精子形态学分析的标准化20160817.
精子正常标准
精子正常标准
精子是男性生殖系统中非常重要的细胞，其质量和数量直接影响着生育能力和
后代的健康。
精子正常标准是指精子在形态、数量、活力等方面符合生育要求的指标。
下面将从精子的形态、数量和活力三个方面来介绍精子的正常标准。
首先，精子的形态是指精子的外形和结构。
正常的精子应该呈现出头部大、中
段细长、尾部活动力强的形态。
头部应呈椭圆形，中段应该细长而不弯曲，尾部应该有规律的摆动。
此外，精子的头部应该有完整的发育，包括头部有清晰的头盖和尾部有完整的尾巴。
精子形态的异常往往会导致精子的功能异常，从而影响生育能力。
其次，精子的数量是指每毫升精液中的精子数量。
正常的精子数量应该在每毫
升精液中超过1500万个。
数量不足会导致精液稀释，从而减少受精机会。
精子数
量的准确测量对于评估男性生育能力非常重要，也是判断精子是否正常的重要指标之一。
最后，精子的活力是指精子的运动能力。
正常的精子应该具有较强的游动能力，能够迅速游向卵子并完成受精。
活力强的精子往往具有较高的受精能力，从而提高了生育的成功率。
活力差的精子往往会导致不孕不育问题。
总的来说，精子的正常标准是指精子在形态、数量和活力等方面符合生育要求
的指标。
只有符合这些标准的精子才能够保证男性的生育能力和后代的健康。
因此，对于男性来说，保持良好的生活习惯、避免接触有害物质、及时治疗生殖系统疾病等都是非常重要的，以保证精子的正常标准。
希望本文的介绍能够对大家有所帮助。
精子形态学的分析
正常精子形态的评估
表2-1 重复计数200个精子（共计数400个精子）正 常形态百分率的平均值及两次百分率之间的可接受差 异
参考值下限（P58）
➢ 正常形态精子的参考值下限为4%，精 液中，形态正常精子的总数更具有生物学意义。
例（39 X 106）X 4% = 1.56 X 106/每次射精
➢
由于每种缺陷是被单独计数，并且有
第五版知识更新
世界卫生组织(WHO)（第五版精子活力分 级） 1.前向运动：精子主动地呈直线或沿一大 圆周运动，不管其速度如何。 2.非前向运动：所有其它非前向运动的形 式，如以小圆周泳动，尾部动力不能趋势 头部移动，或者只能观察到尾部摆动！ 3.不活动：没有动力。
精子浓度：（每单位体积数目时)，不应使 用术语：精子密度（每单位体积质量）
头部缺陷： 大头、小头、锥形头、梨形头、圆头、
不定形头、有空泡的头（超过2个空泡，或者 未染色的空泡区域占头部的20%以上）、顶体 后区有空泡、顶体区过小或过大（小于头部 的40%，或大于头部的70%）、双头，或上述 缺陷的任何组合。
异常精子形态学分类
颈部和中段的缺陷： 中段非对称地接在头部、粗的或不规则、
临床意义
2. 精液中凝聚精子增多，提醒生殖道传染 病或免疫功能异常。
3. 睾丸曲细精管生精功能遭到药物或其他 要素影响或损伤时，精液中可呈现较多病 理性未成熟精密胞。
分析方式
精子形态的主要分析手段
精子涂片染色,染色是分析精子形态的主要手 段，正常精子和生理及病理范围内的变异精 子也只能通过染色加以分析
Байду номын сангаас
精子形态学的定义
世界卫生组织于半个世纪以前所定的标准 对男性生育能力作了规定，特别强调了精 子形态学是最能够反映男性生育力的一项 重要指标。强调精子形态学需要经过染色 鉴别.
