宁夏压砂甜瓜白粉病病原菌初步鉴定
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（2）盆栽接种：按（1）中抖粉方法将分生孢子均匀 地撒在盆栽甜瓜植株叶片上，然后将花盆放入温室内， 以滑石粉作对照，10 株为处理，观察发病情况，病株统 计以植株叶片组织白斑覆盖大于一半以上的记为发病 株，并按 1.2.1 方法重新观察发病叶片上的病原物。 2 结果与分析 2.1 压砂甜瓜白粉病病原菌无性阶段形态特征
刘建利等：宁夏压砂甜瓜白粉病病原菌初步鉴定
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A
B
C
D
E
A：分生孢子；B：萌发管(箭头)；C：纤维状体(箭头)；D：菌丝；E：分生孢子梗
图 1 压砂甜瓜白粉病病原菌显微形态
图 2 叶盘法回接试验感染叶片
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令参 中国农学通报
A
B
A：发病初期；B：发病后期
使宁夏中部干旱带成为名副其实的“中国压砂西甜瓜 之乡”。种植压砂西甜瓜具有明显生态效益、经济效益 和社会效益[1]。
甜瓜白粉病（Melon powdery mildew）为甜瓜的常 见病，分布广泛，发生普遍，春秋两季发病较重，发病率 70%~100%，显著影响甜瓜生产，最高可使甜瓜减产 60%，同时影响甜瓜的成熟度和含糖量，从而影响甜瓜 的品质和商品性。该病的病原菌为甜瓜白粉菌，有子 囊菌亚门真菌白粉菌目的白粉属二孢白粉菌 （Erysiphe cichoracearum）和 单 囊 壳 属 单 囊 壳 白 粉 菌 （Sphacelotheca fuliginea）[2-3]。对宁夏中部干旱带压砂 甜瓜白粉病病原菌的鉴定至今未见报道，此研究对宁 夏中部干旱带压砂甜瓜白粉病病原菌进行初步鉴定，
0 引言 宁夏中部干旱带，年降水 180 mm 左右，蒸发量却
有 2400 mm。距今约一百多年前，当地农民利用大山 的石头沙砾，开始了一种特色种瓜模式——“压砂”，即 在沙砾淤积丰富的冲击扇区域将大量碎沙石覆盖在山 地表层，利用砂砾铺压对地表所具有的节水、增温、保 墒效果生产西瓜（Citrullus lanatus L.）和甜瓜（Cucumis melo L.），这样做的最直接效果是减少了土地荒漠化 面积，提高了土地利用率，同时，海拔 1600~1800 m 高 度得天独厚光热资源又为西瓜和甜瓜中天然葡萄糖、 维生素、氨基酸和多种微量元素，特别是食物中稀缺的 硒元素的积聚提供了独特的自然条件。2008 年压砂 西甜瓜实现 33 万 hm2 种植面积，瓜果产值达到 8 亿元，
所有的病叶上均未观察到子囊和子囊孢子。但分 生孢子可见，分生孢子无色，桶形或椭圆形（图 1A），串 生，长(30±2) μm，宽(15±3) μm。萌发管侧生，不分叉 （图 1B），宽(5±0.5) μm。所有的分生孢子中均有纤维 状体（图 1C），个数 1~10 个，平均 5 个。菌丝无色，有隔 （图 1D），宽(3±0.5) μm。分生孢子梗圆柱状或短棍状 （图 1E），不分枝，无色，有 2~4 个隔膜，长(100±20) μm， 宽(10±2) μm，其上着生分生孢子。初步鉴定宁夏干旱 带压砂甜瓜主栽品种玉金香感染白粉病病原菌为单囊 壳属单囊壳白粉菌（Sphacelotheca fuliginea）。 2.2 叶盘法回接实验结果
中国农学通报 2010,26(14):261-264 Chinese Agricultural Science Bulletin
宁夏压砂甜瓜白粉病病原菌初步鉴定
刘建利，任 贤，金 妮，李 强，陈 丹，曾舒予
（北方民族大学生物科学与工程学院，银川 750021）
摘 要：初步鉴定宁夏干旱带压砂甜瓜主栽品种玉金香上白粉病病原菌。通过观察病原菌的分生孢子、
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中国农学通报
旨在为生物防治压砂甜瓜白粉病和抗白粉病育种研究 提供参考。 1 材料和方法 1.1 菌株
