脑脊液常规操作规程

白细胞分类


1、直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜换为高 倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计 数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核 细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白 细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具 体数字。 2、染色分类法：如直接分类不易区分细胞时，可 将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清l 滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37℃温箱内待 干，进行瑞氏染色后用油镜分类。如见有不能分 类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿 瘤时。


1、红色：
如标本为均匀红色血性脑脊液，为区别蛛网膜下 腔出血或穿刺性损伤，应： (1)将血性脑脊液试管离心5 min(1500r／min)，如上 层液体呈淡红色或黄色，隐血试验阳性，多为蛛 网膜下腔出血，呈黄色说明出血的时间已超过4 h。 如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿 刺损伤所致的新鲜出血。 (2) 红细胞在渗透压较血浆高的脑脊液中5 min后， 即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用 以鉴别陈旧性或新鲜出血。
试验方法：取潘（迪）氏试剂2～3ml于小试管内，
白细胞总数


非血性标本：于小试管内滴入1%冰醋酸1-2滴，转 动试管，使壁内沾有冰醋酸后倾去，滴入标本3-4 滴，数分钟后充入计数池计数，计数10个大方格 内的白细胞数。白细胞数/L=10个大方格内的白细 胞数×106。如白细胞较多，可计数一大格内的细 胞×10 ×106。 血性标本用1%的冰醋酸稀释后计数，并用以下公 式校正：每升中白细胞数=每升中白细胞末校正数每升中红细胞数×每升血液中白细胞数/每升血液 中红细胞数。（EDTA-K2抗凝？）（上机？）
正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞， 多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约 为7：3，偶见内皮细胞：软脑膜和蛛网膜 细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞等。 正常脑脊液 单个核细胞：约95%， 多型核细胞：约5%。

红细胞总数
1、对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴 入计数池，计数10个大方格内红细胞数， 其总和即为每μl的细胞数。 2、浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管 吸取混匀的脑脊液20μl，加入含红细胞稀释 液0.38m1的小试管内，混匀后滴入计数池 内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数， 乘以50，即为每μl脑脊液的细胞总数。

成人脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范 围：成人：(0-8)×106/L ；儿童为（0-15）×106/L， 新生儿为（0-30）×106/L。 如白细胞达（10-50）×106/L为轻度增加，（50100）×106/L为中度增加，200×106/L以上显著增 加。如超过300×106/L时外观可变为浑浊。




2、黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑 脊液滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也 可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。 3、脓样：由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓 性细菌引起的脑膜炎，应立即直接涂片进行革兰 染色检查细菌。 4、绿色：可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链 球菌引起的脑膜炎。 5、褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色 素肉瘤。
蛋白定性试验(潘迪氏法)

实验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形
成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。

所需试剂：5%的苯酚溶液：取纯苯酚25 ml，加
蒸馏水至500 ml，用力振摇，置37℃温箱内1～2 天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。

用毛细滴管滴入脑脊液1～2滴，衬以黑背景，立 即观察结果。 结果判断： 阴性：清晰透明，不显雾状； 极弱阳性（±）：微呈白雾状，在黑色背景下才能 看到； 弱阳性（+）：灰白色云雾状； 阳性（2+）：白色浑浊； 强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀； 最强阳性（4+）：白色凝块。
脑Biblioteka Baidu液常规操作规程
河大一附院检验科
常规检测内容

包括：一般性状的检查、潘迪氏试验、白 细胞计数与分类、革兰氏染色、抗酸染色、 墨汁负染色。
一般性状检查

主要观察颜色（无色、白色、红色、黄色、 绿色、黑色等），透明度（透明、微浑、 浑浊、脓样等），凝块（无、有或薄膜形 成、胶冻状 ）。
常见颜色变化及临床意义