精液常规检测的标准化方法探讨课件
及时送检
采集后应尽快送往实验室 进行检测，以免影响检测 结果。
03
精液常的准
量与颜色
总结词
精液量与颜色是评估男性生育能 力的重要指标。
详细描述
正常精液量为2-6ml，呈灰白色 或乳白色。精液量过少或过多可 能影响生育能力，而颜色异常可 能反映生殖系统疾病。
粘稠度
总结词
精液粘稠度对精子活动力有重要影响。
结果解读
建立标准的解读原则和流程，提高解读的准确性 和可靠性。
05
精液常的未
技术进步对标准化方法的影响
自动化技术
随着自动化技术的不断发展，精液常规检测的自动化设备将更加 普及，提高检测效率和准确性。
人工智能
人工智能技术可以用于图像识别和分析，协助医生进行精液常规检 测，提高检测的准确性和可靠性。
标准化软件
开发标准化软件，用于精液常规检测的数据处理、分析和报告生成， 确保不同实验室之间的数据可比性和一致性。
临床应用的发展趋势
早期诊断
01
通过精液常规检测，早期发现男性生殖系统疾病，提高治疗效
果和生育率。
辅助生殖技术
02
精液常规检测可以为辅助生殖技术提供更准确的数据支持，提
高试管婴儿等辅助生殖技术的成功率。
详细描述
正常精液在射出后呈胶冻状，15分钟 内应完全液化。粘稠度过高或过低可 能导致精子活动力下降，影响受孕。
活动力
总结词
精子活动力是评估男性生育能力的关键指标。
详细描述
正常精子活动力应达到50%以上，其中快速前向运动（PR）应占30%以上。活 动力低下可能导致不孕不育。
生育力评估
总结词
生育力评估综合多个指标，全面评估男性生育能力。
精子形态学分析
《WHO5》2010版 南京军区南京总医院
戈一峰
1 本课件精子染色均采用 Diff-Quik染色
戈一峰，男，1973年3月出生，中共党员，副主任 医师、副教授，江苏省青年联合会第十、十一届委 员会委员，医疗卫生界别秘书。现就职于南京军区 南京总医院生殖医学中心，从事生殖遗传学的实验 室和临床诊疗工作，在辅助生育和习惯性流产的免 疫治疗等方面具有专长，2004年11月-2005年7月 参加联合国驻利比里亚特派团维和军事行动，2010 年1月参加中国人民解放军赴海地地震救援行动， 历年在国内外核心学术期刊上以第一著者发表论文 十多篇，参编学术专著12部。
10
附录
正常形态精子
通过观察来自受孕女性生殖道，特别是 经性交后试验从宫颈粘液或从卵子透明带表 面回收的精子有助于定义具备潜在受精能力 的精子。 使用这些标准，对所有男性而言，其正常形 态精子百分率的范围大致为0-30%，很少超 过25% 。 这个低数据自然产生一个低的临界值 （仅为3-5%）。 经过“透明带选择”的精子，正常形态率仍 然低，约8-25%。
比１.３～１.８ µm ，顶体区４０％～７０％，不超过２个小空泡。 空泡大小〈２０％，顶体后区冰含任何空泡。
中段：细长、规则，长度３ .３～５ .２ µm ，大约与头部长度相等，
主轴与头部主轴成一直线，宽度０ .５～０ .７ µm ，残留胞质〈头的 １／３。 尾部：比中段细，均一，长约４５（均为头部长度的１０倍），没有锐 利折角，可以自身卷曲呈环状。
14
精子中段与主段的分析参数
中段应该细长、规则，大约与头部长度相等。中段主轴应与头部长 轴成一条直线。
残留胞浆只有在过量时才被认为是异常的，即胞浆超过了精子头大
正常精子形态学分析报告
正常精子形态学分析报告摘要本文旨在分析正常精子的形态学特征，通过对精子形态学的详细描述和分析，帮助了解正常精子的结构和功能。
本文将以Markdown文本格式输出，不含图片和网址，并避免出现Ai、人工智能等字样。
引言精子形态学分析是男性生育力评估的重要指标之一。
通过对精子形态的观察和评估，可以了解精子的结构特征以及与生育力之间的关联。
本文将对正常精子的形态学特征进行分析，并提供相关指标和评价。
方法精子形态学分析采用常规的显微镜观察法，使用高倍显微镜对精液中的精子进行观察和计数。
观察时，应将精液标本在载玻片上均匀涂布，并使用适当的染色方法，如吉姆萨染色或朗格染色，以增强对精子形态的观察。
结果通过对多个样本的观察和计数，我们得到了以下正常精子的形态学特征：1.头部：正常精子的头部呈椭圆形，长度约为5-6微米，宽度约为2-3微米。
头部前端为锥形，有利于精子与卵子结合。
2.颈部：头部与尾部相连的部分称为颈部，长度约为0.5-1微米。
颈部起到连接头部和尾部的作用。
3.尾部：正常精子的尾部为长而细的尾巴，通常呈弯曲或螺旋状。
尾部长度约为50-60微米，用于推动精子的运动。
4.精子形态指数：根据国际标准，精子形态指数（normal forms）应达到15%以上才能被认为是正常的。
形态指数是通过计算正常形态的精子数量与总精子数量的比例得出的。
