分子生物学实验课考试资料
分子生物学大实验习题及解答(精)
分子生物学大实验习题及解答一、名词解释1、genome；2、基因芯片；3、持家基因；4、Operon；5、感受态细胞；6、逆转录酶；7、PCR技术；8、转化；9、重组DNA技术；10、基因沉默；11、hnRNA；12、复制子；13、反义RNA；14、衰减子；15、拟基因；16、RNA编辑；17、颠换；18、拓扑异构酶；19、变性；20、转座子二、基础理论单项选择题1、DNA连接酶的作用为（）A、合成RNA引物B、将双螺旋解链C、去除引物、填补空隙D、使双螺旋DNA链缺口的两个末端连接2、DNA复制中RNA引物的主要作用是( )。
A、引导合成冈奇片段B、作为合成冈奇片段的模板C、为DNA合成原料dNTP 提供附着点D、激活DNA聚合酶3、下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分（）A、 H1B、H2A 、H2BC、 H3、H4D、 H54、DNA的变性：（）A、包括双螺旋的解旋B、可以由低温产生C、是可逆的D、是磷酸二酯键的断裂5、转录需要的原料是:（）A、 dNTPB、 dNDPC、 dNMPD、 NTP6、在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核甘酸：A、DNA聚合酶ⅢB、 DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅠD、外切核酸酶MFl7、下真核生物复制起始点的特征包括（）A、富含GC区B、富含AT区C、 Z DNAD、无明显特征8、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同9、DNA复制时不需要以下哪种酶？（）A、 DNA指导的DNA聚合酶B、RNA指导的DNA聚合酶C、拓扑异构酶D、连接酶10、1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是：（）A、从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂B、DNA突变导致毒性丧失C、生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能D、DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子11、利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一个地方的遗传元件叫（）A、启动子B、转座子C、T-DNAD、顺反子12、原核DNA合成酶中（）的主要功能是合成前导链和冈崎片段A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、引物酶13、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。
生物化学及分子生物学实验考试-图文
生物化学及分子生物学实验考试-图文一、实验原理步骤：1、分子克隆总流程：分子克隆：在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。
常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。
流程：（1）带有目的基因的DNA片段的获得——PCR引物设计，PCR获得。
（2）重组DNA分子的构建——与载体酶切连接。
（3）重组DNA分子的转化和重组克隆的筛选——转化，培养，筛选（4）检测——菌落PCR检测，粗提质粒检测，酶切检测，精提质粒测序。
2、质粒DNA的提取及鉴定一一碱裂解法原理：根据共价闭合环状质粒DNA和线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离质粒DNA。
在pH12.0-12.5,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，质粒DNA的氢键断裂，但两条互补链仍紧密结合。
当加入pH4.8的KAc高盐缓冲液中和pH至中性时，共价闭合环状的质粒DNA复性迅速而准确，而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，复性慢，缠绕形成网状结构。
通过离心，染色体DNA与RNA、蛋白质-SDS复合物等一起絮状沉淀下来而被除去。
步骤：1、细菌培养和收集①将3ml含Kan的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37°C振荡培养过夜。
（已完成）②取2.5mL培养物倒入微量离心管（EP管）中，10000rpm离心lmin,吸去培养液。
2、细菌裂解及质粒的提取③将细胞沉淀悬浮于100ul溶液I中,充分震荡混匀。
④加200ul溶液II（新鲜配制），盖紧管盖，轻轻混匀内容物，将离心管放冰上5min。
⑤加150ul溶液III（冰上预冷），盖紧管口，轻轻颠倒数次使混匀。
冰上放置10min。
⑥12000rpm离心10min,将上清转至另一EP管（作好标记）中。
分子生物学习题库与参考答案
分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
分子生物学考试资料
第一二章遗传物质的分子本质基因工程:分、切、接、转、筛遗传物质的发现：肺炎双球菌的体内转化实验（格里菲斯）（a）将光滑型肺炎双球菌注入小鼠体内，使小鼠致死。
（b）将粗糙型肺炎双球菌注入小鼠体内，对小鼠无害。
（c）将光滑型肺炎双球菌加热杀死后，再注入小鼠体内，对小鼠无害。
（d）将加热杀死的光滑型肺炎双球菌与粗糙型肺炎双球菌一起注入小鼠体内，小鼠死掉。
结论：加热杀死的S型细菌中，含有某种促成R型细菌转化为S型细菌的“转化因子”肺炎双球菌的体外转化实验艾弗里及同事取S型细菌，分离出其中的DNA，蛋白质，多糖以及将DNA与DNA酶混合，将以上四组分分别于R型细菌培养基混合培养；结果除有DNA组的培养液中既能分离出R型细菌又能分离出S型细菌，其余各组均只有R型细菌。
结论：只有DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。
DNA作为遗传物质的证实：噬菌体侵染细胞的实验用放射性同位素35S标记蛋白质，32P标记DNA，，用标记的噬菌体感染细菌，发现只有标记的DNA进入细菌细胞内，而标记的蛋白质留在细胞外。
结论：DNA是遗传物质。
证明DNA的半保留复制将大肠杆菌放在15N为唯一氮源的培养基上连续培养，使细胞内的DNA两条链上的14N被15N取代，收集菌体，一部分用于抽取DNA，一部分放在14N为氮源的培养基中继续培养一代，一部分提取DNA，另一部分继续培养，再提取DNA,用CsCl密度梯度离心的方法，发现0代为一条高密度带，两条链上的N原子全部是15N，第一代为中密度带，第二代中有中密度带和低密度两条带。
DNA的提取：1. 细胞裂解2. 去除蛋白等杂质（酚：氯仿：异戊醇25:24:1）3. 沉淀DNA（乙醇，异丙醇）4. 风干DNA5. 溶解DNA细胞破碎：①机械方法：超声波处理法、研磨法（植物叶）匀浆法（动物组织）；②化学试剂法：用SDS、CTAB（植物组织）；③酶解法：加入溶菌酶或蜗牛酶，都可使细胞壁破碎。
DNA的测序：Sanger的双脱氧终止法核酸模板在核酸聚合酶、引物、四种单脱氧碱基存在条件下复制或转录时，如果在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，只要双脱氧碱基掺入链端，该链就停止延长，链端掺入单脱氧碱基的片段可继续延长。
分子生物学考试题及答案
分子生物学考试题及答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.DNA复制时，子代DNA的合成是A、一条链以5’→3’合成，另一条链以3’→5’合成B、两条链均以3’→5’合成C、两条链均以5’→3’合成D、两条链先以3’→5’生成冈崎片段，再连接成长链E、两条链先以5’→3’生成冈崎片段，再连接成长链正确答案：C2.比较复制和转录的聚合酶，错误的说法是A、底物不同B、催化聚合反应的方向不同C、碱基配对略有不同D、产物不同E、模板链不同正确答案：B3.大肠杆菌基因组DNA复制的起始与哪种碱基的修饰有关A、AB、GC、TD、CE、U正确答案：A4.质粒DNA导入细菌的过程称为A、转化B、转染C、感染D、传染E、连接正确答案：A5.指导合成真核生物蛋白质的序列主要是A、高度重复序列B、中度重复序列C、单拷贝序列D、卫星DNAE、反向重复序列正确答案：C6.关于真核生物的RNA聚合酶，说法正确的是A、RNA聚合酶II对鹅膏蕈碱极敏感B、RNA聚合酶I的转录产物往往是小分子RNAC、RNA聚合酶的氨基端重复序列可发生磷酸化D、不一定需要蛋白质因子辅助E、RNA聚合酶III的转录产物是45S rRNA正确答案：A7.DNA半保留复制需要A、DNA指导的RNA聚合酶B、引物酶C、延长因子D、终止因子E、mRNA正确答案：B8.下列物质中，能够辅助真核生物的RNA聚合酶结合启动子的是A、起始因子B、增强子C、转录因子D、延长因子E、σ因子正确答案：C9.在重组DNA技术中，能特异切割DNA的酶是A、限制性核酸内切酶B、核酸外切酶C、核酶D、DNA酶E、DNA连接酶正确答案：A10.不属于直接进入蛋白质合成的氨基酸是A、胱氨酸B、瓜氨酸C、精氨酸D、谷氨酰胺E、羟赖氨酸正确答案：B11.真核生物的RNA聚合酶有几种A、1B、2C、3D、4E、5正确答案：C12.哪一条单股DNA片段在双链状态下不能形成回文结构A、ATGCGCATB、ACTGCAGTC、GTCATGACD、AGTGCACTE、ACTGCATG正确答案：E13.原核生物的基因组主要存在于A、类核B、质粒C、高尔基体D、线粒体E、核糖体正确答案：A14.乳糖操纵子模型是在哪个环节上调节基因表达A、转录后水平B、翻译后水平C、转录水平D、复制水平E、翻译水平正确答案：C15.基因有两条链，与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做A、有义链B、反义链C、重链D、cDNA链E、模板链正确答案：A16.下列哪种氨基酸在转录因子的转录激活结构域中含量丰富A、LysB、ArgC、AspD、HisE、Trp正确答案：C17.下列过程中不需要RNA引物的是A、前导链生成B、随后链生成C、冈崎片段生成D、DNA复制E、DNA转录正确答案：E18.大肠杆菌可以采用哪种方式调控转录终止A、阻遏作用B、去阻遏作用C、反义控制D、衰减作用E、降低转录产物的稳定性正确答案：D19.真核生物II类基因的启动子核心序列通常位于A、+1区B、–10区C、+10区D、–25区E、–35区正确答案：D20.蛋白质合成时，每增加1个肽键至少需要消耗几个高能磷酸键A、2B、3C、1D、5E、4正确答案：A21.真核生物中，与原核生物的Pribnow box功能相当的是A、GC boxB、CAAT boxC、CACA boxD、八聚体（8 bp）元件E、Hogness box正确答案：E22.3’→5’ 核酸外切酶能切除A、单链DNA的5’末端核苷酸B、单链DNA的3’末端核苷酸C、双链DNA的5’末端核苷酸D、双链DNA的3’末端核苷酸E、以上均可正确答案：B23.乳糖操纵子中，能结合别位乳糖（诱导剂）的物质是A、AraCB、cAMPC、阻遏蛋白D、转录因子E、CAP正确答案：C24.核酸分子杂交试验不能用于A、单链DNA分子之间的杂交B、单链DNA分子与RNA之间的杂交C、抗原与抗体分子之间的杂交D、基因组DNA与PCR产物之间的杂交E、RNA与RNA之间的杂交正确答案：C25.关于真核生物的转录延长，说法正确的是A、组蛋白发生磷酸化利于核小体解聚B、组蛋白发生乙酰化利于核小体解聚C、转录延长的同时出现多聚核蛋白体现象D、延长因子辅助RNA聚合酶催化核苷酸加入E、转录前后，核小体解聚并在原位重新聚合正确答案：B26.关于各种原核生物RNA聚合酶的σ亚基，描述错误的是A、种类很多B、分子量不同C、参与转录延长过程D、与转录起始点相结合E、决定转录的特异性正确答案：C27.真核生物中，RNA聚合酶II的转录产物是A、45S rRNAB、5S rRNAC、tRNAD、U6 snRNAE、hnRNA正确答案：E28.高等动物的DNA复制起始位点为A、CAAT盒B、TATA盒C、微卫星序列D、ori CE、以上都不是正确答案：E29.蛋白质合成时消耗能量的步骤发生在① 氨基酸活化② 进位③ 成肽④ 转位⑤ 新生肽链的释放A、① ＋② ＋④ ＋⑤B、① ＋④ ＋⑤C、① ＋③ ＋⑤D、① ＋② ＋④E、① ＋② ＋③正确答案：D30.确切地讲，cDNA文库包含A、一个物种的全部基因信息B、一个物种的全部mRNA信息C、一个生物体组织或细胞的全部基因信息D、一个生物体组织或细胞的全部RNA信息E、一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息正确答案：E31.原核生物的RNA聚合酶有几种A、1B、2C、3D、4E、5正确答案：A32.大肠杆菌的转录全过程始终需要A、αββ'ωB、α2β2β'ωC、αβ2β'ωD、αββ'2ωE、α2ββ'ω正确答案：E33.相对载体而言，插入的DNA片段称为A、筛选基因B、可调节基因C、外源DNAD、cDNAE、基因组DNA正确答案：C34.在上题所述的条件下，细菌在营养丰富的培养基中每20分钟分裂一次，即第一轮复制尚未完成就开始第二轮复制，此时染色体有几个复制叉A、4B、10C、8D、2E、6正确答案：E35.核蛋白体调控转录终止的典型例子是A、乳糖操纵子B、半乳糖操纵子C、阿拉伯糖操纵子D、色氨酸操纵子E、以上都不对正确答案：D36.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶是A、对称的二聚体B、不对称的二聚体C、一条多肽D、对称的三聚体E、不对称的三聚体正确答案：B37.关于真核生物DNA聚合酶的说法错误的是A、DNA 聚合酶α参与引发作用B、DNA 聚合酶δ主要催化DNA链的生成C、DNA聚合酶β催化线粒体DNA的生成D、PCNA参与DNA 聚合酶δ的催化作用E、真核生物DNA 聚合酶有α、β、γ、δ和ε 5种正确答案：C38.