关于WHO五版精子形态学分析
精子形态学分析
《WHO5》2010版 南京军区南京总医院
戈一峰
1 本课件精子染色均采用 Diff-Quik染色
戈一峰,男,1973年3月出生,中共党员,副主任 医师、副教授,江苏省青年联合会第十、十一届委 员会委员,医疗卫生界别秘书。现就职于南京军区 南京总医院生殖医学中心,从事生殖遗传学的实验 室和临床诊疗工作,在辅助生育和习惯性流产的免 疫治疗等方面具有专长,2004年11月-2005年7月 参加联合国驻利比里亚特派团维和军事行动,2010 年1月参加中国人民解放军赴海地地震救援行动, 历年在国内外核心学术期刊上以第一著者发表论文 十多篇,参编学术专著12部。
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附录
正常形态精子
通过观察来自受孕女性生殖道,特别是 经性交后试验从宫颈粘液或从卵子透明带表 面回收的精子有助于定义具备潜在受精能力 的精子。 使用这些标准,对所有男性而言,其正常形 态精子百分率的范围大致为0-30%,很少超 过25% 。 这个低数据自然产生一个低的临界值 (仅为3-5%)。 经过“透明带选择”的精子,正常形态率仍 然低,约8-25%。
比1.3~1.8 µm ,顶体区40%~70%,不超过2个小空泡。 空泡大小〈20%,顶体后区冰含任何空泡。
中段:细长、规则,长度3 .3~5 .2 µm ,大约与头部长度相等,
主轴与头部主轴成一直线,宽度0 .5~0 .7 µm ,残留胞质〈头的 1/3。 尾部:比中段细,均一,长约45(均为头部长度的10倍),没有锐 利折角,可以自身卷曲呈环状。
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精子中段与主段的分析参数
中段应该细长、规则,大约与头部长度相等。中段主轴应与头部长 轴成一条直线。
残留胞浆只有在过量时才被认为是异常的,即胞浆超过了精子头大
精子形态学的分析
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8
临床意义
• 2. 精液中凝聚精子增多,提醒生殖道传染 病或免疫功能异常。
➢ 当两个百分率间的差异大于可接受差 异,放弃第一次的两个值并重新评估。(不 要计数第三个样本,取3个值的平均值,或 者取3个值中最相近的两个值的平均值。)
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正常精子形态的评估
表2-1 重复计数200个精子(共计数400个精子)正 常形态百分率的平均值及两次百分率之间的可接受差 异
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• 缺乏客观性
• 判读差异
• 执行外部质量控制差
WHO-5手册推荐了简单区别精子形态正
常或异常的分类方法---记录异常形态精子
的异常部位。只有采用WHO-5严格标准,所
给出的参考限才有意义。
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正常形态精子
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正常精子形态学
• 精子头外形上应该是光滑、轮廓 规则,大体上呈椭圆形。顶体区可清 晰分辨,占头部的40~70%。顶体区没 有大空泡,并且不超过2个小空泡, 空泡大小不超过头部的20%。顶体后 区不含任何空泡。
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正常精子形态的评估
➢ 最好在另一张重复涂片上,但是也可选 择同一张涂片,重复评估至少200个精子,以 达到可接受的低抽样误差。只评估具有头部 和尾部的完整精子。
➢
仅评估具有头部和尾部的完整精子,
不计数未成熟的生殖细胞(圆细胞)。
Байду номын сангаас
WHO第5版精液检查及处理缩写及翻译
WHO laboratory manual for the Examination and processingof human semenAcronyms and abbreviations used in this manual缩写Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOVA analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BAEE N-benzoyl-L-arginine ethyl esterN-苯甲酰-L-精氨酸乙酯BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBAVD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物) CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸(依地酸)EQA external quality assurance 室间质量保证EQC external quality control 室间质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质过多FITC fuorescein isothiocyanate异硫氰酸荧光素FMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholine甘油磷酰胆碱H2O2 hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albumin 人血清白蛋白HTF human tubal fluid 人输卵管培养液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 室内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantification 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的(活力)PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, act策划-实施-检查-改进PMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的(活力)PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保证QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 折射率RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/VAP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerol Tyrode’s葡萄糖甘油TZI teratozoospermia index 畸形精子症指数VAP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (VAP/VCL) 摆动。
世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册第五版.介绍
-致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。
我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。
另外感谢:Ms Cathy Treece, Ms Charlene Tollner和Jim Overstreet教授(University of California, Davis, CA, USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对;Dr Rune Eliasson (Sophiahemmet Hospital, Stockholm, Sweden) 帮助定义非精子细胞;Dr Gary N Clarke (The Royal Women´s Hospital, Carlton, Australia), Dr Roelof Menkveld (Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa)和Pieter Wranz 教授(University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa) 对本手册编译工作提供附注。
衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。
这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人Geoffrey Waites (1928-2005),他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。
编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。
缩写词Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen 夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOV A analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBA VD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物)CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸(依地酸)EQA external quality assurance 外质量保险EQC external quality control 外质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质FITC fuorescein isothiocyanateFMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholineH2O2hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白IVHTF human tubal fuid 人输卵管液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantifcation 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的(活力)PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, actPMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的(活力)PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保险QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 屈光指数RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/V AP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerolTZI teratozoospermia index 畸形精子症指数V AP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (V AP/VCL) 摆动第1章背景1.1 导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加,世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。
WHO第五版人类精液及精子-宫颈粘液相互作用之精液分析的改变
参考值下限 1.5(1.+1.7) 39(33-46) 15(12-16) 40(38-42) 32(31-34) 58(55-63) 4(3.0-4.0)
≧7.2 <1.0 <50 <50 ≧2.4 ≧13 ≧20
常见的精液异常
轻度少精子症
少精子症的分类 精子浓度
≧10,<20(15) ×106/ml
浓度:指一定体积的精液中所含的精子 数目
密度:单位体积所具有的精子质量
精子浓度和精子总数的测定
❖强调一次射精的总精子数—更能反映睾丸 的生精功能。
❖精子总数:每次射出精液中的精子总数( 精子浓度*精液量)
❖参考值下限: 精子总数(106/次射精):39
精子浓度和精子总数的测定
年轻人 老年人 差异
30%
改良巴氏染色;Shorr染色; Diff-Quick染色
100倍油镜及 至少10倍目镜
15%
第五版
49页
改良巴氏染色;Shorr染色; Diff-Quick染色
100倍油镜及 至少10倍目镜
4%
精子形态学:染色方法
❖推荐采用Papanicolaou、Shorr或 Diff-Quik染色法
❖使用光学显微镜观察,精子头部顶体区为 浅蓝色,顶体后区为深蓝色,中段略呈红 色,尾部为蓝色或红色。残余的胞浆小滴 染成粉红色或橙红色。
精子形态学:
精子畸形:
①头部畸形:锥形头,梨形头,圆形头(无顶体,小), 无定形头,空泡样头,顶体区域小的等。
②颈和中段畸形:不对称、中断和头部连接点粗、细 ③尾部畸形:短尾,成角弯折,卷尾 ④过多的胞浆残余体:>精子头部大小的1/3
精子形态学:
精液的参考值范围
WHO第五版精子形态解读2010.10.4(1)
精子形态学评估标准
在评估精子正常形态时应采用严格标准(Kruger et al.,1986; Menkveld et al., 1990; Coetzee et al., 1998)。 精子包括头、颈、中段、主段和末端。由于通过 光学显微镜很难观察到精子末端,因此可以认为 细胞是由头(和颈)和尾(中段和主段)组成。 只有头和尾都正常的精子才认为是正常的。所有 处于临界状态的精子均认为是异常。
改良巴氏染色步骤
1、80%乙醇 2、50%乙醇 3、纯水 4、Harris苏木精 5、纯水 6、酸性乙醇 7、流水洗 8、50%乙醇 9、80%乙醇 30秒 30秒 30秒 4分钟 30秒 4—8次* 5分钟 30秒 30秒
10、95%乙醇 至少15分钟 11、橙黄G6 1分钟 12、95%乙醇 30秒 13、95%乙醇 30秒 14、95%乙醇 30秒 15、EA-50 1分钟 16、95%乙醇 30秒 17、95%乙醇 30秒 18、100%乙醇 15秒 19、100%乙醇 15秒
《WHO人精液实验室检查及处理手册》 (第5版) 精子形态学部分解读
浙江省人类精子库 姚康寿 主任医师
背景
全球精液检测标准化的需求,WHO制定 了人类精液实验室操作手册,用于临床实 验室和科研。
第一版 1980年 第二版 1987年 第三版 1992年 第四版 1999年 第五版 2010年
1992 2010 1980 WHO1
21
25 15 3 2
胞浆小滴
11
尾部畸形
4 4
胞浆小滴
10 0
颈和中段畸形
尾部畸形
WHO第5版与第4版精子形态学评估标准的主要区别
1、头部外形轮廓判断变的宽松,仅要求大致成椭圆形。 2、对头部空泡的判断更严格,多于2个空泡或者顶头后区空 泡,都判断为异常。 3、颈部的长度有原来头部的1.5倍缩短为1倍,并且宽度比第 4版要更细。 4、尾部只有尖锐的折角才判断为异常,而不再以弯曲角度 90度为界限。 5、胞浆小滴的标准无差异。
《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版中低正常精子形态值的临床意义
引言达成专业的共识总是涉及到对分歧的观点进行艰难的平衡。
对于精子形态的评估和报告达成共识更加困难。
还有许多完全不同的关于如何评估精子形态的观点。
这在即将出版的《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(简称手册)[1]的引言(第1章)中。
书中说,对于精子形态评估的主题,“一些实验室仅仅评估正常的精子,而另一些实验室则认为精子的类型、异常的部位和程度更重要。
