151104 大米中直链淀粉和支链淀粉的检测 分光光度法

大米中直链淀粉和支链淀粉的检测分光光度法
企业标准（拟定稿）
倪天瑞2015年11月04日
1.适用范围
大米中直链淀粉和支链淀粉含量的测定，不适用于熟制大米的检测；
2.规范性引用文件
NY/T 2639-2014 稻米直链淀粉的测定分光光度法
GB/T 15683-2008 大米直链淀粉含量的测定
3.原理
大米中淀粉与碘形成显色复合物，在波长620 nm处测定显色物的吸光度值，其吸光度与直链淀粉含量成正比；
大米中淀粉分为直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉含量之外数值即为支链淀粉含量。

4.试剂
使用试剂为分析纯试剂，水为三级水
4.1 氢氧化钠溶液（1 mol/L）：称取4 g 氢氧化钠，溶于100 mL水中；
4.2 乙酸溶液（1 mol/L）：量取
5.78 mL冰乙酸，用水定容至100 mL；
4.3 碘液：0.2 g碘、2 g碘化钾，用水定容至100 mL；
4.4 乙醇溶液（95%）
4.5 空白校正液：氢氧化钠溶液（0.09 mol/L），量取4.5 mL 1 mol/L 氢氧化钠溶液，定容至50 mL；
4.6 直链淀粉标准品，购于上海将来试剂公司；
4.7 支链淀粉标准品，购于上海将来试剂公司；
5.仪器
分光光度计
分析天平，感量±0.0001 g
水浴锅
烧杯
研钵
筛子（80目）
6.分析步骤
6.1 样品处理：将样品混匀，称取约10 g，粉碎后，过80目筛子；
6.2 前处理：准确称取样品50±0.2 mg，置于50 mL容量瓶中，加入0.5 mL 95%乙醇溶液，冲洗容器壁上的粉末，再加入4.5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，沸水浴10 min，取出，冷却至室温，定容至50 mL。

该溶液即为待测液。

6.3 标准溶液：
6.3.1 直链淀粉标准溶液（1 mg/mL）
称取50±0.2 mg直链淀粉标准品，置于50 mL容量瓶中，加入0.5 mL 95%乙醇溶液，冲洗容器壁上的粉末，再加入4.5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，沸水浴10 min，取出，冷却至室温，定容至50 mL。

6.3.2 支链淀粉标准溶液（1 mg/mL）
称取50±0.2 mg支链淀粉标准品，制备方法同上
6.4 梯度浓度直链淀粉标准溶液配制
6.5 测定
6.5.1 标准曲线制作：
准确量取0.5 mL梯度标准溶液到10 mL离心管中，加入5mL水，0.1 mL 乙酸溶液，摇匀，加入0.2 mL碘试剂，定容至10 mL，摇匀，静置10 min；
分光光度计用空白校正液调零后，在620 nm处测定系列标准溶液的吸光度；
以吸光度为纵坐标，直链淀粉含量（干基质量分数）为横坐标，绘制标准曲线。

6.5.2 样品检测
准确量取0.5 mL待测液到10 mL离心管中，加入5mL水，0.1 mL 乙酸溶液，摇匀，加入0.2 mL碘试剂，定容至10 mL，摇匀，静置10 min；分光光度计用空白校正液调零后，在620 nm处测定系列标准溶液的吸光度。

每个浓度样品做2份平行测定。

7.结果表示
参照6.5.1的标准曲线的吸光度值得到测定结果，两次检测结果的算数平均值为测定结果。