抑制其它致病菌
生长。
4.
枯草芽孢杆菌菌体自身合成α -
4
淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤
维素酶等酶类，在消化道中与
动物体(人体)内的消化酶类一
同发挥作用。
3.
3
刺激动物(人体)免疫器官
的生长发育，激活T、B
淋巴细胞，提高免疫球
蛋白和抗体水平，增强
细胞免疫和体液免疫功
能，提高群体免疫力。
生物科学 进入人体，能100%到达大小肠，抑
制致病菌，促进有益厌氧菌生长，并产生 乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑 制其它致病菌生长。提高免疫球蛋白和抗 体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能， 提高群体免疫力。合成α -淀粉酶、蛋白酶、 脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与 动物体(人体)内的消化酶类一同发挥作用。
枯草芽孢杆菌
改善生态环境
生物肥料：枯草芽 孢杆菌可提高土壤
2 肥力，促进植物生
长
3
生物农药：枯草芽
孢杆菌可作为生物
农药，减少化学农
药的使用
工业领域
生物农药：用 于生产生物农 药，防治植物 病害
饲料添加剂： 提高饲料营养 价值，促进动 物生长
生物降解：用 于降解工业废 水中的有机污 染物
生物修复：用 于土壤修复， 改善土壤质量
3
降解有机物质： 枯草芽孢杆菌能 降解有机物质， 如蛋白质、脂肪 等，提高土壤肥 力。
4
改善土壤结构： 枯草芽孢杆菌能 促进土壤团粒结 构的形成，提高 土壤的透气性和 保水性。
农业领域
生物防治：枯草芽 孢杆菌可有效防治
多种植物病害，如 1
枯萎病、根腐病等
生物修复：枯草芽 4
孢杆菌可修复受污 染的土壤和水体，
05
广泛应用于食品、 饲料、农业等领域
环境影响
01
对环境无害
02
生物降解性
03
非转基因
04
非病原体
05
非致敏原
06
非致癌物
法规政策
01
法规：《食品安全法》
03
法规：《食品生产许可 管理办法》
05
法规：《食品安全法实 施条例》02政策：《食品安全国家标 准 食品添加剂使用标准》
04
法规：《食品添加剂新 品种管理办法》
生物转化：用 于生物转化， 生产高附加值 化学品
环保领域
01
02
03
04
生物降解：枯草芽 孢杆菌可降解多种 有机污染物，如石
油、农药等
土壤修复：枯草芽 孢杆菌可改善土壤 质量，提高土壤肥
生物肥料：枯草芽 孢杆菌可提高土壤
2 肥力，促进植物生
长
3
生物农药：枯草芽
孢杆菌可作为生物
农药，减少化学农
药的使用
工业领域
生物农药：用 于生产生物农 药，防治植物 病害
饲料添加剂： 提高饲料营养 价值，促进动 物生长
生物降解：用 于降解工业废 水中的有机污 染物
生物修复：用 于土壤修复， 改善土壤质量
3
降解有机物质： 枯草芽孢杆菌能 降解有机物质， 如蛋白质、脂肪 等，提高土壤肥 力。
4
改善土壤结构： 枯草芽孢杆菌能 促进土壤团粒结 构的形成，提高 土壤的透气性和 保水性。
农业领域
生物防治：枯草芽 孢杆菌可有效防治
多种植物病害，如 1
枯萎病、根腐病等
生物修复：枯草芽 4
孢杆菌可修复受污 染的土壤和水体，
05
广泛应用于食品、 饲料、农业等领域
环境影响
01
对环境无害
02
生物降解性
03
非转基因
04
非病原体
05
非致敏原
06
非致癌物
法规政策
01
法规：《食品安全法》
03
法规：《食品生产许可 管理办法》
05
法规：《食品安全法实 施条例》02政策：《食品安全国家标 准 食品添加剂使用标准》
04
法规：《食品添加剂新 品种管理办法》
生物转化：用 于生物转化， 生产高附加值 化学品
环保领域
01
02
03
04
生物降解：枯草芽 孢杆菌可降解多种 有机污染物，如石
油、农药等
土壤修复：枯草芽 孢杆菌可改善土壤 质量，提高土壤肥
枯草芽孢杆菌习性及其培养PPT课件
然后，将接种环从柄部至环端逐渐通过火焰 灭菌，复原。
不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体 爆溅而污染空间。平板接种时，通常把平板的面 20
21
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
9
枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。 在不同质量浓度猪胆盐液 体培养基中，枯草芽孢杆 菌均得到了增殖，但增殖 幅度不大，说明猪胆盐对 枯草芽孢杆菌的增殖具有 抑制作用，当猪胆盐质量 浓度为0.3 %时，其抑制作 用明显增加。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
13
菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
5
成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
6
适应生长条件
相关试验结果表明：该株枯草芽孢杆菌具有良好 的耐高 温、耐酸性和耐胆盐能力， 在90 ℃水浴中处理10 min后其存活率接近80 % 在pH等于2的人工胃液中处理6 h后存活率仍超过76 % 在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活率超过 90 % 在含猪胆盐的培养基中，仍可以生长增殖。 为微生物添加剂产品的开发提供了优良的菌种。
不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体 爆溅而污染空间。平板接种时，通常把平板的面 20
21
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
9
枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。 在不同质量浓度猪胆盐液 体培养基中，枯草芽孢杆 菌均得到了增殖，但增殖 幅度不大，说明猪胆盐对 枯草芽孢杆菌的增殖具有 抑制作用，当猪胆盐质量 浓度为0.3 %时，其抑制作 用明显增加。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
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菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
5