关于起始tRNA说法错误的是A、在肽链延长阶段，起始tRNA不能继续运输蛋氨酸B、原核与真核起始tRNA所携带的氨基酸不同C、真核生物中识别AUG的tRNA至少有两种D、原核生物的起始tRNA可以辨认AUG、GUG和UUGE、原核生物的起始tRNA可以运输N－甲酰甲硫氨酸、缬氨酸和亮氨酸正确答案：E39.抑制真核生物蛋白质合成的抗生素是A、四环素B、链霉素C、新霉素D、氯霉素E、放线菌酮正确答案：E40.用于测序的DNA末端终止法中不需要A、四种脱氧核苷酸（dNTP）B、四种双脱氧核苷酸（ddNTP）C、DNA聚合酶D、32P标记的一种dNTPE、DNA连接酶正确答案：E41.关于色氨酸操纵子的调控，正确的说法是A、色氨酸存在时，仅生成前导mRNAB、色氨酸不足时，转录提前终止C、是翻译水平的调控D、具有抗终止作用E、依赖ρ因子进行转录调控正确答案：A42.重组DNA能在含氨苄青霉素的培养基上生长是因为A、抗生素失效B、抗生素过少C、细菌过多D、载体含有氨苄青霉素抗性基因E、以上都不是正确答案：D43.限制性核酸内切酶A、识别并切割RNA的特异序列B、识别并切割DNA的特异序列C、限制并保护自身的DNAD、具有统一的识别和切割位点E、以上都不对正确答案：B44.与原核生物相比较，真核生物的基因表达调控包括多个层次，下列哪项不是其调控复杂性特有的分子基础A、细胞内被膜性结构分隔形成多个区域B、含有重复序列C、染色质结构D、断裂基因E、转录与翻译分离正确答案：B45.用非特异性核酸酶酶切真核细胞的染色质DNA时，大多数情况下可得到约200 bp的片段，其主要原因是A、DNA片段较短B、每个核小体单位包含约200 bp的DNAC、核酸酶没有特异性D、基因组结构简单E、DNA是线性的正确答案：B46.一种生物单倍体所具有的全部基因称为A、信息库B、基因库C、基因型频率D、基因频率E、基因组正确答案：E47.DNA分子的体外连接方法包括A、合成接头B、Klenow补平C、粘端连接D、平端连接E、以上都对正确答案：E48.引物酶的作用是A、松弛DNA正超螺旋B、催化DNA链延长C、解开DNA双链D、稳定DNA单链E、合成RNA引物正确答案：E49.下列对大肠杆菌DNA聚合酶I活性的描述，哪项是错误的A、5’→3’聚合活性B、5’→3’外切活性C、3’→5’聚合活性D、3’→5’外切活性E、参与RNA引物的切除正确答案：C50.有关基础转录因子的叙述，正确的是A、与非转录核心序列相结合B、决定基因表达的特异性C、其种类和数量在不同组织中差别很大D、辅助RNA聚合酶结合启动子E、在原核生物中的种类比真核生物少正确答案：D51.生命活动涉及核酸和蛋白质两类生物大分子之间的相互作用，下列物质中不属于核酸－蛋白质复合物的是A、mRNPB、splicesomeC、SRPD、telomereE、ribozyme正确答案：E52.关于转录和复制的相同点，说法错误的是A、核苷酸以3', 5'－磷酸二酯键连接B、以DNA为模板C、原料为dNTP或NTP，组成核酸链的是dNMP或NMPD、产物可与变性的模板杂交E、新生核酸链的延伸方向是3' → 5'正确答案：D53.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指A、建立单克隆抗体B、建立多克隆抗体C、构建重组DNA分子D、无性繁殖DNAE、有性繁殖DNA正确答案：D54.关于DNA复制时所需引物，错误说法是A、引物是由特殊的RNA聚合酶合成的B、前导链只有一个引物C、随后链有多个引物D、引物的消除由引物酶完成E、引物对于DNA复制是必需的正确答案：D55.目前使用最广的将外源基因注入动物受精卵的方法是A、精子载体法B、胚胎干细胞法C、显微注射法D、逆转录病毒载体法E、脂质体包裹法正确答案：C56.RNA引物位于A、前导链和随后链的5’端B、前导链和随后链的3’端C、仅冈崎片段的5’端D、仅冈崎片段的3’端E、前导链和冈崎片段的5’端正确答案：E57.真核生物细胞DNA复制的特点是A、冈崎片段较短B、复制叉前进速度快C、仅有一个复制起始点D、在细胞周期G2期最活跃E、DNA聚合酶Ⅲ催化延长正确答案：A58.新的DNA链开始合成的位置在A、DNA链的3’-OH端B、RNA引物的3’-OH端C、DNA链的5’末端D、RNA引物的5’末端E、以上均可正确答案：B59.DNA序列自动化测定中不正确的描述是A、荧光标记代替同位素标记B、激光扫描分析代替人工读序C、测序原理与手工测序基本相同D、不需要引物E、需要模板正确答案：D60.大肠杆菌DNA聚合酶的哪个亚基可以形成滑卡式结构A、αB、βC、γD、δE、ε正确答案：B61.真核生物中催化合成tRNA的酶是A、α2ββ'B、α2ββ'σC、RNA polymerase ID、RNA polymerase IIE、RNA polymerase III正确答案：E62.真核生物染色质的基本结构单位是A、核小体B、结构域C、质粒D、ß-片层E、α-螺旋正确答案：A63.真核生物合成mRNA的起始阶段不涉及A、Hogness boxB、release factorC、transcriptional factorD、RNA-pol IIE、cis-acting element正确答案：B64.关于复制体，正确说法是A、复制体即引发体B、复制体即DNA亲代双链C、复制体即新合成的DNA子链D、复制体即DNA链和各种酶、蛋白质因子E、复制体即分布在复制叉上与复制有关的各种酶和蛋白质因子正确答案：E65.引导新生多肽链靶向输送到细胞核的核酸序列称为A、signal peptideB、NLSC、KDELD、MLSE、SD正确答案：B66.DNA复制时，模板序列是5’-TAGA-3’，将合成下列哪种互补结构A、5’-TCTA-3’B、5’-ATCA-3’C、5’-UCUA-3’D、5’-GCGA-3’E、5’-AGAT-3’正确答案：A67.基因表达包括① 复制② 转录③ 逆转录④ 翻译A、① ＋② ＋④B、② ＋④C、① ＋③D、① ＋②E、③ ＋④正确答案：B68.对重组体进行筛选,证明外源基因已经表达了的方法是A、RT-PCRB、Northern印迹C、Western印迹D、原位杂交E、以上都正确正确答案：E69.真核生物的RNA聚合酶发生哪种修饰后，进入转录延长阶段A、磷酸化B、去磷酸化C、甲基化D、去甲基化E、乙酰化正确答案：A70.原核生物RNA聚合酶的σ亚基辨认转录起始点的实质是A、DNA－蛋白质相互作用B、RNA－蛋白质相互作用C、蛋白质－蛋白质相互作用D、DNA－DNA相互作用E、DNA－RNA相互作用正确答案：A71.下列关于cDNA文库的叙述中，错误的是A、从特定组织或细胞中提取DNAB、从特定组织或细胞中提取RNAC、由反转录酶催化合成与mRNA互补的单链DNAD、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAE、双链DNA与合适载体连接后转入受体菌正确答案：A72.关于逆转录酶的描述，错误的是A、底物是dNMPB、具有RNA指导的DNA聚合酶活性C、具有DNA指导的DNA聚合酶活性D、可特异性的降解RNA-DNA杂交体上的RNAE、需要tRNA作为引物正确答案：A73.IPTG诱导乳糖操纵子表达的机制是A、使乳糖－阻遏蛋白复合物解离B、与阻遏蛋白结合，使之丧失DNA结合能力C、与乳糖竞争结合阻遏蛋白D、与RNA聚合酶结合，使之通过操纵序列E、变构修饰RNA聚合酶，提高其活性正确答案：B74.下列哪一类分子常具有亮氨酸拉链的结构特征A、G蛋白B、酪氨酸蛋白激酶受体C、生长因子D、转录因子E. 丝/苏氨酸蛋白激酶正确答案：D75.DNA经限制性核酸内切酶切割后，断端易于首尾连接，自行成环。
分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案(整理版)
一、选择题
1.DNA双螺旋结构是由哪两种碱基之间的氢键支撑的？ A. 腺嘌呤和胸腺嘧啶
B. 腺嘌呤和鳌酷嘧啶
C. 胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
D. 腺嘌呤和胸腺嘧啶、胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
2.在RNA转录中，哪种RNA是由RNA聚合酶合成的？ A. mRNA
B. rRNA
C. tRNA
D. snRNA
3.下列哪个过程不属于DNA复制中的信息单向传递过程？ A. 串联扭曲
B. 连续DNA合成
C. 不连续DNA合成
D. 缺氧齿合
二、填空题
1.DNA双螺旋结构中，两根链之间的碱基互为__________。
2.在生物细胞中，DNA的复制是由__________完成的。
3.参与DNA复制的酶包括DNA__________酶、DNA__________酶和
DNA__________酶。
三、简答题
1.请简要说明DNA双螺旋结构的特点和形成方式。
2.什么是DNA复制？简要描述DNA复制的过程。
四、解答题
1.请根据你的理解，解释DNA复制的半保留复制特点。
2.试分析DNA复制过程中可能出现的错误及其纠正机制。
以上为分子生物学试题及答案的整理版，希望能对您的学习有所帮助。
分子生物学实验 考题
2005－2006学年第二学期考试试题答案考试科目：现代分子生物学大实验考试时间：120分钟试卷总分100分一、名词解释（本大题共5小题，每小题3分，总计15分）1、探针：能够与靶分子特异结合的核酸分子，带有供杂交后检测的合适标记物。
2、显色反应：在IPTG的诱导下，载体可与宿主菌产生有活性的β-半乳糖苷酶，此酶能使显色底物X-gal分解成不溶于水的蓝色化合物，从而使菌落变蓝。
若有外源片段插入此位点，则使载体的β-半乳糖苷酶基因失活，不能形成有活性的β-半乳糖苷全酶，X-gal 不能被分解，菌落为白色。
3、PCR：聚合酶链式反应，在聚合酶、引物、buffer、模板、dNTPs存在的条件下，经过变性、退火、延伸3步多个循环后，使模板上介于两个引物之间的特异性DNA片段得到大量复制。
4、质粒：独立于染色体DNA之外的，能稳定遗传的共价闭合双链DNA分子。
5、BLAST：是基本的局部对比排列搜索工具（basic local alignment search tool）的简称。
可以从数据库中找出与查询序列的某些子序列相似的子序列。
二、填空题（本大题共5小题，每小题3分，总计15分）1、染色体DNA、结构的大小差异2、最快，最慢，中间3、3.24、乳糖，操纵子5、IPTG浓度、诱导时间、诱导温度6、电荷效应、分子筛效应、还具有浓缩效应7、等电聚焦（IEF）二、简答题（本大题共4小题，每小题10分，总计40分）1、如有一核苷酸序列A，未知其功能，请用至少一种方法对其进行初步地功能标示。
答：通过国际生物信息数据库，如美国国立生物信息中心，对未知序列A进行基本局部序列比对BLAST，找到与其同源性较高的序列，将其功能用来注释未知序列（6分）。
步骤如下：登录,点击BLAST网页，在序列对话框内粘贴序列A，点击BLAST按钮，等待其返回同源性结果，选择含有mRNA序列的GenBank文件，将其功能作为未知序列的功能（10分）。
教学生物实验中的分子生物学技术考核试卷
19. ABCD
20. ABC
三、填空题
1.互补
2.翻译
3. DNA聚合酶
4. 30亿
5. Western blot
6. BLAST
7.引物1、引物2、引物3
8.核酸内切
9.线粒体
10.三级结构
四、判断题
1. √
2. √
3. √
4. √
5. ×
6. ×
7. √
8. √
9. ×
10. √
14. A
15. B
16. D
17. A
18. C
19. A
20. A
二、多选题
1. ABC
2. ABC
3. ABC
4. AB
5. ABC
6. BC
7. ABCD
8. ABC
9. ABC
10. ABC
11. ABCD
12. ABC
13. ABC
14. ABCD
15. AB
16. ABCD
17. ABC
8.下列哪种技术用于蛋白质的分离？（）
A. PCR
B.电泳
C. X射线晶体学
D.亲和层析
9.哪个过程负责将DNA上的信息转化为蛋白质？（）
A.转录
B.翻译
C.克隆
D.突变
10.下列哪种酶在DNA复制过程中起关键作用？（）
A. DNA聚合酶
B. DNA连接酶
C.逆转录酶
D.限制性内切酶
11.在分子生物学中，SDS-PAGE主要用于？（）
C. PhyML
D. GROMACS
18.下列哪些是实验室常用的细胞培养技术？（）
分子生物学试题及答案+实验
现代分子生物学第1讲绪论第2讲DNA结构第3讲染色体第4讲DNA复制第5讲DNA损伤、修复和DNA转座第6讲RNA转录第7讲蛋白质翻译第8讲原核生物基因表达调控第9讲真核生物基因表达调控（考试不考）第四版第1讲对应书本第1章P1-18 复习1第2-5讲对应书本第2章P21-70 复习2-9第6讲对应书本第3章P72-113 复习10第7讲对应书本第4章P116-164 复习11第8讲对应书本第7章P246-292 复习12第9讲对应书本第8章P294-360 复习13（考试不考）考试题型1.名词解释（英文）：21’=3’*72.单项选择：18’=1’*183.简答：35’=7’*54.论述：16’=16’*15.实验；10’=10’*1复习11.What is Molecular Biology?Molecular biology seeks to explain the relationships between the structure and function of biological molecules and how these relationships contribute to the operation and control of biochemical processes. ---Turner et al.广义的分子生物学Molecular Biology：蛋白质及核算等大分子结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴，即从分子水平阐明生命现象和生物学规律。
Molecular biology is the study of genes and their activities at the molecular level,including transcription,translation,DNA replication, recombination and translocation.--- Robert Weaver狭义的分子生物学Molecular Biology：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控等过程，当然也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究基因的分子生物学。