白粉病病原菌于 2009 年 7—9 月采自宁夏中部干 旱带中卫市鸣沙镇甜瓜主栽品种玉金香发病植株。 1.2 方法 1.2.1 病原菌形态观察
图 3 盆栽试验回接发病植株
cichoucacearum DC）、白粉菌属普生白粉菌（Eysiphe coumunis（Wallr.）Link）、白 粉 菌 属 蓼 白 粉 菌（Eysiphe polygoni DC）、内 丝 白 粉 菌 属 鞑 靼 内 丝 白 粉 菌 （Leveillula taurica（Lev.）Amaud）、单囊壳属单囊壳菌 （Sphaerotheca fulisinea（Schlecht. Ex Fr.）Poll.）和粉孢 霉（Oidium sp.），郑儒永等[6]认为，其中引起中国甜瓜 白粉病最主要的病菌是单囊壳属（Sphacelotheca）和白 粉 属（Erysiphe）两 个 属 ，但 是 为 新 种 ，并 分 别 定 名 为 Eysiphe. curbitacacearum Zheng and chen 和 Sphaerotheca cucurbitae (Jacz.)Z.Y Zhao。 徐 志 豪 等 [7] 研究认为，Sphacelotheca fuliginea 是引起杭州春季白 粉病发生的主要病原菌。单囊壳属单囊壳白粉菌 （Sphacelotheca fuliginea）和 白 粉 属 二 孢 白 粉 菌 （Erysiphe cichoracearum）二者无性阶段形态相似，而 有性阶段的闭囊壳不经常出现，所以给病原物分类鉴 定工作造成困难。Vakalounakis 等[8]提出了两种病菌 的结构差异，根据 Sphacelotheca fuliginea 的分生孢子 是椭圆形、有发达的纤维状体，萌发管叉状或顶端膨
根据对甜瓜白粉病症状和病原菌观察，并通过病 原菌回接试验验证，明确了引起宁夏中部干旱带甜瓜 发生白粉病的病原物为单囊壳属单囊壳白粉菌 （Sphacelotheca fuliginea）。
白粉菌是一类常见的重要植物病原菌。Sitterly[2,5] 报道，有 3 个属 6 个种的真菌均可引起葫芦科植物白粉 病 ，它 们 分 别 是 白 粉 菌 属 二 孢 白 粉 菌（Eysiphe
基金项目：宁夏回族自治区自然科学基金项目“宁夏干旱带甜瓜白粉病拮抗微生物的筛选”压砂甜瓜 白粉病防治的生物农药研制”资助。 第一作者简介：刘建利，男，1973 年出生，讲师，硕士，主要从事微生物分子生物学研究。通信地址：750021 宁夏银川文昌北路北方民族大学生命科学 与工程学院，E-mail：ljl7523@。 收稿日期：2010-01-18，修回日期：2010-02-11。
（1）挑取法制作临时玻片观察子囊、子囊孢子、分 生孢子和萌发管：用挑针从叶上挑取表面的粉状物或 孢子团用乳酚油（苯酚结晶（加热熔化）20 mL，乳酸 20 mL，甘油 40 mL，蒸馏水 20 mL）浮载制成玻片，显 微镜下检视，观察 5 个玻片，每个玻片观察 3 个视野，每 个视野取 5 个孢子用显微测微尺测量孢子大小、萌发 管宽度，取平均值。
(College of Biological Sciences and Engineering, North University for Ethnics, Yinchuan 750021)
Abstract: The study aimed to identify preliminarily powdery mildew on‘Yu Jinxiang’that is the major variety of melon cultivated in lands overlaid with sands of droughty midregion in Ningxia. Identification preliminary have completed in this paper based on morphological characteristics conidia, germ-tube, fibrosin bodies, hypha, and