成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
6
适应生长条件
相关试验结果表明：该株枯草芽孢杆菌具有良好 的耐高 温、耐酸性和耐胆盐能力， 在90 ℃水浴中处理10 min后其存活率接近80 % 在pH等于2的人工胃液中处理6 h后存活率仍超过76 % 在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活率超过 90 % 在含猪胆盐的培养基中，仍可以生长增殖。 为微生物添加剂产品的开发提供了优良的菌种。
枯草杆菌 生物兴趣小组(共35张PPT)
9、 复染：滴加蕃红复染3-5min， 水洗。
至此，革兰氏染色结束。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
观察荚膜和鞭毛标本片
周生
一端生一束
荚膜
革兰氏染色法是一种鉴别性的染色方法。 美国用枯草芽孢杆菌QST713菌株开发出活菌制剂杀菌剂SerenadeTM，用于防治多种作物的白粉病、霜露病、疫病、灰霉病等病害，用于防 治叶部病害(灰霉病、白粉病)和根部病害(枯萎病、根腐病、黑斑病等)，用于防治番茄晚疫病、灰霉病和小麦白粉病，还可作为增产促进剂。 [1]刘惠知，孔利华，周映华，黄建军. 确定N源后，在保持C含量不变的情况下，分别用葡萄糖，蔗糖，玉米粉，玉米淀粉，大米粉作为C源制作发酵培养基，其它组分不变，相同 条件下培养48h，测定活菌数和芽孢率，确定最佳C源。 本品还有婴幼儿生长发育所必须的多种维生素、微量元素及矿物质钙，可补充因消化不良或腹泻所致的缺乏。 利用蛋白质工程技术，能够在生产新酶之前对该酶的性质进行改良和调整，从而改善酶的活性或者赋予酶新的所需性质。 稻草粗细程度对枯草芽孢杆菌生长的影响 枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病 菌生长 研究证明，枯草芽孢杆菌的活菌制剂可以作为口服液用于治疗肠炎、支气管炎和腹泻等多种疾病，也用来预防和治疗烧伤面的感染。 通用名称：枯草杆菌二联活菌颗粒
这些浮游植物的光合作用，又为池内底栖水产动物的呼吸、有机物的分解提供氧气，从而使养殖水体形成一个良性的生态循环； 精、番红染 色液、蒸馏水。 8 pH对枯草芽孢杆菌生长的影响
培养方法
先用接种环接种1环试管菌 种到牛肉膏蛋白胨液体培 养基中，200r/min，37℃培 养24h，进行扩大培养和活 化，然后再取1mL液体种接 种到发酵培养基中，37℃培 养48h。
枯草芽孢杆菌
培养特性
在营养琼脂培养基上，37℃培养24h ，可形成圆形、隆起、表面光滑、湿 润、边缘整齐的菌落，菌落呈灰白色 或略带黄色。
生态环境与分布
生态环境
枯草芽孢杆菌广泛存在于土壤、空气 、尘埃以及人和动物的肠道中。
分布
作为一种常见的环境微生物，枯草芽 孢杆菌在全球范围内的各种生态环境 中都有分布，包括土壤、水体、空气 以及动植物体表和体内。
枯草芽孢杆菌
汇报人：XX
目录
• 枯草芽孢杆菌基本概念 • 枯草芽孢杆菌生理功能 • 枯草芽孢杆菌应用领域 • 枯草芽孢杆菌培养技术 • 枯草芽孢杆菌安全性评价 • 枯草芽孢杆菌市场前景展望
01
枯草芽孢杆菌基本概念
定义与分类
定义
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ）是一种革兰氏阳性、好氧或兼 性厌氧的杆状细菌，属于芽孢杆 菌属。
终止发酵。
05
枯草芽孢杆菌安全性评价
毒性试验
1 2
急性毒性试验
通过对实验动物进行单次或短时间内的高剂量暴 露，观察枯草芽孢杆菌对实验动物的急性毒性作 用。
亚急性毒性试验
在实验动物上进行较长时间的连续或反复暴露， 以评估枯草芽孢杆菌对机体的亚急性毒性作用。
3
慢性毒性试验
通过长期低剂量暴露，观察枯草芽孢杆菌对实验 动物的慢性毒性作用，包括致癌性、生殖毒性等 。
医药领域应用拓展
枯草芽孢杆菌在医药领域具有潜在应用价值，如生产抗生 素、酶制剂等，随着医药技术的不断发展，其市场需求将 进一步扩大。
工业领域应用前景广阔
枯草芽孢杆菌在工业领域可用于生产多种酶类、有机酸等 化工产品，随着工业生物技术的不断发展，其市场需求将 进一步增加。
枯草芽孢杆菌习性及其培养PPT课件
15
加塞 培养基分装完毕后，在试管口上塞上棉塞，以阻 止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证 有良好的通气性能。
包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包 一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，外 边再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称， 组别，配制日期。三角瓶加塞后，外包牛皮纸， 用麻绳以活结扎好，使用时容易解开，同样注明。
它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及 动物肠道等处。
芽孢杆菌bacillus 杆菌科的一属细菌。 为好氧或兼性厌氧的杆菌，一般为革兰氏染色阳性。 在某种环境下，菌体内的结构发生变化，经过前孢子阶段，形成一个
完整的芽孢。 芽孢对热、放射线和化学物质等有很强的抵抗力。
11
6.枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘 菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质 对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
7.枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低 氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降 低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长。
8.刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞， 提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫 功能，提高群体免疫力。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
