第二章提取分离鉴定的方法和技术2
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
教学
后记
及时用实验巩固课堂知识
3、铅盐沉淀法
酸性或碱性化合物还可通过加入某种沉淀试剂使之生成水不溶性的盐类沉淀等析出。如加入铅盐、雷氏铵盐等。
四、结晶与重结晶法
1、基本原理
利用不同温度可引起物质溶解度的改变的性质以分离物质。将不是结晶状态的固体物质处理成结晶状态的操作称结晶；将不纯的结晶进一步精制成较纯的结晶的过程称重结晶。
2、溶剂选择的一般原则：
4、结晶操作
实际是进一步分离纯化过程，一般是应用适量的溶剂在加热至沸点的情况下将化合物溶解，制成过饱和溶液，趁热过滤去除不溶性杂质，放置冷处，以析晶。可分为以下一个过程
1）、制备结晶溶液
2）、趁热过滤
3）、将滤液放冷，使析出结晶
4）、抽气滤过，将结晶从母液中分出
5、结晶纯度的判断
教案末页
教学
小结
通过教学要求学生对两相溶剂萃取法（简单萃取法、逆流连续萃取法、逆流分溶法、液滴逆流分配法）的原理、基本方法和技术；结晶法中溶剂的选择和操作；沉淀法（酸碱沉淀、试剂沉淀、铅盐沉淀）的应用等内容予以掌握。
商洛职业技术学院教案
课程名称
天然药物化学
专业班级
06药学
授课教师
顾晓燕
授课类型
讲授
学时
2
章节题目
第二节天然药物化学成分分离、精制、鉴定的方法与技术
目的
与
要求
1、掌握两相溶剂萃取法（简单萃取法、逆流连续萃取法、逆流分溶法、液滴逆流分配法）的原理、基本方法和技术
2、掌握结晶法中溶剂的选择和操作
3、熟悉沉淀法（酸碱沉淀、试剂沉淀、铅盐沉淀）的应用范围
实际工作中，尽量选择分离因子β值大的溶剂系统，以求简化分离过程，提高分离效率。
③分配比与pH：对酸性、碱性及两性化合物来说，分配比还受溶剂系统的影响。因为pH的变化可以改变它们的存在状态（游离型或解离型），从而影响在溶剂系统中的分配比。
酚类化合物的pKa值一般为9.2~10.8，羧酸类化合物的pKa值约为5。
A比重不同B分配系数不同C分离系数不同D萃取常数不同E介电常数不同
5、萃取时破坏乳化层不能用的方法是
A搅拌乳化层B加入酸或者碱C热敷乳化层D将乳化层抽滤E分离出乳化层再用新溶剂萃取
6、从天然药物的水提液中萃取强亲脂性成分，宜选用
A乙醇B甲醇C正丁醇D乙酸乙酯E苯
7、采用乙醇沉淀法除去水提液中多糖蛋白质等杂质时，应使乙醇的浓度达到
重点
与
难点
重点:操作技术
难点:分离原理
方法
与手段
讲授
使用教材
及参考书
《天然药物化学》主编:吴剑锋出版社:人民卫生出版社
《天然药物化学学习指导》主编:吴剑锋出版社:人民卫生出版社
教案续页
教学内容
辅助手段时间分配
第二节天然药物化学成分分离、精制、鉴定的方法与技术（一）
一、系统溶剂分离法：
天然药物中提取液中常含有极性不同的各种化学成分，若其中所含物质为不明成分，常采用系统溶剂分离法进行分离。按极性由小到大的顺序选用不同极性的溶剂组成溶剂系统，依次提取分离提取液中不同成分，使各溶解度有差异的成分得以分离。如选用石油醚、己烷适用于强亲脂性成分如挥发油、脂肪油、蜡、脂溶性色素、甾醇类和某些苷元等；选用乙醚氯仿适用于提取分离亲脂性成分如树脂、生物碱、苷元、醛、酮、醇、醌、有机酸和某些苷类等；选用氯仿-乙醇（2：1）适用于提取分离中等极性中较小极性的苷类如强心苷等；选用乙酸乙酯适用于提取分离中等极性成分中极性居中的某些苷类如黄酮苷；选用正丁醇适用于提取中等极性中极性较大的某些苷类如皂苷、蒽醌苷等；选用丙酮、乙醇、甲醇适用于提取分离亲水性成分如极性很大的苷、糖类、氨基酸、某些生物碱盐；选用水适用于提取分离强亲水性成分如蛋白质、粘液质、果胶糖类、氨基酸和某些无机盐类等。