conidiophores of melon powdery mildew under light microscope. The pathogen of melon powdery mildew on‘Yu Jinxiang’is sphacelotheca fuliginea. Sphacelotheca fuliginea could cause powdery mildew on ‘Yu Jinxiang’. Key words: melon cultivated in lands overlaid with sands; powdery mildew; preliminary identification
菌丝、分生孢子梗、萌发管、纤维状体显微形态特征进行初步鉴定。宁夏干旱带压砂甜瓜主栽品种玉金
香上白粉病病原菌初步鉴定为单囊壳属单囊壳白粉菌（sphacelotheca fuliginea）。囊壳属单囊壳白粉菌
侵染是造成宁夏干旱带压砂甜瓜主栽品种玉金香上白粉病病因。
关键词：压砂甜瓜；白粉病；初步鉴定
中图分类号：S3
（4）纤维状体观察：在载玻片上的分生孢子滴 3% 的 KOH 溶液后，在 40 倍的显微镜观察分生孢子上是 否有纤维状体，观察 5 个玻片，每个玻片观察 3 个视野， 每个视野取 10 个分生孢子观察纤维状体个数，取平均 值。 1.2.2 病原菌的致病性检测 根据 Koch 氏法则[4]在保湿 的条件下采用喷粉法进行回接，叶盘法和盆栽接种测 定方法测定病原菌的致病性。
（1）叶盘法：当植株长至 3 片真叶时，用直径 15 mm 打孔器从健康的幼叶上切下叶盘，置于浓度为 0.05%的氯化汞溶液中消毒 3 min，再用无菌水冲洗 2~ 3 次，晾干，正面朝上置于培养皿内的滤纸上，将 1.2.1
观察的白粉病菌的分生孢子按 1:10 的比例与滑石粉 混合均匀，装入指形管或试管内，用单层纱布封住管 口，倒置指形管，轻轻振动，将分生孢子均匀地撒在叶 片上，将培养皿盖上盖，为保持叶盘不至于很快黄化， 需在滤纸上滴入含有苯丙咪唑的营养液（25 mg/L），注 意营养液不要没过叶片上表面，盖上培养皿盖，置人工 光照培养箱（22%，光照 16 h/天）。每 9 个叶盘为 1 个处 理，重复 3 次，以清水为对照。7~10 天后调查。
（3）水合氯醛组织透明法制作临时玻片观察分生 孢子梗：将小块病叶组织，在 95%酒精和冰醋酸混合液 （1:1）中固定 24 h，放在水合氯醛的饱和溶液中(水合氯 醛 5 g，水 2 mL)透明 7 天，中途更换水合氯醛溶液，待 组织透明后取出用水洗净，经 0.05%的苯胺蓝乳酚油 溶液染色，用乳酚油浮载检视，观察 5 个玻片，每个玻 片观察 3 个视野，每个视野取 5 段分生孢子梗用显微测 微尺测量分生孢子梗长度和宽度，取平均值。
文献标志码：A
论文编号：2010-0178
Preliminary Identification of Powdery Mildew on Melon Cultivated in Lands Overlaid with Sands in Ningxia
Liu Jianli, Ren Xian, Jin Ni, Li Qiang, Chen Dan, Zeng Shuyu
接种后 9 天叶盘正面出现白色粉状点，至 10~15 天，面积扩大，逐步形成白粉层（图 2），初步呈现白粉 病症状，镜检粉状物，与 2.1 观察结果相同。 2.3 盆栽法回接实验结果
接种 10 天后叶面上产生白色粉状小霉点，很快扩 大形成白粉层（图 3A），随之蔓延到叶背、叶柄和茎蔓 上，严重时整个植株叶片被白色粉状霉层所覆盖，导致 叶片发黄变褐、质地变脆（图 3B），呈现典型的甜瓜白 粉病症状，采用 1.2.1 方法镜检病叶表面白粉，完全符 合 2.1 观察的形态特征。 3 讨论
（2）透明胶带粘贴法制作临时玻片观察菌丝：将塑 料透明胶带纸剪成边长 5 mm 左右的小块，注意胶带 上不要印有指印，使胶面朝下贴在贴在有真菌生长部 位的叶面上，轻按一下后揭下制成玻片，真菌即粘在胶 带上，将胶带取下放在载玻片上的 1 滴甘油乳酸（乳酸 500 mL，甘油 1 000 mL，中，上面再加 1 滴甘油乳酸，加 盖玻片检视，观察 5 个玻片，每个玻片观察 3 个视野，每 个视野取 5 段菌丝用显微测微尺测量菌丝宽度，取平 均值。