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菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
5
成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
加塞 培养基分装完毕后，在试管口上塞上棉塞，以阻 止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证 有良好的通气性能。
包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包 一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，外 边再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称， 组别，配制日期。三角瓶加塞后，外包牛皮纸， 用麻绳以活结扎好，使用时容易解开，同样注明。
它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及 动物肠道等处。
芽孢杆菌bacillus 杆菌科的一属细菌。 为好氧或兼性厌氧的杆菌，一般为革兰氏染色阳性。 在某种环境下，菌体内的结构发生变化，经过前孢子阶段，形成一个
完整的芽孢。 芽孢对热、放射线和化学物质等有很强的抵抗力。
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6.枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘 菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质 对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
7.枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低 氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降 低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长。
8.刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞， 提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫 功能，提高群体免疫力。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
13
菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
5
成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
枯草芽孢杆菌PPT精选文档共36页
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
枯草芽孢杆菌PPT精选文档
•
26、我们像鹰一样，生来就是自由的 ，但是 为了生 存，我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子，然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索
•
27、法律如果不讲道理，即使延续时 间再长 ，也还 是没有 制约力 的。— —爱。 ——马 克罗维 乌斯
•
29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中，哪 里没有 法律， 那里就 没有自 由。— —洛克
•
30、风俗可以造就法律，也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
枯草芽孢杆菌PPT精选文档
•
26、我们像鹰一样，生来就是自由的 ，但是 为了生 存，我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子，然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索
•
27、法律如果不讲道理，即使延续时 间再长 ，也还 是没有 制约力 的。— —爱。 ——马 克罗维 乌斯
•
29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中，哪 里没有 法律， 那里就 没有自 由。— —洛克
•
30、风俗可以造就法律，也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
枯草杆菌ppt
• 9.3、装量差异：取供试品20粒，分别精密称定重量，倾出内容物（不得 损失囊壳），硬胶囊剂囊壳用小刷或其他适宜的用具拭净（软胶囊剂囊 壳用乙醚等溶剂洗净，置通风干燥处使溶剂挥散尽），再分别精密称定 囊壳重量，求出每粒胶囊内容物的装量与20粒的平均装量。每粒装量与 平均装量相比较，超出装量差异限度的不得多于2粒，并不得有一粒超出 限度一倍（平均装量为0.3g以下，装量差异限度为±10.0%；0.3g或0.3g 以上，装量差异限度为±7.5%）。 • 9.4、崩解度与溶出度：胶囊剂作为一种固体制剂，通常应作崩解度、溶 出度或释放度检查，除另有规定外，应符合规定。凡规定检查溶出度或 释放度的胶囊不再检查崩解度。硬胶囊应在30min内全部崩解 • 9.5、按照微生物限度检查，应符合规定。
• 3.2空罐灭菌 • 空气过滤器灭菌，灭菌后对空气过滤器通空气进行保压，使压强保持在 0.1~0.15mpa之间防止染菌。 • 对罐体进行夹套预热85摄氏度以上。 • 温度到达后，关闭夹套进气开关。通热蒸汽对罐体经行升温，当温度达 到120摄氏度、压强0.11mpa时，保持温度和压力20min。 • 灭菌后，关闭蒸汽进气阀，开大放气阀，进行泄压。 •
• 2种子液的制备 • 将上述检定合格的纯培养物，接种于营养肉 汤培养瓶内，在180r/min，37摄氏度摇床过 夜培养18一24小时，进行纯菌及菌形特征检 查。
3发酵罐培养基
3.1发酵罐培养基配置
将发酵培养基按照上述配方比例配好共配培养基10L，因为在蒸汽灭菌过中 会产生大量的冷凝水，导致发酵培养基被稀释，所以初始加入的培养基 为10L,这样可以避免培养基的稀释。
将上述混合物加热溶解后，调PH为7· 0一7· 2，121°下灭菌20一30分钟 ，即制成培养菌液,共配置10L.
