WHO第五版精子形态解读2010.10.4(1)
《WHO人类精液检查和处理实验室手册》(第五版)中文版翻译定稿会在京举行
《WHO人类精液检查和处理实验室手册》(第五版)中文版翻
译定稿会在京举行
卢文红
【期刊名称】《生殖医学杂志》
【年(卷),期】2010(19)6
【摘要】2010年《WHO人类精液检查和处理实验室手册》（第五版）英文版已出版。
世界卫生组织出版中心已授权其在中国的出版合作中心（人民卫生出版社）进行该手册的中文翻译。
人民卫生出版社与世界卫生组织北京人类生殖合作研究中心（国家人口计生委科研所）签署了合作协议由国家人口计生委科研所负责组织专家团队执行该手册的中文版翻译工作。
日前已完成了翻译与两次审校工作。
【总页数】1页(P497-497)
【关键词】《WHO人类精液检查和处理实验室手册》;第五版;“中文版翻译定稿会”;北京
【作者】卢文红
【作者单位】国家人口计生委科研所
【正文语种】中文
【中图分类】R6
【相关文献】
1.精液分析:新版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》及其在精液和精液病理学研究中的应用 [J], Jequier AM;刘强
2.精液分析标准化和精液质量评估——WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)出版 [J], 陈振文;谷龙杰
3.《WHO人类精液检查与处理实验室手册(第五版)》首期培训班在国家人口计生委科研所成功举办 [J], 陈振文;卢文红
4.《WHO人类精液检查与处理实验室手册(第五版)》修订版及标准化操作培训视频光盘首发仪式暨精液分析质量控制培训班纪实 [J], 卢文红;梁小薇
5.《WHO人类精液检查和处理实验室手册》(第五版)中文版翻译定稿会在京举行[J], 卢文红
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
精子形态学分析
《WHO5》2010版 南京军区南京总医院
戈一峰
1 本课件精子染色均采用 Diff-Quik染色
戈一峰，男，1973年3月出生，中共党员，副主任 医师、副教授，江苏省青年联合会第十、十一届委 员会委员，医疗卫生界别秘书。现就职于南京军区 南京总医院生殖医学中心，从事生殖遗传学的实验 室和临床诊疗工作，在辅助生育和习惯性流产的免 疫治疗等方面具有专长，2004年11月-2005年7月 参加联合国驻利比里亚特派团维和军事行动，2010 年1月参加中国人民解放军赴海地地震救援行动， 历年在国内外核心学术期刊上以第一著者发表论文 十多篇，参编学术专著12部。
10
附录
正常形态精子
通过观察来自受孕女性生殖道，特别是 经性交后试验从宫颈粘液或从卵子透明带表 面回收的精子有助于定义具备潜在受精能力 的精子。 使用这些标准，对所有男性而言，其正常形 态精子百分率的范围大致为0-30%，很少超 过25% 。 这个低数据自然产生一个低的临界值 （仅为3-5%）。 经过“透明带选择”的精子，正常形态率仍 然低，约8-25%。
比１.３～１.８ µm ，顶体区４０％～７０％，不超过２个小空泡。 空泡大小〈２０％，顶体后区冰含任何空泡。
中段：细长、规则，长度３ .３～５ .２ µm ，大约与头部长度相等，
主轴与头部主轴成一直线，宽度０ .５～０ .７ µm ，残留胞质〈头的 １／３。 尾部：比中段细，均一，长约４５（均为头部长度的１０倍），没有锐 利折角，可以自身卷曲呈环状。
14
精子中段与主段的分析参数
中段应该细长、规则，大约与头部长度相等。中段主轴应与头部长 轴成一条直线。
残留胞浆只有在过量时才被认为是异常的，即胞浆超过了精子头大
精子形态学的分析
可编辑ppt
8
临床意义
• 2. 精液中凝聚精子增多，提醒生殖道传染 病或免疫功能异常。
➢ 当两个百分率间的差异大于可接受差 异，放弃第一次的两个值并重新评估。（不 要计数第三个样本，取３个值的平均值，或 者取３个值中最相近的两个值的平均值。）
可编辑ppt
35
正常精子形态的评估
表2-1 重复计数200个精子（共计数400个精子）正 常形态百分率的平均值及两次百分率之间的可接受差 异
可编辑ppt
• 缺乏客观性
• 判读差异
• 执行外部质量控制差
WHO-5手册推荐了简单区别精子形态正
常或异常的分类方法---记录异常形态精子
的异常部位。只有采用WHO-5严格标准，所
给出的参考限才有意义。
可编辑ppt
17
正常形态精子
可编辑ppt
18
正常精子形态学
• 精子头外形上应该是光滑、轮廓 规则，大体上呈椭圆形。顶体区可清 晰分辨，占头部的40~70%。顶体区没 有大空泡，并且不超过2个小空泡， 空泡大小不超过头部的20%。顶体后 区不含任何空泡。
可编辑ppt
32
正常精子形态的评估
➢ 最好在另一张重复涂片上，但是也可选 择同一张涂片，重复评估至少200个精子，以 达到可接受的低抽样误差。只评估具有头部 和尾部的完整精子。
➢
仅评估具有头部和尾部的完整精子，
不计数未成熟的生殖细胞（圆细胞）。
Байду номын сангаас
who第五版的精症标准
who第五版的精症标准"WHO第五版的精神疾病诊断与统计手册（Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fifth Edition，简称DSM-5）"并非由世界卫生组织（World Health Organization, 简称WHO）发行，而是由美国精神病学会（American Psychiatric Association, 简称APA）所编制和发布的。
DSM-5是一本用于临床诊断和研究精神疾病的手册，其中包含了各种精神疾病的诊断标准和描述。
DSM-5的诊断标准是根据广泛的研究、临床实践和专家共识开发的，旨在帮助医生和其他专业人员对精神疾病进行诊断和分类。
该手册涵盖了多个精神疾病，包括但不限于抑郁症、焦虑症、精神分裂症、双相障碍等。