刘建利等：宁夏压砂甜瓜白粉病病原菌初步鉴定
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A：分生孢子；B：萌发管(箭头)；C：纤维状体(箭头)；D：菌丝；E：分生孢子梗
图 1 压砂甜瓜白粉病病原菌显微形态
图 2 叶盘法回接试验感染叶片
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令参 中国农学通报
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A：发病初期；B：发病后期
使宁夏中部干旱带成为名副其实的“中国压砂西甜瓜 之乡”。种植压砂西甜瓜具有明显生态效益、经济效益 和社会效益[1]。
甜瓜白粉病（Melon powdery mildew）为甜瓜的常 见病，分布广泛，发生普遍，春秋两季发病较重，发病率 70%~100%，显著影响甜瓜生产，最高可使甜瓜减产 60%，同时影响甜瓜的成熟度和含糖量，从而影响甜瓜 的品质和商品性。该病的病原菌为甜瓜白粉菌，有子 囊菌亚门真菌白粉菌目的白粉属二孢白粉菌 （Erysiphe cichoracearum）和 单 囊 壳 属 单 囊 壳 白 粉 菌 （Sphacelotheca fuliginea）[2-3]。对宁夏中部干旱带压砂 甜瓜白粉病病原菌的鉴定至今未见报道，此研究对宁 夏中部干旱带压砂甜瓜白粉病病原菌进行初步鉴定，
0 引言 宁夏中部干旱带，年降水 180 mm 左右，蒸发量却
有 2400 mm。距今约一百多年前，当地农民利用大山 的石头沙砾，开始了一种特色种瓜模式——“压砂”，即 在沙砾淤积丰富的冲击扇区域将大量碎沙石覆盖在山 地表层，利用砂砾铺压对地表所具有的节水、增温、保 墒效果生产西瓜（Citrullus lanatus L.）和甜瓜（Cucumis melo L.），这样做的最直接效果是减少了土地荒漠化 面积，提高了土地利用率，同时，海拔 1600~1800 m 高 度得天独厚光热资源又为西瓜和甜瓜中天然葡萄糖、 维生素、氨基酸和多种微量元素，特别是食物中稀缺的 硒元素的积聚提供了独特的自然条件。2008 年压砂 西甜瓜实现 33 万 hm2 种植面积，瓜果产值达到 8 亿元，
所有的病叶上均未观察到子囊和子囊孢子。但分 生孢子可见，分生孢子无色，桶形或椭圆形（图 1A），串 生，长(30±2) μm，宽(15±3) μm。萌发管侧生，不分叉 （图 1B），宽(5±0.5) μm。所有的分生孢子中均有纤维 状体（图 1C），个数 1~10 个，平均 5 个。菌丝无色，有隔 （图 1D），宽(3±0.5) μm。分生孢子梗圆柱状或短棍状 （图 1E），不分枝，无色，有 2~4 个隔膜，长(100±20) μm， 宽(10±2) μm，其上着生分生孢子。初步鉴定宁夏干旱 带压砂甜瓜主栽品种玉金香感染白粉病病原菌为单囊 壳属单囊壳白粉菌（Sphacelotheca fuliginea）。 2.2 叶盘法回接实验结果
中国农学通报 2010,26(14):261-264 Chinese Agricultural Science Bulletin
宁夏压砂甜瓜白粉病病原菌初步鉴定
刘建利，任 贤，金 妮，李 强，陈 丹，曾舒予
（北方民族大学生物科学与工程学院，银川 750021）
摘 要：初步鉴定宁夏干旱带压砂甜瓜主栽品种玉金香上白粉病病原菌。通过观察病原菌的分生孢子、
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中国农学通报
旨在为生物防治压砂甜瓜白粉病和抗白粉病育种研究 提供参考。 1 材料和方法 1.1 菌株
白粉病病原菌于 2009 年 7—9 月采自宁夏中部干 旱带中卫市鸣沙镇甜瓜主栽品种玉金香发病植株。 1.2 方法 1.2.1 病原菌形态观察
图 3 盆栽试验回接发病植株