枯草芽孢杆菌的分离纯化ppt完美版
养4天，取培养液（约2ml）和等量的40%NAOH相混合，加少量
肌酸（约0.5—1mg），充分振荡，2—5min后如培养液呈红色，
即为试验阳性。
•
四 淀粉水解
• 原理：许多芽孢杆菌产生淀粉酶，能将培养基中的淀 粉水解，淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
• 培养基：在肉汤琼脂中添加0.2%的可溶性淀粉，分装 于三角瓶。0.1MPa(15lbf/in2)20min灭菌备用。
• 枯草芽孢杆菌在自然生长和发酵培养 产生的脂肽类抗生素具有很强的抗真菌、 病毒、肿瘤、支原体活性，在防治植物病 害上具有广阔的应用前景。
分离原理
• 芽孢杆菌能产生芽孢，在沸水中加热不 会失去生理活性，但是不能产生芽孢的细 菌会失去活性，因而得到芽孢菌属，经过 进一步的分离及生理生化鉴定得到枯草芽 孢杆菌。
• 病 不 孢 以害高杆提枯上使菌高草具其的脂芽有应发肽孢广 用 酵 类杆阔 受 技 抗菌的 到 术 生脂应 限 和 素肽用 制 对 产类前 ， 其 量抗通景 进 。生过行,但素研遗由在究传于防枯改其治草造产植芽可量物 培枯枯的2发(养将发(养将对脂原将结枯菌培无将铺枯的无5无培将05培对脂原脂 菌将1对脂脂培 脂结5将取阴2将2若 2将对脂芽离芽离经1（对脂培无若芽离培对脂将铺若枯的 脂培脂原培培将无将枯将对脂若培若脂将将 将发(养培乙经对脂枯枯的培（（脂对脂无可取阴菌脂 结培将若结将结芽离芽离发(养对脂菌2（50枯 的（发(养可若55结若对脂对比111116MM6— — — — — —%%%%%%%%%%养草草应酵基沉酵基脂每肽理沉果草落养荚培满草应荚荚养沉养每肽理肽落沉每肽肽养肽果沉一性芽在沉每肽孢及孢及生2每肽养荚芽孢及养每肽培满草应肽养肽理养养脂荚脂草脂每肽芽养芽肽沉沉脂酵基养酰生每肽草草应养菌2沉肽沉每肽荚利一性落肽果养测测芽果沉果孢及孢及酵基每肽落4草应菌酵基利在果芽每肽每较MMPP的 的的的的111） ） ） 111、 、 、 、 、PP结 芽 芽 用 过 、 淀 过 、 肽 管 类 ： 淀 表 芽 颜 结 膜 养 菌 芽 用 膜 膜 结 淀 基 管 类 ： 类颜 淀 管 类 类 基类 表 淀 载 。 基 孢 培淀 管 类 杆 生 杆 生 理 管 类 基 膜 孢 杆 生 结 管 类 养 菌 芽 用类 结 类 ： 结 结 肽 膜 肽 芽 肽 管 类 孢 基 孢 类 淀 淀肽 过 、 基 甲 理 管 类 芽 芽 用 结 体 淀 类 淀 管 类 膜 用 载 。 颜 类表 基 结 试 试 孢 表 淀 表 杆 生 杆 生 过 、 管 类 颜 芽用 体 过 、 用 培 表 孢 管 类 管 不aammmmmm可 可可可可平平挑a((a2222211gggggg束孢孢前程无在程无类乙抗有在明孢色束，基落孢前，，束在：乙抗有抗 色在乙抗抗： 抗明在玻：杆养 在乙抗菌理菌理生乙抗：，杆菌理束乙抗基落孢前 抗束抗有束束类，类孢类乙抗杆：杆抗在在 类程无：基生乙抗孢孢前束应在抗在乙抗，蛋玻色抗 明：束菌杆明在明菌理菌理程无乙抗色孢 前应程无蛋养明杆乙抗乙同（（%%%%%溶 溶溶溶溶55））））））板板菌后杆杆景中机6中机抗醇生些6,杆、后周做为杆景周周后6在醇生些生 、6醇生生在 生,6片在菌基 6醇生能生能生化醇生在周菌能生后醇生做为杆景 生后生些后后抗周抗杆抗醇菌蛋菌生66抗中机在甲化醇生杆杆景后呈6生6醇生周白片、生 ,在后种种菌,6,能生能生中机醇生、杆 景呈中机白基,菌醇生醇pll88、 、 、 、 、最最最最最最bb性性性性性，，，，，，000000的0的000及H0llffbb,菌菌。采盐采盐生溶素芽菌形,生成度菌。生生,肉溶素芽素 形溶素素肉 素，肉测中 溶素产化产化鉴溶素肉生在产化,溶素成度在菌。 素,素芽,,生生生菌生溶素在白在素生采盐肉醇鉴溶素菌菌。,杆素溶素生质，形素 肉,接接在产化产化采盐溶素形菌 。杆采盐质中在溶素溶//℃℃℃℃℃℃℃℃ ℃℃℃33333777777777佳佳佳佳佳佳条ii淀 淀淀淀淀ff充充充充充充制制纯nn//%%%%%000000000的在用培用培素液的孢的状鞭平，在鞭鞭汤液的孢的 状液的的汤 的在汤试加 液的生鉴生鉴定液的汤鞭琼生鉴液的平，琼在的的孢素鞭素的素液的琼胨琼的素用培汤在定液的在状的液的鞭、在状的 汤种种琼生鉴生鉴用培液的状在 状用培、加琼液液ii22培培培培培培件nn的的的的的的的的 的的的000000000粉 粉粉粉粉分分分分分分备备化、、、、、))22000000000分自单养单养粗进干杆分、毛板平自毛毛琼进干杆、进干琼 上琼菌入 进干芽定芽定，进干琼毛脂芽定进干板平脂自提杆粗毛粗分粗进干脂脂粗单养琼碱，进干分自，进干毛多上、琼于于脂芽定芽定单养进干、提自 ，单养多入脂进干进干HHHH5HHHHH22养养养养养养下烘烘烘）烘烘烘烘烘 烘烘烘）， ，，，，振振振振振振rrrrrrrrr：：：g0055555PPPPPPPPP/////////离然因基因基提行重菌离质，，板然，，脂行重菌质行重脂 面脂接少 行重孢得孢得确行重脂，柱孢得行重，板柱然取菌提，提离提行重柱柱提因基脂性确行重离然具行重，种面质脂肉肉柱孢得孢得因基行重质取然 具因基种少柱行重行重，mmmmmmmmmmm%%%%%条条条条条条沉LLLLLLLLL33箱箱箱箱箱箱箱箱 箱箱箱分 分分分分荡荡荡荡荡荡溶溶从00CCCCCCCCCiiiiiiiiiii纯生素素物平。发纯地革凝呈生革革中平。发地平。中 加中种量 平。，到，到定平。中革表，到平。凝呈表生发物革物纯物平。表表物素中环定平。纯生芽平。革糖加地中汤汤表，到，到素平。地生 芽素糖量表平。平。))