葡萄酒分析检验实验2009年(实验)

葡萄酒分析检验实验

葡萄酒学院

二OO八年

《葡萄酒分析检验》实验教学大纲

学时：36学时

实验一：葡萄酒分析常用试剂的配制及标定、葡萄酒pH值的测定

掌握分析常用试剂的配制和标定的方法，学会使用pH计。

实验二：液相色谱仪的使用及葡萄酒酒度、比重的测定（3学时）

了解液相色谱仪原理及基本操作技术，掌握比重瓶测定酒度的方法，掌握酒精计测定酒度技术，能正确使用酒精表及比重计。

实验三：气相色谱仪测定葡萄酒的酒度（3学时）

了解气相色谱仪原理及基本操作技术、学会使用气相色谱仪测定葡萄酒酒度

的方法，能正确操作气相色谱仪。

实验四：葡萄酒干浸出物、可溶性固形物的测定（3学时）

掌握干浸出物测定方法及实际操作技术，学会使用手持糖量计。

实验五：葡萄酒糖的测定（3学时）

了解液相色谱仪测定糖的原理及方法，掌握斐林试剂滴定法测定糖的原理、

技术方法以及注意事项。

实验六：葡萄酒总酸、挥发酸的测定（3学时）

了解电位滴定法测定总酸的原理，掌握总酸的测定方法及各类酒终点的确定

方法及掌握挥发酸的测定原理及其实际操作技术。

实验七：葡萄酒二氧化硫的测定（3学时）

掌握游离二氧化硫、总二氧化硫的测定原理、技术及终点的确定方法。

实验八：葡萄酒中苹果酸－乳酸层析分析（3学时）

熟悉有机酸组分的测定原理。掌握用纸层析法分离鉴定葡萄酒中主要有机酸

的技术与方法。

实验九：葡萄酒中铁的测定（3学时）

掌握邻菲啰啉比色法测定铁的原理与操作技术。

实验十：白葡萄酒中蛋白质的测定（3学时）

掌握考马斯亮兰法测定白葡萄酒中蛋白含量的方法

实验十一：葡萄酒综合分析实验（6学时）

掌握葡萄酒分析检验的一般方法及主要指标的检测方法，要求学生能独立完

成葡萄酒某项指标的检测。

实验一 葡萄酒分析常用试剂的配制标定及pH 计的使用

一、实验目的：

学会斐林试剂A 、B 液，氢氧化纳标液的配制及氢氧化纳的标定，熟练掌握pH 计的使用 二、试验试剂

NaOH 、苯二甲酸氢钾、酒石酸钾纳、硫酸铜、氢氧化纳、酚酞 三、操作步骤

⑴、斐林试剂A 、B 液的配制

斐林试剂A 液：称取34.7g 硫酸铜 定溶至500ml 容量瓶中。 斐林试剂B 液：173.0g 酒石酸钾纳＋ 50gNaOH 定溶至500ml 容量瓶中。 ⑵、0.05mol/L 氢氧化纳溶液的配制

①、称取2g 氢氧化纳 定溶至1000mL ②、无二氧化碳水的制备：

量取一定量蒸馏水，加热至沸，保持沸腾状态5～10min ③、标定：

称取苯二甲酸氢钾（在105～110℃烘2h ，取出在干燥器中冷却）0.3000g 溶于50ml 无二氧化碳蒸馏水中，加2滴酚酞，用配制的氢氧化纳溶液滴定至粉红色，保持30s 不褪色。记录体积（V ） ④、计算：

CNaOH （mol/L ）＝）

－（苯二甲酸氢钾）02042.0g

(V V m

（3）5g/L 葡萄糖溶液的配置：

精确称取5.0000g/L （精确到0.0001g ）在105～110℃烘箱内烘干3小时，并在干燥器中干燥冷却的葡萄糖，用水定容至1000mL 。 （4）、pH 计的使用

①、取出复合电极和测温传感器

②、.接通电源，预热30min ③、进行pH 仪的标定 A 、一点标定

电极 蒸馏水冲洗 吸干 插入pH 4.01缓冲溶液中

开关置于“ T “测定温度 开关置于"PH ” 斜率调节至满刻度 调节“定位”至显示4.01 B 、二点标定

取出电极……吸干……“ T ”…开关置于“pH ” 插入 pH 7.0缓冲溶液中 调节“定位”至显示取出擦干（测酸性溶液）插入pH4.0

取出擦干（测碱性溶液）插入pH9.0 调节 “斜率” 至显示相应值。

④、标定结束后，即可进行酒样pH 值的测定 先显示温度在打到pH 档，显示酒样的pH 值。

四、记录数据（包括原始数据及试验结果）

实验二. 高效液相色谱仪的结构、天美7890F气相色谱仪的使用及

葡萄酒酒精度的气相色谱测定方法

一、实验目的：

熟悉高效液相色谱仪的结构及其流程。

熟悉天美7890F气相色谱仪的流程、各部分结构以及操作步骤。掌握气相色谱测定葡萄酒的酒精度的方法。

二、实验原理：

样品在气相色谱仪中通过色谱柱时，由于在气固两相中吸附系数不同，而使乙醇与其他组分分离，利用氢火焰离子化检测器进行鉴定，用内标法定量。

三、仪器：

岛津高效液相色谱仪；

气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器。

色谱柱：Chromosrb 103

微量进样器：

四、试样制备：

标线制备：同书

将样品准确稀释4倍(或根据酒度适当稀释)，然后吸取10.00mL于10mL容量瓶中，准确加入0.50mL正丙醇内标溶液，混匀。

五、分析步骤：

1.岛津高效液相色谱仪

流动相存储器（流动相）高压泵进样器保护柱

色谱柱检测器记录仪

样品

2.天美7890F气相色谱仪的使用

①. 通气：打开空气、氢气、氮气开关

②. 打开电源开关

③. 设定色谱条件

柱温：（根据色谱柱及样品，温度设定在最高温度之下）200℃

检测器：（温度应高于柱温20～30℃） 240℃

载气流量(氮气)：40mL/min；

氢气流量：40mL/min；

空气流量：500mL/min；

设定量程 8 衰减 1

④. 观察检测器温度。当检测器温度＞100℃后点火。

⑤. 基线稳定后进样（一般在30min后）

⑥. 标准曲线的绘制

⑦. 分别吸取0.3μL乙醇标准溶液，快速从进样口注入色谱仪，同时开启记录仪

记录色谱图。以标样峰面积和内标峰面积比值对酒精浓度做标准曲线(或建立回归方程)。

⑧. 试样的测定：吸取0.3μL的试样按以上操作

六、结果分析计算

用试样组分峰面积与内标峰面积的比值查标准曲线得出的值(或用回归方程计算出的值)，乘以稀释倍数，即为酒样中的酒精含量。