这些或者有差别的或者半定量的评估是否能提高《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版中低正常精子形态值的临床意义Menkveld R【摘要】第5版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》中提出4%这一非常低的正常精子形态临界值与近期发表的数值和报道中正常精子形态平均值下降趋势一致。
导致正常形态精子比例下降的可能原因很多。
首先是引进了评估精子形态的严格标准。
其他的原因可能包括采用另外的标准定义精子形态异常,诸多负面环境因素导致的精液参数下降。
虽然同原先使用的严格评估精子形态的标准一样,新引入的非常低的正常值本身并不能提供强有力的预测值来评价男性生殖潜能,但是如果将全面、严格的评价精子形态的方法与其他可行的精子形态参数一起应用,仍然可得到一个良好的预测值,已知有一些形态参数对精子异常有很强的预测与预后判断作用。
此外,更好的方法学国际标准化,精子形态评估标准解释的一致性及标准的国际室间质量控制(EQC)计划对保证精子形态预测值的精确性极为重要。
【关键词】男性生殖潜能;正常临界值;精液分析;精子形态学评估;严格标准;世界卫生组织手册Clinical Significance of the Low Normal Sperm Morphology Value as Proposed in the Fifth Edition of theWHO Laboratory Manual for the Examination and Processing of Human Semen Menkveld R.Andrology Laboratory,Department of Obstetrics and Gynaecology,Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch,Tygerberg7505,South AfricaCorresponding author:Menkveld R,E⁃mail:rme@sun.ac.za【Abstract】The very low cut-off value for sperm morphology of4%morphologically normal spermatozoa,as proposed in the new edition of the World Health Organization(WHO)manual on semen analysis,is in agreement with recently published values and reflects the trend of a decline in reported mean values for normalsperm morphology.The reduced value for morphologically normal spermatozoa over the years may be due to several factors.The first is the introduction of strict criteria for the evaluation of sperm morphology.Other reasons may include the introduction of additional criteria for sperm morphology abnormalities and the suggested decrease in semen parameters because of increasing negative environmental influences.Although onits own the newly proposed very low normal value may not provide the strong predictive value for a males’fertility potential,as originally reported for sperm morphology evaluated according to strict criteria,a good predictive value can still be obtained if the holistic,strict approach for sperm morphology evaluation is followed together with additional sperm morphology parameters now available,because certain morphology patterns and sperm abnormalities are now known to be of strong prognostic value.In addition,better international standardization of the technical methodology,consensus on the interpretation of sperm morphology evaluation criteria and standardized international external quality control(EQC)schemes,are of utmost importance to maintain the good predictive value of sperm morphology.【Key words】Male fertility potential;Normal cut⁃off values;Semen analysis;Sperm morphology evaluation;Strict criteria;WHO manual(J Int Reprod Health∕Fam Plan,2010,29:168-177)·观点·作者单位:Andrology Laboratory,Department of Obstetrics andGynaecology,Tygerberg Academic Hospital and University of Stellen⁃bosch,Tygerberg7505,South Africa通讯作者:Menkveld R,E⁃mail:rme@sun.ac.zaAsian J Androl,2010,12(1):47-58精液分析的价值仍然有争议。
who第五版精液标准
who第五版精液标准WHO第五版精液标准。
精液是男性生殖系统的重要组成部分,其质量直接影响着生育能力和健康状况。
为了评估精液的质量,世界卫生组织(WHO)制定了精液标准,以指导临床诊断和治疗,保障男性生殖健康。
本文将详细介绍WHO第五版精液标准的相关内容。
首先,WHO第五版精液标准对精液的外观进行了规定。
精液应该呈现出乳白色或灰白色,具有黏稠度和液体特性。
此外,精液的凝聚度和液化时间也是评估标准之一。
外观的检测可以直观地了解精液的基本情况,为后续的检测提供重要参考。
其次,精液的化学成分也是评估标准的重要内容之一。
WHO第五版精液标准对精液中的pH值、精子浓度、总精子数、活动精子数等指标进行了详细的规定。
这些指标可以客观地反映出精液的生育能力和质量,为临床诊断提供重要依据。
此外,精液的形态和运动能力也是精液质量的重要评估指标。
WHO第五版精液标准对精子的形态进行了详细的描述和评定标准,以及对精子的运动能力进行了具体的测定和评价。
这些指标可以全面地评估精子的健康状况,为生育能力的评估提供重要依据。
最后,WHO第五版精液标准还对精液中的其他成分进行了规定,如白细胞、抗氧化剂、精浆等。
这些成分的检测可以帮助医生全面地了解精液的健康状况,为临床诊断和治疗提供重要参考。
总的来说,WHO第五版精液标准是全面、科学的评估精液质量的指导标准,对于男性生殖健康的保障具有重要意义。
医生和患者可以根据这些标准对精液的质量进行评估,及时发现问题并采取相应的治疗措施。
同时,科研人员也可以根据这些标准开展相关研究,促进男性生殖健康领域的发展。
希望本文对您了解WHO第五版精液标准有所帮助。
精液常规分析SOP
若用37℃为温度标准,精液标本不仅要在此 温度进行孵育,还要预热计数工具。载物台最 好也加热至37℃。