分子生物学实验理论及操作答案
实验答案一、基本原理题1、限制性内切酶有那些特点？①能识别双链分子的某种特定核苷酸序列②使每条DNA链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开2、限制性内切酶有那些类型，我们DNA重组时常用的是哪类？答：限制性内切酶主要分成三大类。
第一类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序，并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA 分子中的双链，但是切割的核苷酸顺序没有专一性，是随机的。
这类限制性内切酶在DNA 重组技术或基因工程中没有多大用处，无法用于分析DNA结构或克隆基因。
这类酶如EcoB、EcoK等。
第二类限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序，并在该顺序内的固定位置上切割双链。
由于这类限制性内切酶的识别和切割的核苷酸都是专一的。
所以总能得到同样核苷酸顺序的DNA片段，并能构建来自不同基因组的DNA片段，形成杂合DNA分子。
因此，这种限制性内切酶是DNA重组技术中最常用的工具酶之一。
这种酶识别的专一核苷酸顺序最常见的是4个或6个核苷酸，少数也有识别5个核苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。
第二类限制性内切酶的识别顺序是一个回文对称顺序，即有一个中心对称轴，从这个轴朝二个方向“读”都完全相同。
这种酶的切割可以有两种方式。
一是交错切割，结果形成两条单链末端，这种末端的核苷酸顺序是互补的，可形成氢键，所以称为粘性末端。
另一种是在同一位置上切割双链，产生平头末端。
第三类限制性内切酶也有专一的识别顺序，但不是对称的回文顺序。
它在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。
但这几个核苷酸对则是任意的。
因此，这种限制性内切酶切割后产生的一定长度DNA片段，具有各种单链末端。
这对于克隆基因或克隆DNA片段没有多大用处。
3、何为细菌的限制修饰系统？是一种存在于细菌（可能还有其他原核生物），可保护个体免于外来DNA（如噬菌体）侵入的系统，主要有限制内切酶和甲基化酶组成的二元系统。
细菌的限制修饰系统包含三个连锁基因：（1）hsd R：编码限制性核酸内切酶（2）hsd M：编码限制性甲基化酶（3）hsd S：编码限制性酶和甲基化酶的协同表达大多数限制性内切酶常常伴随有1~2种修饰酶（DNA甲基化酶），后者能保护细胞自身的DNA不被限制性内切酶破坏。
分子生物学实验复习题附答案
分子生物学复习题实验一DNA的制备（1）为什么分子生物学实施时要担心EB?溴化乙锭（Ethidium bromide)是DNA诱变剂，溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配.具有高致癌性（接触致癌)（2）DNA加样缓冲液的用途是什么？由于植物细胞匀浆含有多种酶类（尤其是氧化酶类）对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。
（3）DNA电泳时所用的琼脂糖凝胶其浓度是如何决定的？1．核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系（2）琼脂脂糖的浓度不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
琼脂糖浓度与DNA分离范围琼脂糖浓度 /％ 0。
3 0.6 0。
7 0.9 1。
2 1。
5 2。
0线状DNA大小/kb60-520-110-0.87-0。
56—0。
44-0.23—0.1（4）琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理是什么DNA分子在pH值高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场中向阳极移动。
DNA分子在电场中通过琼脂糖凝胶而泳动,除了电荷效应以外，还有分子筛效应。
由于DNA分子可片段的相对分子质量不同,移动速度也不同,所以可将相对分子质量不同或构象不同的DNA分离.DNA片段迁移距离(迁移率）与碱基对的对数成反比，因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较，便可测出未知片段的大小。
但是当DNA分子大小超过20kb时，普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。
此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小，因此，就用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分子大小不宜超过此值.（5）琼脂糖凝胶电泳时胶中DNA是靠什么发出荧光的？为什么？溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，可插入DNA双螺旋结构的两个碱基之间,形成一种荧光络合物。
在254nm波长紫外光照射下，呈现橙黄色的荧光。
用溴化乙啶检测DNA,可检出10-9g以上的DNA 含量.（6）制备基因组DNA时用到的以下试剂分别起什么作用？CTAB等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来氯仿有机溶剂，能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸（DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。
分子生物学实验必背十题
分子生物学实验必背十题1、简述双抗体夹心法（ELISA）原理定义、操作过程、注意事项。
（1）原理定义：将可溶性的抗原或抗体吸附到固相载体上，并保持其免疫活性，使之结合并吸附结合抗体或抗原，通过洗涤去除未结合成分，再与酶标记的抗体或抗原结合，并保留酶的活性，然后加入酶反应的底物，后者被催化变为有色产物，根据反应颜色的深浅进行免疫反应的定性和定量的方法。
（2）操作过程：①用一直抗体包被固相载体；②加入受检的标本（含待测抗原），使抗原与固相上的抗体结合；③加入以辣根过氧化物酶标记的已知抗体，使之与抗原结合。
标记的酶可催化底物（四甲基联苯胺）起显色反应，从而指示特异性抗原抗体反应的存在。
（3）注意事项：①对倍稀释抗原混匀时不要产生太多气泡；②酶标板要洗涤干净不要交叉污染；③加样时从最低稀释度逐一加至最高稀释度。
2、比较聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳。
（1）相同点：都是电泳方法，可用于物质的分离与鉴定。
（2）不同点：前者利用蛋白质分子大小形状的差异进行分离，后者利用的是两性电解质形成的光滑pH使蛋白质停留在与其pI相等的位置上进行分离；前者有扩散的作用，后者无扩散作用，因而物质更集中，分辨率高；电泳时间加长，前者电泳效果会变差，后者可使同一蛋白区带更狭窄，利于分辨。
3、比较向聚丙烯酰胺薄膜层析和凝胶柱层析。
（1）相同点：都是层析方法，可用于分离物质；固定相均为固体，流动相均为液体；与分离物质不发生反应，分离后可鉴定。
（2）不同点：前者属于特殊的吸附分配层析，后者属于分子筛层析；前者通过荧光观察判断分离物质，后者通过收集液的显色反应；前者原理与分离物质与聚丙烯酰胺薄膜形成氢键有关，后者利用分子颗粒大小有关。
4、使牛蛙红细胞细胞融合的试剂及其原理；红细胞计数。
（1）PEG；PEG具有强烈的吸水和凝聚沉淀蛋白质的作用，可改变细胞膜的结构，使两细胞接触点处脂类分子发生分散和重组，引起细胞融合。
（2）计数：格子数；稀释倍数。
分子生物学实验试题
分子生物学实验试题
1.实验设计与方案：要求设计合理的实验方案，包括实验目的、材料和方法、
数据处理等。
2.DNA/RNA提取与纯化：要求熟悉DNA或RNA提取的步骤和方法，并
了解各种提取试剂的原理和适用性。
3.PCR技术：要求理解PCR（聚合酶链反应）的原理和步骤，包括引物设计、
循环数、温度条件等，并能进行反应体系的准备。
4.凝胶电泳：要求理解凝胶电泳的原理、操作步骤和结果分析方法，能够分析
DNA片段大小和判断阳性/阴性结果。
5.分子克隆技术：要求熟悉分子克隆的基本原理、重要步骤和相关工具，如限
制性内切酶消化、连接酶反应、DNA转化等。
6.基因组分析：要求理解测序技术的基本原理和常用方法，如Sanger测序、
下一代测序（NGS）等。
7.蛋白质分离与分析：涉及蛋白质的萃取、纯化、SDS-PAGE凝胶电泳、
Western blot等技术。
8.基因表达与蛋白质组学：要求了解基因转录和翻译的机制，以及相关的实验
技术如RT-PCR、Northern blot、ELISA等。
分子生物学练习题库+答案
分子生物学练习题库+答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、α互补筛选法属于：A、原位杂交筛选B、抗药性标志筛选C、免疫化学筛选D、酶联免疫筛选E、标志补救筛选正确答案：E2、原核生物染色体基因组是A、线性双链DNA分子B、环状双链DNA分子C、线性单链DNA分子D、线性单链RNA分子E、环状单链DNA分子正确答案：B3、进行蛋白质溶液凝胶过滤脱盐时,宜选用的葡萄糖凝胶是A、G-75B、G-100C、G-150D、G-25E、G-200正确答案：D4、关于DNA双螺旋结构模型的叙述中，除了哪一项外其余都是正确的A、两股核苷酸链呈反向平行B、两股链间有严格的碱基配对关系C、为右手螺旋，每个螺距含10对碱基D、极性磷酸二酯键位于双螺旋内侧E、螺旋直径为2nm正确答案：D5、已知序列的情况下，获得目的DNA最常用的是A、筛选cDNA文库B、化学合成法C、DNA合成仪合成D、聚合酶链式反应E、基因组DNA文库分离正确答案：D6、分子生物学领域中，分子克隆主要是指A、DNA的大量复制B、DNA的大量剪切C、RNA的大量剪切D、RNA的大量复制E、蛋白质分子的大量复制正确答案：A7、Southem杂交通常是指A、DNA与RNA杂交B、DNA与DNA杂交C、RNA与RNA杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA与蛋白质杂交正确答案：B8、下述哪一条对质粒的描述是错的？A、从细菌体内分离出的质粒DNA在体外呈现超螺旋，开环和线性三种状态的混合物B、质粒DNA往往是闭环状态C、质粒小则转化效率较高D、质粒对宿主细胞的转化效率高于噬菌体E、大片段DNA与质粒重组较困难正确答案：D9、tRNA的结构特点不包括A、含甲基化核苷酸B、5’-末端具有特殊的帽子结构C、有局部的双链结构D、三叶草型的二级结构E、倒L型三级结构正确答案：B10、下列哪种不是癌基因产物A、生长因子类似物B、酪氨酸蛋白激酶C、转录调控中的反式作用因子D、细胞骨架蛋白E、RNA聚合酶正确答案：E11、Taq-DNA聚合酶可以不要模板在dsDNA的末端加上A、dCTPB、dGTPC、dATPD、dTTPE、dNTP正确答案：C12、确切地讲，cDNA文库包括含:A、一个物种的全部基因信息B、一个物种的全部mRNA信息C、一个生物体组织或细胞的全部基因信息D、一个生物体组织或细胞的全部mRNA信息E、一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息正确答案：E13、有关真核基因组的说法错误的是A、基因组DNA以染色体的形式储存在细胞核内B、结构基因大多为断裂基因C、真核基因的转录产物为单顺反子D、基因组的编码序列所占比例远低于非编码序列E、真核生物基因组不包括线粒体基因组正确答案：E14、下述哪项不是重组DNA的连接方式A、平端与平端的连接B、黏性末端与黏性末端的连接C、黏性末端与平端的连接D、人工接头连接E、同聚物加尾连接正确答案：C15、关tRNA分子的恰当解释是A、tRNA的功能主要在于结合蛋白质合成所需要的各种辅助因子B、tRNA分子多数由80个左右的氨基酸组成C、tRNA的D、反密码环中的反密码子的作用是结合DNA中相互补的碱基E、以上都不正确正确答案：C16、以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称为A、转位B、感染C、转染D、转化E、转导正确答案：D17、有关PCR的描述，不正确的为A、引物决定扩增的特异性B、是一种酶促反应C、以DNA或RNA作为模板D、扩增的序列是氨基酸残基E、是在体外进行的核酸复制过程正确答案：D18、菌落杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、用于基因定位分析C、不仅可以检置DNA样品中是否存在某特定的基因,还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息D、阳性菌落的筛选E、检测目标是正确答案：D19、分子杂交实验不能用于：A、单链DNA与RNA分子之间的杂交B、双链DNA与RNC、分子之间的杂交D、单链RNA分子之间的杂交E、单链DNA分子之间的杂交F、抗原与抗体分子之间的杂交正确答案：B20、右手DNA双螺旋模型是何年提出的A、1950年B、1953年C、1958年D、1955年E、1919年正确答案：B21、适用于DNA序列中单个碱基突变的检测方法是A、多重PCRB、巢式PCRC、锚定PCRD、LCRE、原位PCR正确答案：D22、核酸分子杂交的原理是：A、核苷酸分子间形成磷酯键配对B、抗原抗体结合C、碱基互补配对D、氨基酸残基配对E、配体受体结合正确答案：C23、有关核酸的变性与复性的恰当叙述为A、热变性后相同的DNA经缓慢冷却后可复性B、不同的DNA分子变性后，在合适温度下都可复性C、复性的最佳温度为25摄氏度D、热变性的DNA迅速降温过程也称作退火E、以上都不正确正确答案：A24、原核生物的基因主要存在于A、质粒B、类核C、线粒体D、核糖体E、转座因子正确答案：B25、PCR技术的发明人是A、穆利斯B、史蒂文·沙夫C、兰德尔·才木D、沃森E、施莱登正确答案：A26、DNA和RNA共有的成分是A、D-2-脱氧核糖B、D-核糖C、鸟嘌呤D、尿嘧啶E、胸腺嘧啶正确答案：C27、关于癌基因论述正确的是A、癌基因只存在于病毒中B、甲基化程度增高导致原癌基因被激活C、细胞癌基因是细胞的正常基因D、细胞癌基因来源于病毒癌基因E、有癌基因的细胞一定发生癌变正确答案：C28、下列哪一种概念不属于印迹技术：A、DNA杂交B、RNA杂交C、WesternD、斑点杂交E、氨基酸层析正确答案：E29、核酸中含量相对恒定的元素是A、氮B、氧D、碳E、磷正确答案：E30、下列有关DNA变性的叙述，不正确的是A、两条多核苷酸链间氢键断裂B、分子中磷酸二酯键断裂C、DNA中含GC碱基对多则Tm值高D、两条多核苷酸链分离E、A正确答案：B31、质粒DNA提取中,沉淀DNA的是A、70%乙醇B、无水乙醇C、酚-氯仿D、SDSE、异丙醇正确答案：B32、RNA和DNA彻底水解后的产物A、核糖相同，部分碱基不同B、碱基相同，核糖不同C、碱基不同，核糖不同D、碱基不同，核糖相同E、部分碱基不同，核糖不同正确答案：E33、核酸的基本组成单位是A、戊糖和磷酸B、戊糖和碱基C、核苷酸D、戊糖、碱基和磷酸E、以上均不正确正确答案：C34、用于蛋白质检测的标本长期保存于A、-20℃C、8℃D、温室E、-70℃正确答案：E35、蛋白质水平的检测，主要采用A、原位杂交法B、Southern印迹法C、Northern印迹法D、斑点杂交法E、Western印迹法正确答案：E36、关于 