耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测(一)
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耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测(一)
【摘要】目的研究我院耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的感染现状和耐药情况,为临床医生合理使用抗生素提供实验依据。方法按照《全国临床检验操作规程》进行常规细菌分离培养,应用湖南天地人生物科技有限公司提供的微生物生化药敏试剂卡片进行菌种鉴定,药敏试验采用纸片扩散(K-B)法,苯唑西林琼脂筛选法确证试验。结果共检测CNS206株,以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主要菌种,耐苯唑西林株检出率56.9%。结论加强MRCNS的分布及耐药性的监控,对临床治疗及抗生素的合理应用意义重大。
【关键词】耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药
凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)一般认为无致病性,因而对CNS感染的监测不够重视。近年来经过医院感染调研发现耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)造成的医院感染病例显著增多,对苯唑西林和万古霉素的最小抑菌圈(MIC)水平亦逐年增高。MRCNS已经引起人们的关注。通过探讨MRCNS所致医院感染的特点,耐药性以及医院感染的高发区和易感人群,为临床诊治提供依据,指导临床合理使用抗生素。
1材料和方法
1.1标本的来源:
医院感染患者各种标本,包括痰,伤口分泌物,中段尿,血液,泌尿生殖道排泄物中分离出凝固酶阴性的葡萄球菌株260株。
1.2材料:
由湖南天地人生物科技有限公司提供的生化鉴定卡片以及由英国OXOID公司提供的苯唑西林(OXA)药敏纸片。
1.3质控品:
质控标准参考菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923,ATCC29213。
1.4方法:
1.4.1所有送检标本按《全国临床检验操作规程》进行常规细菌培养,应用湖南天地人生物科技有限公司提供的微生物生化,药敏试剂卡鉴定临床标本到种。
1.4.2OXA琼脂纸片扩散(K-B)法:操作按NCCLS规定用头孢西丁药敏纸片(含量30微克/片)做药物敏感性测定,药敏平板放置35度24小时判读结果,执行NCCLS(2001年)标准凝固酶阴性葡萄球菌抑菌环直径=24毫米判定为耐药(R),判读时注意用透射光检查抑菌环内有无耐药菌株或薄菌膜,防止漏检。
1.4.3苯唑西林琼脂筛选法确证试验:选常规细菌培养物中可疑菌落接种到含有1.75微克/毫升OXA并添加4%NaCl的M-H琼脂板上,接种菌液浓度为0.5麦氏比浊标准,接种量为一白金耳置于30-35度之间孵育24小时后观察有无细菌生长。任何形式的菌落生长都表示对苯唑西林耐药,在OXA琼脂平上生长的凝固酶阴性葡萄球菌则为MRCNS。
2结果
2.1MRCNS菌株分离及分布见表1:
菌种共测定CNS260株,其中MRCNS148株,阳性检出率59.6%。菌株分布以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主。
细菌名称株数构成比(%)
溶血葡萄球菌6845.9
表皮葡萄球菌4530.4
人型葡萄球菌2013.5
模仿葡萄球菌85.4
头部葡萄球菌53.4
孔氏葡萄球菌21.4
2.2MRCNS发生的部位分布见表2:
MRCNS感染的部位最多的是泌尿生殖道,其次是呼吸道、中段尿,伤口分泌物,血液。感染的高发区是外科,其次是呼吸科、老干科、ICU、肿瘤科等。有青霉素过敏史者占相当的比例(45%)。男性患者多于女性患者(男:女=105:43)。年龄分布上来看,各个年龄阶段的患者都有。泌尿生殖道感染患者多见于中青年,占92%;呼吸道感染者以老年人为主,65岁以上者占83%。