计数足够精子的重要性
手册第5版特别强调计数足够数量的精子(总 数≥400条)和重复计数(同一标本二次取样 分别检测),以期达到结果的一致性。 WHO第5版要求抽样误差<5%。检测精子总数在 400条时抽样误差为5%。检测精子总数在200条 时抽样误差为7.1%。检测精子总数在100条时 抽样误差为10%。抽样误差>10%不可取。
如何看待一份精液常规分析报告
通过一份精液标本的评估不可能确定一位男性 精液质量的特征。 检测该男子的2-3份精液标本有助于获取有效 的信息。 若多次采集标本,每次禁欲天数均应尽可能一 致。
取样前精液必须充分混匀
取样用于检测之前,应充分混匀标本。当重复 取样的结果一致时才能认可此测定值。 重复取样前,要再次充分混匀标本。 常规分析时,不要在涡旋振荡器上高速混匀精 液,这样会损伤精子,影响精子活力的测定。 稀释质控样本检测精子浓度时要将稀释后的标 本置于涡旋振荡器上以最大速度混匀20-30秒。
正常形态精子的概念
把“具备潜在受精能力精子”(亚群)的外观 作为形态正常的标准。 这些精子来自性交后的宫颈黏液或卵子透明带 表面。 借助目镜测微尺,甚至计算机系统来精确测量 精子各部分尺寸。 统计学处理大量数据后人为设定临界标准,规 定“临界形态精子都是异常”。
涂片的制作与染色
将标本600g离心10分钟, 除去大部分上清液,轻轻拍打试管,使精子团 重新混悬于剩余的上清液中。 必要时可加生理盐水重复洗涤一次。
洗涤后的精子浓度在20-50X106/ml为好。
WHO第五版新标准解读与第四版相关参数
附注:1、精液的两个主要量化指标:1.精子总数,反应睾丸的生精状况和睾丸后管道系统的通畅程度。
2.体积反应腺体的分泌能力。
3.仅凭一次精液检查不能确定精子质量。
4.检查两到三次有助于获得可靠的基本数据2 、对于生育男性精液pH值的参考值尚未确定,现保持原有下限值7.2。
注释:如低体积低精子数目的精液样本的pH低于7.0,可能存在生殖道梗阻或先天性双侧输精管缺如。
同时也可能是精囊发育不良的一个表现。
3、非精子细胞的存在往往暗示着睾丸的损伤(未成熟生精细胞)、输精管的病理性损害(纤毛丛)或附属性腺的炎症(白细胞)。
4、正常精子的观点由于精子形态差异较大,评估较为困难,但是,我们可以从女性生殖道,尤其是从性交后子宫颈管内粘液中获得的精子,以及从透明带表面收集到的精子的形态来定义有受精潜能(形态学正常)的精子。
通过严格应用这种形态学标准,我们可以建立正常精子形态率和各种生育指标(获得妊娠间期(time-to-pregnancy TTP)以及体内、体外妊娠率)之间的关系,这对生育的预后非常有用。
子宫颈内粘液里面广泛存在的精子被认为是有受精潜能的精子,而这正是这里所描述的形态分类系统的基础。
通过这些标准,生育和不育男性的正常形态率为0~30%,很少超过25%(Menkveld et al., 2001)。
因此,正常值下限很低。
通过人透明带也可以选出一组形态相似的精子,但这种“透明带选择”精子的形态变异度比较大(Liu et al., 1990;Garrett et al., 1997)。
在有生育男性精液中,这种“透明带选择”活动精子比例也很低(8~25%)(Liu et al.,2003)。
药物参考:育之缘口嚼片(每日3次,每次2片)、维生素E(每日3次,每次1粒,按说明书指导服用)。
WHO人类精液检验与处理实验手册第五版
致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。
我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。
另外感谢:Ms Cathy Treece, Ms Charlene Tollner和Jim Overstreet教授(University of California, Davis, CA, USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对;Dr Rune Eliasson (Sophiahemmet Hospital, Stockholm, Sweden) 帮助定义非精子细胞;Dr Gary N Clarke (The Royal Women´s Hospital, Carlton, Australia), Dr Roelof Menkveld (Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa)和Pieter Wranz 教授(University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa) 对本手册编译工作提供附注。
衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。
这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人Geoffrey Waites (1928-2005),他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。
编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。
缩写词Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen 夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOV A analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBA VD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物)CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸(依地酸)EQA external quality assurance 外质量保险EQC external quality control 外质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质FITC fuorescein isothiocyanateFMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholineH2O2hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白IVHTF human tubal fuid 人输卵管液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantifcation 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的(活力)PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, actPMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的(活力)PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保险QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 屈光指数RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/V AP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerolTZI teratozoospermia index 畸形精子症指数V AP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (V AP/VCL) 摆动第1章背景1.1 导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加,世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。
陈振文教授WHO第5版修订解读
存在活动精子吗?