要了解具体的精神疾病诊断标准，请参考DSM-5手册或咨询专业医生或心理健康专家。
非常抱歉，但由于我的回答已经涵盖了您的问题，并且DSM-5是一个非常详尽和复杂的手册，因此无法在一个简短的回答中列出所有的疾病和诊断标准。
如果您对某个特定的精神疾病的诊断标准感兴趣，我建议您参考DSM-5手册中相关章节的详细内容。
您也可以咨询专业的医生或心理健康专家，他们可以帮助您解读和理解特定精神疾病的诊断标准。
请记住，精神疾病的诊断需要通过专业医生或心理健康专家进行，他们通过详细的评估和访谈才能做出准确的诊断。
很抱歉，我误解了您的问题。
以下是一些常见的精神疾病诊断标准示例：1. 抑郁症：DSM-5对抑郁症的诊断标准包括情绪低落、兴趣或快感丧失、睡眠问题、疲劳、注意力集中困难等症状的存在，并且这些症状持续时间至少两周以上。
2. 焦虑症：焦虑症的诊断标准涉及出现过度担忧、紧张不安、焦虑或害怕情绪，并伴随着身体症状，如心跳加快、呼吸困难等，这些症状持续时间较长并影响到个体正常生活。
3. 精神分裂症：诊断精神分裂症需要存在持续症状至少6个月，包括幻觉、妄想、语言和思维紊乱、情感魔力等。
WHO第五版人类精液及精子-宫颈粘液相互作用之精液分析的改变
参考值下限 1.5（1.+1.7） 39（33-46） 15（12-16） 40（38-42） 32（31-34） 58（55-63） 4（3.0-4.0）
≧7.2 <1.0 <50 <50 ≧2.4 ≧13 ≧20
常见的精液异常
轻度少精子症
少精子症的分类 精子浓度
≧10，<20(15) ×106/ml
浓度：指一定体积的精液中所含的精子 数目
密度：单位体积所具有的精子质量
精子浓度和精子总数的测定
❖强调一次射精的总精子数—更能反映睾丸 的生精功能。
❖精子总数：每次射出精液中的精子总数（ 精子浓度*精液量）
❖参考值下限： 精子总数（106/次射精）：39
精子浓度和精子总数的测定
年轻人 老年人 差异
30%
改良巴氏染色；Shorr染色； Diff-Quick染色
100倍油镜及 至少10倍目镜
15%
第五版
49页
改良巴氏染色；Shorr染色； Diff-Quick染色
100倍油镜及 至少10倍目镜
4%
精子形态学：染色方法
❖推荐采用Papanicolaou、Shorr或 Diff-Quik染色法
❖使用光学显微镜观察，精子头部顶体区为 浅蓝色，顶体后区为深蓝色，中段略呈红 色，尾部为蓝色或红色。残余的胞浆小滴 染成粉红色或橙红色。
精子形态学：
精子畸形：
①头部畸形：锥形头，梨形头，圆形头（无顶体，小）， 无定形头，空泡样头，顶体区域小的等。
②颈和中段畸形：不对称、中断和头部连接点粗、细 ③尾部畸形：短尾，成角弯折，卷尾 ④过多的胞浆残余体：＞精子头部大小的1/3
精子形态学：
精液的参考值范围
WHO第五版精子形态解读2010.10.4(1)
精子形态学评估标准
在评估精子正常形态时应采用严格标准（Kruger et al.,1986; Menkveld et al., 1990; Coetzee et al., 1998）。 精子包括头、颈、中段、主段和末端。由于通过 光学显微镜很难观察到精子末端，因此可以认为 细胞是由头（和颈）和尾（中段和主段）组成。 只有头和尾都正常的精子才认为是正常的。所有 处于临界状态的精子均认为是异常。
改良巴氏染色步骤
1、80%乙醇 2、50%乙醇 3、纯水 4、Harris苏木精 5、纯水 6、酸性乙醇 7、流水洗 8、50%乙醇 9、80%乙醇 30秒 30秒 30秒 4分钟 30秒 4—8次* 5分钟 30秒 30秒
10、95%乙醇 至少15分钟 11、橙黄G6 1分钟 12、95%乙醇 30秒 13、95%乙醇 30秒 14、95%乙醇 30秒 15、EA-50 1分钟 16、95%乙醇 30秒 17、95%乙醇 30秒 18、100%乙醇 15秒 19、100%乙醇 15秒
《WHO人精液实验室检查及处理手册》 （第5版） 精子形态学部分解读
浙江省人类精子库 姚康寿 主任医师
背景
全球精液检测标准化的需求，WHO制定 了人类精液实验室操作手册，用于临床实 验室和科研。
第一版 1980年 第二版 1987年 第三版 1992年 第四版 1999年 第五版 2010年
1992 2010 1980 WHO1
21
25 15 3 2
胞浆小滴
11
尾部畸形
4 4
胞浆小滴
10 0
颈和中段畸形
尾部畸形
WHO第5版与第4版精子形态学评估标准的主要区别
1、头部外形轮廓判断变的宽松，仅要求大致成椭圆形。 2、对头部空泡的判断更严格，多于2个空泡或者顶头后区空 泡，都判断为异常。 3、颈部的长度有原来头部的1.5倍缩短为1倍，并且宽度比第 4版要更细。 4、尾部只有尖锐的折角才判断为异常，而不再以弯曲角度 90度为界限。 5、胞浆小滴的标准无差异。
精液分析:新版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》及其在精液和精液病理学研究中的应用
精液分析：新版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》及其在精液和精液病理学研究中的应用Jequier AM;刘强【期刊名称】《国际生殖健康/计划生育杂志》【年(卷),期】2010(029)003【摘要】评论最新的、全面的精液分析指南:第5版<世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册>(简称手册).该手册不但描述了精液分析中常规变量的测定方法,还描述了对精子功能检测具有重要价值但不常见的其他多种检测方法.手册记录了体外受精及宫腔内人工授精过程中精液处理的方法和技术,还详述了多种精液评价的实用技术.手册对进行精液分析的实验室均有指导意义.