A 50% B 60% C 70% D 80% E 90%
8、有效成分为黄酮类化合物的天然药物水提溶液，预除去其中的淀粉、多糖和蛋白质时，宜用
A铅盐沉淀B乙醇沉淀C酸碱沉淀D离子交换沉淀法E盐析法
9、两相溶剂萃取法是依据什么原理进行的？在实际工作中如何选择溶剂？
10、萃取操作中要注意什么问题？
11、影响提取效率的因素有哪些？
一般pH<3时，酸性物质多呈非解离状态（HA）、碱性物质则呈解离状态（BH+）存在；但pH>12，则酸性物质多呈解离状态（A—）、碱性物质则呈非解离状态（B）存在。据此，可采用在不同pH的缓冲溶液与有机溶剂中进行分配的方法，使酸性、碱性、中性及两性物质的以分离。
2、各种萃取方法
①简单萃取
利用分液漏斗进行两相溶剂萃取。
一般β>50时，简单萃取即可分离，β<50时，则易采用逆流分溶法。．
三、沉淀法
1、酸碱沉淀法
对酸性、碱性或两性有机化合物来说，通常通过加入酸、碱以调节溶液的pH，以改变分子的存在状态（游离型或解离型），从而改变溶解度而实现分离。
如：酸提碱沉法，碱提酸沉法等。
2、试剂沉淀法
在中草药提取液中加入另一种溶剂以改变混合物溶剂的极性，使一部分物质沉淀析出，从而实现分离。如：水—醇法除多糖、蛋白质等水溶性杂质；醇—水法除树脂、叶绿素等水不溶性杂质；醇—醚法或醇—丙酮法使苷类成分，而脂溶性树脂等杂质则存留在母液中。
不反应；冷时对所需要的成分溶解度较小，而热时溶解度较大；对杂质溶解度很大或很小；沸点低，易挥发；无毒或毒性小。若无理想的单一溶剂时，可以考虑使用混合溶剂。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。
3、结晶的条件
结晶形态和色泽：单一化合物的结晶具有结晶形状均一和均匀的色泽。
熔点和熔距，熔距很窄，在1℃~2℃的范围内。但要注意双熔点，如汉防己乙素、芫花素及一些与糖结合的苷类化合物。
思考题
或
作业题
1连续回流提取法所用的仪器名称叫
A水蒸气蒸馏器B薄膜蒸发器C液滴逆流分配器D索氏提取器E水蒸气发生器
2、可将天然药物水提液中的亲水性成分萃取出来的溶剂是
A乙醚B乙酸乙酯C丙酮D正丁醇E乙醇
3、采用铅盐沉淀法分离化学成分是常用的脱铅方法是
A硫化氢B石灰水C明胶D雷氏盐E氯化钠
4、两相溶剂萃取法的原理是利用混合物中各成分在两相溶剂中的
②逆流连续萃取法
是一种连续的两相溶剂萃取法。其装置可具有一根、数根或更多根的萃取管。
③逆流分配法（CCD）
又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法，与两相溶剂逆流萃取法原理一致，对于分离具有非常相似性质的混合物效果较好。
④液滴逆流分配法（DCCC）
本法必须选用能生成液滴的溶剂系统，且对高分子化合物的分离效果较差，处理样品量小，并要有一定的设备，操作较繁琐。
二、两相溶剂萃取法
1、原理：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数的不同而实现分离。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高。
①分配系数K值（即分配比）：溶质在两相溶剂中的分配比（K）在一定温度及压力下为一常数
②分离难易与分离因子β：分离因子β可以表示分离的难易。分离因子β可定义为A、B两种溶质在同一溶剂系统中分配系数的比值。一般情况下，β≥100，仅作一次简单萃取就可实现基本分离；但100≥β≥10时，则需萃取10~12次；β≤2时，要实现基本分离，需作100次以上萃取才能完成。β≌1时，则KA≌KB，意味着两者性质及其相似，即使作任意次分配也无法实现分离。