—))—)、 、 葡 、 、 、nnnnnnnnnnn件件件件件件淀对 对 对 对 对中中中中中中中中中中中装 装装装装mm，，，，，，化 化 上定定定定定定定定定离离离离离离离离离灭灭化长试试过板酵化、兰固蓝长兰兰添板酵、板添一添于肌板在枯在枯是板添兰面在枯板固蓝面长酵过兰过化过板面面过试添境是板化长孢板兰及一、添琼琼面在枯在枯试板、长孢试及肌面板板——11111萄为为为为为为的ii脂脂脂脂脂干干干干干干干干 干干干于 于于于于222222nn三三述00000量 量量量量量量 量量心心心心心心心心心菌菌和验验抑葡透氏后色和氏氏加抑葡透抑加 滴加上酸 抑沸草沸草芽抑加氏生沸草抑后色生和葡氏抑生生验加中芽抑和，抑氏淀滴透加脂脂生沸草沸草验抑透和 ，验淀酸生抑抑S酸SSSS酸——————灭灭糖%%%%%LLLLLL干肽肽肽肽肽燥燥燥燥燥燥燥燥 燥燥燥三 三三三三角角分eeeee检 检检检检检检 检检111111111备备aaaaaa发方方菌萄明阳取，发阳阳菌萄明菌述以 菌水芽水芽孢菌阳长水芽菌取，长发萄阳菌长长方可孢菌发宽菌阳粉明斜斜长水芽水芽方菌明发 宽方粉以长菌菌00300沉030沉555555)))))菌菌5ppppp重000000000类类类类类11111111111nnnnnn、、、、、角 角角角角瓶瓶离.—...—..mmmmmm测 测测测g测测测 测测用用hhhhhmmmmmmmmm88888888888dddddd酵法法试糖度性菌而酵性性试糖度试培补 试中孢中孢杆试性为中孢试菌而为酵糖性试为为法被杆试酵度试性，度面面为中孢中孢法试度酵 度法，补为试试淀淀，,抗抗抗抗抗aaaaa初初初初初瓶 瓶瓶瓶瓶iiiiiihhhhhhhhhhhyyyyyy中中的11以iiiiiiiiinnnnnn。。nnnnnnnnnddddd培验产等菌种菌培菌菌验产等验养充 验加杆加杆菌验菌好加杆验种菌好培产菌验好好氧菌验培一验菌分等上上好加杆加杆验等培 一分充好验验,,法,,法,培培培培培培,,,,,,,,,00N后后后后后后考考考考考生生生生生称称称称称称称称 称称称始始始始始,,,,,,,,,。 。。。。eeeee的的平确%%取取取取取取取取取a养酸均，点落养，，酸均液胍 热菌热菌属，氧热菌点落氧养酸，氧氧气属养致，解均，，氧热菌热菌均养 致解胍氧,,,,,,,,,,,,xxxxx养养养养养养如如如如如如察察试试试试试试试察试试察试察试试素素素素素重重重重重重重重 重重重pppppC牛牛板定的的上上上上上上上上上LLLLLHHHHH，一有种周有有，一中基 不。不。纯有菌不。种周菌，有菌菌成纯；有色一培培菌不。不。一；色基菌基基基基基基l培培培培培培产不不验产验验验验验产验不验产验不验产 不验验HHHHH产产产产产即即即即即即即即 即即即肉肉上完过过5值值值值值清清清清清清清清清并致芽于围芽芽并致，， 会会种芽，会于围并芽，，二种芽氨致养养，会会致氨，，,,,,,,-----养养养养养养g生同同真生真真真真真生真同真生真同真生 同真真初初初初初初量量量量量为为为为为为为为 为为为22222汤汤分全氧氧(((((，，，，，，，，，，00000将）孢�
枯草芽孢杆菌 2课件
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? 1992 年，Nakamura 等首次克隆了纳豆激酶基因并测定了全基因序列， 使得利用基因工程技术提高纳豆激酶活性及产量成为可能。近年来， 我国掀起对纳豆激酶的研究和开发热潮，纳豆激酶的药用价值日益突 出，通过利用基因工程菌生产纳豆激酶，致使对纳豆激酶基因的克隆 表达、纯化及表达产物的产量和活性方面的研究取得了很大进展 在我 国传统大豆发酵食品豆豉中发现了类似纳豆激酶的高活力的纤溶酶， 将其产生菌株鉴定为枯草芽孢杆菌，并将豆豉纤溶酶基因克隆到了毕 赤酵母中。与此同时，韩国也在其传统大豆发酵食品中发现了类似的 纤溶酶。近期，陈晔等通过枯草芽孢杆菌培养，利用（NH4）2SO4沉 淀、Sephadex G100 柱层析对该酶发酵液进行分离纯化，已经分离纯 化出了枯草芽孢杆菌（B.subtilis ZY21）溶栓酶。 以上研究证明，日 本、中国及韩国先后发现的这3种纤溶酶应该均由枯草杆菌分泌的， 只是菌株不同而已。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌 或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，并且枯草 芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进 有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值， 间接抑制其它致病菌生长。
14
? 姜华等人采用全自动微生物鉴定系统和分子生物学鉴定方 法，从辽宁碱蓬中分离纯化出7种细菌：枯草芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、缓慢葡萄 球菌、松鼠葡萄球菌和无乳链球菌其中，枯草芽孢杆菌对 供试的10种真菌有抑菌作用，尤其对草酸青霉菌丝干物质 抑制率可达86.4%，对茄病镰孢菌和串珠镰孢菌的抑制率 分别为52.2%和41.4%。
? 陈中义等构建了含有CrylAc基因的两个穿梭表达质粒载体，导入生防 枯草芽孢杆菌B916，获得了兼有杀虫防病效果的基因工程菌Bs2014和 Bs2249，同时还将CrylAb、CrylAc、Cry12Aa等杀虫基因导入B916并 获得了一系列单价和双价杀虫防病工程菌。
? 1992 年，Nakamura 等首次克隆了纳豆激酶基因并测定了全基因序列， 使得利用基因工程技术提高纳豆激酶活性及产量成为可能。近年来， 我国掀起对纳豆激酶的研究和开发热潮，纳豆激酶的药用价值日益突 出，通过利用基因工程菌生产纳豆激酶，致使对纳豆激酶基因的克隆 表达、纯化及表达产物的产量和活性方面的研究取得了很大进展 在我 国传统大豆发酵食品豆豉中发现了类似纳豆激酶的高活力的纤溶酶， 将其产生菌株鉴定为枯草芽孢杆菌，并将豆豉纤溶酶基因克隆到了毕 赤酵母中。与此同时，韩国也在其传统大豆发酵食品中发现了类似的 纤溶酶。近期，陈晔等通过枯草芽孢杆菌培养，利用（NH4）2SO4沉 淀、Sephadex G100 柱层析对该酶发酵液进行分离纯化，已经分离纯 化出了枯草芽孢杆菌（B.subtilis ZY21）溶栓酶。 以上研究证明，日 本、中国及韩国先后发现的这3种纤溶酶应该均由枯草杆菌分泌的， 只是菌株不同而已。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌 或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，并且枯草 芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进 有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值， 间接抑制其它致病菌生长。