【总页数】3页(P136-138)【作者】Jequier AM;刘强【作者单位】PIVET Medical Centre,Leederville,Western Australia6007,Australia;PIVET Medical Centre,Leederville,Western Australia6007,Australia【正文语种】中文【相关文献】1.关于发行《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(第5版)的评论 [J], Ford WCL;季灵艳2.《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版中低正常精子形态值的临床意义 [J], Menkveld R;甄威3.计算机辅助精液分析系统在精液质量检测中的应用 [J], 张圣强;张曼4.SQA-V精子质量分析仪与计算机辅助精液分析系统在土家族男性精液检测中的应用 [J], 张明忠;秦丽;赵敏5.精液质量分析系统在公鸡精液品质检测中的初步应用 [J], 鲁生霞;张德祥;李大泉;陈广炽;李国新;潘卫民;练国辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
who第五版精液标准
who第五版精液标准WHO第五版精液标准。
精液是男性生殖系统的重要组成部分，其质量直接影响着生育能力和健康状况。
为了评估精液的质量，世界卫生组织（WHO）制定了精液标准，以指导临床诊断和治疗，保障男性生殖健康。
本文将详细介绍WHO第五版精液标准的相关内容。
首先，WHO第五版精液标准对精液的外观进行了规定。
精液应该呈现出乳白色或灰白色，具有黏稠度和液体特性。
此外，精液的凝聚度和液化时间也是评估标准之一。
外观的检测可以直观地了解精液的基本情况，为后续的检测提供重要参考。
其次，精液的化学成分也是评估标准的重要内容之一。
WHO第五版精液标准对精液中的pH值、精子浓度、总精子数、活动精子数等指标进行了详细的规定。
这些指标可以客观地反映出精液的生育能力和质量，为临床诊断提供重要依据。
此外，精液的形态和运动能力也是精液质量的重要评估指标。
WHO第五版精液标准对精子的形态进行了详细的描述和评定标准，以及对精子的运动能力进行了具体的测定和评价。
这些指标可以全面地评估精子的健康状况，为生育能力的评估提供重要依据。
最后，WHO第五版精液标准还对精液中的其他成分进行了规定，如白细胞、抗氧化剂、精浆等。
这些成分的检测可以帮助医生全面地了解精液的健康状况，为临床诊断和治疗提供重要参考。
总的来说，WHO第五版精液标准是全面、科学的评估精液质量的指导标准，对于男性生殖健康的保障具有重要意义。
医生和患者可以根据这些标准对精液的质量进行评估，及时发现问题并采取相应的治疗措施。
同时，科研人员也可以根据这些标准开展相关研究，促进男性生殖健康领域的发展。
希望本文对您了解WHO第五版精液标准有所帮助。
精子形态分析
精子形态分析精子的形态分析指的是精子固定、染色之后，在显微镜下进行观察，分析精子的形态，记录形态正常的精子和形态异常的精子百分率以及异常精子形态的类型，最常用的染色方法是巴氏染色法。
正常的精子大致是蝌蚪的形状，可以分为头部和尾部两部分，头部是椭圆形，精子的头部由细胞核和顶体组成。
根据世界卫生组织第五版，使用严格的精子形态学标准进行评估，正常男性的精子畸形率不能超过96%，在进行精液检查的时候，形态正常的精子要达到4%以上，男性精液中精子的畸形通常包括头部异常、颈中段异常和尾部异常等。
精子形态分析是分析向前运动的精子，优质精子的数量，从而判断男性的生育能力。
精子质量分为4个等级，a级，b 级，c级和d级，a级精子和b级精子所占的比例必须在50%以上，考虑生育功能基本正常。
另外，a级精子和b级精子还必须以向前运动的精子为主，如果精子向侧方运动，也会影响受精能力的，所以可以从这些方面综合判断精液质量。
正常精子外形似蝌蚪状，由头、体（颈、中段）、尾（主、末段）构成。
头部正面观呈卵圆形，侧面观呈扁平梨形，长约 4.0 ～ 5.0 μ m ，头部轮廓规则，顶体覆盖头部表面的 1/3 以上。
体部轮廓直而规则，长约 5 ～7 μ m 。
尾部细长，弯而不卷曲呈鞭毛状，长约 50 ～60 μ m 。
异常情况的精子形态：①头部异常：常见有大头、小头、锥形头、无定形头、空泡样头、双头、无顶体头等；②体部异常：常见有体部肿胀、不规则、弯曲中段、异常薄中段；③尾部异常：常见有无尾、短尾、长尾、双尾、卷尾等；④联合缺陷体：精子头、体、尾均有或其中两者有不同程度异常。
参考范围：正常精液中异常精子数应该小于 20%如异常形态精子大于30% ，称为畸形精子症 (WHO) ，畸形精子大于40% ，即会影响精液质量，大于50% 常可致不育。
WHO精液检查第五版
2
HCV hepatitis C virus 丙肝病毒 HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒 HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透 HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验 HPF high power field 高倍视野 HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白 IV HTF human tubal fuid 人输卵管液 IB immunobead 免疫珠 IBT immunobead test 免疫珠试验 ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射 Ig immunoglobulin 免疫球蛋白 IM immotility 不动 IQC internal quality control 内质量控制 IU international unit 国际单位 IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精 IVF in vitro fertilization 体外受精 KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer 培养液 LIN linearity 线性 LLQ lower limit of quantifcation 定量下限 LPF low power field 低倍视野 MAD mean angular displacement 平均角位移 MAI multiple anomalies index 复合异常指数 MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应 NA numerical aperture 数值孔径 NP non-progressive (motility) 非前向的（活力） PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液 PDCA plan, do, check, act PMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐 PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清 PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷 PR progressive (motility) 前向的（活力） PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素 QA quality assurance 质量保险 QC quality control 质量控制 RCF relative centrifugal force 相对离心力 RI refractive index 屈光指数 RNA ribonucleic acid 核糖核酸 ROS reactive oxygen species 活性氧类物质 rpm revolutions per minute 每分钟转速 SD standard deviation 标准差 SDI sperm deformity index 精子畸形指数 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 SE standard error 标准误
陈振文教授WHO第5版修订解读
存在活动精子吗？
将40 μl 精液置于 24mm×50mm 盖片下 (33μm深)； 观察整个盖片 (~1200个视野)；如果见到活动精子，则计数有多少。
注意：以上过程并不精确； 少的精子 = 大的计数误差； 未见精子 ≠ 没有精子存在； 0 的95%可信区间上限= 3.7。
24
精子数低的样本：需要精确评估时
精子数目的测定值的准确性依赖于所计数的精子 数量。在Poisson分布中，计数（N）的标准差是 它的平方根（√N），95%可信区间大约是N ± 1.96 ×√N（接近N ± 2×√N）。 计数200个精子，那么标准差就是14，95%可信区 间就是172~228。如果计数400个精子，标准差是 20，95%可信区间是360~440。 为了减低抽样误差，必须计数足够数量的精子。 新版手册推荐每份标本的两个重复样本各自计数 至少200个精子。
11
精液采集和体积测定
根据重量间接计算精液体积，假定精 液比重为1 g/ml(实际为1.014 g/ml) 来计算 。（首选方法） 1、秤取容器的重量， 2、秤取装有精液的容器的重量， 3、计算重量之差（g = ml）
在收集精液的容器中 直接测量
12
精液是不均匀的。
第一部分：精子密度高 快速运动精子 形态正常 第二部分：精子密度低 慢速运动精子 形态异常
100μm 深的计数池 含有9 x 100 nl 的格子 中央格含有 25 × 4 nl 大的正方形 每个正方形含有 16 × 250 pl 的小正方形
14
精子密度检测
要精确测定精子密度，必须根据对所观察的体积中的精子数 目的粗略估计，来确定精子的稀释倍数。 所观察的体积取决于显微镜视野的面积和计数池的深度。对 于×40的物镜和孔径为20 mm的×10目镜，所观察的体积 大约为 4 nl（即4×10-9 升）。
世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册第五版.介绍
-致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。
我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。
另外感谢：Ms Cathy Treece, Ms Charlene Tollner和Jim Overstreet教授(University of California, Davis, CA, USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对；Dr Rune Eliasson (Sophiahemmet Hospital, Stockholm, Sweden) 帮助定义非精子细胞；Dr Gary N Clarke (The Royal Women´s Hospital, Carlton, Australia), Dr Roelof Menkveld (Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa)和Pieter Wranz 教授(University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa) 对本手册编译工作提供附注。
衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。
这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人Geoffrey Waites (1928-2005)，他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。
编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。
缩写词Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen 夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOV A analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBA VD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物)CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸（依地酸）EQA external quality assurance 外质量保险EQC external quality control 外质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质FITC fuorescein isothiocyanateFMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholineH2O2hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白IVHTF human tubal fuid 人输卵管液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantifcation 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的（活力）PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, actPMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的（活力）PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保险QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 屈光指数RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/V AP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerolTZI teratozoospermia index 畸形精子症指数V AP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (V AP/VCL) 摆动第1章背景1.1 导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加，世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。
精子形态学的分析 ppt课件
正常精子形态学述评
1. 使用此标准，精子头部形状比大小 更为重要，除非存在严重缺陷。
2. 可借助目镜测微尺来区分精子头部 大小正常或异常。
正常精子形态学述评
3. 使用计算机系统测量77个经巴氏染色的精 子的头部尺寸〔重复测量的差异变异系数 为2-7%〕得到以下数据：长度的中位数为 4.1μm ，95%可信限区间为；宽度的中位 数为，95%可信限区间为；长宽比的中位数 为，95%可信限区间为。
精子形态学的定义
世界卫生组织于半个世纪以前所定的标准 对男性生育能力作了规定，特别强调了精 子形态学是最能够反映男性生育力的一项 重要指标。强调精子形态学需要经过染色 鉴别.
学科意义
为临床提供确切的诊断依据
精液不染色检查中往往将精液中的"圆形细 胞(是白细胞和不成熟生精细胞的统称)"都 报告为"白细胞"，实际上这些圆形细胞大约 70%是生精细胞，我们缺乏鉴别能力，造 成临床误诊，我们必须重视用染色方法， 油镜观察，不能停留在过去的认识和分类 ，应该依精子凋亡形态和生精细胞凋亡形 态进行分类
第五版知识更新
1 世界卫生组织(WHO)〔第四版活力分级〕 推荐将精子活动力分为4级：①精子活动好， 运动迅速，活泼有力，直线向前运动；②精 子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定 ，呈直线或非直线运动，带有盘旋；③精子 运动不良，运动缓慢，原地打转或抖动，向 前运动能力差；④死精子，精子完全不活动
正常精子形态学述评
4. 使用同样的计算机系统测量74个经巴氏染 色的精子的中段尺寸，得到以下数据：长度 的中位数为，95%可信限区间为；宽度的中位 数为，95%可信限区间为。
5. 卷尾〔﹥360°〕பைடு நூலகம்能提示附睾功能障碍。
WHO第5版人类精液检查主要计数指标参考区间验证