cichoucacearum DC）、白粉菌属普生白粉菌（Eysiphe coumunis（Wallr.）Link）、白 粉 菌 属 蓼 白 粉 菌（Eysiphe polygoni DC）、内 丝 白 粉 菌 属 鞑 靼 内 丝 白 粉 菌 （Leveillula taurica（Lev.）Amaud）、单囊壳属单囊壳菌 （Sphaerotheca fulisinea（Schlecht. Ex Fr.）Poll.）和粉孢 霉（Oidium sp.），郑儒永等[6]认为，其中引起中国甜瓜 白粉病最主要的病菌是单囊壳属（Sphacelotheca）和白 粉 属（Erysiphe）两 个 属 ，但 是 为 新 种 ，并 分 别 定 名 为 Eysiphe. curbitacacearum Zheng and chen 和 Sphaerotheca cucurbitae (Jacz.)Z.Y Zhao。 徐 志 豪 等 [7] 研究认为，Sphacelotheca fuliginea 是引起杭州春季白 粉病发生的主要病原菌。单囊壳属单囊壳白粉菌 （Sphacelotheca fuliginea）和 白 粉 属 二 孢 白 粉 菌 （Erysiphe cichoracearum）二者无性阶段形态相似，而 有性阶段的闭囊壳不经常出现，所以给病原物分类鉴 定工作造成困难。Vakalounakis 等[8]提出了两种病菌 的结构差异，根据 Sphacelotheca fuliginea 的分生孢子 是椭圆形、有发达的纤维状体，萌发管叉状或顶端膨
根据对甜瓜白粉病症状和病原菌观察，并通过病 原菌回接试验验证，明确了引起宁夏中部干旱带甜瓜 发生白粉病的病原物为单囊壳属单囊壳白粉菌 （Sphacelotheca fuliginea）。
白粉菌是一类常见的重要植物病原菌。Sitterly[2,5] 报道，有 3 个属 6 个种的真菌均可引起葫芦科植物白粉 病 ，它 们 分 别 是 白 粉 菌 属 二 孢 白 粉 菌（Eysiphe
基金项目：宁夏回族自治区自然科学基金项目“宁夏干旱带甜瓜白粉病拮抗微生物的筛选”压砂甜瓜 白粉病防治的生物农药研制”资助。 第一作者简介：刘建利，男，1973 年出生，讲师，硕士，主要从事微生物分子生物学研究。通信地址：750021 宁夏银川文昌北路北方民族大学生命科学 与工程学院，E-mail：ljl7523@。 收稿日期：2010-01-18，修回日期：2010-02-11。
（1）挑取法制作临时玻片观察子囊、子囊孢子、分 生孢子和萌发管：用挑针从叶上挑取表面的粉状物或 孢子团用乳酚油（苯酚结晶（加热熔化）20 mL，乳酸 20 mL，甘油 40 mL，蒸馏水 20 mL）浮载制成玻片，显 微镜下检视，观察 5 个玻片，每个玻片观察 3 个视野，每 个视野取 5 个孢子用显微测微尺测量孢子大小、萌发 管宽度，取平均值。
(College of Biological Sciences and Engineering, North University for Ethnics, Yinchuan 750021)
Abstract: The study aimed to identify preliminarily powdery mildew on‘Yu Jinxiang’that is the major variety of melon cultivated in lands overlaid with sands of droughty midregion in Ningxia. Identification preliminary have completed in this paper based on morphological characteristics conidia, germ-tube, fibrosin bodies, hypha, and conidiophores of melon powdery mildew under light microscope. The pathogen of melon powdery mildew on‘Yu Jinxiang’is sphacelotheca fuliginea. Sphacelotheca fuliginea could cause powdery mildew on ‘Yu Jinxiang’. Key words: melon cultivated in lands overlaid with sands; powdery mildew; preliminary identification