PCR 的基本成分叙述错误的是：A、特异性引物B、耐热性DNA聚合酶C、ddNTPD、含有MgE、模板正确答案：C37、构成核酸的基本单位是A、核苷酸B、多核苷酸C、磷酸戊糖D、核苷E、环核苷酸正确答案：A38、DNA的二级结构是A、β-折叠B、α-螺旋C、双螺旋结构D、三叶草结构E、锌指结构正确答案：C39、不属于乳糖操纵子结构的是A、启动子B、操纵原件C、通透酶相关基因D、外显子区域E、LacZ正确答案：D40、下列有关mRNA的叙述，正确的是A、为线状单链结构，5’端有多聚腺苷酸帽子结构B、可作为蛋白质合成的模板C、链的局部不可形成双链结构D、3’末端特殊结构与mRNA的稳定无关E、三个相连核苷酸组成一个反密码子正确答案：B41、核酸的最大紫外光吸收值一般在哪一波长附近A、280nmB、260nmC、220nmD、240nmE、200正确答案：B42、组织DNA提取中,苯酚-氯仿抽提离心分三层,DNA位于A、上层B、中间层C、下层D、中间层和下层E、上下均有正确答案：A43、基因芯片显色和分析测定方法主要为A、32P法B、荧光法C、放射法D、生物素法E、地高辛法正确答案：B44、多重PCR反应体系中引物数量为A、不加引物B、半对引物C、一对引物D、两对引物E、两对以上引物正确答案：E45、下列有关加热导致DNA变性的叙述，不正确的是A、黏度降低B、紫外光吸收值降低C、50％链结构被解开时的温度称为DNA的TmD、热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性E、变性后的DNA紫外吸收增强正确答案：B46、重组DNA技术中实现目的的基因与载体DNA拼接的酶是A、限制性核酸内切酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、DNA聚合酶正确答案：C47、从细菌体内分离出的质粒DNA，在体外的状态是A、多聚体B、超螺旋C、开环D、线性E、单链正确答案：B48、下列几种DNA分子的碱基组成比例各不相同，哪一种DNA的解链温度最低A、DNA中A+T含量占15％B、DNA中C+C含量占25％C、DNA中C+C含量占40％D、DNA中A+T含量占60％E、DNA中C+C含量占70％正确答案：B49、DNA携带生物遗传信息意味着A、病毒的侵染是靠蛋白质转移至宿主细胞来实现的B、不论哪一物种碱基组成均应相同C、同一生物不同组织的DNA，其碱基组成相同D、DNA碱基组成随机体年龄及营养状况而改变E、同一物种碱基组成不同正确答案：C50、分离纯化核酸的原则是A、保持二级结构完整并保证纯度B、保持空间结构完整C、保持一级结构完整并保证纯度D、保证纯度与浓度E、保证一定浓度正确答案：C51、核酸变性后可发生A、增色效应B、减色效应C、沉淀D、最大吸收峰波长发生转移E、失去对紫外线的吸收能力正确答案：A52、世界上首次用已经分化成熟的体细胞核通过克隆技术培育的动物是A、克隆绵羊B、克隆奶牛C、克隆猴D、克隆鼠E、克隆猪正确答案：A53、目前,临床实验室最常用的PCR技术是A、定性PCRB、实时荧光定量PCRC、反转录PCRD、多重PCRE、数字PCR正确答案：B54、有关DNA的变性是A、DNA分子中糖苷键的断裂B、DNA分子中磷酸二酯键的断裂C、DNA分子中碱基的水解D、DNA分子由正超螺旋转变成负超螺旋E、DNA分子中碱基间氢键的断裂正确答案：E55、α-互补筛选法属于A、抗生素抗性筛选B、免疫化学筛选C、分子杂交筛选D、标志补救筛选E、酶联免疫筛选正确答案：D56、克隆的基因组DNA不宜在以下哪种系统中表达A、E.coli表达体系B、酵母表达体系C、COS细胞表达体系D、昆虫表达体系E、哺乳动物细胞表达体系正确答案：A57、具有里程碑意义的.、标志着现代分子生物学开端的是A、遗传规律B、发现DNA聚合酶C、PCR技术D、基因编辑技术E、DNA双螺旋结构正确答案：E58、重组体中切出插入片段，最常用的方法是A、用DNA酶将其切出B、用多种限制性内切酶将其切出C、用核酶将其切出D、用重组时所用的限制性内切酶将其切出E、用DNA聚合酶I将其切出正确答案：D59、DNA序列测定中，待测DNA克隆到质粒载体后，通过下列哪种方法处理重组载体，使测序引物便于结合模板DNA？A、碱变性B、加热C、紫外线照射D、酸变性E、乙醇处理正确答案：A60、以等位基因特异的寡核行微探针余交法给诊断某常染色体隐性道遗传病时,若能与突变研及正常探针结合,则该样本为A、不能确定B、正常人C、纯合体患者D、携带者E、杂合体患者正确答案：E61、对于tRNA的叙述哪一项是不正确的A、tRNA分子中含有稀有碱基B、tRNA=级结构呈三叶草形C、tRNA的=级结构有=氢尿嘧啶环D、反密码环是有CCA三个碱基组成反密码子E、以上均不正确正确答案：D62、下列关于DNA碱基组成的的叙述正确的是A、DNA分子中A与T的含量不同B、同一个体成年期与少儿期碱基组成不同C、同一个体在不同营养状态下碱基组成不同D、同一个体不同组织碱基组成不同E、不同生物来源的DNA碱基组成不同正确答案：E63、在分子生物学领域,重组DNA又称A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNA工程正确答案：D64、基因工程中，将目的基因与载体DNA拼接的酶是A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶ⅢC、限制性内切核酸酶D、DNA连接酶E、反转录酶正确答案：D65、M13噬菌体适用于A、构建基因组文库B、构建CDNA文库C、克隆较小DNA片段D、克隆待测序的E、以上都对正确答案：D66、tRNA分子上3’端CCA-OH的功能为A、辨认mRNA上的密码子B、提供-OH基与氨基酸结合C、被剪接的组分D、形成局部双链E、识别并结合核蛋白体正确答案：B67、外显子的特点通常是A、不编码蛋白质B、不被转录也不被翻译C、调节基因表达D、只被转录但不翻译E、编码蛋白质正确答案：E68、下面哪一种技术不能用于鉴别核酸分子序列：A、斑点印迹B、原位杂交C、Southern印迹杂交D、WesternE、Northern印迹杂交正确答案：D69、用于检测HPV的分子生物学检测方法中,哪个具有高特异、高敏感、高通量、操作期便快速的特点A、核酸杂交技术B、飞行时间质谱技术C、荧光定量PCRD、基因芯片技术E、流式荧光技术正确答案：C70、已知一段设计好的引物的序列为GTGGATCCATGGCTCCTCTGAAGATTC，其Tm值为A、80B、78C、82D、84E、55正确答案：C71、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞A、CaClB、病毒感染法C、脂质体转染法D、显微注射法E、磷酸钙共沉淀法正确答案：A72、核酸的紫外吸收特性来自A、脱氧核糖B、磷酸二酯键C、磷酸基团D、嘌呤嘧啶碱基E、核糖正确答案：D73、DNA 链末端合成终止法不需要：A、ddNTPB、dNTPC、逆转录酶D、DNA聚合酶E、模板正确答案：C74、目前常用的基因表达体系细胞包括A、大肠埃希菌B、哺乳动物细胞C、昆虫细胞D、酵母细胞E、以上都是正确答案：E75、下列有关核酸分子杂交的叙述，不正确的是A、杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间B、杂交可发生在碱基序列完全互补的核酸分子之间C、具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交D、不同来源的DNA分子之间可以杂交E、以上都不正确正确答案：C76、一个DNA分子中，若A所占的摩尔比为17.2％，则C的摩尔比应为A、67.2％B、32.8％C、65.6％D、17.2％E、50.3%正确答案：B77、核酸变性后，可产生的效应是A、溶液黏度增加B、溶液黏度减小C、增色效应D、最大吸收波长发生转移E、失去对紫外线的吸收能力正确答案：C78、对于镰刀型红细胞贫血的基因诊断不可以采用A、PCR-RFLPB、DNA测序C、核酸分子杂交D、等位基因特性性PCRE、Western正确答案：E79、离子交换层有效分离蛋白质的依据是A、蛋白质的pIB、配体的特异性亲和力C、蛋白的分子大小D、蛋白的溶解度E、蛋白所带电荷正确答案：E80、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB是一种可视物质B、EB是核酸传性染料C、EB特异性结合核酸分子D、EB在紫外光下放射荧光E、插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光正确答案：E81、DNA受热变性时，出现的现象是A、多聚核苷酸链水解成单核苷酸B、在260nm波长处的吸光度增高C、碱基对以共价键连接D、溶液黏度增加E、最大光吸收峰波长发生转移正确答案：B82、属于核糖核酸二级结构的描述是A、核苷酸在核酸长链上的排列顺序B、tRNA的三叶草结构C、DNA双螺旋结构D、DNA的超螺旋结构E、DNA的核小体结构正确答案：B83、真核生物染色质DNA的三级结构是A、结构域B、超螺旋C、锌指结构D、核小体E、模体正确答案：D84、提出右手DNA双螺旋模型的科学家是A、Watson和CrickB、PaulingC、SmithD、Sanger，Maxam和GilbertE、Cech正确答案：A85、斑点/夹缝杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、用于基因定位分析C、不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，哈可以获取基因片段的大小及酶切位点分布的信息D、阳性菌落的筛选E、蛋白水平的检测正确答案：A86、重组DNA、技术常用的限制性核酸内切酶为A、I类酶B、II类酶C、III类酶D、IV类酶E、V类酶正确答案：B87、长期保存核酸样品的适宜温度是A、-50℃B、-20℃C、室温D、0~4℃E、-80℃正确答案：E88、催化聚合酶链反应的酶是：A、DNA连接酶B、反转录酶C、末端转移酶D、DNA聚合酶IE、Taq正确答案：E89、同一种哺乳细胞中，下列哪种情况是正确的A、在过剩的DNA存在下，所有RNA都能与DNA杂交B、在过剩的RNA存在下，所有DNA片段能与RNA杂交C、RNA与DNA有相同核苷酸组成D、RNA与DNA有相同的碱基比例E、以上都不正确正确答案：A90、下列几种DNA分子的碱基组成比例各不相同，哪一种DNA的解链温度（Tm）最低A、DNA中A+T含量占15％B、DNA中G+C含量占25％C、DNA中G+C含量占40％D、DNA中A+T含量占60％E、DNA中G+C含量占70％正确答案：B91、PCR技术的本质是A、核酸杂交技术B、核酸重组技C、核酸扩增技术D、核酸变性技术E、核酸连接技术正确答案：C92、下列说法错误的是A、用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃B、用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入1mol/L正确答案：B93、以下哪种PCR技术，广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究?A、原位PCRB、差异显示PCRC、反向PCRD、不对称PCRE、RT-PCR正确答案：A94、基因工程操作中转导是指A、重组质粒导入宿主细胞B、把DNA重组体导入真核细胞C、DNA重组体导入原核细胞D、把外源DNA导入宿主细胞E、以噬菌体或病毒为载体构建的重组DNA导入宿主细胞正确答案：E95、寡核苷酸探针的最大优势是A、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列B、易合成C、杂交分子稳定D、易标记E、易分解正确答案：A96、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶正确答案：C97、寡核苷酸探针一般A、长度50bp-100bpB、虽然不用太长，但越长越好C、就是一段人工合成的寡核苷酸序列D、长度＜15bpE、长度在18bp左右正确答案：E98、一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。
分子生物学题库(附参考答案)
