凯氏定氮法测定6-苄基氨基嘌呤的含量

于 ５ ０ Ｌ凯氏定氮瓶 中， ０ ５ 粉状 的硫 酸铜 ，０ ０ｍ 加 ．ｇ １ｇ粉状 的
硫酸钾 ， 沿瓶壁加入 ２ ｍ ０ Ｌ硫 酸 ， 并使瓶壁 的粉末洗 至瓶 中，
瓶 口置 于 一 个玻 璃 漏 斗 ， 后 将 凯 氏 定 氮 瓶 以 ４ 。 斜 置 装 然 ５角
好， 缓缓加热 ， 溶液温度保 持在沸点 以下。泡沫停止 发生 使 后， 强热使其沸 腾 ， 溶液 由黑色 逐渐 转为 透明 ， 再继 续加 热
河 南 化 工 Leabharlann Baidu
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５ ・ ６
Ｈ Ｎ Ｎ Ｃ ＭＩＡ Ｎ Ｕ Ｔ Ｙ Ｅ Ａ ＨＥ Ｃ ＬＩ Ｄ Ｓ Ｒ
２ １ ５月 ０ ０年
第２ ７卷
第 ５期（ 下）
凯 氏定 氮 法 测 定 ６一苄 基 氨 基 嘌 呤 的 含 量
张志 斌 。 晓 滨 张
（ 东 光 华 化 学厂 有 限 公 司 ， 头 ，１０ １ 广 汕 ５５ ６ ）
法［］ ３ 对同一批 ６一苄基氨基 嘌呤进 行测定。测定 结果如表
１２ １ 标 准样 品 ： 识 值 ９ ． ％ ； ．． 标 ９５ １２ ２ 所 用试 剂 均 需 分 析纯 或 指 示 剂 以上 ； ．．
１２ ３ 盐 酸标准溶液 ［ （ Ｃ ）＝ ． ｍ ＶＬ］ ．． ｅ Ｈ １ ０１ｏ 的配 制及标定
形瓶 吸收 ， 用水淋洗冷凝 管 ， 用盐 酸标准溶 液滴定 至溶液 由
瓶颈上 ， 万一沾 附可用少量水冲下 ， 以免被检样消化不完全 ，
河 南 化 工
２１ ０ ０年 ５月
第２ ７卷
第 ５期 （ 下）
ＨＥＮＡＮ ＣＨＥＭＩ ＡＬ Ｉ Ｃ ＮＤＵＳ ＴＲＹ
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位为毫升（ Ｌ ； 一 一盐酸标准滴 定溶液浓 度 的准 确数值 ， ｍ ）ｃ
单位为摩 尔每升 （ ｏ ） Ｍ一一 ｍ ＶＬ ； ６一苄基氨基 嘌呤摩尔质量
１ １１ 仪器及装置 ．．
１ １１ １ 美 国 热 电 Ｈ ｌ ｓ 紫外 可 见 分光 光度 计 ； ．．． ｅｉ ｏ
的数值 ， 单位为克每 摩尔 （／ ｏ） Ｍ（Ｃ２ Ｎ ）＝ ５ ０ ］ ｇｍ １［ 。 Ｉ ５ ４ ．５ ； Ｈ
１０ Ｌ 溶液 Ｉ） 另称取 ０ １ ０ｍ （ ； ． ｇ甲基红 ， 于 乙醇 （ ５ ， 溶 ９ ％） 用
乙醇 （５ ） 释 至 １０ Ｌ（ 液 Ⅱ） 取 ５ ｍ ９％ 稀 ０ｍ 溶 。 ０ Ｌ溶 液 Ｉ及 １０ Ｌ溶 液 Ⅱ， 匀 。 ０ｍ 混 １３ 测 定 方 法 （ 考 Ｇ ／ ０ ． 参 Ｂ Ｔ６ ８—１８ ） 精 确 ０ １ ｇ 品 ９８ ．５ 样
参 考 Ｇ ／ ０ — ０ ２ ５ ； Ｂ Ｔ６ １ ２０ ［ ］
表１
６一苄 基 氨 基嘌 呤 含 量 测定 比较