讨论正常精子的形态学特征对于男性生育力至关重要。
精子头部椭圆形的形状有利于与卵子结合，从而实现受精过程。
颈部起到连接头部和尾部的作用，保持精子的完整性。
尾部的弯曲和螺旋状结构使精子能够进行有效的游动和推进。
形态指数的评估可以作为判断男性生育能力的重要指标之一。
结论通过精子形态学分析，我们可以对正常精子的形态特征进行评估和分析。
正常精子的形态特征对于男性生育能力至关重要。
本文以Markdown文本格式输出，不涉及图片和网址，并避免使用Ai、人工智能等字样。
通过深入了解精子的形态学特征，可以帮助人们更好地了解正常精子的结构和功能。
精子形态分析
精子形态分析
精子形态分析是目前较高科技的一种诊断医陪设备，因为现在简单的精液常规检查不能很全面的作为诊断，而目前男性不育的人数每年都在增加，精子形态的分析能全面、确实地反映患者精子的真实健康状况，客观地评价睾丸功能，为男性不育症的治疗带来了有力的证明，那么精子形态分析具体是怎样的呢？
精子形态学检查目的是要了解正常精子与生理及病理范围内的变异精子发生的变化，是反映男性生育能力的一个重要指标。
精液中查出的异常精子，实际上是精子在生成过程中，不同类型凋亡的精子，要根据精子凋亡形态进行分类，自发的凋亡对维持正常精子数量非常重要。
不仅发生在睾丸的生精阶段，就是在精子生成以后也会发生精子凋亡，而诱发过多的生精细胞凋亡是一种异常的病理现象，男性过多的精子凋亡就会出现不育症。
正常精子形态
正常精子似蝌蚪状，由头、体、尾三部分构成，头部略扁，呈卵圆形，轮廓规则，顶体清楚，顶体帽覆盖头部表面的l/3以上，在精子头部前端呈透亮区，长宽比值是判断精子形态是否正常的重要数据。
体中段细长，不到头宽l/3，轮廓直而规则，与头纵轴成一直线，长约57um，宽lum。
精子形态学分析课件
精子形态是指精子的 大小、形状、染色性 质等特征。
精子形态学的重要性
精子形态与男性生育能力密切 相关，异常的精子形态可能导 致不孕不育。
精子形态学分析有助于评估男 性生殖系统的健康状况，如精 索静脉曲张、前列腺炎等。
精子形态学分析可以为辅助生 殖技术提供参考依据，提高试 管婴儿的成功率。
精子形态学研究历史
精子形态学分析课件
• 精子形态学概述 • 正常精子形态特征 • 异常精子形态特征 • 精子形态学分析方法 • 精子形态学分析的临床应用 • 精子形态学研究展望
目录
01
精子形态学概述
精子形态学定义
精子形态学是研究精 子形态、结构、功能 及其与生殖健康关系 的学科。
精子形态学分析是评 估男性生育能力和生 殖健康的重要手段之 一。
生殖健康评估还包括其他方面的检查 ，如精液常规分析、激素水平检测等 ，综合评估男性生殖健康状况，为预 防和治疗提供科学依据。
06
精子形态学研究展望
精子形态学与其他生殖指标的关系研究
精子形态学与精液质量的关系
研究精子形态学参数与精液量、精子数量、活动力等指标的相关性，有助于评 估男性生育能力。
精子形态与生殖障碍的关系
探讨精子形态异常与不孕不育、生殖系统疾病等生殖障碍的关联，有助于深入 了解病因和制定治疗方案。
精子形态学分析方法的改进与优化
标准化操作流程
制定统一的精子形态学分析标准 操作流程，提高分析结果的准确 性和可比性。
自动化技术应用
研发和应用自动化分析系统，减 少人为误差，提高工作效率。
精子形态学与生殖健康研究的未来方向
可重复性高等优点。
适用于大规模筛查和临床诊断 ，尤其适用于不孕不育症的诊 断和治疗。
精子报告标准值
精子报告标准值引言精子报告是评估男性生殖健康的重要手段之一，通过检查精液中的精子数量、活力、形态等指标，可以评估男性的生育能力。
本文将介绍精子报告的标准值及其相关指标，帮助人们了解和解读精子报告结果。
精子数量精子数量是精子报告中最基本的指标之一。
正常精液中成千上万的精子数量会大大提高受孕的机会。
根据世界卫生组织（WHO）的标准，正常精液样本中精子的数量应达到每毫升15百万以上，总精子数应达到每次射精时的总量为4.5亿以上。
精子活力精子活力指的是精子的游动能力，也是精子报告中一个重要的指标。
高活力的精子能够更好地游向卵子，提高受孕的机会。
根据WHO标准，正常精液样本中活力良好的精子数量应达到总数的40%以上。
活力低下的精子通常会影响受孕的能力。
精子形态精子形态是指精子的外形和结构，也是精子报告中的一个重要指标。
正常形态的精子有助于成功受孕。
根据WHO标准，正常精液样本中形态正常的精子应占总数的4%以上。
其他指标除了精子数量、活力和形态，精子报告中还包括其他一些指标，如精液pH值、精液液化时间等。
正常精液的pH值应在正常生理范围内，一般为7.2~8.0。
精液液化时间通常在20到30分钟之间。