WHO第5版人类精液检查主要计数指标参考区间验证石汉振;李承爱;冯妙芙【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2012(016)005【摘要】目的探讨2010年WHO第5版的人类精液正常参考区间能否代替2001年WHO第4版人类精液的参考区间,验证新参考区间是否更适用于本实验室所在区域人群及实验室的检测系统.方法本实验主要根据CLSI(临床实验室标准化协会)标准文件C28-A3(小样本参考个体验证)文件,抽取80例正常参考个体对第5版的精液常规参考区间进行验证研究,并用两组异常组(不育组和精索静脉曲张组)验证第5版参考区间的适用性.结果正常组4个主要指标均小于10%结果在新参考区间外,其参考区间均可转移,对照新精液参考区间,不育症组和精索静脉曲张组精液分析指标异常率为91.3%和38.3%,比第4版的97.5%和96.7%,更适用于临床医生对男性生育能力的评估.结论第5版精液参考区间适用于本实验室区域人群,可作为本实验室新精液检查参考区间.【总页数】3页(P880-882)【作者】石汉振;李承爱;冯妙芙【作者单位】广东省中医院,检验科,广东,广州510120;广东医学院医学,检验系;广东省中医院,检验科,广东,广州510120【正文语种】中文【中图分类】R446.19【相关文献】1.凝血4项指标生物参考区间的实验室验证 [J], 戴庆忠;覃瑜;靳元英2.北京房山区健康人群6项生化指标参考区间验证分析 [J], 窦会东;李国江3.血细胞分析指标生物参考区间适用性验证探讨 [J], 陈桂山;杨志钊;何秀娴;梁锦胜4.血细胞分析指标生物参考区间在山西省临汾地区适用性验证 [J], 王秋菊;杨改平5.新生儿甲状腺功能指标生物参考区间的建立及验证研究 [J], 程琼; 杨妙琳; 张竞文; 蔡安季因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
WHO人类精液检验和处理实验手册第五版
致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。
我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。
另外感谢：Ms Cathy Treece, Ms Charlene Tollner和Jim Overstreet教授(University of California, Davis, CA, USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对；Dr Rune Eliasson (Sophiahemmet Hospital, Stockholm, Sweden) 帮助定义非精子细胞；Dr Gary N Clarke (The Royal Women´s Hospital, Carlton, Australia), Dr Roelof Menkveld (Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa)和Pieter Wranz 教授(University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa) 对本手册编译工作提供附注。
衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。
这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人Geoffrey Waites (1928-2005)，他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。
编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。
缩写词Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen 夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOV A analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBA VD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物)CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸（依地酸）EQA external quality assurance 外质量保险EQC external quality control 外质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质FITC fuorescein isothiocyanateFMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholineH2O2hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白IVHTF human tubal fuid 人输卵管液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantifcation 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的（活力）PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, actPMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的（活力）PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保险QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 屈光指数RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/V AP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerolTZI teratozoospermia index 畸形精子症指数V AP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (V AP/VCL) 摆动第1章背景1.1 导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加，世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。