分子生物学题库（附参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案：E2.在 pH 为下述何种范围时，Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案：A3.关于SYBR Green Ⅰ 的描述，不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案：D4.PCR 反应过程中，退火温度通常比引物的Tm 值A、低5℃B、低15℃C、高5℃D、高15℃E、相等正确答案：A5.以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案：B6.关于真菌，以下描述正确的是A、真菌种类繁多，其中大多数对人类有害B、浅部真菌感染对治疗有顽固性，对机体的影响相对较小C、近年真菌病的发病率有明显下降趋势D、病原性真菌根据其入侵组织部位深浅的不同分为浅部真菌和内部真菌E、真菌感染对人体的危害不大正确答案：B7.标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、变性B、探针C、杂交D、复性E、复杂性正确答案：B8.不符合分子诊断特点的是A、灵敏度高B、特异性强C、样品获取便利D、检测对象为自体基因E、易于早期诊断正确答案：D9.在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、基因结构变化未知B、点突变C、基因片段缺失D、表达异常E、基因片段插入正确答案：A10.关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因C、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能D、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案：A11.变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案：E12.DNA 自动化测序技术中，不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案：B13.PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案：E14.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称A、变性B、复杂性C、探针D、复性E、杂交正确答案：E15.珠蛋白生成障碍性贫血的主要原因是A、珠蛋白链合成速率降低B、珠蛋白基因突变导致氨基酸序列改变C、血红蛋白破坏加速D、出现异常血红蛋白 SE、铁代谢异常正确答案：A16.众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、肺癌B、肝癌C、乳腺癌D、结直肠癌E、前列腺癌正确答案：D17.为封闭非特异性杂交位点，可在预杂交液中加入A、ssDNAB、1 ×SSCC、10×SSCD、5×TBECE、50×TAE正确答案：A18.不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、有 FraX 体格或性格阳性征象者B、发育迟缓或自闭症的患者C、没有 FraX 家族史D、已明确母亲为携带者的婴儿E、未诊断的 MR 家族史正确答案：C19.病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案：C20.Alu家族属于A、可变数目串联重复序列B、短串联重复序列C、长散在核原件D、短散在核原件E、DNA 转座子正确答案：D21.检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案：D22.母亲血浆中的胎儿 DNAA、占母亲血浆总 DNA 的 50%以上B、可用于检测胎儿从母亲遗传而来的线粒体 DNA 突变C、确定RhD 阳性孕妇所怀胎儿的RhD 情况D、确定胎儿是否从母亲遗传了X 连锁的基因突变E、血友病 A 的产前诊断正确答案：C23.关于人工合成的寡核苷酸探针，下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案：E24.以下哪种方法是检测耐药基因突变的金标准 ( )A、PCR 技术B、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、PCR-SSCPE、DNA 测序技术正确答案：E25.5’-末端的 DNA 探针标记主要依靠的酶是A、T4 多聚核苷酸激酶B、末端转移酶C、AKPD、DNA pol ⅠE、DNA pol正确答案：A26.第三代测序技术测定人全基因组的目标：A、30 分钟的测序时间及 5 万美元的测序价格B、3 小时的测序时间及 5 千美元的测序价格C、30 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格D、3 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格E、3 小时的测序时间及 5 万美元的测序价格正确答案：D27.GeneXpert 全自动结核杆菌检测技术现可进行哪种药物的耐药检测A、乙胺丁醇B、利福平C、链霉素D、异烟肼E、吡嗪酰胺正确答案：B28.不是自动 DNA 测序仪主要系统之一的是A、测序反应系统B、电泳系统C、荧光检测系统D、探针荧光标记系统E、电脑分析系统正确答案：D29.下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA ( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D30.关于 TaqMan 探针技术的描述，不正确的是A、R 基团与Q 基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高B、易受到Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案：C31.下列属于抑癌基因的是 ( )A、sisB、rasC、c-erb-2D、mycE、p53正确答案：E32.荧光定量 PCR 反应中，Mg2+的浓度对 Taq 酶的活性是至关重要，以 DNA 或 cDNA 为模板的 PCR 反应中最好的 Mg2+浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案：C33.有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案：B34.K-ras 基因最常见的激活方式是A、插入突变B、点突变C、缺失突变D、基因扩增E、染色体重排正确答案：B35.下列 DNA 序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5’-CCCCCT-3’B、5’-GGGGCC-3’C、5’-CGCGCG-3’D、5’-GCACAC-3’E、5’-CTCTCCC-3’正确答案：C36.下列哪种病毒在复制过程中可产生 RNA-DNA 杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案：A37.绝大多数β-地中海贫血系由位于第 11 号染色体上的β-珠蛋白基因中的基因突变所致，下列方法中不能用于分子生物学检验的技术是A、PCR-ASOB、PCR-RDBC、基因芯片D、多重 PCRE、MOEA-PCR正确答案：D38.多基因家族的特点描述错误的是 ( )A、由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因B、通常由于突变而失活C、假基因与有功能的基因是同源的D、所有成员均产生有功能的基因产物E、可以位于同一条染色体上正确答案：D39.关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是：A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案：E40.下列方法中不能分辨野生型和突变型基因的是A、PCR-SSCPB、变性梯度凝胶电泳C、熔解曲线分析D、逆转录 PCR正确答案：D41.下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性：A、随机扩增DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案：B42.下列不是目前用于 O157：H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案：E43.未知突变的检测，下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案：D44.任意引物 PCR 的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组 DNA 图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案：A45.巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和 (或) 量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案：E46.下列不是细菌感染性疾病分子生物学检验技术的是A、PCR-SSCPB、real-time PCRC、ELISAD、PFGEE、PAPD正确答案：C47.通过酶联级联反应检测每次核苷酸聚合所产生的ppi 的测序方法是A、化学降解法B、寡连测序C、焦磷酸测序D、边合成边测序E、双脱氧终止法正确答案：C48.以 SDA 技术检测结核杆菌时扩增靶点是A、SDAB、IS6110 和 18SrRNAC、IS6110 和 5SrRNAD、IS6110 和 16SrRNAE、IS6110 和 15SrRNA正确答案：D49.STR 法医鉴定的基础是A、基因多态性B、碱基配对原则C、蛋白质空间结构D、孟德尔遗传定律E、基因扩增技术正确答案：D50.关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案：E51.Northern 印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是 RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案：C52.描述 PCR-RFLP 技术在耐药突变检测方面错误的是：A、分型时间短B、技术简便C、突变要存在限制性内切酶酶切位点D、目前被广泛应用于耐药监测E、只能检测特定的突变位点正确答案：D53.单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、携带者诊断D、症状前诊断E、耐药基因检测正确答案：A54.结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案：B55.下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案：E56.最早应用于 HLA 基因分型的方法是A、RFLP 分型技术B、PCR-SSCP 技术C、测序技术D、PCR-SSO 技术E、PCR-SSP 技术正确答案：A57.编码 HIV 衣壳蛋白的是A、gag 基因B、vif 基因C、pol 基因D、tat 基因E、env 基因正确答案：A58.关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案：E59.下列关于引物设计的原则中，错误的是A、两条引物的Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、5’端可加修饰基团正确答案：A60.多重 PCR 的描述中正确的是：A、同一个模板，多种不同的引物B、相同的引物，多种不同的模板C、多个模板，多种引物D、引物的Tm 值、反应时间和温度、反应缓冲液等尽量不一致以区分不同产物E、同一反应内各扩增产物片段的大小应尽可能相同或接近正确答案：A61.PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案：B62.关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A63.mtDNA 中基因数目为A、39 个B、27 个C、22 个D、37 个E、13 个正确答案：D64.硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、本底低B、高结合力C、共价键结合D、非共价键结合E、脆性大正确答案：A65.要制订一个能够简洁准确的 DNA 测序方案，首先应考虑A、DNA 片段大小B、测序方法C、实验条件D、测序目的E、测序时间正确答案：E66.寡核苷酸探针的最大的优势是A、易分解B、易标记C、杂化分子稳定D、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列E、易合成正确答案：D67.关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案：D68.下列几种 DNA 分子的碱基组成比例，哪一种的Tm 值最高 ( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案：A69.PCR 反应必需的成分是A、BSAB、DTTC、Tween20D、明胶E、Mg2+正确答案：E70.Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案：A71.关于非放射性探针标记，下列描述不正确的是A、对人体危害小B、可长时间使用C、酶促显色检测最常使用的酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶D、灵敏度不如放射性探针E、目前应用的非放射性标志物都是抗原正确答案：E72.作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团 (如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案：A73.检测靶序列是 DNA 的技术是：A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：A74.目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案：D75.