将40 μl 精液置于 24mm×50mm 盖片下 (33μm深); 观察整个盖片 (~1200个视野);如果见到活动精子,则计数有多少。
注意:以上过程并不精确; 少的精子 = 大的计数误差; 未见精子 ≠ 没有精子存在; 0 的95%可信区间上限= 3.7。
24
精子数低的样本:需要精确评估时
精子数目的测定值的准确性依赖于所计数的精子 数量。在Poisson分布中,计数(N)的标准差是 它的平方根(√N),95%可信区间大约是N ± 1.96 ×√N(接近N ± 2×√N)。 计数200个精子,那么标准差就是14,95%可信区 间就是172~228。如果计数400个精子,标准差是 20,95%可信区间是360~440。 为了减低抽样误差,必须计数足够数量的精子。 新版手册推荐每份标本的两个重复样本各自计数 至少200个精子。
11
精液采集和体积测定
根据重量间接计算精液体积,假定精 液比重为1 g/ml(实际为1.014 g/ml) 来计算 。(首选方法) 1、秤取容器的重量, 2、秤取装有精液的容器的重量, 3、计算重量之差(g = ml)
在收集精液的容器中 直接测量
12
精液是不均匀的。
第一部分:精子密度高 快速运动精子 形态正常 第二部分:精子密度低 慢速运动精子 形态异常
100μm 深的计数池 含有9 x 100 nl 的格子 中央格含有 25 × 4 nl 大的正方形 每个正方形含有 16 × 250 pl 的小正方形
14
精子密度检测
要精确测定精子密度,必须根据对所观察的体积中的精子数 目的粗略估计,来确定精子的稀释倍数。 所观察的体积取决于显微镜视野的面积和计数池的深度。对 于×40的物镜和孔径为20 mm的×10目镜,所观察的体积 大约为 4 nl(即4×10-9 升)。
世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册第五版.介绍
-致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。
我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。
另外感谢:Ms Cathy Treece, Ms Charlene Tollner和Jim Overstreet教授(University of California, Davis, CA, USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对;Dr Rune Eliasson (Sophiahemmet Hospital, Stockholm, Sweden) 帮助定义非精子细胞;Dr Gary N Clarke (The Royal Women´s Hospital, Carlton, Australia), Dr Roelof Menkveld (Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa)和Pieter Wranz 教授(University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa) 对本手册编译工作提供附注。
衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。
这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人Geoffrey Waites (1928-2005),他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。
编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。
缩写词Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen 夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOV A analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBA VD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物)CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸(依地酸)EQA external quality assurance 外质量保险EQC external quality control 外质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质FITC fuorescein isothiocyanateFMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholineH2O2hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白IVHTF human tubal fuid 人输卵管液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantifcation 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的(活力)PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, actPMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的(活力)PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保险QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 屈光指数RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/V AP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerolTZI teratozoospermia index 畸形精子症指数V AP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (V AP/VCL) 摆动第1章背景1.1 导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加,世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。
WHO人类精液检验和处理实验手册第五版
