ZQ使用--waters液质联用仪的使用

.开机步骤1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。

2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。

（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。

a. 打开脱气机 (Degasser On)。

b. 湿灌注(Wet Prime)。

c. Purge Injector。

d. 平衡色谱柱。

3. 双击桌面上的 MassLynx4.0图标进入质谱软件。

注：如果进入Masslynx软件时出现提示：“The embedded system is not responding, The system will run in standalone mode”，则说明质谱内置的CPU(EPC)与电脑主机的通讯联系还未建立，此时无法控制质谱，请稍等后再进入软件，如果打开软件仅为处理数据则没有关系（质谱主机电源未开时进入软件也会有同样提示）。

4. 检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。

5. 点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。

6. 选择菜单“Options – Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。

几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。

7. 点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。

8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。

9. 设置源温度（Source Temp）到目标温度。

质谱调谐窗口各项参数设定电喷雾电离源（ESI）1. 在质谱调谐窗口选定要使用的离子模式。

2. 点击进入下面Source界面，设定Source界面里的各项参数。

Capillary(KV) 加在ESI源内毛细管上的高压，正离子模式一般是在2.5-3.75KV 之间优化，负离子模式一般是在2.0-3.0KV之间优化。

在负离子模式时，如果毛细管电压设置过高容易引起放电现象。

Cone(V)样品锥孔电压，一般在10-100V之间优化，通常来说，分子量小的样品选择的锥孔电压要相对小，当提高锥孔电压时，可能得到的碎片信息会多一些。

Extractor (V)二级锥孔电压，一般在0－5V之间优化。

RF Len(V)六级杆透镜电压，一般在0－0.5V之间优化。

Source Temp源温度，一般在80℃－120℃之间优化，一般来讲，温度的设定与进入质谱流动相流速大小有关。

如果用注射泵直接进样，流速在5－4uL/min时，设为80℃，当液相色谱流速在100－300uL/min时，设定为120－150℃。

Desolvation Temp脱溶剂气温度，一般在120℃－300℃之间优化，与流动相流速大小、流动相含水比例高低、是否容易气化相关。

用注射泵直接进样，流速在5－40uL/min时，设为120℃，当液相色谱流速在100－300uL/min时，设为300℃。

Desolvation (L/hr)脱溶剂气流量，一般在300－1000L/Hour之间优化，与流动相流速大小、流动相含水比例高低、是否容易气化相关。

Cone(L/hr) 锥孔气的流量，一般在0－100L/Hour之间优化。

3. 点击图标，进入Analyser界面，设定Analyser界面里的各项参数。

LM Resolution低质量数分辨率，典型值 15.0。

HM Resolution高质量数分辨率，典型值 15.0。

一般来讲，分辨率越高，灵敏度越低，分辨率越差，灵敏度越高。

注意：当改变分辨率的时候，质量数也会有轻微的偏移，所以在不同分辨率的条件下，应该做质量数校正。

Ion Energy离子能量，一般在0－1之间优化。

Multiplier光电倍增管电压，典型值650V。

大气压化学电离源（APCI）Corona 高压放电针电流，正离子模式一般在0－10uA之间优化，负离子模式一般在0－5uA之间优化。

Source Temp源温度，一般在120℃－150℃之间优化。

APCI Probe Temp APCI加热器温度，一般在300℃－600℃之间优化。

其余参数设定与ESI相同。

创建项目和打开项目（ Project）为了便于进行数据管理，可以创建不同的项目（Project），项目的后缀为 .pro，每个项目都有对应的子目录进行相应文件的管理。

1. 从主菜单中选择“File –Project Wizard”，会引导你去创建一个新的项目。

2. 输入项目名称（Project name）、描述(Description)、存放的路径(Location)，点击“Next”，进入下一步。

3. 选择a) Create new project，完全新建一个项目。

b) Current project as Template，将会把上一次所使用项目的子目录（Acqudb、Methdb、Sampledb）里的方法拷贝到你新建的项目中去。

c) Create using existing project as template，选择某项目，并把该项目里的方法拷贝到你新建的项目中去（公司建议用户选择Default.pro为母板进行项目创建）4. 点击 Finish，新的项目会被创建，而且软件会自动切换到新的项目中。