精子报告第五版
精子报告第五版引言精子是生物繁衍的基本单元，对于人类来说，了解精子的特点和功能对于家庭规划和生育健康至关重要。
本报告将详细介绍精子的形成、运动和受精过程，帮助读者更好地了解精子的奥秘。
一、精子的形成精子的形成主要发生在男性的睾丸中的精原细胞中，经历了一系列的细胞分裂和发育过程。
具体步骤如下：1.精原细胞分裂：精原细胞在睾丸中分裂，形成两个细胞，其中一个保留为精原细胞，另一个成为原始生殖细胞。
2.精原细胞发育：精原细胞继续分裂，形成一系列的细胞，经过几个细胞分裂周期后，细胞内部发生重组，形成精子原细胞。
3.精子原细胞分裂：精子原细胞开始进行减数分裂，形成四个细胞，每个细胞都具有半数染色体数目。
4.精子形成：四个细胞继续发育，逐渐形成精子，脱离睾丸进入附睾。
二、精子的运动精子具有自身的运动能力，通过其尾部的鞭毛摆动来实现。
精子的运动主要包括以下几个步骤：1.活动能力提升：精子在附睾中暂时处于休眠状态，当受到刺激时，活动能力会得到提升。
2.尾部摆动：精子的尾部鞭毛开始摆动，产生游动的力量，帮助精子前进。
3.渗透力增强：精子的头部含有一定的酶类物质，能够帮助精子穿透卵子的保护层。
4.化学信号识别：在受精过程中，精子能够通过化学信号识别卵子释放的化学物质，从而找到卵子并与之结合。
三、精子的受精过程精子的受精过程是指精子与卵子结合并融合成为受精卵的过程，主要包括以下几个步骤：1.寻找卵子：精子经过运动后，通过感应卵子释放的化学物质，逐渐接近卵子。
2.结合卵子：精子与卵子的细胞膜发生结合，精子头部的顶体与卵子的细胞膜发生融合。
3.精子进入卵子：精子通过与卵子结合的细胞膜进入卵子内部。
4.融合成受精卵：精子与卵子中的细胞核融合，形成受精卵。
结论精子的形成、运动和受精过程是生物繁殖中的重要环节。
对于了解精子的特点和功能，有助于保持生育健康和进行科学的家庭规划。
希望通过本报告的介绍，读者能够更好地理解精子的奥秘。
矿产
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。
矿产
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
主要溶液的作用
乙醇
固定细胞；并且使细胞脱水
苏木精 使细胞核染成蓝色 酸性乙醇 去除胞浆中非特定区域的染料 （脱色） 自来水 去除未与细胞核结合的苏木精 橙黄G-6 使胞浆染成粉红色 EA-50 使胞浆染成粉红色
WHO第4版与第5版巴氏染色主要步骤比较
内容
总步骤： 固定液： 23步 95%乙醇+95%乙醚 80%、70%、50% 50%、70%、80%、 90% （10秒） 3分
拉薄技术
一开始，可以用10µ l的精液，45°角度，一秒钟的时间涂 片。 为了减少涂片上精子间的相互重叠，如果需要，可以改变上 述参数（10µ l，45°，1秒）。 精液的粘稠度越低，涂片的拉薄技术发挥得越好，拉薄技术 不适用于高度粘稠的精液。
精子密度低的标本 假如精子密度低于2×106/ml，浓缩标本 粘稠精液标本 精浆高度粘稠时涂片往往是厚而不均， 可以按与液化不良精液标本相同的处理方 法或者使用洗涤的方法处理。
染色方法
推荐的染色方法有 Papanicolaou染色法 Shorr染色法 Diff-Quik染色法。
用上述三种染色方法，在光学显微镜亮视野下观察， 精子头部的顶体区染成淡蓝色pale blue，顶体后区染 成深蓝色dark blue，中段可能染成红色，尾部染成蓝 色或淡红色reddish。通常位于头部背后或中段周围的 胞浆小滴染成粉红色、红色（巴氏染色）或者橘红色 （Shorr染色）。
WHO2 WHO3 1987
WHO4
WHO5
1999
中文翻译本
标准方法
精液分析
可选择试验 研究性试验
WHO 5th 主要内容
精子制备
精子制备
精子冷冻
质量保证
附录
正常形态精子：
通过观察来自女性生殖道，特别是经 性交后宫颈粘液或从卵子透明带表面回的 精子有助于定义具备潜在受精能力的精子。
使用这些标准，对所有男性而言，其正常形态精 子百分率的范围大致为0-30%，很少超过25% 。 这个低数据自然产生一个低的临界值 （仅为3-5%）。 经过“透明带选择”的精子，正常形态率仍然低， 约8-25%。
WHO不同版本精子形态学内容比较
篇幅
第一版 10页
染色方法
观察方法
参考值
80.5±19.4%
改良勃－利二氏染色 显微镜40倍物镜下观 巴氏染色 察 吉姆萨染色 改良巴氏染色 勃－利二氏染色 湿片法 吉姆萨染色 改良巴氏染色 勃－利二氏染色 Shorr染色 改良巴氏染色 Shorr染色 Diff－Quik法 巴氏染色 Shorr染色 Diff－Quik法 相差显微镜40倍物镜 下观察；也可用100倍 油镜，明视野观察 × 100油镜亮视野观察 湿片法
WHO第5版与第4版精子形态判断标准比较
精子头部判断标准 分类 WHO第5版
精子头外形上应该光滑、规则， 大体上呈椭圆形；长度95%可信 限区间为3.7-4.7；宽度95%可信限 区间为2.5-3.2；长宽比95%可信限 区间为1.3-1.8 顶体界限清晰，占头部的40%70%；
WHO第4版
精子头的形状必须是椭圆形的， 长度为4.0～5.0μm;宽为2.5～ 3.5μm；长宽比为1.50～1.75之 间； 顶体界限清晰，占头 部的40%70%
40（38-42） 32（31-34） 58（55-63） 4（3.0-4.0）
≥7.2
