回收试验

授课对象：06级检验1-5班

课 时：2学时

回收试验

目 标：1.掌握回收实验的基本原理

2.学会衡量检验方法和检测结果的准确度---回收率实验的设计

3.归纳总结进行回收实验的注意事项及对检测方法的评价

实验用品：（以二乙酰法测BUN 为例）水浴箱（100℃）、721型分光光度计、混合血

清、（①②③）、BUN 标准液（100mmol/L 、200 mmol/L 、7.14 mmol/L ）等

内 容： 一、原理：

在已知浓度的样品中加入一定量的被测物，然后用同样方法测定，测定值与“理论值”（样品浓度和加入浓度之和）之比，乘以100%即为回收率，一般实验方法应在100±5%为合格。

回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一，有人认为回收率除鉴定测定方法的优劣处，不可用来纠正测定中的误差，其计算公式如下：

100%%⨯=

加入浓度

回收浓度

）回收率（

)ml )ml )

ml 标准液量（血清量（标准液量（标准液浓度加入浓度+⨯

=

二、操作步骤（以二乙酰一肟法测尿素氮为例）：

1．样本处理：

a 混合血清2ml+H 2O0.1ml （R ）

b 混合血清2ml+BUN 标（200mmol/L ）0.1ml （R+S 1）

c 混合血清2ml+BUN 标（100mmol/L ）0.1ml （R+S 2）

2．测定： 1 R+S 2 S B R 血清 0.02 — — — — R+S 1血清 — 0.02 — — — R+S 2血清

—

—

0.02

—

—

BUN 标准 — — — 0.02 — 蒸馏水 — — — — 0.02 酸性试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 二乙酰一肟 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 混匀，置100℃12min ，取出待冷比色（λ=540nm ），取各管A 值计算。

三、计算：

100

1

.00.21.010014

.7A A A %)

S ()

R )1S R (⨯+⨯

⨯-=

+（）回收率（

四、注意事项：

1．加入标准液的体积在整个样品中占比例要少，一般不能超过10%，否则整个样品稀释过大，不能反映原有样品的实际情况。

2．加入被分析物后，使回收实验样品的溶度达到医学决定水平（是指对病人医疗具有参考价值的临床分析物的溶度）。

3．回收实验应重复测定三次以上，以减少随机误差。

4．为防止因标准液不稳定，或制备中的误差，或因实验操作所致的误差，应同时用已被公认的可靠性强的方法做比较；测定时应用2份以上的样品；不同样品要同时测定以减少实验操作或样品对实验方法的影响。测定病人的血清，应注意某些药物的干扰。

课后小结：