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? 姜华等人采用全自动微生物鉴定系统和分子生物学鉴定方 法，从辽宁碱蓬中分离纯化出7种细菌：枯草芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、缓慢葡萄 球菌、松鼠葡萄球菌和无乳链球菌其中，枯草芽孢杆菌对 供试的10种真菌有抑菌作用，尤其对草酸青霉菌丝干物质 抑制率可达86.4%，对茄病镰孢菌和串珠镰孢菌的抑制率 分别为52.2%和41.4%。
? 陈中义等构建了含有CrylAc基因的两个穿梭表达质粒载体，导入生防 枯草芽孢杆菌B916，获得了兼有杀虫防病效果的基因工程菌Bs2014和 Bs2249，同时还将CrylAb、CrylAc、Cry12Aa等杀虫基因导入B916并 获得了一系列单价和双价杀虫防病工程菌。
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枯草芽胞杆菌的其他作用
• 能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高 动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，此外枯草芽胞杆菌也 具有抗氧化和促进新陈代谢的作用。李卫芬等发现水体中 添加芽孢杆菌制剂可以提高草鱼机体免疫力和抗氧化活性， 但也使草鱼肠道受到一定程度的应激胁迫。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌 或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，并且枯草 芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进 有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值， 间接抑制其它致病菌生长。
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• 姜华等人采用全自动微生物鉴定系统和分子生物学鉴定方 法，从辽宁碱蓬中分离纯化出7种细菌：枯草芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、缓慢葡萄 球菌、松鼠葡萄球菌和无乳链球菌其中，枯草芽孢杆菌对 供试的10种真菌有抑菌作用，尤其对草酸青霉菌丝干物质 抑制率可达86.4%，对茄病镰孢菌和串珠镰孢菌的抑制率 分别为52.2%和41.4%。
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枯草芽胞杆菌的概念 枯草芽胞杆菌的发展历史 枯草芽胞杆菌的理化性质 枯草芽胞杆菌的作用机理 枯草芽孢杆菌的应用
2
1 枯草芽胞杆菌的概念
3
• 枯草芽胞杆菌是一类好氧型、内生抗逆孢子的杆状细菌， 广泛存在于土壤湖泊、海洋和动植物的体表自身没有致病 性，只具有单层细胞外膜，能直接将许多蛋白质分泌到培 养基中。在营养缺乏的条件下，枯草芽胞杆菌停止生长， 同时加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生素， 并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生长。在极端的 条件下，还可以诱导产生抗逆性很强的内源孢子。正是由 于枯草芽孢杆菌无致病性，并可以分泌多种酶和抗生素， 而且还具有良好的发酵基础，所以用途十分广泛。
4
枯草芽胞杆菌在营养琼脂培养基中的形态
5
2枯草芽胞杆菌研究的发展历史
6
• 关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史，早 期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功 能发掘及防治等方面。
• 近年来，对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物 学领域，研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需 要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆 菌生产菌进行遗传改造等。
11
4枯草芽胞杆菌的作用机理
12
近年来国内外对于芽孢杆菌应用方面的研究日益增多， 枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。 枯草芽胞杆菌的作用机理主要有： 1、枯草芽胞杆菌的抑菌作用 2、枯草芽胞杆菌的免疫作用 3、枯草芽胞杆菌的消化作用 4、枯草芽胞杆菌的其他作用
13
枯草芽胞杆菌的抑菌作用
3、1980年Papavizas G C报道，枯草芽孢杆菌可以防治水稻等作物的多种土传真 菌病害。
4、1992年Hwang等报道，用枯草芽孢杆菌可以防治豌豆的Rhizoctoni根腐病。 5、上世纪90 年代，唐文华等和刘伊强等将枯草芽孢杆菌与Bt 通过细胞融合获得
了具有抑菌杀虫作用的融合子，从而使得该菌既有抗虫性又有抗药性，成为 一种极有前景的农药制剂。
8
虽然目前对该菌种的研究仍然处于实验室 的初始阶段的水平，但是枯草研报杆菌有 一系列的优良性状吸引这一些的科学家的 目光，他们相信随着经济的发展，枯草芽 抱杆菌资源对在工、农、医等方面有重大 应用价值，开发利用更具有重要意义。
9
3枯草芽胞杆菌的理化性质
10
理化性质