过氧化物酶阳性白细胞（106/ml） MAR试验（附着粒上的活动精子，%）
免疫珠试验（附着珠上的活动精子，%） 精浆锌（μmol/射精）
WHO第4版
WHO第5版
19步 95%乙醇 80%、50% 50%、80%、 95% (15分） 4分 1分
浓度梯度： 苏木精时间：
橙黄G6时间： 2分
EA-50时间：
5分
1分
各30秒
酒精浸入时间：各10次
WHO第4版与第5版巴氏染色总结 1、第5版共19步，第4版共23步，减少了4个步骤。 2、由于苏木精后没有流水冲洗，导致染液残留较 多，酸性乙醇的更换频率明显增加。 3、第5版染色所需时间较4版约增加10分钟以上。 4、染色效果相似。
Shorr染色可以得到与巴氏染色相近的正常形 态精子百分率
精子形态的快速染色程序
1、快速染液1 2、快速染液2 3、流水
10秒 5秒 浸10-15次去除多余染剂
一些用快速染色法染的涂片背景很深， 染色的质量可能比巴氏染色方法差。
精子封片前的处理
有两种液体封片剂：溶于乙醇的和不溶于 乙醇。 使用溶于乙醇的封片剂，染色完成后，在 涂片未干的情况下立即使用该封片剂进行 封片。 使用不溶于乙醇的封片剂，将涂片在二甲 苯中浸1分钟（在通风柜中操作），沥干1-2 秒钟后立即封片，封片时应保持涂片的湿 润。
WHO第4版与第5版染色效果比较
WHO第4版
WHO第5版
Shorr染色步骤
1、流水 2、苏木精 3、流水 4、乙醇胺 5、流水 6、50%乙醇 7、Shorr溶液 8、50%乙醇 9、75%乙醇 10、95%乙醇
浸12-15次* 1-2分钟 浸12-15次* 浸10次* 浸12-15次 5分钟 3-5分钟 5分钟 5分钟 5分钟
中段应细，规则，大约与头部长 中段应细，大约为头部长度的1.5 度相等，并且主轴与头部长轴一 倍，并且在轴线上紧贴头部； 致； 长度95%可信限区间为3.3-5.2 宽度95%可信限区间为0.5-0.7 ； 宽度＜1μm
正常 标准
缺陷包括： 中段急剧弯曲；
异常 标准
中段非对称地接在头部、粗的或 不规则的中段、异常细的中段以 及上述缺陷的任何组合。
5th-WHO手册精液参考值下限
参数 精液体积（ml） 精子总数（106 / 次射精） 参考值下限 1.5（1.4-1.7） 39（33-46）
精子浓度（106/ml）
总活动率（PR+NP，%） 前向活动率（PR，%） 存活率（存活精子，%） 精子形态学（正常形态，%） 其他参数 pH
15（12-16）
精液涂片的制备
充分混匀精液样本。 快速取样，避免精子从混悬的精液样 本中沉降。 重复取样前，再次混匀精液样本。 根据精液样本具体不同情况，采用不 同的涂片方式。
（a） 对于未稀释的精液，采用拉薄技术，将一滴精液（S） 沿成角的载玻片背侧边缘展开，向前拖拉制成涂片。 （b） 对于洗涤的精液，采用滴管法，水平持滴管（P）推进， 将一滴精子悬液（SS），沿载玻片的表面展开。
两种标准评估结果比较
1000个精子图片分析
80 70 60 50 40
百分比
形态质控片分析
90
第四版标准
第四版标准 87 81 第五版标准
76 64
第五版标准
80 70 60
百分比
50 40 30 20
40
30 20 10 0
27 11
正常 头部畸形
26 6 10
正常 头部畸形
15 16
颈和中段畸形
21
25 15 3 2
胞浆小滴
11
尾部畸形
4 4
胞浆小滴
10 0
颈和中段畸形
尾部畸形
WHO第5版与第4版精子形态学评估标准的主要区别
1、头部外形轮廓判断变的宽松，仅要求大致成椭圆形。 2、对头部空泡的判断更严格，多于2个空泡或者顶头后区空 泡，都判断为异常。 3、颈部的长度有原来头部的1.5倍缩短为1倍，并且宽度比第 4版要更细。 4、尾部只有尖锐的折角才判断为异常，而不再以弯曲角度 90度为界限。 5、胞浆小滴的标准无差异。
研究目的：比较WHO第四版与第五版精子形态学评估标准的变化。 研究对象： 1000个精子图片、一张精子形态质控片 研究方法： 1、用WHO第四版的评估标准，对上述精子进行评估。 2、精子库9名工作人员学习第五版精子形态学评估标准及精子图谱，并进行 室内质量控制，统一评估标准，工作人员之间无显著差异。 3、用WHO第五版的评估标准，对上述精子再次进行评估。 4、比较上述两种标准分析结果的差异。 研究结果： WHO第五版与第四版相比： 1、形态正常精子百分率高、头部异常率低、尾部异常率低，有显著差异； 2、颈和中段异常率、胞浆小滴率无显著差异。
《WHO人精液实验室检查及处理手册》 （第5版） 精子形态学部分解读
浙江省人类精子库 姚康寿 主任医师
背景
全球精液检测标准化的需求，WHO制定 了人类精液实验室操作手册，用于临床实 验室和科研。
第一版 1980年 第二版 1987年 第三版 1992年 第四版 1999年 第五版 2010年
1992 2010 1980 WHO1
第二版
13页
50％
第三版
13页
30％
第四版
15页
× 100油镜亮视野及至 少× 10的目镜下观察 × 100油镜亮视野及至 少× 10的目镜下观察
*15％ 4％ （下限）
第五版
49页
精子形态学分析包括以下步骤
精液涂片的制备 固定和染色 封片 精子形态评估（应制备双份涂片重复评估，每张 涂片应评估至少200个精子） 。 双份片评估（百分率）结果比较（差异是否在可接 受范围内，如果不可接受，重新读片） 。 取平均值，报告结果
改良巴氏染色步骤
1、80%乙醇 2、50%乙醇 3、纯水 4、Harris苏木精 5、纯水 6、酸性乙醇 7、流水洗 8、50%乙醇 9、80%乙醇 30秒 30秒 30秒 4分钟 30秒 4—8次* 5分钟 30秒 30秒
10、95%乙醇 至少15分钟 11、橙黄G6 1分钟 12、95%乙醇 30秒 13、95%乙醇 30秒 14、95%乙醇 30秒 15、EA-50 1分钟 16、95%乙醇 30秒 17、95%乙醇 30秒 18、100%乙醇 15秒 19、100%乙醇 15秒