后记
及时用实验巩固课堂知识
3、铅盐沉淀法
酸性或碱性化合物还可通过加入某种沉淀试剂使之生成水不溶性的盐类沉淀等析出。如加入铅盐、雷氏铵盐等。
四、结晶与重结晶法
1、基本原理
利用不同温度可引起物质溶解度的改变的性质以分离物质。将不是结晶状态的固体物质处理成结晶状态的操作称结晶；将不纯的结晶进一步精制成较纯的结晶的过程称重结晶。
2、溶剂选择的一般原则：
4、结晶操作
实际是进一步分离纯化过程，一般是应用适量的溶剂在加热至沸点的情况下将化合物溶解，制成过饱和溶液，趁热过滤去除不溶性杂质，放置冷处，以析晶。可分为以下一个过程
1）、制备结晶溶液
2）、趁热过滤
3）、将滤液放冷，使析出结晶
4）、抽气滤过，将结晶从母液中分出
5、结晶纯度的判断
教案末页
教学
小结
通过教学要求学生对两相溶剂萃取法（简单萃取法、逆流连续萃取法、逆流分溶法、液滴逆流分配法）的原理、基本方法和技术；结晶法中溶剂的选择和操作；沉淀法（酸碱沉淀、试剂沉淀、铅盐沉淀）的应用等内容予以掌握。
商洛职业技术学院教案
课程名称
天然药物化学
专业班级
06药学
授课教师
顾晓燕
授课类型
讲授
学时
2
章节题目
第二节天然药物化学成分分离、精制、鉴定的方法与技术
目的
与
要求
1、掌握两相溶剂萃取法（简单萃取法、逆流连续萃取法、逆流分溶法、液滴逆流分配法）的原理、基本方法和技术
2、掌握结晶法中溶剂的选择和操作
3、熟悉沉淀法（酸碱沉淀、试剂沉淀、铅盐沉淀）的应用范围
实际工作中，尽量选择分离因子β值大的溶剂系统，以求简化分离过程，提高分离效率。
③分配比与pH：对酸性、碱性及两性化合物来说，分配比还受溶剂系统的影响。因为pH的变化可以改变它们的存在状态（游离型或解离型），从而影响在溶剂系统中的分配比。
酚类化合物的pKa值一般为9.2~10.8，羧酸类化合物的pKa值约为5。
A比重不同B分配系数不同C分离系数不同D萃取常数不同E介电常数不同
5、萃取时破坏乳化层不能用的方法是
A搅拌乳化层B加入酸或者碱C热敷乳化层D将乳化层抽滤E分离出乳化层再用新溶剂萃取
6、从天然药物的水提液中萃取强亲脂性成分，宜选用
A乙醇B甲醇C正丁醇D乙酸乙酯E苯
7、采用乙醇沉淀法除去水提液中多糖蛋白质等杂质时，应使乙醇的浓度达到
重点
与
难点
重点:操作技术
难点:分离原理
方法
与手段
讲授
使用教材
及参考书
《天然药物化学》主编:吴剑锋出版社:人民卫生出版社
《天然药物化学学习指导》主编:吴剑锋出版社:人民卫生出版社
教案续页
教学内容
辅助手段时间分配
第二节天然药物化学成分分离、精制、鉴定的方法与技术（一）
一、系统溶剂分离法：
天然药物中提取液中常含有极性不同的各种化学成分，若其中所含物质为不明成分，常采用系统溶剂分离法进行分离。按极性由小到大的顺序选用不同极性的溶剂组成溶剂系统，依次提取分离提取液中不同成分，使各溶解度有差异的成分得以分离。如选用石油醚、己烷适用于强亲脂性成分如挥发油、脂肪油、蜡、脂溶性色素、甾醇类和某些苷元等；选用乙醚氯仿适用于提取分离亲脂性成分如树脂、生物碱、苷元、醛、酮、醇、醌、有机酸和某些苷类等；选用氯仿-乙醇（2：1）适用于提取分离中等极性中较小极性的苷类如强心苷等；选用乙酸乙酯适用于提取分离中等极性成分中极性居中的某些苷类如黄酮苷；选用正丁醇适用于提取中等极性中极性较大的某些苷类如皂苷、蒽醌苷等；选用丙酮、乙醇、甲醇适用于提取分离亲水性成分如极性很大的苷、糖类、氨基酸、某些生物碱盐；选用水适用于提取分离强亲水性成分如蛋白质、粘液质、果胶糖类、氨基酸和某些无机盐类等。