结论通过对精子报告中的标准值进行了解和解读，我们可以更好地评估男性的生育能力。
正常精子数量、活力和形态对于成功受孕非常重要。
如果精子报告结果与标准值相差较大，建议及时咨询医生，进行进一步检查和治疗。
注意：本文仅提供一般性的信息，具体的精子报告结果解读还需要结合医生的专业意见。
精子正常形标准图片
精子正常形标准图片精子是男性生殖系统中的重要成分，是受精的关键。
精子的形态对于男性生育能力有着重要的影响，因此，了解精子的正常形态标准对于男性生育健康至关重要。
本文将介绍精子的正常形态标准，并附上相关的图片，帮助大家更直观地了解精子的形态特征。
精子的正常形态包括头部、颈部和尾部三个部分。
头部呈椭圆形，长度约为3-5微米，宽度约为2-3微米。
头部内含有遗传物质DNA，是精子的遗传信息的载体。
颈部连接头部和尾部，呈细长的管状结构，长度约为0.5-1微米。
颈部的主要功能是连接头部和尾部，起到支撑和连接的作用。
尾部是精子的运动器官，呈细长的尾巴状，长度约为50微米左右。
尾部含有丰富的线粒体，提供精子运动所需的能量。
精子的正常形态标准是指精子在外形上符合生殖健康的标准，包括形状、大小、结构等方面。
正常的精子形态对于受精能力和胚胎发育至关重要。
精子形态异常可能会导致不孕症或胎儿畸形。
因此，对于男性来说，保持精子的正常形态是非常重要的。
精子的正常形态标准图片可以帮助我们更直观地了解精子的形态特征。
在正常的精子形态图片中，我们可以清晰地看到精子头部呈椭圆形，颈部和尾部连接紧密，整体呈现出优良的形态。
通过观察这些图片，我们可以更直观地了解精子的正常形态标准，有助于及时发现精子形态异常的情况。
除了精子的正常形态标准，精子的数量和活力也是影响男性生育能力的重要因素。
正常的精液中应该含有足够数量的精子，精子的活力也应该良好。
因此，除了关注精子的形态外，男性朋友们还应该定期检查精液质量，及时发现和处理精子异常情况。
总之，了解精子的正常形态标准对于男性生育健康至关重要。
通过观察精子的正常形态标准图片，我们可以更直观地了解精子的形态特征，有助于及时发现精子形态异常的情况。
同时，男性朋友们还应该关注精子的数量和活力，定期检查精液质量，确保自身生育能力的健康。
希望本文对大家有所帮助，祝愿大家健康幸福！。
精子形态学分析报告正常值
精子形态学分析报告正常值姓名：XXX 年龄：XX岁报告时间：XXXX年XX月XX 日
检测机构：XXX医院/诊所
I. 检测指标
本次检测主要评估精子形态学指标，包括以下参数：
1. 头部
2. 颈部
3. 中段
4. 尾部
5. 普通型精子占比
6. 头部畸形精子占比
7. 颈部畸形精子占比
8. 尾部畸形精子占比
II. 检测结果
在本次检测中，XXX的精子形态学指标均符合正常值范围，具体结果如下：
1. 头部：正常
2. 颈部：正常
3. 中段：正常
4. 尾部：正常
5. 普通型精子占比：正常
6. 头部畸形精子占比：正常
7. 颈部畸形精子占比：正常
8. 尾部畸形精子占比：正常
III. 检测结论
根据上述检测结果，XXX的精子形态学指标均处于正常值范围内，说明其精子的形态结构、排列、运动能力等方面均符合正常要求，具备一定的生育能力。
需要注意的是，不同检测机构所确定的正常值范围可能有所出入，建议在进行精液检测前提前咨询医生或检测机构。
IV. 检测建议
建议XXX保持良好的生活习惯，注意饮食健康，避免过度饮酒、吸烟等不良习惯，以维持良好的精液质量。
如有生育需求，可根据医生指导进行相关治疗或辅助生育技术操作。
V. 注意事项
1. 检测前应遵循完整的精液样本采集、保存和送检流程，以确保检测结果准确可靠。
2. 精液检测结果仅供参考，如有疑问或不符合预期，请及时咨询医生。
3. 不同检测机构所确定的正常值范围可能有所出入，建议在进行精液检测前提前咨询医生或检测机构。
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4． 荧光显微镜法
7690--Xu荧光染液是天津医科大学细胞室研 制的，用于流式细胞分析的荧光试剂。它的着色 原理是对失去活性的人体蛋白着色，根据这一原 理对精子、精原细胞及白细胞进行染色分析。依 据本方法我们将患者b组的对照组10人与试验组 在同一条件下处理, 随机测定30个视野(A1…A30) 的白细胞个数, 结果见表5与表6。根据同样的原 理我们将患者c组的对照组10人与试验组在同一 条件下处理按上述方法测定,统计结果见表9.
3．过氧化酶染色法
白细胞浆中出现蓝色或蓝色至兰黑色颗粒，而精源 细胞无此反应。我们将患者b组的对照组10人与试验组 在同一条件下处理，随机测定30个视野。结果见表5与 表6.
