精子形态学分析.

相差显微镜40倍物镜下观察； 也可用100倍油镜，明视野观 察
50％
第三版
ຫໍສະໝຸດ Baidu
13页
× 100油镜亮视野观察 湿片法
30％
第四版
15页
× 100油镜亮视野及至少× 10的目镜下观察
*15％
第五版
49页
× 100油镜亮视野及至少× 10的目镜下观察
12
4％ （下限）
正常精子形态 精子形态学检查受关注
头部：椭圆形，长３.７～４.７µm、宽２.５～３. ２ µm ，长宽
精子形态学分析及 生精细胞检查
《WHO5》2010版 南京军区南京总医院
戈一峰
1 本课件精子染色均采用 Diff-Quik染色
戈一峰，男，1973年3月出生，中共党员，副主任 医师、副教授，江苏省青年联合会第十、十一届委 员会委员，医疗卫生界别秘书。现就职于南京军区 南京总医院生殖医学中心，从事生殖遗传学的实验 室和临床诊疗工作，在辅助生育和习惯性流产的免 疫治疗等方面具有专长，2004年11月-2005年7月 参加联合国驻利比里亚特派团维和军事行动，2010 年1月参加中国人民解放军赴海地地震救援行动， 历年在国内外核心学术期刊上以第一著者发表论文 十多篇，参编学术专著12部。
第一版 1980年
第二版 1987年
第三版 1992年
第四版 1999年
第五版 2010年
7
1992 2010 1980 WHO1
WHO2 WHO3 1987
WHO4
WHO5
1999
8
中文翻译本
9
标准方法
精液分析
可选择试验
研究性试验 精子制备

WHO 5th 主要内容
精子制备
精子冷冻 质量保证
16
精子头部、颈部和中段缺陷定义
头部缺陷：大头、小头、锥形头、梨形头、圆头、不定形头、有空 泡的头（超过2个空泡，或者未染色的空泡区域占头部的20%以上）、 顶体后区有空泡、顶体区过小或过大（小于头部的40%，或大于头 部的70%）、双头，或上述缺陷的任何组合。 颈部和中段的缺陷：中段非对称地接在头部、粗或不规则、锐角弯 曲、异常细的中段或上述缺陷的任何组合。
Parasympathetic NS (cranio-sacral outflow)
Autonomic NS
Sympathetic NS (paravertebral ganglia)
精液的形成
Inferior mesenteric g.

Vas deferens Pelvic n.


Ampulla corpus cavernosum vasculature
13
精子头部的分析参数
精子包括头、颈、中段、主段和末段。严格的精子形态学判断标 准为：只有头和尾都正常的精子才认为是正常的。所有处于临界 形态的精子应该认为是异常。 精子头外形上应该是光滑、轮廓规则、大体上呈椭圆形。顶体可 清晰分辨，占头部的40% ～ 70%。顶体区没有大空泡，并且不超 过2个小空泡，空泡大小不超过头部的20%。顶体后区不含任何空 泡。
Seminal vesicles


urethral skeletal muscle Prostate


Bulbourethral gland
射精不存在于体内

Epididymis
精子生成过程
精子生成与受精过程
背景

全球精液检测标准化的需求，WHO制定了人类精液实验室操作手册，用于临 床实验室和科研。

11
WHO不同版本精子形态学内容比较
篇幅
第一版 10页
染色方法
改良勃－利二氏 染色 巴氏染色
观察方法
显微镜40倍物镜下观察
参考值
80.5±19.4%
第二版
13页
吉姆萨染色 改良巴氏染色 勃－利二氏染色
湿片法 吉姆萨染色 改良巴氏染色 勃－利二氏染色 Shorr染色 改良巴氏染色 Shorr染色 Diff－Quik法 巴氏染色 Shorr染色 Diff－Quik法
比１.３～１.８ µm ，顶体区４０％～７０％，不超过２个小空泡。 空泡大小〈２０％，顶体后区冰含任何空泡。
中段：细长、规则，长度３ .３～５ .２ µm ，大约与头部长度相等，
主轴与头部主轴成一直线，宽度０ .５～０ .７ µm ，残留胞质〈头的 １／３。 尾部：比中段细，均一，长约４５（均为头部长度的１０倍），没有锐 利折角，可以自身卷曲呈环状。
18
对胞浆小滴的认识
胞浆小滴对渗透压很敏感，并且在常规的空气干燥过程中
不能很好地保留。胞浆小滴在已染色的图片中不明显，它
们看上去像是中段的延伸。 在已固定并染色的涂片中，胞 浆小滴小于头部1/3大小，则应该被认为是正常的。
17
精子主段缺陷、过量残留胞浆定义
主段缺陷：短尾、多尾、断尾、发卡形平滑弯曲、锐角弯曲、宽度 不规则、卷曲，或上述缺陷的任何组合。
过量残留胞浆（ ERC）：这是精子异常发生过程产生的异常精子所
伴有的。这类异常精子的特征是含有大量不规则已染色的细胞浆， 胞浆的大小超过精子头部的三分之一，通常同时有中段缺陷，这种 异常的过量胞浆不应该被认为是胞浆小滴。
10
附录
正常形态精子
通过观察来自受孕女性生殖道，特别是 经性交后试验从宫颈粘液或从卵子透明带表 面回收的精子有助于定义具备潜在受精能力 的精子。 使用这些标准，对所有男性而言，其正常形 态精子百分率的范围大致为0-30%，很少超 过25% 。 这个低数据自然产生一个低的临界值 （仅为3-5%）。 经过“透明带选择”的精子，正常形态率仍 然低，约8-25%。
15
对精子形态缺陷的认识
人类精液标本中含有各种各样畸形的精子。精子异常发生和一些附 睾的病理改变常常与畸形精子百分率升高有关联。精子的形态缺陷
通常是多重的。畸形精子一般都会导致较低的受精潜能，这取决于
畸形的类型，也可能有异常的DNA。形态缺陷常伴有DNA碎片的增加、 染色体结构异常、不成熟染色质和非整倍体。虽然也考虑精子尾 （中段和主段），但是头部的形状更为重要。
14
精子中段与主段的分析参数
中段应该细长、规则，大约与头部长度相等。中段主轴应与头部长 轴成一条直线。
残留胞浆只有在过量时才被认为是异常的，即胞浆超过了精子头大
小的1/3时被认为过量残留胞浆。 主段应该比中段细，均一，其长约45μm（约为头部长度的10倍）。 尾部应没有显示鞭毛折断的锐利折角。主段可以自身卷曲成环状。