A 50% B 60% C 70% D 80% E 90%
8、有效成分为黄酮类化合物的天然药物水提溶液，预除去其中的淀粉、多糖和蛋白质时，宜用
A铅盐沉淀B乙醇沉淀C酸碱沉淀D离子交换沉淀法E盐析法
9、两相溶剂萃取法是依据什么原理进行的？在实际工作中如何选择溶剂？
10、萃取操作中要注意什么问题？
11、影响提取效率的因素有哪些？
一般pH<3时，酸性物质多呈非解离状态（HA）、碱性物质则呈解离状态（BH+）存在；但pH>12，则酸性物质多呈解离状态（A—）、碱性物质则呈非解离状态（B）存在。据此，可采用在不同pH的缓冲溶液与有机溶剂中进行分配的方法，使酸性、碱性、中性及两性物质的以分离。
2、各种萃取方法
①简单萃取
利用分液漏斗进行两相溶剂萃取。
一般β>50时，简单萃取即可分离，β<50时，则易采用逆流分溶法。．
三、沉淀法
1、酸碱沉淀法
对酸性、碱性或两性有机化合物来说，通常通过加入酸、碱以调节溶液的pH，以改变分子的存在状态（游离型或解离型），从而改变溶解度而实现分离。
如：酸提碱沉法，碱提酸沉法等。
2、试剂沉淀法
在中草药提取液中加入另一种溶剂以改变混合物溶剂的极性，使一部分物质沉淀析出，从而实现分离。如：水—醇法除多糖、蛋白质等水溶性杂质；醇—水法除树脂、叶绿素等水不溶性杂质；醇—醚法或醇—丙酮法使苷类成分，而脂溶性树脂等杂质则存留在母液中。
不反应；冷时对所需要的成分溶解度较小，而热时溶解度较大；对杂质溶解度很大或很小；沸点低，易挥发；无毒或毒性小。若无理想的单一溶剂时，可以考虑使用混合溶剂。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。
3、结晶的条件
结晶形态和色泽：单一化合物的结晶具有结晶形状均一和均匀的色泽。
熔点和熔距，熔距很窄，在1℃~2℃的范围内。但要注意双熔点，如汉防己乙素、芫花素及一些与糖结合的苷类化合物。
思考题
或
作业题
1连续回流提取法所用的仪器名称叫
A水蒸气蒸馏器B薄膜蒸发器C液滴逆流分配器D索氏提取器E水蒸气发生器
2、可将天然药物水提液中的亲水性成分萃取出来的溶剂是
A乙醚B乙酸乙酯C丙酮D正丁醇E乙醇
3、采用铅盐沉淀法分离化学成分是常用的脱铅方法是
A硫化氢B石灰水C明胶D雷氏盐E氯化钠
4、两相溶剂萃取法的原理是利用混合物中各成分在两相溶剂中的
②逆流连续萃取法
是一种连续的两相溶剂萃取法。其装置可具有一根、数根或更多根的萃取管。
③逆流分配法（CCD）
又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法，与两相溶剂逆流萃取法原理一致，对于分离具有非常相似性质的混合物效果较好。
④液滴逆流分配法（DCCC）
本法必须选用能生成液滴的溶剂系统，且对高分子化合物的分离效果较差，处理样品量小，并要有一定的设备，操作较繁琐。
二、两相溶剂萃取法
1、原理：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数的不同而实现分离。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高。
①分配系数K值（即分配比）：溶质在两相溶剂中的分配比（K）在一定温度及压力下为一常数
②分离难易与分离因子β：分离因子β可以表示分离的难易。分离因子β可定义为A、B两种溶质在同一溶剂系统中分配系数的比值。一般情况下，β≥100，仅作一次简单萃取就可实现基本分离；但100≥β≥10时，则需萃取10~12次；β≤2时，要实现基本分离，需作100次以上萃取才能完成。β≌1时，则KA≌KB，意味着两者性质及其相似，即使作任意次分配也无法实现分离。