在人类基因组 DNA 序列中，DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案：D76.有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域，通常不被转录D、形式为 (CA) n/ (TG) n、 (AG) n、 (CAG) n 等E、又称为可变数目串联重复序列 (VNTR)正确答案：D77.关于逆转录 PCR 的描述，不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外，还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案：E78.以下不是原癌基因的特点的是A、广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B、在进化过程中，基因序列呈高度保守性C、通过表达产物 DNA 来实现功能D、在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E、对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需正确答案：C79.PCR-ASO 描述错误的是A、需要寡核苷酸探针B、检测点突变的技术C、PCR 产物必须电泳分离D、需正常和异常两种探针E、需严格控制杂交条件正确答案：C80.下列不是片段性突变引起原因的是A、基因重排B、碱基插入C、碱基缺失D、碱基扩增E、转录异常正确答案：E81.在核酸检测体系中加入内质控，其作用不是监控的是A、试剂失效或 Taq 酶活性降低所致的假阴性B、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性C、样本吸取错误所致的假阴性D、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性E、核酸提取效率太低所致的假阴性正确答案：C82.第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案：A83.目前测序读长最大的测序反应：A、边合成边测序B、化学裂解法C、双脱氧终止法D、连接测序E、焦磷酸测序正确答案：C84.以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是 ( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基正确答案：A85.转录依赖扩增系统与其他 PCR 技术的区别是A、模板是 RNAB、模板是 DNAC、引物是 RNAD、模板和产物都是 RNAE、需要热循环正确答案：D86.HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案：A87.HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAE、-ssRNA正确答案：A88.第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案：A89.硝酸纤维素和PVDF 膜结合蛋白主要靠( )A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案：A90.关于梅毒螺旋体的实验室检测，下列描述正确的是A、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法B、镜检法简便，特异性高，但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断C、诊断梅毒的传统方法是体外培养D、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查，对早期梅毒诊断敏感E、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染正确答案：A91.纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8，可使比值降低的是 ( ) ：B、牛血清白蛋白C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案：A92.能发出γ-射线的放射性核素是A、3HB、14CC、32PD、35SE、125I正确答案：E93.定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得：A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案：A94.在人类基因组中，编码序列占的比例为A、3%B、21%C、5%D、23%E、1.5%正确答案：E95.当标本核酸量非常低难以扩增时，可采用的 PCR 技术是A、逆转录 PCRB、转录介导扩增C、原位 PCRD、巢式 PCRE、荧光 PCR正确答案：D96.聚合酶链式反应是一种A、体外特异转录 RNA 的过程B、体外翻译蛋白质的过程C、体外特异转录 DNA 的过程D、体外特异复制 DNA 的过程E、体内特异复制 DNA 的过程正确答案：C97.下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案：C98.唯一一个在结肠上皮增殖过程中起看门作用的基因是A、MCC 基因B、DCC 基因C、APC 基因D、p53 基因E、HNPCC 基因正确答案：C99.线粒体基因组与核基因组之间，下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录，之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍，影响细胞呼吸、氧化功能，进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制，但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立，但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ，相互影响，相互协调正确答案：A100.下列属于抑癌基因的是 ( )A、rasB、mycC、c-erb-2D、sisE、Rb正确答案：E。
青岛农业大学-分子生物学实验考试资料
青岛农业⼤学-分⼦⽣物学实验考试资料实验原理：转化是将DNA分⼦引⼊另⼀细胞品系，是受体细胞获得新的遗传性状的⼀种⼿段。
转化的⽅法有：电击法、氯化钙等试剂法；感受态细胞是指经处理后，细胞膜通透性发上变化，成为能容纳外源DNA分⼦通过的细胞。
本实验⽤氯化钙处理限制性修饰系统缺陷的变异株⽽使其处于感受态，然后与pUC18质粒共保温，pUC18质粒含有抗氨苄青霉素基因。
理论上只有转化成功的受体菌才能在含氨苄青霉素的培养基上⽣长。
实验为什么要在低温⽆菌条件下操作？答：低温可以降低菌株的新陈代谢，减缓⽣命活动，使细胞壁较脆，有利于氯化钙诱使外源DNA进⼊受体菌。
⽆菌操作是为了防⽌杂菌和杂DNA的污染，否则会影响转化效率或DNA的转⼊。
实验原理：当细胞在氢氧化钠和SDS溶液中裂解时，细菌的线性染⾊体变性，⽽共价闭合环状质粒DNA的两条链并不互相分开；加⼊醋酸钾中和后，线状染⾊体DNA ⽚段因与变性的蛋⽩质和细胞碎⽚缠绕在⼀起⽽难以复性，变性后的质粒DNA则恢复原来的构象，留在上清液中，再经酚/氯仿抽提、⼄醇沉淀等步骤可获得质粒DNA。
问：溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ、酚/氯仿、⼄醇的作⽤？答：⑴溶液Ⅰ：葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防⽌DNA受机械剪切⼒作⽤⽽降解。
EDTA：螯合钙离⼦、镁离⼦等⾦属离⼦，抑制脱氧核酸酶对DNA的降解作⽤。
⑵溶液Ⅱ：氢氧化钠破坏菌体细胞使核酸等物质从细胞中释放出来。
SDS能裂解细菌细胞膜，也可与钾离⼦反应引起绝⼤部分蛋⽩质以及基因组DNA共沉淀。
⑶溶液Ⅲ：提供强碱环境，中和溶液Ⅱ，是变性后的质粒复性，同时提供⾼盐度溶液，使蛋⽩质和变性的染⾊体沉淀。
⑷酚/氯仿：除去上清液中的蛋⽩质，最好⽤酚/氯仿抽提⼀次后，再⽤氯仿抽提⼀次，以除去残留的酚，防⽌酚对后续实验有影响，如酶切体系的不良反应（酚对核酸酶具有抑制作⽤）。
⑸⼄醇：冰冷的⽆⽔⼄醇沉淀DNA，70%的⼄醇洗涤沉淀把残留的离⼦洗去。
2021年安师大分子生物学实验课考核考试题库和答案
分子生物学实验课考核考试题库1.PCR原理是什么？2.PCR普通体系应加入哪些试剂？3.PCR防止其他DNA污染, 应注意哪些问题？4.影响PCR产物产量因素重要有哪些？5.引物设计应注意哪些问题？6.简述克隆某一原核生物基因片段普通操作环节？7、什么是质粒？质粒基本性质有哪些？8、质粒抽提实验中溶液I、II、III各有什么作用？9、碱裂解法抽提质粒DNA基本原理是什么？10、在碱裂解法提取质粒DNA操作中应注意哪些问题？11.在碱裂解法提取质粒DNA时, 酚/氯仿作用是什么？12.碱裂解法提取质粒DNA分子普通有几种构象？电泳时移动速率有何差别？13.提取植物基因组DNA基本原理是什么？在操作过程中应当注意什么？14、在植物基因组提取过程中, DNA 降解也许因素？15.在植物基因组提取过程中, 提高DNA 产量办法？16.在使用苯酚进行DNA提取时应当注意什么？17、在提取植物基因组DNA过程中, 使用苯酚与氯仿作用是什么？18、在植物基因组提取过程中, 该如何检测和保证基因组DNA质量？19、什么是限制性内切酶？20、常用Ⅱ型限制性内切酶切割双链DNA后会产生末端或末端。
21.下列关于限制性内切酶描述, 错误是: （）A. 一种限制性内切酶只能辨认一种特定脱氧核苷酸序列B. 限制性内切酶活性受温度影响C. 限制性内切酶能辨认和切割RNAD. 限制性内切酶可以从原核中提取22、既有一长度为l 000 bpDNA分子, 用限制性核酸内切酶EcoR I酶切后得到DNA分子仍是l 000 bp, 用Kpn I单独酶切得到400 bp和600 bp 2种长度DNA 分子．用EcoR I, Kpn l同步酶切后得到200 bp和600 bp 2种长度DNA分子。
请画出该DNA也许酶切图谱。
23.一种限制性内切酶辨认序列和切割位点是5ˊ一G↓GATCC一3ˊ, 在质粒上有该酶一种切点, 请画出质粒被该限制性内切酶切割后所形成黏性末端。
分子生物学试题库(附参考答案)
分子生物学试题库（附参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.下列叙述不正确的是A、F 质粒的主要特征是带有耐药性基因B、R 质粒又称抗药性质粒C、Col 质粒可产生大肠杆菌素D、F 质粒是一种游离基因E、F 和 ColE1 质粒可以在同一菌株内稳定共存正确答案：A2.相对于第一代测序技术,新一代测序技术不具有的优点:A、并行B、高通量C、模板不需要克隆D、一次运行可产生海量的高质量数据E、较长的测序读长正确答案：E3.连接酶链反应正确的是A、不能用来检测 DNA 点突变B、DNA 连接酶代替 DNA 聚合酶C、不需预知靶 DNA 的序列D、引物在模板上的位置不能紧密相连E、属于靶序列扩增正确答案：B4.关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A5.关于 HPV 各亚型遗传物质的描述正确的是A、有的是脱氧核糖核酸,有的是核糖核酸B、脱氧核糖核酸与核糖核酸可交替互换C、都是核糖核酸D、同时存在脱氧核糖核酸和核糖核酸E、都是脱氧核糖核酸正确答案：E6.不是自动 DNA 测序仪主要系统之一的是A、测序反应系统B、电泳系统C、荧光检测系统D、探针荧光标记系统E、电脑分析系统正确答案：D7.限制性长度多态性是由于以下哪项所致A、碱基变化发生在内含子B、碱基变化发生在增强子上C、碱基变化发生在外显子D、碱基变化发生在酶切位点上E、碱基变化发生在微卫星序列上正确答案：D8.关于 DNA 芯片描述不正确的是A、探针为已知序列B、有序地高密度地固定于支持物上C、理论基础是核酸杂交D、可研究基因序列E、不能研究基因突变正确答案：E9.不能作为 PCR 模板的是A、DNAB、RNAC、质粒 DNAD、蛋白质E、cDNA正确答案：D10.阳性质控品失控的原因不包括A、扩增产物污染B、核酸提取试剂失效C、提取的核酸残留有抑制物D、Taq 酶失活E、扩增仪孔间温度不一致正确答案：A11.利用 DNA 芯片检测基因突变,杂交条件应:A、短时间内、低盐、高温条件下的高严紧性杂交B、长时间内、低盐、高温条件下的低严紧性杂交C、短时间内、高盐、高温条件下的低严紧性杂交D、短时间内、低盐、低温条件下的高严紧性杂交E、短时间内、低盐、高温条件下的低严紧性杂交正确答案：A12.平台效应的出现与下列哪个因素关系最密切:A、引物浓度B、初始模板量C、TaqDNA 聚合酶浓度D、Mg2+浓度E、反应变性时间正确答案：B13.利用 DNA 芯片检测基因的表达情况,杂交条件应选( )A、高盐浓度、低温和长时间B、低盐浓度、低温和长时间C、高盐浓度、高温和长时间D、高盐浓度、低温和短时间E、高盐浓度、高温和短时间正确答案：A14.巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和(或)量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案：E15.生物芯片根据芯片上固定的探针种类不同可分为几种,不包括:A、DNA 芯片B、蛋白质芯片C、细胞芯片D、组织芯片E、测序芯片正确答案：E16.GeneXpert 全自动结核杆菌检测技术现可进行哪种药物的耐药检测A、链霉素B、利福平C、乙胺丁醇D、吡嗪酰胺E、异烟肼正确答案：B17.目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案：D18.一位男性血友病患者,他亲属中不可能是血友病的是A、叔、伯、姑B、姨表兄弟C、同胞兄弟D、外祖父或舅父E、外甥或外孙正确答案：A19.描述随机扩增多态性 DNA 技术不正确的是( )A、引物序列随机B、有多条引物C、电泳分离产物D、需要限制性内切酶酶切E、反应基因组多态性正确答案：D20.线粒体糖尿病属于A、2 型糖尿病B、妊娠期糖尿病C、新发现的第 5 种糖尿病D、型糖尿病E、特殊类型糖尿病正确答案：E21.