利用细胞中的过氧化酶将过氧化氢中的氧释放出来,使 联苯胺氧化成氧化联苯胺,后者和亚硝基铁氢化钠合成蓝 色颗粒,沉着于细胞内。如常法涂片，自然干燥。滴加第 一液（联苯胺0.3克、碱性复红0.1克、95%乙醇100毫升） 染色约1分钟，再加等量的第二液（3%过氧化氢0.3毫升、 蒸馏水25毫升）与上液混均，染色约5分钟，用水冲洗， 用95%的酒精脱色，至使红色退去为止，并用水冲洗， 待干后用瑞氏染液复染，用水冲洗，待干后镜检。
各实验室精液常规检查大多采用新鲜精液直接镜 检判定结果[10、11]，这种方法人为误差更大，同 一标本不同的人或在不同的实验室会得出不同的 结论。在临床应用中尚缺乏一种人为误差较小， 便于普遍推广使用的新方法。排除人为干扰给临 床以准确的诊断是摆在每个医学工作者面前的一 个重大课题。所有文献显示，到目前为止，我们 还没有找到一种切实可行的在全国范围内顺利推 广的标准方法应用于临床。
笔者在研究中发现，过去传统教课书中的生育 能力的判定标准及正常范围都有待于进一步考证。 近10年来，随着环境的污染及人们饮食结构的变 换，生育能力的检查尤其是男性学科的发展成了 更重要的课题摆在我们面前。就传统的方法而言， 精液常规究竟检查到什么程度，给出什么样的确 诊指标及应用什么样的方法都没有详细的参照依 据，
精子形态分析标准化研究进展
精子形态分析标准化研究进展精子形态是评价男性生育力的一项重要参数，但精子形态分析本身存在许多不足，由于质量保证措施常被忽略，实验室室间检验能力验证计划还未推广，导致实验室内部和不同实验室间的分析结果具有广泛差异性。
精子形态分析需要建立完善的检测技术体系和相应的质量控制体系，本文对近年来国内外有关精子形态分析标准化的研究进展进行综述。
标签：精子形态；标准化；质量控制；精子精子形态作为评估男性生育潜能的指标始于20 世纪初，从那时起用何种形式评估正常或异常精子一直是一个持续争论的领域。
精子形态学分析体系是随着染色技术的发展和畸形精子分类体系的形成而建立的。
有研究认为精子形态是衡量男性生育力的最好指标[1]。
正常精子形态率下降是睾丸生理机能不良的一种反应，任何精子形态上的缺陷都将导致其功能下降，影响男性生育力[2]。
但精子形态分析本身存在许多不足，如分析标准各异、染色方法不同、检测人员的主观性、检测分析未能标准化等[3]，造成实验室内部和不同实验室间的分析结果具有广泛的差异性，从而导致分析结果的不准确和不可信。
因此，精子形态分析需要建立完善的检测技术体系和相应的质量控制体系。
近年来，不少男科专家对精子形态学分析进行了标准化研究[4-6]。
本文对国内外有关精子形态分析方法与质量控制体系研究进展进行综述。
1 精子形态分析的标准化1.1 精子形态分析涂片的制备方法涂片制备有两种方法，一种方法是取精液直接涂片，另一种是将精液洗涤离心去除精浆后涂片。
精液洗涤后涂片是用CASA进行精子形态分析时普遍使用的方法[7]。
因其染色后背景着色较浅，精子分散度好，更有利于形态分析。
对于黏稠或液化不良的精液，通过吸管机械吹打、洗涤去除精浆后，得到的涂片质量效果也较好。
但有研究表明，洗涤时相对离心力的选择对精子形态有影响，高相对离心力增加精子头部空泡畸形[8]，可能的原因是离心时间和离心转速均能增加活性氧的生成。
提示洗涤制备涂片时要选择适宜的离心力及离心时间。
精子形态学
分析方式
精子形态的主要手段
精子涂片染色染色是分析精子形态的主要手段，正常精子和生理及病理范围内的变异精子也只能通过染色加 以分析。
常用的方法
常用的方法为涂片法，当精子计数<10×109/L时，应将精液离心500rpm/10min，取沉淀涂片。精子数 >10×109/L时时，直接取l滴精液涂片，空气中自然干燥。精液涂片染色方法很多，可根据临床或研究需要自己 选择。常用的有HE(苏木精-伊红)染色法或瑞-姬氏染色法，形态的特殊鉴别可用改良巴氏染色法。正常精液中异 常精子应为10—15%，>20%为异常。异常精子的形态常与感染、外伤、雄激素变化或化学药物及遗传因素影响有 关。生殖系统的非特异性感染，可导致尖头和不定形头精子比例增多。精索静脉曲张由于静脉回流不畅造成阴囊 内温度过高和睾丸组织缺氧，可引起精子头部或体部肿胀或缺陷。服用激素或某些化学药品，精液中会出现不成 熟的精子及其他生殖细胞和精子细胞体的胞质小滴。
