蛋黄中铁含量的测定

一、论文题目

蔬菜、食品中铁的测定

二、论文摘要

随着社会的发展，人们的生活水平有了很大提高，营养成了一个普遍的话题。

人们每天需要摄入多种营养物质，其中蔬菜、食品（如蛋制品）都是非常重要的。

本实验采用邻二氮杂菲分光光度法直接对芹菜、油菜、青椒等几种蔬菜以及蛋黄中铁的含量进行测定。实验中要分析测定邻二氮杂菲、盐酸羟胺等试剂以及pH对实验的影响，从而在实际生活生产中为指导人们合理饮食补铁提供理论依据。本篇论文仅讲解蛋黄中铁含量的测定。

三、关键词

蛋黄；干法；条件试验；铁元素的测定；分光光度法；回收实验；标准曲线

四、实验目的

1、学习样品的预处理方法；

2、综合运用所学知识，学会仪器分析法（如分光光度法）测定物质含量的一般条件

及其选定方法；

3、掌握邻二氮杂菲分光光度法对铁的测定；

4、练习灵活运用各种基本操作的能力和查阅资料的能力。

五、实验原理

食品中的金属元素，由于常与蛋白质、维生素等有机物结合成难溶或难于解离的物质，因此在测定前破坏有机结合体，释放出被测组分。通常采取有机物破坏法，该法是在高温条件下加入氧化剂，使有机物质分解。其中碳、氢、氧等元素生成二氧化碳和水呈气态逸出，而被测的金属元素则会以氧化物或无机盐的形式残留下来。有机物破坏法又分干法和湿法两种，本实验采用的是干法灰化。

常量组分的测定可采用滴定分析法，微量和痕量组分的测定不宜采用滴定法，而应采用仪器分析法，本实验蛋黄中微量铁的测定可采用分光光度法。

根据比耳定律A=εbc，用标准曲线法测定铁的含量。

在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮杂菲生成稳定的橘红色配合物，此配合物的

lgK

稳=21.3，摩尔吸光系数ε

510nm

=1.1×104L·mol-1·cm-1。

在显色前，首先用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+其反应式如下：

2Fe3++2NH

2OH·HCl→2Fe2++N

2

↑+2H

2

0+4H++2Cl-

测定时，控制溶液酸度在pH为5左右较为适宜。酸度高时，反应进行较慢；酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。

六、主要仪器和试剂

主要仪器：722型分光光度计，蒸发皿，容量瓶(50mL 、100mL 、500mL)， 500mL 的试剂瓶（3个），大烧杯，量筒，胶头滴管（2个），玻璃棒（2个），吸量

管（1mL、2mL、5mL、10mL），25mL的移液管，漏斗，酒精灯，洗瓶，石棉

网，三角架，铁架台，电炉，马弗炉，广泛试纸，精密试纸，标签。

主要试剂：蛋黄、400 ug/mL的铁标液、盐酸羟胺固体、邻二氮杂菲固体、醋酸钠固体、2mol/L的盐酸、1:1的盐酸、0.4mol/L的氢氧化钠、8mol/L的氢氧

化钠、硝酸。

·20 ug/mL的铁标液：准确量取25mL 400 ug/mL的铁标液置于500mL容量瓶中，以水稀释定容至刻度，待用；

·200ug/mL的铁标液：准确量取125mL 400 ug/mL的铁标液置于500mL容量瓶中，以水稀释定容至刻度，待用；

·10％的盐酸羟胺：准确称取50g盐酸羟胺固体置于烧杯中，加入500mL蒸馏水溶解后倒入500mL试剂瓶，待用；

·0.2％的邻二氮杂菲：准确称取1g邻二氮杂菲固体置于烧杯中，加入500mL蒸馏水，稍微加热溶解后倒入500mL试剂瓶，待用；

·1mol/L的醋酸钠：准确称取68g醋酸钠固体置于烧杯中，加入500mL蒸馏水溶

解后倒入500mL试剂瓶，待用。

七、实验内容

1.样品处理

将煮熟的鸡蛋去掉蛋清，准确称得蛋黄的质量12.4g，捣碎并放在蒸发皿中，放到电磁炉中加热至没有浓烟为止。然后放到马弗炉高温烘烤若干小时，最后取出冷却至室温。将上述试样加入10mL1:1的HCl至全部溶解，若不溶解可加入数滴硝酸。若还不溶解在酒精灯上加热，冷却然后过滤，调节pH至2～9。将滤液转移到50mL的容量瓶中，

稀释至刻度，待用。

2.条件试验

（1）吸收曲线的测绘

准确移取20ug/mL的铁标溶液5mL于50mL容量瓶中，加入10％盐酸羟胺溶液2.0mL，摇匀，稍冷，加入1mol/L的醋酸钠溶液5mL和0.2％的邻二氮杂菲溶液3mL，以水稀释定容至刻度，在722型分光光度计上，用1cm比色皿，以水为参比液，用不同的波长从450nm开始到570nm为止，每隔10nm或20nm测定一次吸光度（490nm到530nm 间每隔10nm测一次）。平行配两次溶液，测两次吸光度取平均值，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。

测量数据及记录结果

吸收曲线

结论：从吸收曲线上可以确定该测定的适宜波长为510nm。

（2）邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性

重新配制上述溶液，其方法是在最大吸收波长（510nm）处，每隔一定时间测定其吸光度，例如在加入显色剂后立即测定一次吸光度，经1min、2min、3min、5min、 8min、

10 min、15 min、30 min、60min后，再各测一次吸光度。然后以时间为横坐标，吸

光度为纵坐标绘制曲线。

测量数据及记录结果

邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性曲线

结论：从邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性曲线可以看出，在2min到60min

之间邻二氮杂菲-亚铁配合物比较稳定。

（3）显色剂浓度试验

取50mL容量瓶7个，编号，用5mL移液管准确移取20ug/mL的铁标准溶液5mL于容量瓶中，加入2.0mL10％的盐酸羟胺溶液，经2min后，再加入5mL 1mol/L的醋酸钠溶液，然后分别加入0.2％的邻二氮杂菲溶液0.3mL、0.6 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、3.0 mL、和 4.0 mL，以水稀释定容至刻度，摇匀。在分光光度计上，在适宜波长（510nm）下用1cm的比色皿，以水为参比，测定上述各溶液的吸光度。平行配制两次溶液，测定两次吸光度取平均值，然后以邻二氮杂菲的体积为横坐标，吸光度为纵坐标绘制曲线。得到邻