枯草芽胞杆菌在孢子状态下稳定性极好，有耐氧化、耐挤压、耐高温、 耐积水、耐酸等特性并能分泌多种酶类物质和生长为之因子。有资料 表明，枯草芽孢杆菌能长期耐60℃高温，在120℃温度下能存活20分 钟，在100℃下2min损失5%-10%；在贮存和加工条件下芽孢杆菌也 有很高的耐受能力；在pH值2.2-7.0范围内枯草芽孢杆菌有较高的存活 率，在酸性胃环境中能保持活性，并可耐唾液和胆汁的攻击，是饲料 微生物中可100%直达大小肠的活菌；有较高的蛋白酶、纤维素酶和 淀粉酶活性，对植物碳水化合物有较强的降解能力。
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枯草芽胞杆菌的消化作用
• 枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、 纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同 发挥作用。
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• 李卫芬等研究了饲料中添加枯草芽孢杆菌对草鱼消化道酶 活性和肠道菌群数量的影响。选用体质量为（51. 37±0. 58)g 的健康无病草鱼300尾，随机分为对照组和处理组两 组，每组设3个重复，每个重复放50尾鱼，对照组饲喂基 础日粮，处理组饲喂含枯草芽孢杆菌（108 CFU/kg饲料） 的基础日粮，日投喂量为鱼体质量的3%，饲养时间为45 d。 结果表明：饲料中添加枯草芽孢杆菌能够改善草鱼肠道菌 群组成，并提高消化道特定消化酶活性。
15
枯草芽胞杆菌的免疫作用
• 枯草芽胞杆菌可以刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、 B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫 和体液免疫功能，提高群体免疫力。
ห้องสมุดไป่ตู้16
• 边连全等为了研究枯草芽孢杆菌－菊糖合生元对断奶仔猪生长性能及 体液免疫功能的影响，对72头21日龄断奶的三元杂交仔猪进行试验。 各组试猪分别灌喂培养基（对照组）、培养基+3.5 mg /mL菊糖（菊糖 组）、培养基+1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌组）、 培养基+ 3.5mg /mL 菊糖+ 1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌（合生元 组），各组灌喂量为16 mL /d，试验期为14 d。结果表明：枯草芽孢 杆菌－菊糖合生元可提高断奶仔猪的生长性能与体液免疫功能。
7
1、自1958 年Spizizen 发现枯草杆菌168 菌株能摄取外源基因以后，随着DNA 重 组技术的建立，特别是金黄色葡萄球菌带抗性标志的质粒可作为其载体的发 现，枯草杆菌基因工程研究迅速发展。
2、1945年Johnson等报道，枯草芽孢杆菌具有防治植物病害的作用。此后，用枯 草芽孢杆菌制备生防制剂防治植物病害的研究成为国内外研究的热点。
枯草芽胞杆菌的其他作用
• 能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高 动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，此外枯草芽胞杆菌也 具有抗氧化和促进新陈代谢的作用。李卫芬等发现水体中 添加芽孢杆菌制剂可以提高草鱼机体免疫力和抗氧化活性， 但也使草鱼肠道受到一定程度的应激胁迫。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌 或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，并且枯草 芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进 有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值， 间接抑制其它致病菌生长。
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• 姜华等人采用全自动微生物鉴定系统和分子生物学鉴定方 法，从辽宁碱蓬中分离纯化出7种细菌：枯草芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、缓慢葡萄 球菌、松鼠葡萄球菌和无乳链球菌其中，枯草芽孢杆菌对 供试的10种真菌有抑菌作用，尤其对草酸青霉菌丝干物质 抑制率可达86.4%，对茄病镰孢菌和串珠镰孢菌的抑制率 分别为52.2%和41.4%。
1
枯草芽胞杆菌的概念 枯草芽胞杆菌的发展历史 枯草芽胞杆菌的理化性质 枯草芽胞杆菌的作用机理 枯草芽孢杆菌的应用
2
1 枯草芽胞杆菌的概念
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• 枯草芽胞杆菌是一类好氧型、内生抗逆孢子的杆状细菌， 广泛存在于土壤湖泊、海洋和动植物的体表自身没有致病 性，只具有单层细胞外膜，能直接将许多蛋白质分泌到培 养基中。在营养缺乏的条件下，枯草芽胞杆菌停止生长， 同时加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生素， 并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生长。在极端的 条件下，还可以诱导产生抗逆性很强的内源孢子。正是由 于枯草芽孢杆菌无致病性，并可以分泌多种酶和抗生素， 而且还具有良好的发酵基础，所以用途十分广泛。
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枯草芽胞杆菌在营养琼脂培养基中的形态
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2枯草芽胞杆菌研究的发展历史