菌丝、分生孢子梗、萌发管、纤维状体显微形态特征进行初步鉴定。宁夏干旱带压砂甜瓜主栽品种玉金
香上白粉病病原菌初步鉴定为单囊壳属单囊壳白粉菌（sphacelotheca fuliginea）。囊壳属单囊壳白粉菌
侵染是造成宁夏干旱带压砂甜瓜主栽品种玉金香上白粉病病因。
关键词：压砂甜瓜；白粉病；初步鉴定
中图分类号：S3
（4）纤维状体观察：在载玻片上的分生孢子滴 3% 的 KOH 溶液后，在 40 倍的显微镜观察分生孢子上是 否有纤维状体，观察 5 个玻片，每个玻片观察 3 个视野， 每个视野取 10 个分生孢子观察纤维状体个数，取平均 值。 1.2.2 病原菌的致病性检测 根据 Koch 氏法则[4]在保湿 的条件下采用喷粉法进行回接，叶盘法和盆栽接种测 定方法测定病原菌的致病性。
（1）叶盘法：当植株长至 3 片真叶时，用直径 15 mm 打孔器从健康的幼叶上切下叶盘，置于浓度为 0.05%的氯化汞溶液中消毒 3 min，再用无菌水冲洗 2~ 3 次，晾干，正面朝上置于培养皿内的滤纸上，将 1.2.1
观察的白粉病菌的分生孢子按 1:10 的比例与滑石粉 混合均匀，装入指形管或试管内，用单层纱布封住管 口，倒置指形管，轻轻振动，将分生孢子均匀地撒在叶 片上，将培养皿盖上盖，为保持叶盘不至于很快黄化， 需在滤纸上滴入含有苯丙咪唑的营养液（25 mg/L），注 意营养液不要没过叶片上表面，盖上培养皿盖，置人工 光照培养箱（22%，光照 16 h/天）。每 9 个叶盘为 1 个处 理，重复 3 次，以清水为对照。7~10 天后调查。
（3）水合氯醛组织透明法制作临时玻片观察分生 孢子梗：将小块病叶组织，在 95%酒精和冰醋酸混合液 （1:1）中固定 24 h，放在水合氯醛的饱和溶液中(水合氯 醛 5 g，水 2 mL)透明 7 天，中途更换水合氯醛溶液，待 组织透明后取出用水洗净，经 0.05%的苯胺蓝乳酚油 溶液染色，用乳酚油浮载检视，观察 5 个玻片，每个玻 片观察 3 个视野，每个视野取 5 段分生孢子梗用显微测 微尺测量分生孢子梗长度和宽度，取平均值。
文献标志码：A
论文编号：2010-0178
Preliminary Identification of Powdery Mildew on Melon Cultivated in Lands Overlaid with Sands in Ningxia
Liu Jianli, Ren Xian, Jin Ni, Li Qiang, Chen Dan, Zeng Shuyu
接种后 9 天叶盘正面出现白色粉状点，至 10~15 天，面积扩大，逐步形成白粉层（图 2），初步呈现白粉 病症状，镜检粉状物，与 2.1 观察结果相同。 2.3 盆栽法回接实验结果
接种 10 天后叶面上产生白色粉状小霉点，很快扩 大形成白粉层（图 3A），随之蔓延到叶背、叶柄和茎蔓 上，严重时整个植株叶片被白色粉状霉层所覆盖，导致 叶片发黄变褐、质地变脆（图 3B），呈现典型的甜瓜白 粉病症状，采用 1.2.1 方法镜检病叶表面白粉，完全符 合 2.1 观察的形态特征。 3 讨论
（2）透明胶带粘贴法制作临时玻片观察菌丝：将塑 料透明胶带纸剪成边长 5 mm 左右的小块，注意胶带 上不要印有指印，使胶面朝下贴在贴在有真菌生长部 位的叶面上，轻按一下后揭下制成玻片，真菌即粘在胶 带上，将胶带取下放在载玻片上的 1 滴甘油乳酸（乳酸 500 mL，甘油 1 000 mL，中，上面再加 1 滴甘油乳酸，加 盖玻片检视，观察 5 个玻片，每个玻片观察 3 个视野，每 个视野取 5 段菌丝用显微测微尺测量菌丝宽度，取平 均值。