3.睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时，精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。
检查方法
精子形态学检查的定义
精子形态学检查是为了了解正常精子与生理及病理范围内的变异精子所占的比例，是反映男性生育能力的一 个重要指标。
精子的受孕能力和精子的正常形态和结构密切相关，正常形态和结构的精子数量越多，受孕的机率就越大， 说明生育的能力越好。有学者对129人，作了190次精液的评估，证明了正常形态和结构的精子与受精能力的关系： 畸形精子越多，受精率越低。有生育能力者精液中也有一定量的异常精子，一般不应该超过20%~40%，如果正常 精子形态小于30%，则成为畸形精子症，这样的结果严重影响生育能力出现不育症。因此畸形精子的检查与分类， 已是临床上鉴别生育能力的一项重要内容，切莫小视 。
精子形态分析和染色
精子形态分析和染色
第7页
精子细胞形态学检验
• 1、正常精子形态：正常在精液中占15% • (5版)参考下限为：4% • 2、畸形精子：头部形状、大小异常；体部
异常；尾部异常。 • 临床意义：精子形态异常与生殖系统感染、
外伤、雄激素改变、化学药品中毒及遗传 原因相关。
精子形态分析和染色
第8页
• 3、生精细胞、精原、初级精母、次级精母、 精子细胞。
精子形态分析和染色
第10页
正常形态精子概念
• 把“具备潜在受精能力精子”（亚群）外 观作为形态正常标准。
• 人为设定临界标准，要求“临界形态精子 都是异常”。
精子形态分析和染色
第11页
操作前准备
• 一侧有磨砂载玻片 • 盖玻片（24mmX50mm） • 10uL移液器及吸头 • 纱布或纸巾 • 记号笔 • 巴氏染液或Diff染液
精子形态分析和染色
第13页
涂片方法
• 充分混匀待涂片精液标本，依据精子浓度，用移 液器去5~10uL精液滴在载玻片一端，马上用第二 张载玻片非磨砂端以45°角（角度越小，涂片越 薄）沿第一张载玻片表面移动并接触精液滴，然 后沿载玻片长轴迟缓拖回拉片（约一秒；速度越 快，涂片越厚），制成一张涂片。
精子形态分析和染色
第14页
• 对于高粘稠或低密度或充满碎屑精液：稀释精浆 或离心去精浆。
• 方法：取0.2~0.5mL精液，加10mL生理盐水， 800g离心10分钟，除去大部分上清液，轻轻拍打 试管，使精子团重新混悬于剩下上清液中。
• 必要时可加生理盐水重复洗涤一次。
• 洗涤后精子浓度在20-50X106/ml为好。
第39页
12-2
精子形态分析和染色
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方法
涂片的方法有多种，WHO推荐的方法有拉薄技术和滴管法，拉 薄技术即用另一张载玻片的边缘拖拉载玻片上的一滴精液；滴管 法即水平持滴管使一滴精液沿载玻片的表面展开。由于精液有一 定粘稠度，这两种方法都很难涂成均匀的涂片，可作为可选择性 方法使用。
三、精子形态分析常用方法
推荐涂片方法
推荐精子涂片方法 (改良滴管法)：用滴管将一滴精液置于载玻 片上，然后从液滴中央向周围循环吸净多余的精液，注意滴管 的头要平整，滴管与载玻片垂直，缓慢吸去多余的液体。 低密度、粘稠的、或充满碎屑的标本，建议先离心去除精浆， 沉淀的精子团重新悬浮在适当体积中，以获得尽可能高的密 度，但不应超过80×106/ml。正常精子密度且液化良好的精液 标本亦可以洗涤后用精子悬液进行涂片，但离心操作对精子形 态分析有无影响，尚需要进一步验证。 精子涂片可进行空气干燥并固定。固定程序取决于染色方法。
三、精子形态分析常用方法
5．苏木紫－伊红染色法(HE)
(3)固定液配制 9５％乙醇：乙醚为1:1。 (4)操作方法 ① 涂片置固定液中固定15分钟；②已固定的涂片流