注意：你会看见一个提示“current sample list is invalid” ，没有关系，（因为现在的样品表是空的）点击OK 并继续。

5. 若要打开另外一个项目，在软件主界面选择，或File－Open Project，选择要打开的项目。

每个项目包括5个子目录：a) Acqudb 所有采集方法文件，包括质谱方法(*.exp)、液相方法(*.wat)、已存的调谐文件(*.ipr)、质量校正文件(*.cal)。

b) Curvedb 定量校正曲线。

c) Data 已采集的数据文件(*.raw)。

d) Methdb 定量方法。

e) Peakdb 峰列表。

f) Sampledb样品表(*.spl)。

质量校正质量校正（Calibration）是与仪器的调谐（Tuning optimization）分开进行的，为了保证质量的准确，在仪器安装及维护后，必须进行校正，或者按照您所制定的标准操作程序进行。

通常质谱被校正后，校正结果可以被储存起来，以备日后调用。

ZQ 采用的是金属钼四级杆，非常稳定，日常工作情况下质谱是不用校正的，只需调用以前做的校正表即可。

1. 双击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱校正和调谐窗口。

2. 点击真空状态图标去检查真空状态，以确认真空已达到要求。

注意：如果ZQ在放空状态（ vented），选择菜单，“Options –Pump”这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵开始抽真空，几分钟后，ZQ会达到真空要求，ZQ前面板的状态灯“Vacuum”将变绿。

3. 点击分析表头并输入下列参数，如果需要进行其他不同分辨率条件下的校正，则对应输入LM Resolution和HM Resolution的值。

Settings Generic Start ConditionsLM Resolution 15HM Resolution 15Ion Energy 0.5Multiplier 650Syringe Pump Flow 10注意: 必须按回车键（Enter）才能使参数被输入。

选择，Ion Mode – Electrospray + ，在Electrospray + 条件下所做的校正可以用于其他所有方式。

4. 点击，按下表输入源参数，做校正时采用下列常规的Electrospray+ 条件。

Settings < 250 ul/minCapillary (kV) 3.5Cone (V) 30Extractor (V) 3RF lens (V) 0.3Source Temp 100Desolvation Temp 200Gas Flow - Desolvation 350Gas Flow- Cone 505. 点击气体图标打开氮气。

6. 点击操作按钮（Operate ）。

当质谱的所有电压及温度被加上时, 操作按钮的颜色会从红变为绿。

7. 将250ul 进样针抽满校正液(Sodium Iodide with Ceasium Iodide) 并安装在质谱下方的注射泵上，设定注射泵流速为10ul/min。

8. 从调谐界面选择 Options – Syringe Type，确认被选定 (如果用其它的进样针，可以从表中去选择，或者自己重新定义)。

9. 按下注射器图标（syringe），注射泵开始转动向质谱输入校正液。

10. 要选择想监测的质量数，请在相应的Reference File 里查找。

11. 在Mass 编辑器，打开4个mass 窗口，分别设定172.8840、622.5667、1072.2494、1971.6149。

将监测范围（ span）和增益（ gain ）调到适当的值。

12. 选择 File – Open，选择 Uncal.cal 并打开，校正窗口的三种校正类型都必须显示“NoCalibration”(如上图所示)，如果不是，点击Calibrate - Default 去删除这些校正。

13. 从菜单栏选择校正（Calibration）。

14. 在Reference file中选择校正文件NaCis2(ZQ2000用)，NaCis4(ZQ4000用)。

15. 从菜单栏选择“Calibrate –Start Acquisition”。

16. 在校正类型界面，三项都打勾选定，接着选择采集参数按钮。

17. 选择参数：注意：以下设置适合于ZQ 2000 –其他质量数范围或扫描速度可以重新设置，或者点击Default自动定义。

18. 点击OK返回到自动校正对话栏。

19. 选择采集（Acquire）和校正（Calibrate），点击OK 开始校正，质谱将会自动运行校正并和参考文件(NaCis)中的标准质量数进行比对，采集和校正大约需要2分钟时间。

20. 从校正页面选择 File – Save As，并输入校正文件的名称。

注意:这些校正文件可以使用到你所制定的标准操作规程需要你去重新校正，或者怀疑质量精度，以及改变了低端，高端质量数分辨率（LM, HM resolution）的时候。

ZQ现在已经被校正了，下一步可以用调谐界面去优化你的样品的检测灵敏度。

调谐（Tuning）质谱针对特定的样品都有其特定的最佳化条件，了解样品特性，如何选择电离源，流动相及流动相添加物，使样品能够离子化是关键。