微生物学 微生物感染的控制措施
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控制微生物感染的措施
• 药物治疗
– 化学治疗 (chemotherapy)药物：德国艾立希 1910年合成了第一个化疗药——治疗梅毒的砷凡 纳明
– 抗生素(antibiotic)：英国弗莱明 (Alexander Fleming，1945年因此而获诺贝尔医学奖)于 1928年首先发现了青霉素 (penicillin)
冷冻和干燥
• 是抑菌手段，常用于保存某些易腐烂变质 的物品 (食品和生物试剂等)，而不用于消 毒与灭菌。
高渗透压
• 食盐腌制和保存食品、食盐水清洗化脓 创口的原理
射线消毒灭菌法
非电离辐射法
紫外线 (ultraviolet, UV)
机理：使同一条DNA链上相邻的 两个胸腺嘧啶共价结合而形成二 聚体，干扰DNA的复制与转录， 导致细菌死亡或突变
• 疫苗免疫
– 琴纳 (EdwardJenner)于1796年首创接种牛痘 (vaccinia)预防天花
• 改善生活环境
– 消毒与灭菌
消毒与灭菌
(Disinfection and sterilization)
消毒灭菌的奠基人—李斯特
Joseph Lister,1827-1912
于1867年在病人手术伤口上使用经石炭酸浸泡过的敷料，同时消毒整个手术环境， 使手术后伤口感染明显减少，从此开创了现代的消毒与灭菌技术。
Autoclave
高压蒸汽灭菌法 autoclaving
• 灭菌效果监测：
– 程序监测（压力表、温度表、计时表） – 化学指示监测（压力灭菌指示胶带） – 生物指示剂监测（耐热的非致病性芽孢杆菌）
• 使用注意事项：
– 用前培训 – 用时：物品疏松排列，瓶口松开；排尽冷气； – 灭后缓慢减压 – 用后清洁
可杀死链球菌、沙门菌 等病原菌，不影响消毒 物品营养成分 只杀灭细菌繁殖体
可杀灭芽胞；若水中加 2%碳酸氢钠沸点为 105℃，杀芽孢效果更 好 可杀灭细菌繁殖体及芽 胞
最彻底的灭菌方法
乳制品和酒类
食具、注射器、 刀剪
不耐高温的含糖 或牛奶培养基
耐高温耐高湿能 够被蒸汽穿透的 物品，如培养基 、手术器械、玻 璃器皿等
化学消毒灭菌法
杀菌机理： 蛋白质变性凝Hale Waihona Puke Baidu：如酚类、醇类、醛类、重
金属盐类和酸碱类。 干扰细菌酶系统：氧化剂、重金属盐类与细
菌的-SH基结合，使有关的酶失去活性。 损伤细菌细胞膜：表面活性剂、脂溶剂等能
降低细菌细胞膜的表面张力并增加其通透性， 胞外液向菌体内渗，细菌裂解。
蛋白质变性剂
• 酚类：
有效杀菌波长：240~280nm， 260nm杀菌力最强
适用范围： 仅适用于空气及物体 表面的消毒
电离辐射法
Ionizing Radiation
机理： 电离辐射主要使用释放高能电子束的辐射线（高能射
线），通过损伤核酸和酶系，杀灭微生物。一定剂量时对各 种细胞均有致死作用。 适用范围：
常用于忌热物品的常温灭菌方法，如无菌注射器、细胞 培养瓶和移植、埋植的组织或人工器官；节育用品；消毒食 品时不破坏其营养成分。
热力灭菌法(湿热法和干热法）
当温度和时间相同时，湿热灭菌法效果更佳： 湿热穿透力强 湿热中菌体蛋白易变性凝固 湿热蒸汽中存在潜在的热能
常用的干热灭菌法
焚烧：彻底的灭菌法，用于废弃物品和死于传染病的患 者或动物尸体
烧灼：适用于接种环、试管口等 干烤：80~100 ℃经1hr，杀灭细菌繁殖体；160~180℃经
– 石炭酸：由于刺激性气味和腐蚀性，逐渐被代替 。
– 来苏：2%~5%水溶液，10~15min 可基本杀灭细 菌，喷洒、擦试、浸泡容器及洗手等
• 酸类：对细菌繁殖型及芽孢均有杀灭作用
– 常用乳酸 、乙酸 、丙酸，可用于空气消毒
• 有机溶剂：
– 乙醇：可杀灭细菌繁殖型，对芽孢无作用，常用 于皮肤和体温计等的消毒
• Bacteriostasis：抑菌，抑制物体上细菌生长繁殖的方法。
• Antisepsis：防腐，指防止或抑制物体上细菌生长繁殖，以 预防物品腐烂的方法，细菌不一定被杀灭。
物理消毒灭菌法