致谢本手册的出版由UNDP/UNFPA/WHO/世界银行人类生殖研究、发展和研究培训特别规划署及WHO人类生殖健康与研究部共同完成。
我们对所有参与本手册筹备、编辑和校订的人员表示诚挚的感谢。
另外感谢:Ms Cathy Treece, Ms Charlene Tollner和Jim Overstreet教授(University of California, Davis, CA, USA)提供形态学显微照片以及对媒体文件的校对;Dr Rune Eliasson (Sophiahemmet Hospital, Stockholm, Sweden) 帮助定义非精子细胞;Dr Gary N Clarke (The Royal Women´s Hospital, Carlton, Australia), Dr Roelof Menkveld (Tygerberg Academic Hospital and University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa)和Pieter Wranz 教授(University of Stellenbosch, Tygerberg, South Africa) 对本手册编译工作提供附注。
衷心感谢国际男科学会提供的经济支持。
这个版本的手册是为纪念已故前WHO男性生育调控方法学工作组负责人Geoffrey Waites (1928-2005),他也是第二、第三和第四版实验室手册的共同编辑。
编辑委员会全身心投入工作的动力来自于对Geoff诚实、公平和关心疾苦人格的欣赏。
缩写词Ab antibody 抗体AI artificial insemination 人工授精AID artificial insemination with donor semen 供精人工授精AIH artificial insemination with husband’s semen 夫精人工授精ALH amplitude of lateral head displacement 头侧摆振幅ANOV A analysis of variance 变量分析APAAP alkaline phosphatase: anti-alkaline phosphatase complex 碱性磷酸酶: 抗碱性磷酸酶复合物AR acrosome-reacted 顶体反应ART assisted reproductive technology 辅助生殖技术ASA anti-sperm antibody 抗精子抗体BCF beat-cross frequency (Hz) 交打频率BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白BWW Biggers, Whitten and Whittingham试液CASA computer-aided sperm analysis 计算机辅助精子分析CASMA computer aided sperm morphometric assessment 计算机辅助精子形态评估CBA VD congenital bilateral absence of the vas deferens 先天性双侧输精管缺失CD compact disk 压缩盘CD cytoplasmic droplet 胞质小滴CD45 cluster of determination 45 (pan-leukocyte marker) 决定簇45 (全白细胞标记物)CD46 cluster of determination 46 (acrosomal antigen) 决定簇46 (顶体抗原)CI confidence interval 可信区间CL confidence limits 可信界限CO2 carbon dioxide 二氧化碳DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸DPBS Dulbecco’s phosphate-buffered saline Dulbecco’s磷酸缓冲盐溶液DVD digital versatile disc 数字多用盘EDTA ethylenediamine tetra-acetic acid 乙二胺四乙酸(依地酸)EQA external quality assurance 外质量保险EQC external quality control 外质量控制ERC excess residual cytoplasm 残余胞质FITC fuorescein isothiocyanateFMLP formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸GIFT gamete intrafallopian transfer输卵管内配子移植术GPC glycerophosphocholineH2O2hydrogen peroxide 过氧化氢HBSS Hanks’ balanced salt solution Hanks’平衡盐溶液HBV hepatitis B virus 乙肝病毒hCG human chorionic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素HCV hepatitis C virus 丙肝病毒HIV human immunodefciency virus 人免疫缺陷病毒HOP hamster oocyte penetration 仓鼠卵穿透HOS hypo-osmotic swelling 低渗肿胀试验HPF high power field 高倍视野HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶HSA human serum albuminxiv 人血清白蛋白IVHTF human tubal fuid 人输卵管液IB immunobead 免疫珠IBT immunobead test免疫珠试验ICSI intracytoplasmic sperm injection 胞浆内精子注射Ig immunoglobulin 免疫球蛋白IM immotility 不动IQC internal quality control 内质量控制IU international unit 国际单位IUI intrauterine insemination 宫腔内人工授精IVF in vitro fertilization 体外受精KRM Krebs-Ringer Medium Krebs-Ringer培养液LIN linearity 线性LLQ lower limit of quantifcation 定量下限LPF low power field 低倍视野MAD mean angular