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• 关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史，早 期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功 能发掘及防治等方面。
• 近年来，对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物 学领域，研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需 要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆 菌生产菌进行遗传改造等。
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4枯草芽胞杆菌的作用机理
12
近年来国内外对于芽孢杆菌应用方面的研究日益增多， 枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。 枯草芽胞杆菌的作用机理主要有： 1、枯草芽胞杆菌的抑菌作用 2、枯草芽胞杆菌的免疫作用 3、枯草芽胞杆菌的消化作用 4、枯草芽胞杆菌的其他作用
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枯草芽胞杆菌的抑菌作用
3、1980年Papavizas G C报道，枯草芽孢杆菌可以防治水稻等作物的多种土传真 菌病害。
4、1992年Hwang等报道，用枯草芽孢杆菌可以防治豌豆的Rhizoctoni根腐病。 5、上世纪90 年代，唐文华等和刘伊强等将枯草芽孢杆菌与Bt 通过细胞融合获得
了具有抑菌杀虫作用的融合子，从而使得该菌既有抗虫性又有抗药性，成为 一种极有前景的农药制剂。
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虽然目前对该菌种的研究仍然处于实验室 的初始阶段的水平，但是枯草研报杆菌有 一系列的优良性状吸引这一些的科学家的 目光，他们相信随着经济的发展，枯草芽 抱杆菌资源对在工、农、医等方面有重大 应用价值，开发利用更具有重要意义。
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3枯草芽胞杆菌的理化性质
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理化性质
枯草芽胞杆菌在孢子状态下稳定性极好，有耐氧化、耐挤压、耐高温、 耐积水、耐酸等特性并能分泌多种酶类物质和生长为之因子。有资料 表明，枯草芽孢杆菌能长期耐60℃高温，在120℃温度下能存活20分 钟，在100℃下2min损失5%-10%；在贮存和加工条件下芽孢杆菌也 有很高的耐受能力；在pH值2.2-7.0范围内枯草芽孢杆菌有较高的存活 率，在酸性胃环境中能保持活性，并可耐唾液和胆汁的攻击，是饲料 微生物中可100%直达大小肠的活菌；有较高的蛋白酶、纤维素酶和 淀粉酶活性，对植物碳水化合物有较强的降解能力。
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枯草芽胞杆菌的消化作用
• 枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、 纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同 发挥作用。
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• 李卫芬等研究了饲料中添加枯草芽孢杆菌对草鱼消化道酶 活性和肠道菌群数量的影响。选用体质量为（51. 37±0. 58)g 的健康无病草鱼300尾，随机分为对照组和处理组两 组，每组设3个重复，每个重复放50尾鱼，对照组饲喂基 础日粮，处理组饲喂含枯草芽孢杆菌（108 CFU/kg饲料） 的基础日粮，日投喂量为鱼体质量的3%，饲养时间为45 d。 结果表明：饲料中添加枯草芽孢杆菌能够改善草鱼肠道菌 群组成，并提高消化道特定消化酶活性。
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枯草芽胞杆菌的免疫作用
• 枯草芽胞杆菌可以刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、 B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫 和体液免疫功能，提高群体免疫力。
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• 边连全等为了研究枯草芽孢杆菌－菊糖合生元对断奶仔猪生长性能及 体液免疫功能的影响，对72头21日龄断奶的三元杂交仔猪进行试验。 各组试猪分别灌喂培养基（对照组）、培养基+3.5 mg /mL菊糖（菊糖 组）、培养基+1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌组）、 培养基+ 3.5mg /mL 菊糖+ 1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌（合生元 组），各组灌喂量为16 mL /d，试验期为14 d。结果表明：枯草芽孢 杆菌－菊糖合生元可提高断奶仔猪的生长性能与体液免疫功能。
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1、自1958 年Spizizen 发现枯草杆菌168 菌株能摄取外源基因以后，随着DNA 重 组技术的建立，特别是金黄色葡萄球菌带抗性标志的质粒可作为其载体的发 现，枯草杆菌基因工程研究迅速发展。
2、1945年Johnson等报道，枯草芽孢杆菌具有防治植物病害的作用。此后，用枯 草芽孢杆菌制备生防制剂防治植物病害的研究成为国内外研究的热点。