• 热力灭菌：干热灭菌法、湿热灭菌法 • 冷冻和干燥：奈瑟菌、霍乱弧菌、梅毒螺旋体等 • 高渗透压： • 滤过除菌法：物理阻留法除去液体及空气中的细菌 • 辐射杀菌法：紫外线、电离辐射、微波
61.1~ 62.8℃，30min 71.7 ℃，15-30s(目前广泛使用 ) 1个大气压下，100℃，5min
1个大气压下，100℃，1~2hr
1大气压下，100℃流通蒸汽， 15~30min，37℃孵箱过夜， 反复三次以上。或75~80 ℃， 30~60 min，37℃过夜，反复 多次 1.05kg/cm2 蒸汽压力下， 121.3℃，15~20 min
基本概念
• disinfection ：消毒，指杀灭物体上病原微生物的方法，但 不一定杀死细菌芽孢、病毒或非病原微生物。
• Sterilization：灭菌，指杀灭物体上包括细菌芽孢和病毒在 内的所有微生物的方法。
• Asepsis：无菌，指物体上不含活的微生物，这不仅需要灭 菌，而且还需采取必要的措施，预防环境中的微生物再次污 染已灭菌的物品。
蛋白质变性剂
• 蛋白溶解剂：
– 生石灰：地面、排泄物消毒，需临用前新鲜配制
• 蛋白氧化剂：
• 碘：溶解于70%乙醇，碘酒，皮肤消毒，及手术器件的快 速消毒。
• H2O2：消毒伤口， 产生的气泡也有助于排出伤口中的污 染物，除能杀灭一般的细菌外，还能杀灭组织深部的厌 氧菌，对细菌芽孢也有作用。隐形眼镜片的消毒。
滤过除菌法
Filtration
滤菌器种类：石棉（蔡氏）滤菌器、薄膜、玻璃滤菌器、 高效颗粒空气过滤器 (High Efficiency Particulate Air Filter, HEPA Filter)
适用于：不耐高压加温的血清、毒素、抗毒素、抗生素、 药液及空气滤过。
不适用于：病毒、支原体和细菌L型
2h杀灭细菌繁殖体及芽孢。适用于耐高温的玻璃器皿、 瓷器、金属器械等。
干热不适应液体灭菌
常用的湿热消毒灭菌法
方法
消毒/灭菌条件
方法评价
适用范围
巴氏消毒法 (pasteurizati on) 煮沸法 (boiling)
间歇蒸汽灭菌 法(fractional sterilization
高压蒸汽灭菌 法 (autoclaving
• 药物治疗
– 化学治疗 (chemotherapy)药物：德国艾立希 1910年合成了第一个化疗药——治疗梅毒的砷凡 纳明
– 抗生素(antibiotic)：英国弗莱明 (Alexander Fleming，1945年因此而获诺贝尔医学奖)于 1928年首先发现了青霉素 (penicillin)
冷冻和干燥
• 是抑菌手段，常用于保存某些易腐烂变质 的物品 (食品和生物试剂等)，而不用于消 毒与灭菌。
高渗透压
• 食盐腌制和保存食品、食盐水清洗化脓 创口的原理
射线消毒灭菌法
非电离辐射法
紫外线 (ultraviolet, UV)
机理：使同一条DNA链上相邻的 两个胸腺嘧啶共价结合而形成二 聚体，干扰DNA的复制与转录， 导致细菌死亡或突变
• 疫苗免疫
– 琴纳 (EdwardJenner)于1796年首创接种牛痘 (vaccinia)预防天花
• 改善生活环境
– 消毒与灭菌
消毒与灭菌
(Disinfection and sterilization)
消毒灭菌的奠基人—李斯特
Joseph Lister,1827-1912
于1867年在病人手术伤口上使用经石炭酸浸泡过的敷料，同时消毒整个手术环境， 使手术后伤口感染明显减少，从此开创了现代的消毒与灭菌技术。
Autoclave
高压蒸汽灭菌法 autoclaving
• 灭菌效果监测：
– 程序监测（压力表、温度表、计时表） – 化学指示监测（压力灭菌指示胶带） – 生物指示剂监测（耐热的非致病性芽孢杆菌）
• 使用注意事项：
– 用前培训 – 用时：物品疏松排列，瓶口松开；排尽冷气； – 灭后缓慢减压 – 用后清洁
可杀死链球菌、沙门菌 等病原菌，不影响消毒 物品营养成分 只杀灭细菌繁殖体
可杀灭芽胞；若水中加 2%碳酸氢钠沸点为 105℃，杀芽孢效果更 好 可杀灭细菌繁殖体及芽 胞
最彻底的灭菌方法
乳制品和酒类
食具、注射器、 刀剪
不耐高温的含糖 或牛奶培养基