关于 mtDNA 复制特点的描述正确的是A、线粒体密码子与核基因密码子相同B、mtDNA 以 D-环复制为主要模式,与核 DNA 复制同步C、mtDNA 两条链的复制是同步的D、mtDNA 为自主性复制,不受核内基因控制E、参与 mtDNA 复制所需的酶、调控因子等由核 DNA 编码正确答案：E22.遗传病的最基本特征是A、先天性B、遗传物质发生了改变C、酶的缺陷D、患儿发病的家族性E、染色体畸变正确答案：B23.目前白血病的发病机制的研究主要集中的领域不包括A、基因多态性与白血病B、融合基因与白血病C、白血病发病的先天因素D、白血病复发的后天因素E、遗传学疾病及白血病发病的后天因素正确答案：D24.DNA 芯片的样品制备过程错误的是( )A、核酸分子的纯化B、样品的扩增C、样品的标记D、常用的标记物为荧光E、标记后的样品不必再纯化正确答案：E25.病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案：C26.下列不属于 SNP 检测技术特点的是( )A、遗传稳定性B、密度低C、富有代表性D、密度高E、易实现分析的自动化正确答案：B27.影响 DNA 分离纯化效果的是A、材料新鲜,低温保存B、加核酸酶抑制剂C、剧烈震荡D、除净蛋白质E、除净多糖正确答案：C28.血友病是一种A、X 连锁遗传病B、先天畸形C、染色体病D、先天性代谢缺陷病E、常染色体隐性遗传病正确答案：A29.线粒体疾病的遗传特征是A、母系遗传B、女患者的子女约 1/2 发病C、近亲婚配的子女发病率增高D、交叉遗传E、发病率有明显的性别差异正确答案：A30.原核生物基因组中没有( )A、插入序列B、操纵子C、外显子D、内含子E、转录因子正确答案：D31.下列哪种质粒带有抗性基因A、F 质粒B、Col 质粒C、接合型质粒D、ColEIE、R 质粒正确答案：E32.标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、杂交B、变性C、复性D、复杂性E、探针正确答案：E33.在如下情况时,可考虑通过基因连锁分析进行分子生物学检验A、基因表达异常B、基因结构变化未知C、基因缺失D、基因插入E、基因点突变正确答案：B34.下列说法错误的是A、用于 RNA 检测的样本短期可保存在-20℃B、用于 PCR 检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入 1mol/L NaOH 初步处理正确答案：B35.基因诊断与其他诊断比较,最主要的特点在于( )A、诊断周期短B、取材方便C、诊断费用低D、针对病变细胞E、针对基因结构正确答案：E36.第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案：A37.在人类基因组 DNA 序列中,DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案：D38.DNA 双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,DNA 分子成为单链,这一过程称A、变性B、复性C、复杂性D、杂交E、探针正确答案：A39.目前最常用的 TB 分子检测方法是A、PCRB、real-time PCRC、SDAD、LPAE、DNA chip正确答案：B40.理想的质控品应具备的条件不包括A、含有未灭活的传染性病原体B、靶值或预期结果已知C、阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平D、稳定、价廉、同一批次可大量获得E、基质与待测样本一致正确答案：A41.对于 BRCA 基因突变的检测,以下最常用的方法是A、变性高效液相色谱法B、单链构象多态性分析C、变性梯度凝胶电泳D、异源双链分析E、直接 DNA 序列分析正确答案：E42.稀有碱基主要存在于A、核糖体 RNAB、信使 RNAC、转运 RNAD、核 DNAE、线粒体 DNA正确答案：C43.提取 DNA 的原则除外A、保证核酸一级结构完整性B、保留所有核酸分子C、核酸样本中不应存在有机溶剂和过高浓度的金属离子D、蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度E、排除 RNA 分子的污染与干扰正确答案：B44.关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案：D45.组织 DNA 提取中,EDTA 的作用是A、抑制 DNaseB、沉淀 DNAC、减少液体表面张力D、抑制 RNaseE、去除蛋白质正确答案：A46.HIV-1 中最易发生变异的基因是A、nefB、envC、polD、tatE、gag正确答案：B47.延伸的温度通常为A、37℃B、25℃C、55℃D、95℃E、72℃正确答案：E48.最容易降解的核酸探针是A、cDNA 探针B、dsDNA 探针C、ssDNA 探针D、gDNA 探针E、RNA 探针正确答案：E49.下列属于抑癌基因的是( )A、mycB、sisC、p53D、c-erb-2E、ras正确答案：C50.下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性:A、随机扩增 DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案：B51.PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案：B52.为了避免反复冻融对核酸样品产生的破坏作用,最好( )A、将核酸小量分装保存B、将核酸溶解保存C、将核酸冻干保存D、将核酸沉淀保存E、将核酸大量保存正确答案：A53.下列关于 real-time PCR 引物设计的原则中,不正确的是A、两条引物的 Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、引物过长可能提高退火温度正确答案：A54.下列病毒中,基因组可直接作为 mRNA 的 3 种病毒是A、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、流感病毒B、脊髓灰质炎病毒、AIDS 病毒、麻疹病毒C、脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒、新型肠道病毒D、脊髓灰质炎病毒、乙型肝炎病毒、轮状病毒E、脊髓灰质炎病毒、麻疹病毒、甲型肝炎病毒正确答案：C55.PCR 反应体系不包括A、耐热的 TaqDNA 聚合酶B、cDNA 探针C、4 种 dNTPD、合适的缓冲液体系E、模板 DNA正确答案：B56.以下不需要对引物或探针预先标记的实时定量 PCR 方法是A、TaqMan 水解探针技术B、探针杂交技术C、分子信标技术D、SYBR Green Ⅰ荧光染料技术E、数字 PCR 技术正确答案：D57.宫颈癌与 HPV 病毒感染密切相关,宫颈癌细胞产生的机制是A、HPV DNA 大量复制B、原癌基因被激活C、病毒增殖导致细胞破裂D、HPV 导致细胞凋亡E、病毒蛋白在细胞内堆积正确答案：B58.表达谱芯片主要用于分析( )A、目标序列富集B、SNPC、单个碱基缺失D、蛋白质之间作用E、差异基因表达正确答案：E59.脆性 X 综合征的临床表现有A、智力低下伴长脸、大耳朵、大下颌、大睾丸B、智力低下伴头皮缺损、多指、严重唇裂及膊裂C、智力正常、身材矮小、肘外翻、乳腺发育差、乳间距宽D、智力正常张力亢进,特殊握拳姿势、摇椅足E、智力低下伴眼距宽、鼻梁塌陷、通贯手、指间距宽正确答案：E60.目前,个体识别和亲子鉴定主要依靠A、STR 基因座技术B、PCR-SSOC、蛋白质凝胶电泳技术D、PCR-SSCPE、细胞混合培养技术正确答案：A61.最早发现与 mtDNA 突变有关的疾病是A、肿瘤B、Leber 遗传性视神经病C、糖尿病D、耳聋E、MELAS 综合征正确答案：B62.关于梅毒螺旋体的实验室检测,下列描述正确的是A、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法B、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染C、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查,对早期梅毒诊断敏感D、镜检法简便,特异性高,但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断E、诊断梅毒的传统方法是体外培养正确答案：A63.HIV 最易发生变异的部位是A、核衣壳蛋白B、内膜蛋白C、刺突蛋白D、包膜蛋白E、逆转录酶正确答案：C64.关于点样法进行 DNA 芯片制备不正确的是A、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针的 DNA 芯片制备技术B、通过高速点样机直接点样C、多用于大片段 DNA 探针的芯片制备D、成本低E、速度快正确答案：A65.人类基因组的碱基数目为A、3.0×109bpB、4.0×108bpC、2.9×106bpD、4.0×106bpE、4.0×109bp正确答案：A66.下列哪一项 PCR 技术可以检测固定组织的 DNA 或 RNA:A、反转录 PCRB、单细胞 PCRC、原位 PCRD、巢式 PCRE、荧光 PCR正确答案：C67.有关 HBV 长链和短链叙述正确的是A、长链和短链 DNA 的5’端位置是固定的,短链3’端的位置是可变的B、长链和短链 DNA 的3’端位置是固定的,短链5’端的位置是可变的C、短链 DNA 的3’端位置是固定的,长链和短链5’端的位置是可变的D、短链 DNA 的5’端位置是固定的,长链和短链3’端的位置是可变的E、长链 DNA 的5’端位置是固定的,长链和短链3’端的位置是可变的正确答案：A68.荧光定量 PCR 反应中,Mg2+的浓度对 Taq 酶的活性是至关重要,以DNA 或 cDNA 为模板的 PCR 反应中最好的 Mg2+浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案：C69.以 mRNA 为模板合成 cDNA 的酶是A、DNA 酶B、Taq DNA 聚合酶C、限制性内切酶D、RNA 酶E、逆转录酶正确答案：E70.下列不是细菌感染性疾病分子生物学检验技术的是A、PCR-SSCPB、real-time PCRC、ELISAD、PFGEE、PAPD正确答案：C71.关于 PCR-RFLP 错误的是A、采用特定的限制性内切酶对 PCR 产物进行处理B、对酶切后的片段长度进行分析C、判断有无点突变D、突变位点不必在限制酶识别序列中E、需先进行 PCR 扩增正确答案：D72.下列不是影响 DNA 复性因素的是A、DNA 浓度B、DNA 的分子量C、温度D、碱基组成E、DNA 的来源正确答案：E73.未来基因诊断的主要发展方向是A、胎盘着床前诊断B、母体外周血中胎儿细胞分析技术C、对常见病进行分子诊断D、对多发病进行分子诊断E、以上都是正确答案：E74.被称为细菌“分子化石”的是A、16SrRNAB、IS6110 插入序列C、rfbEO157D、fliCH7E、rpoB正确答案：A75.关于测序策略的叙述正确的是A、应该具有最大重叠、最小数量的测序反应B、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用引物步移法C、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用随机克隆法D、大片段未知序列 DNA 测序,可以直接测序E、大规模基因组计划,可以使用多个测序策略正确答案：E76.关于非放射性探针标记,下列描述不正确的是A、可长时间使用B、对人体危害小C、灵敏度不如放射性探针D、酶促显色检测最常使用的酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶E、目前应用的非放射性标志物都是抗原正确答案：E77.目前测序读长最大的测序反应:A、焦磷酸测序B、双脱氧终止法C、连接测序D、边合成边测序E、化学裂解法正确答案：B78.关于SYBR Green Ⅰ的描述,不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案：D79.TaqMan 探针技术要求扩增片段应在A、200~250bpB、50~150bpC、300~350bpD、250~300bpE、150~200bp正确答案：B80.在对病原体检测中,一次性获得信息量最大的技术是( )A、ELISAB、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、原位杂交技术E、基因芯片技术正确答案：E81.下列物质不适于非放射性探针标记的是A、AKPB、ACPC、生物素D、地高辛E、荧光素正确答案：B82.关于特定突变位点探针的设计说法正确的是A、长度为 N 个碱基的突变区需要 2N 个探针B、检测变化点应该位于探针的两端C、探针设计时不需要知道待测样品中靶基因的精确细节D、检测变化点应该位于探针的中心E、采用等长移位设计法正确答案：D83.核酸序列的基本分析不包括A、统计分析B、测序分析C、限制性酶切分析D、序列变换分析E、分子量、碱基组成、碱基分布正确答案：A84.下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D85.关于 p53 基因说法不正确的是A、属于抑癌基因B、在进化过程中高度保守C、编码蛋白为转录因子 p53 蛋白,与调控细胞生长周期、调节细胞转化、DNA 复制及诱导细胞凋亡有关D、可单独作为乳腺癌预后的分子标志E、定位于人染色体 17q13 上正确答案：E86.探针基因芯片技术的本质就是A、基因重组技术B、酶切技术C、聚合酶链反应技术D、蛋白质分子杂交技术E、核酸分子杂交技术正确答案：E87.关于肿瘤分子诊断的说法正确的是A、肿瘤分子诊断就是利用分子生物学原理和技术建立的肿瘤诊断方法B、肿瘤分子诊断的研究成果仅用于临床肿瘤的诊断C、肿瘤的分子诊断中根据目的、对象、类型的不同要采取相似的诊断策略与方法D、肿瘤分子诊断的含义主要表现在虽然检测对象众多,但大多数标志物是特异性的肿瘤标志物E、肿瘤分子诊断的核心是基于细胞水平的分子诊断技术正确答案：A88.PCR 技术扩增 DNA,不需要的条件是( )A、目的基因B、引物C、四种脱氧核苷酸D、DNA 聚合酶E、mRNA正确答案：E89.PCR 反应中延伸的时间取决于A、引物长度B、待扩增片段的长度C、模板的纯度D、Taq DNA 聚合酶的量E、模板的含量正确答案：B90.