displacement 平均角位移MAI multiple anomalies index 复合异常指数MAR mixed antiglobulin reaction 混合抗球蛋白反应NA numerical aperture数值孔径NP non-progressive (motility) 非前向的(活力)PBS phosphate-buffered saline 磷酸缓冲盐溶液PDCA plan, do, check, actPMA phorbol 12-myristate 13-acetate (12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐PMSG pregnant mare serum gonadotrophin 孕马血清PNPG p-nitrophenol glucopyranoside 对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷PR progressive (motility) 前向的(活力)PSA Pisum sativum agglutinin 碗豆凝集素QA quality assurance质量保险QC quality control 质量控制RCF relative centrifugal force 相对离心力RI refractive index 屈光指数RNA ribonucleic acid 核糖核酸ROS reactive oxygen species 活性氧类物质rpm revolutions per minute 每分钟转速SD standard deviation 标准差SDI sperm deformity index 精子畸形指数SDS sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠SE standard error 标准误SOP standard operating procedure 标准操作流程STR straightness (VSL/V AP) 直向TBS Tris-buffered saline Tris缓冲盐溶液TGG Tyrode’s glucose glycerolTZI teratozoospermia index 畸形精子症指数V AP average path velocity 平均轨道速率VCL curvilinear velocity 曲线速率VSL straight-line (rectilinear) velocity 直线速率WHO World Health Organization 世界卫生组织WOB wobble (V AP/VCL) 摆动第1章背景1.1 导言鉴于人类精液检查标准化需求的日益增加,世界卫生组织于1980年首次出版了《世界卫生组织人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》。
WHO人类精液检验与处理实验室手册第五版 2.16
2.16 形态学图解图解1-14所示的显微镜下照片均使用上文所述之严格形态学标准进行评估。
因为精子的头、尾特征有很多类型,难以在正常和异常精子形态之间人为的划分一个界限,所以精子形态学分析具有主观性,并特别难以标准化。
下面的图解均经Thinus Kruger博士分析而来。
为保证精子畸形记述的一致性,形态学评估名称均于图解后提供了额外的注释。
下表中每一横列均为某一精子形态学的详细描述。
下表中描述了精子头部是否正常;并对头部异常的一些细节做出描述;描述了精子颈部、尾部主段外形是否正常;是否精子整体上能被认为是正常。
另外一些相关备注,列于下面“注解”之中,注解详见表2.6。
表2.6 用于形态学描述的缩略语图解1 10微米图解1中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解2 10微米图解2中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解3 10微米图解3中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解4 10微米图解4中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解5 10微米图解5中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解6 10微米图解6中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解7 10微米图解7中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解8 10微米图解8中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解910微米图解9中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解1010微米图解10中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解1110微米图解11中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解1210微米图解12中精子形态学评估精子头部外形其他头部评估颈部评估尾部主段评估整体精子分类评估图解1310微米图解13中细胞评估图解14 10微米图解14中细胞评估细胞细胞类型。
精子报告第五版
精子报告第五版引言精子是生物繁衍的基本单元,对于人类来说,了解精子的特点和功能对于家庭规划和生育健康至关重要。
本报告将详细介绍精子的形成、运动和受精过程,帮助读者更好地了解精子的奥秘。
一、精子的形成精子的形成主要发生在男性的睾丸中的精原细胞中,经历了一系列的细胞分裂和发育过程。
具体步骤如下:1.精原细胞分裂:精原细胞在睾丸中分裂,形成两个细胞,其中一个保留为精原细胞,另一个成为原始生殖细胞。
2.精原细胞发育:精原细胞继续分裂,形成一系列的细胞,经过几个细胞分裂周期后,细胞内部发生重组,形成精子原细胞。
3.精子原细胞分裂:精子原细胞开始进行减数分裂,形成四个细胞,每个细胞都具有半数染色体数目。
4.精子形成:四个细胞继续发育,逐渐形成精子,脱离睾丸进入附睾。
二、精子的运动精子具有自身的运动能力,通过其尾部的鞭毛摆动来实现。
精子的运动主要包括以下几个步骤:1.活动能力提升:精子在附睾中暂时处于休眠状态,当受到刺激时,活动能力会得到提升。
2.尾部摆动:精子的尾部鞭毛开始摆动,产生游动的力量,帮助精子前进。
3.渗透力增强:精子的头部含有一定的酶类物质,能够帮助精子穿透卵子的保护层。
4.化学信号识别:在受精过程中,精子能够通过化学信号识别卵子释放的化学物质,从而找到卵子并与之结合。