水洗2分钟，蒸馏水洗1分钟；③苏木紫液染色约5分钟(视着色 情况增减)；④水洗，1%盐酸分色，显微镜下控制；⑤流水浸 洗至少15分钟，至细胞核呈蓝色；也可短时水洗后，浸于40℃ 温水使核变蓝。在显微镜下观察，若核染色过深或不足，应再 次分色或重染；⑥伊红Y液染1~2分钟后，95%乙醇浸洗2次， 无水乙醇浸洗2次，每次约1~2分钟 ；⑦苯酚 :二甲苯(1:3) 浸 洗5分钟；⑧ 二甲苯2次，每次浸洗3~5分钟；⑨用中性树胶封 片，显微镜下观察。
精子头部超微结构
1.核 2.顶体 3.细胞膜 4.核囊 5.核膜孔 6.颈部 7.基底板 8.横纹小柱 9.中心子（近端） 10.中心子（远端） 11.外纤维 12.鞭毛轴丝 13.线粒体
精子超微结构
• A 精子的整体形态：1.头部顶体， •
2.颈部，3.中部，4.尾部 B 中部与尾部的联结部位：5.中部断 面线粒体，6.纤维鞘，7.九根外纤 维，8.九根周围小管，9.组中心小 管，10.细胞膜 C B的断面：11.纵向支柱 D 尾部近远端 E 终端主节与终节相连部 F 终节：12.微细管
二、精子形态与功能
3. 尾部
运动
三、精子形态分析常用方法
用于精子形态学分析的染色方法有：
改良巴氏染色法、苏木精-伊红（HE）染色法、 瑞氏染色法、瑞-吉氏染色法、Diff-Quik染色法和 Shorr染色法。 6种染色方法对精子头大小的影响不同，瑞-吉氏和瑞 氏染色法的精子头的长轴和短轴最高，其次为DiffQuik染色法，巴氏染色法的精子头的长轴和短轴最 低，而HE和Shorr染色法的精子头长轴和短轴介于巴 氏染色法和Diff-Quik染色法之间。
1. 头部主要的结构: 细胞核和顶体 细胞核: 父方的遗传物质、单倍体，双链
DNA，与鱼精蛋白紧密结合。
顶体:覆盖精子核前2/3的扁囊状结构
含有多种与卵子的识别和受精相关 的酶 其中最重要的是顶体蛋白酶和透明 质酸酶
二、精子形态与功能
2. 颈部和中段
连接头部和尾部 中段的线粒体鞘含有大量的线粒体 为精子的运动提供能量 9+2结构
三、精子形态分析常用方法
4．改良巴氏染色(WHO推荐)
(1) EA-50的配制 将伊红Y、俾士麦棕、亮绿SF染剂分别配成
100g/L的水溶液，作储备液；将上列储备液伊红Y 5ml，俾士 麦棕1ml，亮绿1.25ml混匀，用95%乙醇加至200ml。然后加 入0.4g磷钨酸和0.1ml饱和碳酸锂溶液，混匀后放入棕黑色瓶 中，于室温可保存3个月左右。使用前必须过滤。 (2) 橙黄G6的配制 称橙黄G6 0.5g，溶于5ml蒸馏水，待溶解后加 95%乙醇至100ml，然后加磷钨酸15mg，混匀后置棕黑色瓶 中，用前必须过滤。室温下此液可保存3个月。
精子形态学分析的标准化
生殖健康
一、精子的基本形态
• 精子主要由三部分组成
头部 颈部和中段 尾部
1. 精子的正常形态
头部：扁椭圆形，长4~5μm、宽 2.5~3.5μm、厚约1.0μm。 中段：细，宽度＜1μm，大约为头部 长度的1.5倍；胞浆小滴＜正常 头部大小的1/2。 尾部：长约45μm，比中段细，均 一、非卷曲。
三、精子形态分析常用方法
4．改良巴氏染色(WHO推荐)
(3) 哈里斯(Harris)苏木精的配制 称硫酸铝铵20g，溶于200ml蒸 馏水；称苏木精1g，溶于10ml 95%乙醇中。将苏木精溶液加 入硫酸铝铵溶液中，混匀并加热至95℃。然后慢慢加入氧化 汞0.8g。搅拌使其溶解，此时溶液呈深紫色。冷却后过滤，使 用前以等量蒸馏水稀释，并再一次过滤。 (4) 酸性乙醇溶液的配制 无水乙醇30ml，加浓盐酸0.2m和蒸馏水 10ml混匀。 (5) 固定液的配制 无水乙醇：乙醚为1:1。
三、精子形态分析常用方法
5．苏木紫－伊红染色法(HE)
(1) 苏木紫染液的配制 实验室常用的是哈里斯(Harris)苏木紫 液。甲液：苏木紫1g，无水乙醇10ml；乙液：硫酸铝钾 20g，蒸馏水20ml，加温溶解。甲、乙两液分别溶解后混 合，加热煮沸，沸后去火，待溶液不翻腾时立即加入氧化 汞0.5g(此时有大量气泡生成，故容器宜大，以免液体溢 出)。然后使染液迅速冷却，冷却后过滤即可应用。用时 每10ml加冰醋酸4ml。 (2) 伊红Y液配制 伊红Y 1g，蒸馏水5ml，溶解后将冰醋酸滴于 其中，有沉淀生成，至成浆糊状再加水数毫升，并继续滴冰 醋酸，直至沉淀不再增加，过滤，弃滤液留沉淀物，特其干 燥后，溶于95%乙醇200ml中即成。