１２４ 甲基红 一亚 甲基 蓝混合 指示液 （ ． ． 临用前 配制 ） 称 取 ０ １ 亚甲基蓝 ， 于乙醇 （ ５ ， 乙醇 （ ５ 稀 释至 ．ｇ 溶 ９ ％） 用 ９ ％）
ｍ一 一样 品 质量 的准 确 数 值 ， 位 为 克 （ ） 单 ｇ。
２ 结果 和 讨 论
１ １１２ 凯氏定氮装置 （ ０ ｒ ． ． ． ５ Ｏ Ｌ凯 氏定氮瓶 、 ６ ０ ｍ冷 ａ 长 ０ｍ
凝 管 ） 。
１２ 试 剂 ．
２ １ 实验结果 ．
１ 。
按凯氏定氮法及 已报道紫外吸收分光光度
成功的一个 ， 已广泛 用于组织培 养 中， 在农业和 园艺上也有
着 广 阔 的应 用 前 景 Ｌ Ｊ 目前 对 于 ６一 基 氨基 嘌呤 含 量 的 ｌ 。 苄
６一苄基氨基嘌呤的质量分数 Ｗ 数值 以“ 表示 ， ， ％” 按下式计 算：
：
分析方法除 了高效液相色谱法 、 还有 已报道 的紫外分光光度 法［ ］ 电化学法 ， ３及 而对于一些不具有液相色谱仪 、 紫外分光 光度计及示波极谱仪的实验室 ， 本文研究 的用凯 氏定 氮法测
【 中图分类号 】 ０５．２ ６７３
【 文献标识码 】 Ｂ
【 文章编号】 １０ — ４７２ １）０ ０５ 一 １ ０３ ３６ （００ １ — ０６ Ｏ
６一苄 基 氨基 嘌 呤 是 迄今 为 止 人 工 合 成 细 胞 分 裂 素 中较
绿 色 变 为灰 紫 色 。同 时做 空 白实 验 。
３ｒｉ。冷却 ， ０ ｎ ａ 缓缓加入 ２ Ｏ Ｌ水 ， ０ｒ ａ 摇匀 ， 冷却 ， 沿瓶 壁慢慢加
入 １０ Ｌ氢氧化钠溶液 （０ ｇ Ｌ 流至瓶底 ， ２ｍ ３０／ ） 自成 一液层 ， 再 加 ２ 锌粒 。装好 冷凝器开 始蒸 馏。轻 轻摇 动凯 氏定 氮瓶 ， ｇ 使内容物混合 ， 加热 蒸 出 ２ ３液体 ， ／ 用盛 有 ５ ｍ ０ Ｌ硼 酸溶液
：
×１ ０ ００
１０ ０
式 中： Ｖ一一样品试验消耗盐酸标 准滴定溶液用 量的准
确数值 ， 位为毫升（ Ｌ ； 单 ｍ ）
定合成 ６一 苄基氨 基嘌 呤的含量是 一个 可行而低 成本 的方
法。
Ｖ ０一一 白试验消耗盐酸标准滴 定溶液用量的准确数值 ， 空 单
１ 实验 部分 １ １ 仪 器 和试 剂 ．
（０ Ｌ 及 ８ 甲 基 红 一亚 甲基 蓝 混 合 指 示 液 的 ５０ ２ ） 滴 ０ ｍＬ锥 ２２ 结 果 讨 论 ． ２ ２ １ 实验 要 点 ． ． ２ ２ １ １ 本 方 法 要 求 样 品应 是 均 匀 的 ， 预 先研 细 混 匀 。 ． ． ． 应 ２ ２ １２ 操 作 过 程 中 ， 品放 入 凯 氏定 氮瓶 内时 ， 要 沾 附 ． ．． 样 不
【 摘要】 通过凯 氏定氮法将 ６～ 苄基氨基嘌呤中的氮转 变为氨 ， 用硼酸溶液 吸收， 盐酸标准滴定溶液滴定 ， 到 ６ 用 测 一苄
基氨基嘌呤的含量。用紫外分光光度法对凯 氏定氮法测定样品的可靠性进行验证 。该法具有较高准确度与精密度 ， 适用性广 。
【 关键词】 ６ 苄基氨基嘌呤 ； 氏定氮法； 一 凯 紫外分光光度法