三、精子的受精过程精子的受精过程是指精子与卵子结合并融合成为受精卵的过程,主要包括以下几个步骤:1.寻找卵子:精子经过运动后,通过感应卵子释放的化学物质,逐渐接近卵子。
2.结合卵子:精子与卵子的细胞膜发生结合,精子头部的顶体与卵子的细胞膜发生融合。
3.精子进入卵子:精子通过与卵子结合的细胞膜进入卵子内部。
4.融合成受精卵:精子与卵子中的细胞核融合,形成受精卵。
结论精子的形成、运动和受精过程是生物繁殖中的重要环节。
对于了解精子的特点和功能,有助于保持生育健康和进行科学的家庭规划。
希望通过本报告的介绍,读者能够更好地理解精子的奥秘。
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顶体( ) 顶体(3) 顶体<40% 顶体>70% 无顶体 空泡( ) 空泡(3) vac >2vac PA vac 胞浆滴( ) 胞浆滴(2) 细胞浆 >1/3 <1/3 CD ERC 细胞浆的额外残留,或者胞浆小滴,根据大小判断 异常的胞浆小滴(大于头部的1/3)(ERC) 正常的胞浆小滴(小于头部的1/3)(CD) 胞浆小滴 过量残留的细胞浆(见插图2.13n)
2
拉薄技术
一开始,可以用10µl的精液,45°角度,一秒钟 ° 一秒钟的时间涂 一秒钟 片。 为了减少涂片上精子间的相互重叠,如果需要,可以改变上 述参数(10µl,45°,1秒)。 精液的粘稠度越低,涂片的拉薄技术发挥得越好,拉薄技术 不适用于高度粘稠的精液。
3
WHO第5版与第4版精子形态学评估标准的主要区别
18
对于头部异常的描述 1、部外形
梨形 锥形 扁平底 轮廓不规则
大头针样
无定形头
小头
圆头
19
2、空泡
多于2个空泡
3、顶体 、
表面有空泡 顶体>70% 顶体<40%
空泡>20%
顶体后区空泡
20
对于颈和中段异常的描述
1、中段异常 、
增粗 轮廓不规则
2、胞浆小滴 、
胞滴大于1/3(ERC)
插入
弯曲
1、头部外形轮廓 头部外形轮廓判断变的宽松,仅要求大致成椭圆形。 头部外形轮廓 2、对头部空泡 空泡的判断更严格,多于2个空泡或者顶头后区空 空泡 泡,都判断为异常。 3、颈部的长度 颈部的长度有原来头部的1.5倍缩短为1倍,并且宽度比第 颈部的长度 4版要更细。 4、尾部 尾部只有尖锐的折角 尖锐的折角才判断为异常,而不再以弯曲角度 尾部 尖锐的折角 90度为界限。 5、胞浆小滴 胞浆小滴的标准无差异。 胞浆小滴
4
5th-WHO手册精液参考值下限 手册精液参考值下限 手册精
参数 精液体积( ) 精液体积(ml) 次射精) 精子总数( 精子总数(106 / 次射精) 精子浓度( 精子浓度(106/ml) ) 总活动率( 总活动率(PR+NP,%) , ) 前向活动率(PR,%) 前向活动率( , ) 存活率(存活精子, ) 存活率(存活精子,%) 精子形态学(正常形态, ) 精子形态学(正常形态,%) 其他参数 pH 过氧化物酶阳性白细胞( ) 过氧化物酶阳性白细胞(106/ml) MAR试验(附着粒上的活动精子,%) 试验(附着粒上的活动精子, ) 试验 免疫珠试验(附着珠上的活动精子, ) 免疫珠试验(附着珠上的活动精子,%) 精浆锌( 射精) 精浆锌(µmol/射精) 射精 精浆果糖( 射精) 精浆果糖(µmol/射精) 射精 精浆中性葡糖苷酶( 射精) 精浆中性葡糖苷酶(mU/射精) 射精 ≥7.2 <1.0 <50 <50 ≥2.4 ≥13 ≥20 5 参考值下限 1.5(1.4-1.7) ( ) 39(33-46) ( ) 15(12-16) ( ) 40(38-42) ( ) 32(31-34) ( ) 58(55-63) ( ) 4(3.0-4.0) ( )
16
细胞( 细胞(9) 杆菌 退化的白细胞 细菌 明显易判的异常
退化的精子细胞 明显易判的异常 巨噬细胞 单核细胞 上皮细胞 精子细胞 精母细胞 多核型白细胞 白细胞中的巨噬细胞 无颗粒白细胞 来自男性泌尿生殖管道 未成熟的生殖细胞 未成熟的生殖细胞 多核型白细胞
17
未分类的 未评估( ) 未评估(2) 由于精子重叠或者聚焦不清楚 重叠 聚焦 其他 异常 缺陷 正常 if PP OK 明显易判的异常 明显易判的异常 类似在宫颈粘液中找到的精子 不是在所有的照片中都能看到精子的尾部(如果不包 括尾部,其他部分是正常的,那么该精子可以被认为 是正常精子) 头部被尾部遮挡 难以聚焦(未评估)
15
顶体面积小于精子头部的40% 顶体面积大于精子头部的70% 顶体缺失
空泡 大于2个空泡 顶体后区有空泡
中段和主段( ) 中段和主段(8) 弯曲 卷曲 双尾 插入 轮廓不规则 环状 粗 太长 不自然的折角(见插图2.13g和e) 明显易判的异常 明显易判的异常 尾部插入的位置位于头部长轴的一侧 外形轮廓不规则 尾部弯曲成环状 明显易判的异常 明显易判的异常
精子形态学评估
正常形态精子百分率与受精率 受精率相关 正常形态 受精率 异常形态精子的类型、部位和程度 类型、 异常形态 类型 部位和程度更重要
WHO第五版手册中精液参考值的来源 第五版手册中精液参考值的来源
12个月内 个月内使女方妊娠的男性精液参数 个月内 400~1900份精液标本(来自3大洲,8个国家 大洲, 个国家 个国家) 大洲 单侧参考范围,第5 百分位数 单侧 第 百分位数作为下限 任何精液参数的高值 高值都不能判断生育力 高值
难以聚焦 重叠
未分类细胞
25
(a) 对于未稀释的精液,采用拉薄技术,将一滴精液(S) 沿成角的载玻片背侧边缘展开,向前拖拉制成涂片。 (b) 对于洗涤的精液,采用滴管法,水平持滴管(P)推进, 将一滴精子悬液(SS),沿载玻片的表面展开。
1
(a) 对于未稀释的精液,采用拉薄技术,将一滴精液(S) 沿成角的载玻片背侧边缘展开,向前拖拉制成涂片。 (b) 对于洗涤的精液,采用滴管法,水平持滴管(P)推进, 将一滴精子悬液(SS),沿载玻片的表面展开。
胞滴小于1/3(CD)
21
对于主段异常的描述
双尾 环状 卷曲
短尾
粗
弯曲
22
非精子细胞 (一)
退化的巨噬细胞 多核型白细胞 退化的白细胞 巨噬细胞
上皮细胞
杆菌
单核细胞
吞噬中的巨噬细胞
23
非精子细胞 (二)
生精细胞 精母细胞 分裂中的 精母细胞
分裂中的 精子细胞
精子细胞
退化的精子 细胞
24
未评估精子
6
7
8
9
10
11
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形态图片的评估 注释的进一步说明 头部形状( ) 头部形状(8) 梨形 圆形 侧视精子 小头 扁平底 锥形 不定形 大头针状 头部形状(见插图2.13b) 头部形状(见插图2.13c) 精子直立时的侧面形状 头部尺寸 精子头不是椭圆面作底部 头部形状(见插图2.13a) 头部形状(见插图2.13d) 不认为是精子,无染色体