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链,这一过程称A、杂交B、复性C、探针D、变性E、复杂性正确答案：A91.若要采用 Southern 或 Northern 印迹方法分析某特定基因及其表达产物,需要A、收集培养细胞的上清液B、收集组织或细胞样品,然后从中提取蛋白质C、利用 PCR 技术直接从标本中扩增出待分析的片段D、收集组织或细胞样品,然后从中提取总 DNA 或 RNAE、制备固定在支持物上的组织或细胞正确答案：D92.下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案：E93.单细胞基因扩增一般采用下列何种技术增加检测的敏感性和特异性A、巢式 PCRB、多重 PCRC、PCR-RFLPD、等位基因特异性 PCRE、PCR-SSCP正确答案：A94.以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案：B95.关于带正电荷尼龙膜的描述下列不正确的是A、可结合 DNAB、可结合 RNAC、对盐浓度要求不高D、核酸可通过 UV 交联共价结合E、本底较低正确答案：E96.下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体 DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案：C97.决定 PCR 反应特异性的是A、模板B、dNTPC、引物D、缓冲液E、Taq DNA 聚合酶正确答案：C98.关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案：B99.导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、肺炎衣原体B、鹦鹉热衣原体C、豚鼠衣原体D、沙眼衣原体E、鼠衣原体正确答案：D100.HBV DNA 中最小的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S 基因区E、C 基因区正确答案：C。
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分子考试资料整理1.质粒DNA的构型与电泳速率的关系？答：DNA分子的迁移速率取决于由DNA分子的大小与构型而形成的分子筛效应。
①在相同的构型下，DNA分子迁移速率与其相对分子量成反比。
②相同分子量但不同构型的DNA分子迁移速率不同。
当琼脂糖凝胶的浓度较低时，电泳速率为：超螺旋DNA>线性DNA＞开环DNA。
2.碱裂解法提取质粒DNA的原理以及三种溶液的作用？①基本原理质粒的分离是利用质粒DNA与染色体DNA在变性与复性中的差异来达到的目的。
当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，由于染色体DNA 与质粒DNA拓朴构型不同,染色体DNA双螺旋结构解开，而共价闭环质粒DNA的氢键虽被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕仍会紧密地结合在一起。
当加入中和液后, 溶液pH调恢复至中性，在高盐浓度的情况下，染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构并与蛋白质-SDS复合物等形成沉淀；不同的是，质粒DNA复性迅速而准确，保持可溶状态而留在上清中。
这样，通过离心可沉淀大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质。
除去沉淀后上清中的质粒可用酚氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。
②三种溶液的作用（溶液I，50 mM葡萄糖/ 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS (新鲜的)；溶液III，3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸。
）溶液I: Tris-Cl:适当pH值,葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解,悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部,EDTA:抑制DNase的活性，和抑制微生物生长(是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂)溶液II：NaOH：是最佳的溶解细胞的试剂。
这一步要记住两点：第一，不能用旧的NaOH；第二，时间不能过长，必须温柔混合，不然基因组DNA也会断裂。
SDS: 是离子型表面活性剂。
它主要功能有：（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。
溶液III：醋酸钾: K+离子会与SDS形成溶解度很低的盐并与蛋白质形成沉淀而除去；高浓度的盐，使得沉淀更完全（在pH为8左右的溶液中，DNA分子是带负电荷的，加一定浓度的NaAc或KAC，使Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀）。
2 M的醋酸:中和NaOH，创造质粒复性的环境。
3. 感受态细胞制备过程应注意的问题；①细胞的生长状态和密度最好从-70℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。
细胞生长密度以每毫升培养液中的细胞数在5×107个左右为佳。
即应用对数期或对数生长前期的细菌，可通过测定培养液的OD600（0.4-0.5）控制。
（应注意OD600值与细胞数之间的关系随菌株的不同而不同；受体细胞一般应是限制-修饰系统缺陷的突变株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。
并且受体细胞还应与所转化的载体性质相匹配。
②质粒DNA的质量和浓度一般地，DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%；对于以质粒为载体的重组分子而言，分子量大的转化效率低；重组DNA分子的构型与转化效率也密切相关，环状重组质粒的转化率较分子量相同的线性重组质粒高10-100倍。
③整个操作过程均应在无菌条件下进行，所用器皿及试剂都要灭菌。
④用纯的试剂，注意防止被其它试剂、DNA酶或杂DNA所污染⑤整个操作均需在冰上进行，不能离开冰浴⑥CaCl2处理后细胞很脆，动作要轻，慢。
⑦化合物及无机离子的影响：在Ca2+的基础上联合其他二价金属离子（如Mn2+或Co2+）、DMSO或还原剂等物质处理细菌，可使转化效率大大提高（100-1000倍）；4.挖胶过程应注意什么？①保证切下的条带没有外源DNA的污染。
②切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积。
③切胶时尽量在长波长下进行，减少紫外对DNA的损伤。
④为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，可采用薄而宽的梳子来跑胶。
5.如何灭活RNase？A. RNase 灭活剂①焦磷酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。
它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。
②异硫氰酸胍：目前被认为是最有效的RNA酶抑制剂，它在裂解组织的同时也使RNA酶失活。
它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来，又对RNA酶有强烈的变性作用。
③氧钒核糖核苷复合物：由氧化钒离子和核苷形成的复合物，它和RNA酶结合形成过渡态类物质，几乎能完全抑制RNA酶的活性。
④RNA酶的蛋白抑制剂（RNasin）：从大鼠肝或人胎盘中提取得来的酸性糖蛋白。
RNasin 是RNA酶的一种非竞争性抑制剂，可以和多种RNA酶结合，使其失活。
⑤其它：SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定抑制作用。
B.RNase灭活剂C.玻璃器皿200℃高温烘烤2小时D.塑料器皿焦炭酸二乙酯（DEPC）水溶液处理。
6.提取RNA和DNA时所用的饱和酚有什么不同？①水饱和酚又叫水平衡酚。
水饱和酚的PH小于7，一般是PH为5.0左右，通常与异硫氢酸胍一起使用，用于细胞RNA的提取，在酸性环境中，DNA在酚相，RNA在水相。
两者就分开了。
②Tris饱和酚一般PH大于7.8，用于DNA的提取。
其中，酚是强的蛋白变性剂，可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。
由于PH值大于7，在碱性环境中DNA处于水相，RNA 处于有机相。
从而分离上清，即可得到DNA。
7.如何减少蛋白诱导过程中包涵体的产生？①降低诱导温度，一般15-25℃②降低诱导剂ITPG浓度③使用中等强度或弱的启动子④进行融合表达⑤增加蛋白质折叠的添加剂⑥与伴侣分子和折叠酶共表达⑦选择突变的菌株⑧优化培养基条件7.单酶切时，为提高连接效率应采取什么措施？为什么？通常选择对质粒载体用碱性磷酸酶处理，除去其５’末端的磷酸基，防止环化，通过连接反应后形成的缺口可在转化细胞后得以修复。
8.连接反应中，插入片段与载体的合适比例是多少？载体与目的基因摩尔数之比为1：3-5 如果插入片段较小，而载体较大，和载体的摩尔比例3-6:1连接效果好，如果载体和插入片段大小相近，摩尔比1：1较好；如果插入片段和载体的摩尔比例过大，会导致多克隆的插入；如果插入片段和载体的摩尔比例过小，会导致假阳性增多。
9.筛选阳性克隆的方法？菌落PCR、酶切鉴定、Cracking gel、菌落原位杂交、测序10.蓝白斑筛选的原理是什么？如何出现大量蓝斑，可能是什么原因？蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法：许多载体（PUC序列）都带有一个大肠杆菌的DNA 的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。
在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS）。
受体菌含编码β-半乳糖苷酶C端aa序列。
当无外源基因插入时，载体表达的N端β-半乳糖苷酶多肽与受体菌表达的C端β-半乳糖苷酶多肽功能互补，具有β-半乳糖苷酶活性。
可以将生色底物X-gal分解成蓝色物质，从而在培养基中形成蓝色菌落。
然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，造成插入失活，而使表达的产物不具有β-半乳糖苷酶活性，不能分解底物X-gal，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
原因：1）载体与目的基因连接做的不好，重组质粒太少，大量的自连载体进入感受态细胞。
2）酶切不完全，未被酶切的空载体进入感受态细胞。
11. 已知一个基因的核酸序列，如何进行蛋白表达？步骤？①目的基因的获取：提取RNA，反转录成cDNA，以cDNA为模板，根据核酸序列设计引物，PCR扩增目的基因②克隆载体的选择与构建：提取质粒DNA③重组质粒的构建，即外源基因与表达载体的连接：双酶切，电泳检测，切胶回收目的片段，连接，获得重组质粒。
④重组DNA导入受体菌：转化，将重组质粒导入受体菌⑤重组体的筛选：用菌落PCR方法筛选阳性克隆，并将阳性菌落保存留种。
⑥克隆基因的表达：先将菌种复苏、扩繁；用IPTG分别诱导阳性克隆菌和空载体菌；取适量蛋白样，处理好后，上样、跑胶，染色、脱色、拍照。
观察重组蛋白的表达情况。
a. 对于阳性克隆菌，向5ml菌液中加入IPTG至终浓度0.6mM（30ul 0.1M IPTG），继续震荡培养；b. 对于空载体菌，向5ml菌液中加入30ul 0.1M IPTG （终浓度0.6mM IPTG）；12.质粒的特点是什么？结构：大多为共价、闭合环状、超螺旋（circular covalently closed DNA,cccDNA)功能：正常生长非必须的，但赋予细菌某些性状特征（具有遗传标记）复制和遗传：细菌内的共生型遗传因子，其复制独立于细菌染色体,但复制和转录依赖于宿主编码的蛋白和酶。
可以转移。
13.PCR的原理是什么？PCR程序通常有哪几个步骤？聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR）是模拟体内DNA的复制过程，在体外特异性扩增DNA片段的方法，从而获得大量的同一序列DNA。
每经过一轮扩增，模板分子数增加一倍，经过n次循环后，模板分子数变为原来的2n倍。
步骤：PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。
每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
14.当两种限制酶反应条件不同时，若要用双酶切，应采取什么措施？答：要避免星活性及部分酶切。
（1）先用低盐缓冲液中活性最高的酶切，再补盐和第二种酶；（2）用一种酶消化后，以酚：氯仿：异戊醇抽提，再经乙醇沉淀，将DNA重新溶解与适合第二种酶的缓冲液，加第二种酶消化；（3）先低温酶，后高温酶；（4）使用通用缓冲液。
15.大肠杆菌转化（CaCl2法）的原理？0℃下，细菌处于CaCl2的低渗溶液中，菌体细胞膨胀成球形，DNA与CaCl2形成羟基-钙磷酸复合物，粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促使细胞吸收DNA复合物，在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增值，被转化的细菌中，重组子基因得以表达，在抗生素选择性培养基平板上，可选出所需的转化子。