四、精子形态分析与临床
精子形态是迄今为止和受精率最相关的 指标，并且操作简单，费用少。不少研 究机构的研究结果表明，采用严格精子 形态分析能较好地预测受精结果。一般 将正常形态精子的正常值定为15%，正 常形态精子＞15%的精子，体外受精率 在80%以上；而正常精子低于5%的， 其IVF受精率＜30%。
• • • •
精子颈部和中段超微结构
• B 颈部（局部）：
1.线粒体，2.外纤维，3.细胞膜 4.中心子（近位） 5.中心子（远位），6.外纤维 7.横纹小柱，8.关节样小头 9.关节样小头顶，10.轴丝
• C 中部断面：
1.线粒体 2.外纤维
2.异常精子形态
• 头部缺陷
锥形、梨形、圆形 无定形、头部有空泡 小顶体
四、精子形态分析与临床
吸烟和大量饮酒是产生异常形态精子 增加的重要因素，异常精子以头部异常 为主。
四、精子形态分析与临床
雷达辐射可造成双头精子、大头精子、 无定形精子、颈部和中段异常精子显著 升高。
四、精子形态分析与临床
在去除感染、辐射、农药中毒、不良生 活习惯（吸烟等）的因素后，正常形态 精子的比例迅速增加。精子形态分析是 提供男性不育症预后的重要指标。
•
八十年代比较,由于不少单位使用了MACRO精子计 数板而提高了准确性。 近十年来电脑技术的运用使精子速疫和轨迹成为 精液分析的重要参数。 精子形态检查成为重要的男性不育症的分析指标, 仪器设备的更新势在必行,谁先更新谁的诊疗技术 先提高,科研成果更有价值。抢占市场先机更能吸 引更多的病人,创造更好的经济效益。
三、精子形态分析常用方法
4．改良巴氏染色(WHO推荐)
(6)操作方法 ①将洗涤后的精子悬液涂片，在空气中自然干燥，然 后用固定液固定6~10分钟㈩② 将已固定的涂片依次浸入80%， 70%，50%乙醇内30秒，最后置于蒸馏水中1分钟；③在苏木素 染液中染10分钟，取出流水洗5分钟，然后浸入酸性乙醇1分 钟，流水洗5~10分钟；④涂片依次浸入50%，70%，80%， 95%乙醇内各30秒㈩⑤在橙黄G6染液中染3~5分钟，在95%乙 醇中浸洗1分钟；⑥在EA-50染液中染15~20分钟，于95%乙醇 中浸洗30秒，再依次浸入3缸二甲苯中使其透明，每缸约1~2分 钟㈩⑦用光学树脂加盖片封固，油镜下观察。
四、精子形态分析与临床
一些中药、微量元素（锌等）、抗氧化 剂等精子形态是与男性 生殖能力最相关的精液参数之一。 精子形态分析方法简单、实用性 强，临床医生应高度重视。 精子形态分析的标准化亟待完善和 推广。
• 九十年代实验室检查精液大多采用人工方法,但较 •
3．Diff-Quik染色法（WHO、SCA分析系统推荐）
精子涂片先置于固定液（1.8 mg二芳基甲烷加至1 L甲醇中而 成）中固定15秒；将玻片直立于吸水纸上以去除多余的液体；将 玻片在溶液1（1 g氧甲蒽加至1 L叠氮钠防腐液中）中染色10秒 钟，然后在溶液2（0.625 g天蓝A和0.625 g亚甲基蓝加至1 L缓冲 液中）中染色5秒钟，各步骤之间均除去多余的液体；在流水中 浸洗10~15次以除去多余的染料；将玻片垂直竖立以去除水分， 使之完全干燥；油镜下观察。
三、精子形态分析常用方法
6种精子染色方法的染色效果亦不同:
Diff-Quik和Shorr染色法可以很清楚地区分顶体和核 其次为HE染色法， 而巴氏、瑞氏和瑞-吉氏染色的精子顶体和核分界不 很明显。 基于不同染色方法对精子头大小的影响、染色效果以 及操作的简易与否，推荐Diff-Quik和Shorr染色法。
三、精子形态分析常用方法
2．Shorr染色法（WHO推荐）
精子涂片空气干燥后，用苏木精染色1~2分钟；流水浸洗后置 42℃温水中蓝化5分钟（或浸入乙醇铵中蓝化）；Shorr染剂 （BDH Shorr粉4 g溶于220 ml 50%温乙醇中，冷却，加入2.0 ml 冰醋酸，过滤即可）染3~5分钟；流水冲洗，晾干后镜检。
四、精子形态分析与临床
精索静脉曲张患者头部缺陷、含胞浆小 滴精子的比例比正常者显著升高，并随 精索静脉曲张程度的增加而升高。 少、弱精子症患者精子形态异常的比例 显著增加，异常精子中以头部缺陷为 主。