耐高温耐高湿能 够被蒸汽穿透的 物品，如培养基 、手术器械、玻 璃器皿等
化学消毒灭菌法
杀菌机理： 蛋白质变性凝Hale Waihona Puke Baidu：如酚类、醇类、醛类、重
金属盐类和酸碱类。 干扰细菌酶系统：氧化剂、重金属盐类与细
菌的-SH基结合，使有关的酶失去活性。 损伤细菌细胞膜：表面活性剂、脂溶剂等能
降低细菌细胞膜的表面张力并增加其通透性， 胞外液向菌体内渗，细菌裂解。
蛋白质变性剂
• 酚类：
有效杀菌波长：240~280nm， 260nm杀菌力最强
适用范围： 仅适用于空气及物体 表面的消毒
电离辐射法
Ionizing Radiation
机理： 电离辐射主要使用释放高能电子束的辐射线（高能射
线），通过损伤核酸和酶系，杀灭微生物。一定剂量时对各 种细胞均有致死作用。 适用范围：
常用于忌热物品的常温灭菌方法，如无菌注射器、细胞 培养瓶和移植、埋植的组织或人工器官；节育用品；消毒食 品时不破坏其营养成分。
热力灭菌法(湿热法和干热法）
当温度和时间相同时，湿热灭菌法效果更佳： 湿热穿透力强 湿热中菌体蛋白易变性凝固 湿热蒸汽中存在潜在的热能
常用的干热灭菌法
焚烧：彻底的灭菌法，用于废弃物品和死于传染病的患 者或动物尸体
烧灼：适用于接种环、试管口等 干烤：80~100 ℃经1hr，杀灭细菌繁殖体；160~180℃经
– 石炭酸：由于刺激性气味和腐蚀性，逐渐被代替 。
– 来苏：2%~5%水溶液，10~15min 可基本杀灭细 菌，喷洒、擦试、浸泡容器及洗手等
• 酸类：对细菌繁殖型及芽孢均有杀灭作用
– 常用乳酸 、乙酸 、丙酸，可用于空气消毒
• 有机溶剂：
– 乙醇：可杀灭细菌繁殖型，对芽孢无作用，常用 于皮肤和体温计等的消毒
• Bacteriostasis：抑菌，抑制物体上细菌生长繁殖的方法。
• Antisepsis：防腐，指防止或抑制物体上细菌生长繁殖，以 预防物品腐烂的方法，细菌不一定被杀灭。
物理消毒灭菌法
• 热力灭菌：干热灭菌法、湿热灭菌法 • 冷冻和干燥：奈瑟菌、霍乱弧菌、梅毒螺旋体等 • 高渗透压： • 滤过除菌法：物理阻留法除去液体及空气中的细菌 • 辐射杀菌法：紫外线、电离辐射、微波
61.1~ 62.8℃，30min 71.7 ℃，15-30s(目前广泛使用 ) 1个大气压下，100℃，5min
1个大气压下，100℃，1~2hr
1大气压下，100℃流通蒸汽， 15~30min，37℃孵箱过夜， 反复三次以上。或75~80 ℃， 30~60 min，37℃过夜，反复 多次 1.05kg/cm2 蒸汽压力下， 121.3℃，15~20 min
基本概念
• disinfection ：消毒，指杀灭物体上病原微生物的方法，但 不一定杀死细菌芽孢、病毒或非病原微生物。
• Sterilization：灭菌，指杀灭物体上包括细菌芽孢和病毒在 内的所有微生物的方法。
• Asepsis：无菌，指物体上不含活的微生物，这不仅需要灭 菌，而且还需采取必要的措施，预防环境中的微生物再次污 染已灭菌的物品。
蛋白质变性剂
• 蛋白溶解剂：
– 生石灰：地面、排泄物消毒，需临用前新鲜配制
• 蛋白氧化剂：
• 碘：溶解于70%乙醇，碘酒，皮肤消毒，及手术器件的快 速消毒。
• H2O2：消毒伤口， 产生的气泡也有助于排出伤口中的污 染物，除能杀灭一般的细菌外，还能杀灭组织深部的厌 氧菌，对细菌芽孢也有作用。隐形眼镜片的消毒。
滤过除菌法
Filtration
滤菌器种类：石棉（蔡氏）滤菌器、薄膜、玻璃滤菌器、 高效颗粒空气过滤器 (High Efficiency Particulate Air Filter, HEPA Filter)
适用于：不耐高压加温的血清、毒素、抗毒素、抗生素、 药液及空气滤过。
不适用于：病毒、支原体和细菌L型
2h杀灭细菌繁殖体及芽孢。适用于耐高温的玻璃器皿、 瓷器、金属器械等。
干热不适应液体灭菌
常用的湿热消毒灭菌法
方法
消毒/灭菌条件
方法评价
适用范围
巴氏消毒法 (pasteurizati on) 煮沸法 (boiling)
间歇蒸汽灭菌 法(fractional sterilization
高压蒸汽灭菌 法 (autoclaving