薄荷茎尖组织培养技术总结报告

薄荷茎尖组织培养技术总结报告.

茎尖培养

1 材料选取

每年6月份盛花期,在薄荷田中利用目测,采用手搓叶片鼻闻的方式选取,生长健壮,无病虫害,香味浓郁,叶片肥厚有本品种特征特性的优良单株,连株拔取,栽入花盆中,作为取材的母株.

2材料处理

待母株成活后,搬入热疗室进行处理,在38℃下间歇处理38小时,然后移出热疗室,在温室中缓苗7天,然后去嫩头,放入容器中,用清水清洗数次再用新洁尔灭浸泡13min.后拿入无菌室中,用70%乙醇消毒3s,升汞消毒8min在超净工作台上,挑取0.2mm大小茎尖接种于培养基上,

3 配方设计及培养基配制

茎尖分化培养基采用MS+BA1.5mg/l+NAA0.08mg/l+琼脂6.5g/l+白糖30g/l,ph5.8

首先配好母液,再将琼脂放入蒸馏水中溶化后,加入母液,加入糖,充分搅拌好后,定容到1000ml再调节ph值到5.8后,就可以分装培养基了.将培养基分倒到培养瓶中,扎好瓶口,放入高压锅中灭菌30min,拿出冷凉,培养基就制备好了.

4 培养条件

将接好种的培养基放在培养室中培养,光照度2000lx,温度25

16h/d光照,培养大约10-20天.转到MS培养基中

5 培养过程中的问题

⑴玻璃化问题

在培养过程中,可以采取固体和液体培养对照培养,一套培养采用滤纸桥培养,将茎尖放在棉花上培养.液体培养过程中易形成玻璃化苗,玻化苗的形成可用调节培养基的NH4+离子浓度来避免,另外,可用调节ph及调节培养温度来做调节。

⑵茎尖大小问题

培养过程中,采用0.2mm大小茎尖培养,过大过小均不好,过大不易脱去病毒,过小易于死亡,所以茎尖大小采用0.2mm大小的茎尖.

二茎段快繁

1茎段快繁采用一叶一芽方式,剪切横放于培养基中,培养基采用MS 或者1/2MS,3/4MS均可,如果是切段快繁,可以采用1/2MS+NAA0.05mg/l不仅生长势旺,而且生长迅速.

2茎段快繁每15天即可进行一次,每瓶放置7株,选择一瓶可繁殖8瓶,繁殖倍率为56倍.

3茎段快繁可以结合生根阶段进行,驯化基质要求排水良好,疏松透气,可以采用蛭石珍珠岩,培养土均可.当薄荷苗生根后,苗高8cm左右即可炼苗.炼苗时打开瓶口,小心的用镊子掏出来,放于水中洗净根部琼脂,然后再用多菌灵浸泡一下,载于基质中,基质栽培前用高锰酸钾消毒杀死病菌,灾后盖上塑料薄膜保湿,1周后可以揭去薄膜经常喷水施肥成活率可达100%